哈蟆油對免疫力低下小鼠體內(nèi)脂肪酸含量的影響

1、哈蟆油對免疫力低下小鼠體內(nèi)脂肪酸含量的影響         【摘要】  目的：觀察不同劑量哈蟆油水溶液對小鼠脾臟中脂肪酸含量的影響。方法:20只小鼠隨機(jī)分為4組(高、低劑量組、模型對照組及正常對照組)，分別灌胃不同劑量哈蟆油水溶液及生理鹽水，10 d后，高、低劑量組及模型對照組深部X射線照射，造成免疫力低下模型，24 h后，斷頭處死，取脾；皂化法提取脾中脂肪酸,氣相色譜測定含量。結(jié)果：與模型組比較，高、低劑量組中的兩種單不飽和脂肪酸n-7與模型組含量均有極顯著性差異，n-3及n-6系脂肪酸與模型組有顯著性

2、差異。結(jié)論：在小鼠免疫力低下時(shí)，哈蟆油具有調(diào)節(jié)其免疫器官中脂肪酸含量的作用，從而提高其免疫功能。 【關(guān)鍵詞】  哈蟆油；脂肪酸含量；免疫功能；小鼠哈蟆油(Oviductus  Ranae)系蛙科動物中國林蛙(Rana temporaria chensinensis)雌蛙的輸卵管干制品1,為我國名貴滋補(bǔ)中藥，含有氨基酸、脂肪酸等多種營養(yǎng)成分，具有抗應(yīng)激2、抗衰老3、防治小兒哮喘、增強(qiáng)免疫力等藥理作用。目前，已有實(shí)驗(yàn)證明機(jī)體免疫力和體內(nèi)脂肪酸含量有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)主要觀察了哈蟆油對小鼠免疫器官中脂肪酸含量的影響，在此基礎(chǔ)上探討其對免疫功能的影響作用。2  方法2.1

3、0; 哈蟆油溶液的制備  精確稱取哈蟆油粉末0.5 g、1.0 g兩份，各加50 mL生理鹽水(100 mg生藥/kg體重、200 mg生藥/kg體重),6070水浴加熱24 h，常溫后勻漿成稀漿液6，冰箱保存。2.2  小鼠的喂養(yǎng)及處理  20只小鼠隨機(jī)分為4組，每組5只，各組每日灌胃2種劑量哈蟆油溶液(0.1 mL/10g)及生理鹽水，隔天稱重。10 d后，高、低劑量組及模型對照組深部X射線照射(0.5Cu，1.0Al，5GY)7，24 h后，稱重，斷頭處死，無菌取脾。2.3  脂肪酸提取方法  本實(shí)驗(yàn)采用皂化法提取脾臟中脂肪酸：取脾與KO

4、H-乙醇混合加熱30 min后，采用乙酸乙酯與正己烷的混合液萃取其中脂肪酸，萃取液與HCl-甲醇加熱30 min(100)，甲基化后氮?dú)獯蹈?，殘留物?00L正己烷溶解，氣相進(jìn)樣1L測定。2.4  氣相條件  島津GC-14C氣相色譜儀，裝配氫火焰離子化檢測器,色譜柱為DB-23石英毛細(xì)管柱(30×0.25×0.25)，進(jìn)樣口溫度為230，檢測器溫度230，起始柱溫170,恒溫4 min，再以4/min程序升溫至220，恒溫20 min。采用Sigma公司標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸進(jìn)行定性分析鑒定脂肪酸組份，浙大2000色譜數(shù)據(jù)工作站按峰面積內(nèi)標(biāo)法計(jì)算脂肪酸各組份含量。

5、         3  實(shí)驗(yàn)結(jié)果   根據(jù)StatView軟件分析25種脂肪酸相對含量,運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法處理數(shù)據(jù),結(jié)果見表1。4  小結(jié)與討論4.1  從表1可以看出，模型組與正常對照組比較，除飽和脂肪酸及單不飽和脂肪酸中分別有兩項(xiàng)外，各項(xiàng)值均與模型組有顯著性降低，說明小鼠造成免疫力低下模型后，免疫器官脾中的各種脂肪酸含量均顯著下降，由此我們得出結(jié)論，機(jī)體內(nèi)的脂肪酸含量與機(jī)體免疫功能有密切關(guān)系。4.2  與模型組比較，低劑量組中的兩種n-7系單不飽和脂肪酸均

6、與模型組有極顯著性差異;n-3系脂肪酸中的十八碳三烯酸、DHA及總量與模型組有顯著性差異；高劑量組與模型組比較，其中兩種n-7系單不飽和脂肪酸亦與模型組有極顯著性差異；n-3系脂肪酸中的十八碳三烯酸、EPA 、DHA及總量與模型組有顯著性差異；在n-6系脂肪酸中,十八碳二烯酸及總量與模型組有顯著性差異。4.3  高劑量組與低劑量組相比數(shù)值略有提高，但差異不顯著；高劑量組與模型組比較，有顯著性差異的脂肪酸種類要高于低劑量組，說明哈蟆油對機(jī)體免疫力的調(diào)節(jié)作用與用量成正比例關(guān)系；高、低劑量組和模型組同時(shí)與正常對照組比較，高、低劑量組的脂肪酸含量接近正常值，說明哈蟆油有助于恢復(fù)照射后小鼠的免

7、疫功能。表1  小鼠脾臟中25種脂肪酸相對含量（略）注:與正常對照組比較P0.05，P0.01；與模型組比較#P0.05，#P0.014.4  從總體來看，哈蟆油確有抵抗放射線照射的傷害及調(diào)節(jié)免疫力低下小鼠免疫器官中脂肪酸含量的作用，從而提高其免疫功能，但哈蟆油對調(diào)節(jié)人體免疫力的確實(shí)有效劑量，及在多大劑量范圍內(nèi)與用量呈正比關(guān)系，尚待研究。【參考文獻(xiàn)】  1姜大成,肖井雷.中國林蛙與哈蟆油M.長春：吉林科學(xué)技術(shù)出版社,2006:269-311.2高艷玲.甘肅產(chǎn)哈蟆油對小鼠免疫力和應(yīng)激性能的影響J.中藥材,2004,19(2):90-92.3李月紅,黃 權(quán).林蛙油對衰老模型小鼠部分生理指標(biāo)的影響J.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2000,26(6):646-648.4金志春,張敦蘭.哈蟆油防治小兒哮喘及其對體液免疫影響的研究J.中醫(yī)藥研究,1998,14(2):28-30.5朱黎霞.哈士蟆油膠囊的生理藥理實(shí)驗(yàn)研究J.中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2002,30