高中生物二輪復習基因工程及克隆技術(shù)基礎(chǔ)自修課

1、高中生物二輪復習基因工程及克隆技術(shù)基礎(chǔ)自修課“基因工程與克隆技術(shù)基因工程與克隆技術(shù)”課前診斷課前診斷卷卷點擊鏈接點擊鏈接限制酶限制酶DNA 連接酶連接酶載體載體作用作用切割切割_和載體和載體拼接拼接DNA 片段，片段，形成形成_攜帶目的基因攜帶目的基因進入進入_作用作用部位部位兩個核苷酸之間的兩個核苷酸之間的_限制酶限制酶DNA 連接酶連接酶載體載體作用作用特點特點(條件條件)識別雙鏈識別雙鏈DNA 分子的分子的某種某種_在特定位點在特定位點上切割上切割Ecoli DNA 連接酶只能連連接酶只能連接接_T4 DNA 連接連接酶能連接酶能連接_和平末端和平末端能在宿主細胞能在宿主細胞內(nèi)穩(wěn)定存在并

2、大內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復制量復制有多個有多個_具有特殊的具有特殊的_常用常用類型類型EcoR 限制限制酶酶 Sma 限限制酶制酶Ecoli DNA 連連接酶、接酶、T4 DNA 連接酶連接酶質(zhì)粒、質(zhì)粒、噬菌體噬菌體的衍生物、動植的衍生物、動植物病毒等物病毒等方法方法具體操作具體操作直接分離直接分離從自然界已有的物種中分離，如從從自然界已有的物種中分離，如從_中獲取中獲取人人工工合合成成化學合成化學合成已知核苷酸序列的已知核苷酸序列的_，直接利用，直接利用DNA合成儀用化學方法合成，不需要模板合成儀用化學方法合成，不需要模板逆轉(zhuǎn)錄法逆轉(zhuǎn)錄法 以以RNA為模板，在為模板，在_作用下人工合成作用下人工合

3、成PCR技術(shù)技術(shù)擴增擴增目的基因目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈，引物受熱變性后解鏈為單鏈，引物與單鏈相應互補序列結(jié)合，然后在與單鏈相應互補序列結(jié)合，然后在_作用下延伸作用下延伸植物細胞植物細胞動物細胞動物細胞微生物細胞微生物細胞常用常用方法方法_法、法、基因槍法、基因槍法、_法法_技術(shù)技術(shù)_法法(用用Ca2處理處理)受體受體細胞細胞受精卵、體細胞受精卵、體細胞_原核細胞原核細胞項目項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)取材取材植物植物_或出生不久的幼齡或出生不久的幼齡動物的動物的_項目項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)過程過程項目項目植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)

4、動物細胞培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)結(jié)果結(jié)果獲得植株個體，可以體獲得植株個體，可以體現(xiàn)現(xiàn)_新的細胞，不新的細胞，不_，不體現(xiàn)全能性不體現(xiàn)全能性條件條件無菌無菌營養(yǎng)營養(yǎng)適宜條件適宜條件無菌、無毒無菌、無毒營養(yǎng)，營養(yǎng)，_等等溫度和溫度和pH氣體環(huán)境：氣體環(huán)境：_應用應用植株快速繁殖植株快速繁殖脫毒植株的培養(yǎng)脫毒植株的培養(yǎng)人工種子人工種子生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等轉(zhuǎn)基因植物的培育轉(zhuǎn)基因植物的培育蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)皮膚移植材料的培育皮膚移植材料的培育檢測有毒物質(zhì)檢測有毒物質(zhì)生理、病理、藥理學的生理、病理、藥理學的研究研究項目項目植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞融合動物細胞融合原理原理 細胞膜的細胞膜的_、細胞的、細胞的_細胞膜的細胞膜的_過程過程項目項目植物體細胞雜交植物體細胞雜交動物細胞融合動物細胞融合相關(guān)酶相關(guān)酶纖維素酶和纖維素酶和_或膠原蛋白酶或膠原蛋白酶融合方融合方法法物理法：離心、電激、物理法：離心、電激、振動；振動；化學法：聚乙二醇等試化學法：聚乙二醇等試劑誘導劑誘導除物理法和化學法外還除物理法和化學法外還可以用可以用_誘導誘導結(jié)果結(jié)果雜種植株雜種植株雜交細胞雜交細胞 意義意義克