臨床實(shí)驗(yàn)室常用試劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作程序

1、臨床實(shí)驗(yàn)室常用試劑配制標(biāo)準(zhǔn)操作程序一、目的： 保證實(shí)驗(yàn)中用到的各種試劑符合實(shí)驗(yàn)要求。二、適用范圍： 實(shí)驗(yàn)室常用需要配制的試劑。三、職責(zé)： 由臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室專業(yè)技術(shù)人員制定程序文 件，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人審核，科室主任批準(zhǔn)實(shí)施。四、程序：1、4%NaOH容液配制用電子天平稱取4克分析純的NaOH固體，置于一只三 角燒瓶中。用200ml量筒準(zhǔn)確取100ml水，緩緩注入盛放NaOH固 體的三角燒瓶中。搖蕩三角燒瓶使NaOH固體充分溶解。然后緩緩傾倒入250ml廣口瓶中密封保存?zhèn)溆谩?、1%NaClO溶液配制用5ml量筒準(zhǔn)確取2mlNaClO原液，緩緩注入一只三角 燒瓶中。用200ml量筒準(zhǔn)確取198

2、ml水，緩緩注入盛放NaCIO的 三角燒瓶中。搖蕩混勻溶液。將混勻的溶液轉(zhuǎn)移入廣口瓶中。重復(fù)步的操作，制備1000ml的1%NaCIO溶液儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?、10%NaCI O溶液配制用100ml量筒準(zhǔn)確取20mINaCIO原液，緩緩注入一只三 角燒瓶中。用200ml量筒準(zhǔn)確取180ml水，緩緩注入盛放NaCIO的 三角燒瓶中。搖蕩混勻溶液。將混勻的溶液轉(zhuǎn)移入廣口瓶中。重復(fù)步的操作，制備1000ml的10%NaCIO溶液儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?、1N HCl溶液配制用100ml量筒準(zhǔn)確取86.2ml濃鹽酸，緩緩注入一只三 角燒瓶中。用1000ml量筒準(zhǔn)確取913.8ml水，緩緩注入盛放濃鹽 酸的三角燒瓶中。搖蕩

3、混勻溶液。將混勻的溶液轉(zhuǎn)移入廣口瓶中儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?、RNA專用試劑配制1)RNA提取器皿的處理1提取過(guò)程盡量使用一次性塑料制品,并經(jīng)高壓消毒.因?yàn)?其基本不含Rnase,可以不經(jīng)預(yù)處理直接用于制備和儲(chǔ)存RNA。2如須使用玻璃制品.使用前必須經(jīng)180C干烤8小時(shí)以上,或用0.1%DEPC容液浸泡。3不能用高溫干烤的用品均須用0.1%DEPC溶液浸泡。4DEPC去除Rnase步驟：灌滿0.1%DEPC勺器皿在37C放置2小時(shí),然后用滅菌水淋洗數(shù)次，并于100C干烤，15分 鐘.最后高壓消毒15分鐘。100C干烤15分鐘待用。2）DEPC水 （無(wú)Rnase水）配制1量取一定量的超純水（18.2MQ）2

4、量取0.1%（v/v）的DEPC加入水中。3水放置過(guò)夜。4高壓蒸汽滅菌15分鐘。3）75%DEP（乙醇配制1準(zhǔn)備無(wú)Rnase的量筒及玻璃瓶。2按3:1比例分別量取RNA專用的無(wú)污染的無(wú)水乙醇和DEPC水,倒入容器內(nèi)。3混勻，即為75%DEP（乙醇3）RNA式劑的準(zhǔn)備1所用RNA試劑均須為提取RNA專用，不可與其它用途的 式劑混用,以免污染.2稱量RNA試劑時(shí)，其所用的藥勺、容器、量筒等均應(yīng)為 無(wú)Rnase污染器皿。3配制用水為高壓滅菌超純水（最好用DEPC處理過(guò)的超純水）4在配制過(guò)程中應(yīng)戴一次性手套,并須勤換。.5如試劑內(nèi)不含能與DEPC反應(yīng)的成分，配好的溶液可用0.1%DEPC于37C處理至少12小時(shí)，然后于