兩法檢測海島地區(qū)幼兒抗

1、兩法檢測海島地區(qū)幼兒抗                 【關(guān)鍵詞】 乙肝表面抗體；電化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)摘要 目的 分析電化學(xué)發(fā)光與酶聯(lián)兩法檢測海島-HBs的比較免疫檢測抗-HBs兩法方法學(xué)的特點(diǎn)。方法 應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光（ECLIA）和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）兩種方法檢測155例幼兒抗-HBs，同時進(jìn)行靈敏度、線性、陽性率對比。結(jié)果 ECLIA法靈敏度2.4 u/L，線性范圍達(dá)1000 u/L，155例幼兒抗-HBs的陽性率

2、為82.6%，而ELISA法靈敏度為43.8 u/L，線性范圍800 u/L，陽性率僅為61.3%。ECLIA法的批內(nèi)、批間CV5.9%，而ELISA法的批內(nèi)、批間CV10.1%。結(jié)論 ECLIA法敏感性高于ELISA法，線性范圍寬、重現(xiàn)性好，能定量檢測抗-HBs，尤其對部分幼兒低水平（1043.8 u/L）抗-HBs檢測有較大的價值。關(guān)鍵詞 乙肝表面抗體；電化學(xué)發(fā)光法；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)壳埃Ｒ?guī)檢測抗-HBs，主要是酶聯(lián)免疫法（ELISA），尤其近來電化學(xué)發(fā)光法（ECLIA）以其敏感、自動化程度高、重現(xiàn)性好、快速、穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，在固相標(biāo)記免疫測定技術(shù)上居領(lǐng)先地位1。有文獻(xiàn)報道2乙肝病毒感染主要

3、發(fā)生在嬰幼兒時期，為此檢測幼兒抗HBs有重要的意義。因我縣地處海島，有獨(dú)特的地理環(huán)境，所以用先進(jìn)的ECLIA法測定我縣155例幼兒抗-HBs水平，并用ECLIA法作對照，現(xiàn)報告如下。1 對象與方法1.1 檢測對象 155例幼兒，男89例，女66例；年齡26歲。來自我縣各幼兒園，這些對象都按“0、1、6”程序進(jìn)行過乙肝疫苗接種。1.2 ELISA試劑 由珠海亞利生物公司提供，用Bio-550酶標(biāo) 兩法檢測海島地區(qū)幼兒抗-HBs的比較 儀、蘭勃型洗板機(jī)。1.3 ECLIA法 用瑞士羅氏公司ELECSYS 1010電化學(xué)發(fā)光儀及其相應(yīng)各種配套試劑。1.4 質(zhì)量控制 ECLIA法測定時，用羅氏低、高定

4、值質(zhì)控品，批號162631，定值為3.07 u/L、86.9 u/L。ELISA法用衛(wèi)生部臨檢中心質(zhì)控品，濃度為30 mu/L，批號030231，質(zhì)控測定結(jié)果都在標(biāo)定值的允許誤差范圍之內(nèi)。1.5 方法 這些幼兒采用早晨空腹抽血3 ml，分離血清，立即用兩法進(jìn)行抗-HBs測定，另外每人還做HBsAg、ALT兩個項(xiàng)目。2 結(jié)果和討論2.1 兩法抗體陽性率 155例幼兒（男89例、女66例），按ECLIA法以10 u/L為陽性，ELISA法以S/CO1.0為陽性，結(jié)果見表1。表1 ECLIA和ELISA法測定抗-HBs結(jié)果表1顯示，ECLIA抗-HBs陽性為128例（男74例、女54例），陽性率為8

5、2.6%，而ELISA陽性為95例（男55例，女40例），陽性率為61.3%，經(jīng)2檢驗(yàn)，2=17.4，P0.01，兩法陽性率差異有非常顯著性，ELISA法陽性率和2001年我市疾病控制中心用ELISA法對我縣123例城鄉(xiāng)兒童乙肝抗體調(diào)查的陽性率（60.6%）接近，但兩法明顯低于文獻(xiàn)報道陽性率90%以上3，4。2.2 兩法結(jié)果比較 95例抗-HBs ELISA法陽性的標(biāo)本，用ECLIA檢測全部呈陽性，而128例ECLIA法陽性的標(biāo)本，用ELISA法檢測陽性僅為95例，說明有32例ECLIA法陽性而ELISA法測定呈陰性，也表明兩法的特異性是相符的，但ELISA法的靈敏度明顯低于ECLIA法，32

6、例ELISA法陰性的標(biāo)本，用ECLIA法測定顯示抗-HBs濃度都在1044 u/L，說明ECLIA法有較高的敏感性。2.3 線性比較 將抗-HBs測定值10001400 u/L范圍內(nèi)的3份血清混合，重復(fù)測定3次，取其均值作為原倍血清的理論值，然后做6點(diǎn)倍比稀釋，求兩者相關(guān)性并進(jìn)行回歸分析。ECLIA回歸方程：Y=1.034X+0.765,R=0.9995，ELISA回歸方程：Y=1.081X+1.672,R=0.9964，ECLIA在21000 u/L范圍內(nèi)線性良好，ELISA在44800 u/L范圍內(nèi)線性良好，可見ECLIA檢測范圍比ELISA寬。2.4 靈敏度比較 用羅氏高值質(zhì)控血清86.

7、9 u/L，進(jìn)行一系列的倍比稀釋，結(jié)果ECLIA法可以測到2.4 u/L，而ELISA法在43.8 u/L以下S/CO都1.0，說明只能測到43.8 u/L，兩者靈敏度相差18.3倍。2.5 重現(xiàn)性試驗(yàn) 采取批內(nèi)和批間差異來確定，用上述兩法對低（71.4 u/L）、中（213.2 u/L）、高（532.7 u/L）混合血清，批內(nèi)試驗(yàn)平行測定20次，批間試驗(yàn)每天上、下午各測定一次，連續(xù)10天，結(jié)果ECLIA法批內(nèi)CV分別為4.1%、3.3%、2.6%，而ELISA法分別為6.4%、5.6%、4.3%。ECLIA法批間CV分別為5.9%、4.8%、4.6%，ELISA法批間CV為10.1%、7.3

8、%、6.8%。試驗(yàn)結(jié)果表明ECLIA法檢測抗-HBs陽性率明顯高于ELISA法。文獻(xiàn)2認(rèn)為抵抗HBV感染的最低抗-HBs有效水平為10 u/L，因此那些抗-HBs濃度在1046 u/L的幼兒其實(shí)不用立刻進(jìn)行乙肝疫苗加強(qiáng)接種。由此可見，用ECLIA法測定抗-HBs具有十分重要的意義?？傊?HBs定量測定對乙肝的治療和防治有重要的參考價值，尤其ECLIA法測定抗-HBs不但重現(xiàn)性好、自動化程度高、簡便快速，而且靈敏度極高3，4。因此，ECLIA法測定抗-HBs目前是一個比較理想的方法。參考文獻(xiàn)2 郭弘紅，董春明，王文慶，等.重組酵母乙肝疫苗源性，免疫持久性及保護(hù)效果.中國計劃免疫，1999，5（3）：158.3 崔清榮，葛君華，陳達(dá)乾，等.天臺縣19922000年兒童乙肝疫苗免疫后抗體檢測.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2002，1