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文檔簡介
1、臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)第九章 酶免疫技術(shù)一、A11、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中應(yīng)用最多的底物是A、鄰苯二胺(OPD)B、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)C、ABTSD、對磷酸酯(P-NPP)E、以上都不是2、下述哪一種酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)方法最常用于抗原測定? A、間接法 ELISAB、反向間接法 ELISA C、競爭法 ELISAD、雙抗體夾心法 ELISA E、捕獲法3、下列哪項(xiàng)不是血藥濃度免疫學(xué)測定的技術(shù)A、化學(xué)發(fā)光免疫測定B、免疫電泳法C、放射免疫法D、熒光免疫法E、酶免疫法4、選擇 ELISA 的標(biāo)記用酶,下面哪一項(xiàng)特性是不需要的A、具有可與抗原、抗體結(jié)合的基團(tuán)B、標(biāo)記抗原后,
2、酶活性保持穩(wěn)定C、當(dāng)酶標(biāo)抗原與抗體結(jié)合后酶活性可出現(xiàn)激活或抑制D、酶催化底物反應(yīng)后生成的信號(hào)易于測定、重復(fù)性好E、酶的穩(wěn)定性、可溶性好5、酶免疫技術(shù)中最佳工作濃度的選定常采用A、抗原稀釋法B、抗體稀釋法C、酶標(biāo)記物稀釋法D、棋盤滴定法E、AB6、酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)記物而分為下述哪幾種類型A、均相異相B、同相均相C、異相固相D、固相均相E、固相異相7、酶免疫技術(shù)中酶的要求A、酶的活性要強(qiáng),催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高,純度高B、易與抗體或抗原偶聯(lián),標(biāo)記后酶活性保持穩(wěn)定C、作用專一性強(qiáng),酶活性不受樣品中其他成分的影響D、酶催化底物后產(chǎn)生的產(chǎn)物易于或測量,方法簡單易行、
3、敏感和重復(fù)性好第1頁臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)E、以上都是8、ELISA 雙抗原夾心法檢測抗體時(shí),固相載體包被物是A、酶標(biāo)記的抗原B、酶標(biāo)記的抗體C、未標(biāo)記的已知抗原D、未標(biāo)記的已知抗體E、未標(biāo)記的抗抗體9、辣根過氧化物酶的酶活性基團(tuán)為A、糖蛋白B、亞鐵血紅素C、活躍糖基 D、醛基E、羥基10、下列說法錯(cuò)誤的是A、TMB 是 ELISA 中應(yīng)用最廣泛的底物。B、一般采用四甲基聯(lián)苯胺作為 AP 的底物C、AP 系統(tǒng)的敏感性一般高于應(yīng)用 HRP 系統(tǒng)D、AP 較難得到高純度制劑,穩(wěn)定性較 HRP 低,價(jià)格較 HRP 高,E、半乳糖苷酸的底物常用 4-甲基酮基-D 半乳糖苷11、酶聯(lián)免疫吸
4、附試驗(yàn)(ELISA)中應(yīng)用最多的底物是A、鄰苯二胺(OPD)B、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)C、ABTS酶結(jié)合物時(shí)得率也較 HRP 低D、對磷酸酯E、以上都不是12、在雙位點(diǎn) ELISA 實(shí)驗(yàn)中,造成抗原檢測值低于實(shí)際含量的常見A、固相抗體過多B、反應(yīng)時(shí)間不夠C、標(biāo)記抗體過多D、待測物過濃 E、酶活性過高13、下列哪項(xiàng)不是血藥濃度免疫學(xué)測定的技術(shù)A、化學(xué)發(fā)光免疫測定B、免疫電泳法C、放射免疫法D、熒光免疫法E、酶免疫法14、下列對血清中酶活力的測定的描述哪一項(xiàng)是錯(cuò)誤的A、可測定產(chǎn)物生成量B、可測定底物消耗量C、需最適 pHD、需最適E、與底物濃度無關(guān)是第2頁臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)15、
5、ELISA 中最常用的固相載體是A、聚氯乙烯B、聚苯乙烯C、三聚胺D、瓊脂糖 E、尼龍膜16、ELISA 板包被后,最常用的封閉物質(zhì)是A、人白蛋白B、人球蛋白C、牛血清白蛋白D、牛血清球蛋白E、鼠白蛋白17、用 ELISA 雙抗體夾心法檢測抗原 A 時(shí),固相載體的包被物是A、酶標(biāo)記 A 抗體B、未標(biāo)記的抗 A 抗體C、未標(biāo)記抗原 AD、酶標(biāo)抗球蛋白抗體E、酶標(biāo)記抗原 A二、B1、A.間接法B.雙抗體夾心法測抗原C.競爭法測抗體D.捕獲法E.競爭法測抗原<1>、以下示意圖是哪一種 ELISA 檢測模式A、B、C、D、E、<2>、以下示意圖是哪一種 ELISA 檢測模式A、
6、第3頁臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)B、C、D、E、<3>、以下示意圖是哪一種 ELISA 檢測模式A、B、C、D、E、一、A11、【正確【光,還具有】 B】 鄰苯二胺靈敏度高,比色方便,是 ELISA 中應(yīng)用最早的底物,但穩(wěn)定性差,反應(yīng)過程需要避性;四甲基聯(lián)苯胺穩(wěn)定性好,反應(yīng)無需避光,沒有致突變作用,是目前應(yīng)用最廣泛的底物,但是水溶性差?!驹擃}“酶免疫測定的應(yīng)用”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行【答疑編號(hào) 100536317】2、【正確【該題】 D】 ELISA 可用于測定抗原,也可用于測定抗體,雙抗體夾心法是檢測抗原最常用的方法?!懊该庖邷y定的應(yīng)用”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100536316】
7、3、【正確【該題】 B】多數(shù)量很小,為半抗原。免疫電泳的方法不夠靈敏,不適于測定半抗原?!懊该庖邷y定的應(yīng)用”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100536315】4、【正確【】 C】 選擇 ELISA 的標(biāo)記用酶,保證標(biāo)記抗原后,酶活性保持穩(wěn)定。第4頁部分臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)【該題“酶免疫測定的應(yīng)用”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100536311】5、【正確【該題】 D】 最佳工作濃度的選擇通常通過將抗體、抗原作一系列的稀釋,即棋盤滴定?!懊该庖邷y定的應(yīng)用”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100536306】6、【正確【兩類?!驹擃}】 A】 酶免疫測定根據(jù)抗原抗體反應(yīng)后是否需要分離結(jié)合的與游離的酶標(biāo)
8、記物而分為均相和異相這“酶免疫技術(shù)的特點(diǎn)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100499817】7、【正確【】 E】 1.酶的活性要強(qiáng),催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高,純度高。2. 易與抗體或抗原偶聯(lián),標(biāo)記后酶活性保持穩(wěn)定,且不影響標(biāo)記抗原與抗體的免疫反應(yīng)性。3. 作用專一性強(qiáng),酶活性不受樣品中其他成分的影響,受檢組織或體液中不存在與標(biāo)記酶相同的內(nèi)源性酶或抑制物。用于均相酶免疫測定的酶還要求當(dāng)抗體與酶標(biāo)抗原結(jié)合后,酶活性可出現(xiàn)抑制或激活。4.酶催化底物后產(chǎn)生的產(chǎn)物易于或測量,方法簡單易行、敏感和重復(fù)性好?!驹擃}“酶免疫技術(shù)分類”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100499816】8、【正確【】 C】 間接法測抗體是檢測抗體
9、最常用的方法,其操作步驟如下:將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原,洗滌;加稀釋的受檢血清;加酶標(biāo)抗抗體;加底物顯色。由此可知固相載體包被物是未標(biāo)記的已知抗原?!驹擃}“酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行【答疑編號(hào) 100499005】9、【正確【該題】 B】 辣根過氧化物酶由糖蛋白和亞鐵血紅素組成,其酶活性基團(tuán)為亞鐵血紅素?!懊该庖呒夹g(shù)的特點(diǎn)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100498999】10、【正確【】 B】 鄰苯二胺為在 ELISA 中應(yīng)用最多的底物。一般采用對磷酸酯作為堿性磷酸酶(AP)第5頁臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)的底物。在 ELISA 中應(yīng)用 AP 系統(tǒng),其敏感
10、性一般高于應(yīng)用 HRP 系統(tǒng),空白值也較低。但 AP 較難得到高純度制劑,穩(wěn)定性較 HRP 低,價(jià)格較 HRP 高,糖苷酸的底物常用 4-甲基酮基-D 半乳糖苷。酶結(jié)合物時(shí)得率也較 HRP 低。在 ELISA 中,-半乳【該題“酶免疫技術(shù)的特點(diǎn)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100498997】11、【正確【光,還具有】 B】 鄰苯二胺靈敏度高,比色方便,是 ELISA 中應(yīng)用最早的底物,也穩(wěn)定性差,反應(yīng)過裎需要避性;四甲基聯(lián)苯胺穩(wěn)定性好,反應(yīng)無需避光,沒有致突變作用,是目前應(yīng)用最廣泛的底物,但是水溶性差?!驹擃}“酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行【答疑編號(hào) 100498996】12、【正確
11、【】 D】 測定時(shí)將含待測抗原標(biāo)本和酶標(biāo)抗體同時(shí)加入進(jìn)行反應(yīng),兩種抗體互不干擾,經(jīng)過一次和洗滌后,即可加入底物進(jìn)行顯色測定。但當(dāng)待測抗原濃度過抗體結(jié)合而抑制夾心復(fù)合物的形成,出現(xiàn)鉤狀效應(yīng),過量的抗原可分別同固相抗體和酶標(biāo)【該題“酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100498995】13、【正確【該題】 B】多數(shù)量很小,為半抗原。免疫電泳的方法不夠靈敏,不適于測定半抗原。“酶免疫測定的應(yīng)用”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100498994】14、【正確【】 E】 酶促反應(yīng)中需要最適 pH、及過量的底物,反應(yīng)速度可用一定時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物生成量或底物消耗量來反映?!驹擃}“酶免疫技術(shù)的特點(diǎn)”
12、知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100498993】15、【正確【】 B】 將抗原或抗體結(jié)合在固相載體上的過程稱為包被。由于載體的不同,包被的方法也不同。目前普遍使用的聚苯乙烯載體,通常將抗原或抗體溶于緩沖液(常用為 pH9.6 的碳酸鹽緩沖液)中,加于 ELISA板4過夜。包被好的固相載體在低溫可放置一段時(shí)間而不失去免疫活性?!驹擃}“酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行【答疑編號(hào) 100498979】第6頁臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)輔導(dǎo)16、【正確【該題】 C】 ELISA 板包被后最常用的封閉物質(zhì)是牛血清白蛋白?!懊嘎?lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)”知識(shí)點(diǎn)進(jìn)行】【答疑編號(hào) 100498978】17、【正確【該題
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