推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型關節(jié)液中細胞因子的影響

1、推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型關節(jié)液中細胞因子的影響         【摘要】 目的觀察推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型關節(jié)液中細胞因子IL-1和TNF-a的影響，探討推拿加功能訓練治療膝骨關節(jié)炎的機制。方法將新西蘭大白兔40只隨機分為空白對照組(A組)、模型對照組(B組)、電針治療組（C組）、手法治療組(D組)。除A組外，其余3組將大        【摘要】  目的觀察推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型關節(jié)液中細胞因子

2、IL-1和TNF-a的影響，探討推拿加功能訓練治療膝骨關節(jié)炎的機制。方法將新西蘭大白兔40只隨機分為空白對照組(A組)、模型對照組(B組)、電針治療組（C組）、手法治療組(D組)。除A組外，其余3組將大白兔左膝關節(jié)伸直位石膏固定7周制成骨性關節(jié)炎動物模型，造模成功后,A組和B組正常飼養(yǎng),不處理；C組電針治療，D組給予推拿手法加功能訓練治療，連續(xù)治療21 d。處理前、后分別取各組家兔關節(jié)沖洗液，采用放射免疫分析法（RIA），測定關節(jié)沖洗液中IL-1和TNF-a的含量。結果經治療后，C、D組與A、B組比較有顯著性差異(P<0.05)；D組治療前后有顯著性差異(P<0.05)。結論推拿加

3、功能訓練治療能降低膝骨關節(jié)炎關節(jié)液中細胞因子IL-1和TNF-a的含量,從而發(fā)揮對膝骨關節(jié)炎的防治作用。 【關鍵詞】  膝骨關節(jié)炎 推拿手法 細胞因子膝關節(jié)骨性關節(jié)炎(Knee Osteoarthritis，KOA) 是臨床中常見的關節(jié)疾病，好發(fā)于中老年人，是由于關節(jié)滑膜退變，軟骨破壞引起的以膝關節(jié)疼痛、僵硬和活動受限為特征的慢性骨關節(jié)病，主要病變?yōu)橄リP節(jié)軟骨退行性變和繼發(fā)性骨質增生。近年來,臨床上不斷報道用針灸、推拿加功能訓練及針刀等方法治療膝骨關節(jié)炎取得較好療效1。研究發(fā)現，細胞因子IL-1及TNF-a是參與骨性關節(jié)炎進程的重要介質, 是炎癥反應的重要調節(jié)劑，是調節(jié)炎癥的始動因素

4、，與軟骨破壞密切相關2。本實驗研究推拿加功能訓練對膝骨關節(jié)炎家兔模型細胞因子的影響,旨在證實推拿手法治療膝骨關節(jié)炎的療效，探討膝骨關節(jié)炎的發(fā)病機理。1  材料與儀器1.1  儀器與試劑IL-1和TNF-放射免疫測定藥盒從解放軍總醫(yī)院放免研究所購買，采用放射免疫分析法（RIA），放免測定程序按試劑說明書進行。離心機(中佳公司,KDC-2046型)、電針儀(廣東省汕頭市醫(yī)用設備廠, 6805-)和放射免疫計數器(眾城公司, DFM-96型10管)等。1.2 動物健康新西蘭大白兔40只(從重慶醫(yī)科大學動物中心購買)，雌雄各半，雌無孕，體重2.02.5kg。隨機分為空白對照組（A）

5、、模型對照組（B）、電針治療組（C）和手法治療組（D），每組10只。造模成功后C，D兩組每只分別給予電針或手法治療，1次/d。2 方法2.1  動物模型實驗動物同等條件下穩(wěn)定飼養(yǎng)7 d后，B，C，D組按照膝關節(jié)石膏制動法造模。先剪去所有動物左后肢踝關節(jié)以上的兔毛，用管型石膏將其左后肢伸直位固定，石膏外以透明膠紙封好，以防兔撕咬，若石膏松動或脫落者及時重新固定。制動滿7周后，隨機從A，B，C，D組各抽出1只動物處死，取關節(jié)軟骨作病理檢查以觀察造模情況，確定模型成功后解除石膏外固定。2.2 組織學檢查分別于造模成功后和治療結束后隨機從B，C，D各組中抽出1只家兔處死，處死后立即切取家兔脛

6、骨平臺內側關節(jié)面的完整軟骨及軟骨下骨組織標本，用10的甲醛溶液固定48 h，脫鈣23 d，石蠟縱向包埋固定，常規(guī)切片，HE染色。觀察滑膜與軟骨的病理變化3。2.3 推拿加功能訓練方法D組每天用按摩、揉捏、點壓、分筋、理筋等手法以松解股四頭肌，順逆時針旋揉髕骨，再作內旋內收、外展外旋、屈伸髖和膝關節(jié)各5次，15 min/次，最后平地趕跑100 m，治療1次/d，連續(xù)治療21 d；C組參照實驗針灸學4與動物針灸學5,取左后肢“內外膝眼、陽陵泉、血海、足三里和梁丘”6個穴位。以30號、1寸毫針針刺，得氣后，針柄接電針治療儀，電壓6 V，疏密波型，頻率1.62 Hz，輸出調節(jié)強度12,以局部皮膚肌肉輕

7、微顫動為度，1次/d，留針30 min/d，連續(xù)治療21 d。 正常組、模型組正常飼養(yǎng)。2.4 關節(jié)液標本采集分別于造模成功后及治療結束后采集A，B，C，D四組的關節(jié)液，獲得4組動物膝關節(jié)沖洗液，回收量0.40.6 ml，平均0.5 ml，于-20低溫冰箱中保存待測。具體方法：施行膝關節(jié)穿刺，證實刺入關節(jié)腔后，注入0.9%的生理鹽水0.5 ml，反復回抽、注入3次后，再盡量抽出腔內液體。抽取關節(jié)液后，每只兔肌注2萬單位慶大霉素，以防膝關節(jié)感染。采用放射免疫分析法（RIA）處理標本，放免測定程序按試劑說明書進行6。2.5 統計學處理方法所有實驗數據用SAS9.0以上軟件進行分析,以±s表示,組間差異采用方差分析(ANOVA)中的SNK法,各組治療前后差異采用t檢驗，以P<0.05作為顯著性差異的標準。3 結果3.1  病理切片觀察造模后隨機從各組中取出1只動物處死,解剖A組動物,肉眼觀察膝關節(jié)面光滑呈淡藍色；B，C，D組動物關節(jié)軟骨面粗糙