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1、推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型關節(jié)液中細胞因子的影響 【摘要】 目的觀察推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型關節(jié)液中細胞因子IL-1和TNF-a的影響,探討推拿加功能訓練治療膝骨關節(jié)炎的機制。方法將新西蘭大白兔40只隨機分為空白對照組(A組)、模型對照組(B組)、電針治療組(C組)、手法治療組(D組)。除A組外,其余3組將大 【摘要】 目的觀察推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型關節(jié)液中細胞因子
2、IL-1和TNF-a的影響,探討推拿加功能訓練治療膝骨關節(jié)炎的機制。方法將新西蘭大白兔40只隨機分為空白對照組(A組)、模型對照組(B組)、電針治療組(C組)、手法治療組(D組)。除A組外,其余3組將大白兔左膝關節(jié)伸直位石膏固定7周制成骨性關節(jié)炎動物模型,造模成功后,A組和B組正常飼養(yǎng),不處理;C組電針治療,D組給予推拿手法加功能訓練治療,連續(xù)治療21 d。處理前、后分別取各組家兔關節(jié)沖洗液,采用放射免疫分析法(RIA),測定關節(jié)沖洗液中IL-1和TNF-a的含量。結果經治療后,C、D組與A、B組比較有顯著性差異(P<0.05);D組治療前后有顯著性差異(P<0.05)。結論推拿加
3、功能訓練治療能降低膝骨關節(jié)炎關節(jié)液中細胞因子IL-1和TNF-a的含量,從而發(fā)揮對膝骨關節(jié)炎的防治作用。 【關鍵詞】 膝骨關節(jié)炎 推拿手法 細胞因子膝關節(jié)骨性關節(jié)炎(Knee Osteoarthritis,KOA) 是臨床中常見的關節(jié)疾病,好發(fā)于中老年人,是由于關節(jié)滑膜退變,軟骨破壞引起的以膝關節(jié)疼痛、僵硬和活動受限為特征的慢性骨關節(jié)病,主要病變?yōu)橄リP節(jié)軟骨退行性變和繼發(fā)性骨質增生。近年來,臨床上不斷報道用針灸、推拿加功能訓練及針刀等方法治療膝骨關節(jié)炎取得較好療效1。研究發(fā)現,細胞因子IL-1及TNF-a是參與骨性關節(jié)炎進程的重要介質, 是炎癥反應的重要調節(jié)劑,是調節(jié)炎癥的始動因素
4、,與軟骨破壞密切相關2。本實驗研究推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型細胞因子的影響,旨在證實推拿手法治療膝骨關節(jié)炎的療效,探討膝骨關節(jié)炎的發(fā)病機理。1 材料與儀器1.1 儀器與試劑IL-1和TNF-放射免疫測定藥盒從解放軍總醫(yī)院放免研究所購買,采用放射免疫分析法(RIA),放免測定程序按試劑說明書進行。離心機(中佳公司,KDC-2046型)、電針儀(廣東省汕頭市醫(yī)用設備廠, 6805-)和放射免疫計數器(眾城公司, DFM-96型10管)等。1.2 動物健康新西蘭大白兔40只(從重慶醫(yī)科大學動物中心購買),雌雄各半,雌無孕,體重2.02.5kg。隨機分為空白對照組(A)
5、、模型對照組(B)、電針治療組(C)和手法治療組(D),每組10只。造模成功后C,D兩組每只分別給予電針或手法治療,1次/d。2 方法2.1 動物模型實驗動物同等條件下穩(wěn)定飼養(yǎng)7 d后,B,C,D組按照膝關節(jié)石膏制動法造模。先剪去所有動物左后肢踝關節(jié)以上的兔毛,用管型石膏將其左后肢伸直位固定,石膏外以透明膠紙封好,以防兔撕咬,若石膏松動或脫落者及時重新固定。制動滿7周后,隨機從A,B,C,D組各抽出1只動物處死,取關節(jié)軟骨作病理檢查以觀察造模情況,確定模型成功后解除石膏外固定。2.2 組織學檢查分別于造模成功后和治療結束后隨機從B,C,D各組中抽出1只家兔處死,處死后立即切取家兔脛
6、骨平臺內側關節(jié)面的完整軟骨及軟骨下骨組織標本,用10的甲醛溶液固定48 h,脫鈣23 d,石蠟縱向包埋固定,常規(guī)切片,HE染色。觀察滑膜與軟骨的病理變化3。2.3 推拿加功能訓練方法D組每天用按摩、揉捏、點壓、分筋、理筋等手法以松解股四頭肌,順逆時針旋揉髕骨,再作內旋內收、外展外旋、屈伸髖和膝關節(jié)各5次,15 min/次,最后平地趕跑100 m,治療1次/d,連續(xù)治療21 d;C組參照實驗針灸學4與動物針灸學5,取左后肢“內外膝眼、陽陵泉、血海、足三里和梁丘”6個穴位。以30號、1寸毫針針刺,得氣后,針柄接電針治療儀,電壓6 V,疏密波型,頻率1.62 Hz,輸出調節(jié)強度12,以局部皮膚肌肉輕
7、微顫動為度,1次/d,留針30 min/d,連續(xù)治療21 d。 正常組、模型組正常飼養(yǎng)。2.4 關節(jié)液標本采集分別于造模成功后及治療結束后采集A,B,C,D四組的關節(jié)液,獲得4組動物膝關節(jié)沖洗液,回收量0.40.6 ml,平均0.5 ml,于-20低溫冰箱中保存待測。具體方法:施行膝關節(jié)穿刺,證實刺入關節(jié)腔后,注入0.9%的生理鹽水0.5 ml,反復回抽、注入3次后,再盡量抽出腔內液體。抽取關節(jié)液后,每只兔肌注2萬單位慶大霉素,以防膝關節(jié)感染。采用放射免疫分析法(RIA)處理標本,放免測定程序按試劑說明書進行6。2.5 統計學處理方法所有實驗數據用SAS9.0以上軟件進行分析,以±s表示,組間差異采用方差分析(ANOVA)中的SNK法,各組治療前后差異采用t檢驗,以P<0.05作為顯著性差異的標準。3 結果3.1 病理切片觀察造模后隨機從各組中取出1只動物處死,解剖A組動物,肉眼觀察膝關節(jié)面光滑呈淡藍色;B,C,D組動物關節(jié)軟骨面粗糙
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