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1、222 動物細胞融合與單克隆抗體導(dǎo)學(xué)案編寫人:謝建 審核人: 審批人:【學(xué)習(xí)目標】(1) 掌握動物細胞融合與植物體細胞雜交的區(qū)別與聯(lián)系。(2) 簡述動物細胞融合與單克隆抗體制備的過程。(3) 了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實踐中的應(yīng)用,并說出應(yīng)用的實例?!局攸c難點】1. 教學(xué)重點(1) 動物細胞融合的原理和過程。(2)單克隆抗體制備的原理和過程。2. 教學(xué)難點單克隆抗體制備的原理和過程?!咀灾鲗W(xué)習(xí)】、動物細胞融合1、概念:_或_動物細胞結(jié)合形一個細胞的過程,也稱細胞雜交。2、結(jié)果:形成_。3、過程:兩個或多個細胞_。4、意義:克服了_的不親和性,成為研究_、_、腫瘤和 _培育的重要手段。、單克隆抗體1、
2、抗體產(chǎn)生細胞:_。 成分:_。特點:從_中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。2、單克隆抗體的制備(1)過程給小鼠注射特定的抗原蛋白培養(yǎng)骨髓瘤細胞從_中分離B淋巴細胞骨髓瘤細胞未融合細胞_小鼠體內(nèi)培養(yǎng)體外培養(yǎng)_抗體雜交瘤細胞的特點:_、_。單克隆抗體的優(yōu)點:_、_、_。、單克隆抗體的應(yīng)用1、作為診斷試劑,具有_、_、_、_的優(yōu)點。2、用于治療疾病和運載藥物:主要用于治療_、可制成_?!菊n內(nèi)探究】探究一:動物細胞的融合1、植物體細胞雜交和動物細胞融合的區(qū)別植物體細胞雜交動物細胞融合細胞融合原理細胞膜的流動性融合過程先使細胞分散開誘導(dǎo)方法電激、振動、離心、聚乙二醇結(jié)果應(yīng)用培育植物新品種意義相同點
3、原生質(zhì)體融合原理相同;原生質(zhì)體融合的方法相似2植物體細胞雜交和動物細胞融合的主要區(qū)別是什么?3、為什么可以使用滅活的病毒促進動物細胞融合?4、不滅活的病毒能作為誘導(dǎo)劑嗎? 知識閱讀:閱讀課本P52中的小字,了解一下動物細胞融合技術(shù)的發(fā)展簡史。(二)單克隆抗體探究二:單克隆抗體制備的原理1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么?抗體是從何來的?2、B淋巴細胞有什么特點?3、若要想獲得大量的單一抗體,如何做呢?4、在體外培養(yǎng)的條件下,一個B淋巴細胞是不可能無限增殖的,那么,怎樣解決這一問題的呢?5、小結(jié)以下內(nèi)容: 利用_產(chǎn)生特異性抗體的功能。 利用_無限增殖的特性。 利用_技術(shù)將兩
4、種細胞融合獲得雜交瘤細胞。 利用_技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細胞。探究三:單克隆抗體制備的過程1、如何獲得B淋巴細胞?2、如果把B淋巴細胞和骨髓瘤細胞放在一起時,會有幾種融合方式(類型)?3、 選擇雜交瘤細胞的兩步篩選的目的各是什么?4、如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)? 融合后的細胞經(jīng)選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后,能存活的細胞就是雜交瘤細胞,但這些雜交瘤細胞并非都是能分泌所需抗體的細胞,通常用“有限稀釋法”來選擇。將雜交瘤細胞稀釋,用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng),使每孔不超過一個細胞,通過培養(yǎng)讓其增殖。然后檢測各孔上清液中細胞分泌的抗體,那么上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細胞還不能保證是來自
5、單個細胞,挑選陽性孔的細胞繼續(xù)進行有限稀釋,一般需進行34次,直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞。該過程即為雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。探究四:單克隆抗體的應(yīng)用1、單克隆抗體的應(yīng)用有哪些?2、生物導(dǎo)彈的組成及優(yōu)點 【當堂檢測】1、基因型為Aa與基因型為Bb的動物體細胞混合,用滅活的仙臺病毒處理后,不可能獲得下列哪種基因型的細胞 ( )AAAaa BAaBb CAabb DBBbb2、動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中,正確的是 ( )誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細胞A.B. C.D.3、關(guān)于單克隆抗體,下列敘述不正確的是( )A、可以制成診
6、斷盒用于疾病的珍斷 B、可以與藥物結(jié)合,用于病變細胞的定向治療 C、可以利用基因工程技術(shù)生產(chǎn) D、可以在生物體內(nèi)生產(chǎn),不能體外生產(chǎn)4、“生物導(dǎo)彈”是指( )A、單克隆抗體 B、帶有特定藥物的單克隆抗體C、雜交細胞 D、B淋巴細胞【課后練習(xí)與提高】1、動物細胞融合和植物原生質(zhì)體融合比較,在動物細胞融合中有特殊性的是( )A、融合的原理 B、融合的優(yōu)點 C、融合的誘導(dǎo)手段 D、融合的過程2、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖,其中1過程注射的物質(zhì)和A細胞的名稱為( )A、抗體、T淋巴細胞 B、抗原、T淋巴細胞C、抗體、B淋巴細胞 D、抗原、效應(yīng)B淋巴細胞3、單克隆抗體和血清抗體相比,其優(yōu)越性在 于(
7、)A、單克隆抗體能夠制成“生物導(dǎo)彈” B、單克隆抗體能夠在體外制備C、單克隆抗體比血清抗體的特異性強、免疫活性高D、單克隆抗體制備過程簡單4、單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述,錯誤的是( ) A特異性強、靈敏度高 B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈” C體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體 D由效應(yīng)B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌5、試管嬰兒、試管苗、克隆羊三者均屬于生物工程技術(shù)的杰出成果,下面對其生物學(xué)原理及技術(shù)的敘述正確的是 ( ) A都屬于無性生殖,能保持母本性狀 B都是細胞工程的技術(shù)范圍C都充分體現(xiàn)了體細胞的全能性 D都不會發(fā)生基因重組和變異6、右圖為細胞融合的簡略過程,請據(jù)圖回答:(1)若A、B是植物細胞,在細胞融合之前已用_ _處理,除去了_;由A、B到細胞C的過程中,常用的物理方法是_。融合完成的標志是_。(2)若A、B是植物細胞,則形成的D細胞還要應(yīng)用_技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。(3)若A、B是動物細胞,一般取自_,然后用_使其分散開來;由A、B到C的過程中,常用的不同于植物細胞融合的手段是_,所形成的D稱為_ ,A、B融合為C的過程說明了細胞膜具有_。(4)若該過程是制備單克隆抗體,A為小鼠效應(yīng)B細胞,那么,在獲得此細胞之前,小
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