黏附分子與細(xì)胞因子的檢測(cè)

1、黏附分子與細(xì)胞因子檢驗(yàn)黏附分子與細(xì)胞因子檢驗(yàn) .第一節(jié)第一節(jié) 黏附分子黏附分子 黏附分子（黏附分子（adhesion molecule,AM）是一類介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)是一類介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）間相互接）間相互接觸和結(jié)合的分子，多為跨膜糖蛋白。根觸和結(jié)合的分子，多為跨膜糖蛋白。根據(jù)黏附分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可將其分為整合據(jù)黏附分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可將其分為整合素家族、選擇素家族、黏蛋白樣家族、素家族、選擇素家族、黏蛋白樣家族、免疫球蛋白超家族、鈣黏蛋白家族五個(gè)免疫球蛋白超家族、鈣黏蛋白家族五個(gè)家族家族 黏附分子的共同特點(diǎn)黏附分子的共同特點(diǎn)

2、1大多為跨膜糖蛋白；黏附分子結(jié)構(gòu)多態(tài)大多為跨膜糖蛋白；黏附分子結(jié)構(gòu)多態(tài)性程度低，同一種屬所有個(gè)體同類細(xì)胞表性程度低，同一種屬所有個(gè)體同類細(xì)胞表達(dá)的同一黏附分子結(jié)構(gòu)基本相同。達(dá)的同一黏附分子結(jié)構(gòu)基本相同。 2一種細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)多種黏附分子；同一種細(xì)胞可同時(shí)表達(dá)多種黏附分子；同一種黏附分子在不同細(xì)胞表面可發(fā)揮不同一種黏附分子在不同細(xì)胞表面可發(fā)揮不同的生物學(xué)作用，不同的黏附分子則也可介的生物學(xué)作用，不同的黏附分子則也可介導(dǎo)相似的功能。導(dǎo)相似的功能。 3黏附分子以互為受體黏附分子以互為受體-配體的方式發(fā)揮配體的方式發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，且常需多種黏附分子生物學(xué)效應(yīng)，且常需多種黏附分子-配體對(duì)配體對(duì)協(xié)同作用才

3、能完成。協(xié)同作用才能完成。 4大多數(shù)情況下細(xì)胞間的黏附結(jié)合是短大多數(shù)情況下細(xì)胞間的黏附結(jié)合是短暫的，可逆的。如血循環(huán)中的白細(xì)胞是暫的，可逆的。如血循環(huán)中的白細(xì)胞是非黏附的，在跨血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移的早非黏附的，在跨血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移的早期是黏附的，晚期轉(zhuǎn)變?yōu)榉丘じ蕉撾x期是黏附的，晚期轉(zhuǎn)變?yōu)榉丘じ蕉撾x內(nèi)皮細(xì)胞，進(jìn)入淋巴結(jié)或炎癥區(qū)時(shí)又呈內(nèi)皮細(xì)胞，進(jìn)入淋巴結(jié)或炎癥區(qū)時(shí)又呈現(xiàn)出黏附性能?，F(xiàn)出黏附性能。 5黏附分子與相應(yīng)配體結(jié)合可啟動(dòng)信號(hào)黏附分子與相應(yīng)配體結(jié)合可啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，其介導(dǎo)的黏附作用和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)均轉(zhuǎn)導(dǎo)，其介導(dǎo)的黏附作用和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)均與黏附分子的密度及其與配體的親和力與黏附分子的密度及其與配體的親和力有

4、關(guān)，與其它黏附分子的協(xié)同作用有關(guān)。有關(guān)，與其它黏附分子的協(xié)同作用有關(guān)。通常靜止細(xì)胞黏附分子表達(dá)量少且親和通常靜止細(xì)胞黏附分子表達(dá)量少且親和力低，活化時(shí)表達(dá)量增多且親和力高力低，活化時(shí)表達(dá)量增多且親和力高整合素家族整合素家族 整合素家族（整合素家族（integrin family）因最初）因最初發(fā)現(xiàn)此類黏附分子主要介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞發(fā)現(xiàn)此類黏附分子主要介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)黏附，使細(xì)胞得以附著以形成整外基質(zhì)黏附，使細(xì)胞得以附著以形成整體而得名。隨后證實(shí)它們還介導(dǎo)細(xì)胞間體而得名。隨后證實(shí)它們還介導(dǎo)細(xì)胞間相互黏附，參與細(xì)胞活化、增殖、分化、相互黏附，參與細(xì)胞活化、增殖、分化、遷移、吞噬、炎癥等反應(yīng)過程遷移

5、、吞噬、炎癥等反應(yīng)過程 1組稱為組稱為VLA組，主要參與細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)組，主要參與細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的結(jié)合。的結(jié)合。 2組稱為白細(xì)胞黏附受體組，參與白細(xì)胞與內(nèi)組稱為白細(xì)胞黏附受體組，參與白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞間或與靶細(xì)胞的黏附作用。皮細(xì)胞、免疫細(xì)胞間或與靶細(xì)胞的黏附作用。 3組稱血小板糖蛋白組，在炎癥或血管損傷部組稱血小板糖蛋白組，在炎癥或血管損傷部位與配體結(jié)合可介導(dǎo)血小板凝聚，也可參與白位與配體結(jié)合可介導(dǎo)血小板凝聚，也可參與白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的黏附作用。細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞間的黏附作用。 7組與效應(yīng)和記憶淋巴細(xì)胞向腸道集合淋巴結(jié)、組與效應(yīng)和記憶淋巴細(xì)胞向腸道集合淋巴結(jié)、黏膜固有層、腸道上皮遷移

6、有關(guān)黏膜固有層、腸道上皮遷移有關(guān) 整合素家族部分成員及其配體整合素家族部分成員及其配體成 員分 布配 體11M,Ta,神經(jīng)細(xì)胞,平滑肌CO,LN21L,M,Pt,Fb,EnCO,LN31M,T,BFN,LN,CO,EP41L,Thy,M,EosFN,VCAM-1,MadCAM-151Thy,T,M,Pt,BaFN61Thy.T,M,Pt,EpLN,FN71黑色素瘤,肌細(xì)胞LNV1Pt,En.MegFNL2L,MyICAM-1、2、3M2NK,MyiC3b,Fg,ICAM-1,FX2My,NK,Ta,BaiC3b,ICAM-1,Fg,D2Leu,MacICAM-3b3Pt,En,M,Mac,PM

7、NFg,FN,vWF,TSP,VNV3Pt,En,MegVN,Fg,vWF,TSP,FN,LN,Op,CD3147L,NK,EosMadCAM,VCAM-1,FNE7IELE鈣黏蛋白分組及其亞單位VLA(1)組VLA-1(CD49aCD29)VLA-2(CD49bCD29)VLA-3(CD49cCD29)VLA-4(CD49dCD29)VLA-5(CD49eCD29)VLA-6(CD49fCD29)CD49gCD29CD51CD29白細(xì)胞黏附受體(2)組LFA-1(CD11a/CD18)Mac-1;CR3(CD11b/CD18)p150,95;CR4(CD11c/CD18)CD11d/CD18

8、血小板糖蛋白(3)組HML-1(CD103/?)Gpba(CD41/CD61)VNR-3(CD51/CD61)7組LPAM-1(CD49d/?)選擇素選擇素 血小板選擇素（血小板選擇素（platelet-selectin, P選擇素）選擇素） 內(nèi)皮細(xì)胞選擇素（內(nèi)皮細(xì)胞選擇素（endothlium-selectin, E選擇素）選擇素） 白細(xì)胞選擇素（白細(xì)胞選擇素（leukocyte-selectin, L選擇素）。選擇素）。特性L選擇素(CD62L)P選擇素(CD62P)E選擇素(CD62E)分布與表達(dá)白細(xì)胞,活化后脫落或下調(diào)巨核細(xì)胞、活化內(nèi)皮細(xì)胞和血小板活化內(nèi)皮細(xì)胞配體CD15s(SLeX)

9、、GlyCAM-1、MAdCAM、PNAd、CD34、PSGL-1CD15s(SLeX)、CD15、PSGL-1(CD162)、CD15s(SLeX) 、 ESL-1 、CLA、PSGL-1、E7配體表達(dá)細(xì)胞活化內(nèi)皮細(xì)胞、HEVPMN、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞 PMN、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞主要功能介導(dǎo)白細(xì)胞移向炎癥區(qū),淋巴細(xì)胞歸巢和再循環(huán)介導(dǎo)白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞、血小板黏附介導(dǎo)白細(xì)胞移向炎癥區(qū)、腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移黏蛋白樣家族黏蛋白樣家族 mucin-like family 富含絲氨酸和蘇氨酸糖蛋白，包括富含絲氨酸和蘇氨酸糖蛋白，包括 CD34； 糖基化依賴性細(xì)胞黏附分子糖基化依賴性細(xì)胞黏附分子-1(GlyCAM

10、-1)； P-選擇素糖蛋白配體選擇素糖蛋白配體-1(PSGL-1)； 黏膜地址素細(xì)胞黏附分子黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MadCAM)； 足糖萼蛋白（足糖萼蛋白（podocalyxin）五個(gè)成員。）五個(gè)成員。 CD34是是L-選擇素的配體，主要分布于造選擇素的配體，主要分布于造血干細(xì)胞（血干細(xì)胞（HSC）、定向祖細(xì)胞、骨髓）、定向祖細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞上，參與早期基質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞上，參與早期造血的調(diào)控和淋巴細(xì)胞歸巢。此外、部造血的調(diào)控和淋巴細(xì)胞歸巢。此外、部分急性非淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞、急性分急性非淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞、急性B淋淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞及血管來源的腫瘤細(xì)巴細(xì)胞白血病細(xì)胞及血

11、管來源的腫瘤細(xì)胞也表達(dá)胞也表達(dá)D34。 GlyCAM是是L-選擇素的配體，分布于外選擇素的配體，分布于外周 和 腸 系 膜 淋 巴 結(jié) 高 內(nèi) 皮 小 靜 脈周 和 腸 系 膜 淋 巴 結(jié) 高 內(nèi) 皮 小 靜 脈（HEV）、分泌乳汁的乳腺、肺臟的某）、分泌乳汁的乳腺、肺臟的某些細(xì)胞表面，參與淋巴細(xì)胞歸巢。些細(xì)胞表面，參與淋巴細(xì)胞歸巢。 PSGL-1是選擇素是選擇素E、P、L的配體，的配體，組成型表達(dá)于中性粒細(xì)胞、嗜酸粒組成型表達(dá)于中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞表面，細(xì)胞、單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞表面，主要參與白細(xì)胞向炎癥部位遷移。主要參與白細(xì)胞向炎癥部位遷移。 MadCAM表達(dá)于腸道集合

12、淋巴結(jié)、表達(dá)于腸道集合淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)和黏膜固有層的腸系膜淋巴結(jié)和黏膜固有層的HEV，是是L選擇素的配體，參與淋巴細(xì)胞歸選擇素的配體，參與淋巴細(xì)胞歸巢。巢。 足糖萼蛋白分布于外周淋巴結(jié)足糖萼蛋白分布于外周淋巴結(jié)HEV，是是L選擇素的配體。選擇素的配體。Ig超家族超家族IgSF分子別名配 體分 布CD2LFA-2CD58外周成熟T細(xì)胞、不成熟T細(xì)胞、NK細(xì)胞CD58LFA-3CD2白細(xì)胞、紅細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞LFA-1Mac-1CD102ICAM-2LFA-1,Mac-1大多數(shù)造血細(xì)胞、血小板、內(nèi)皮細(xì)胞, 組成型表達(dá)CD50ICAM-3LFA-1白細(xì)胞, 組成型表達(dá)CD10

13、6VCAM-141, 47內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、DC、巨噬細(xì)胞CD31PECAM-1PECAM-1白細(xì)胞、血小板、內(nèi)皮細(xì)胞MadCAM47,L 選擇素集合淋巴結(jié)和腸系膜淋巴結(jié)的HEV黏附分子CD54ICAM-1分布廣泛,主要被誘導(dǎo)表達(dá),造血細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、角化細(xì)胞CD64FcR IgG單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、DC、CD34+髓樣祖細(xì)胞、活化的中性粒細(xì)胞CD32FcR IgG白細(xì)胞、血小板、巨噬細(xì)胞、DC、內(nèi)皮細(xì)胞(亞群)、T細(xì)胞(亞群)、朗格罕斯細(xì)胞CD16FcR IgG巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核細(xì)胞(亞群)、T細(xì)胞(亞群)、活化的單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞CD8

14、9FcRIgA吞噬細(xì)胞、T細(xì)胞(亞群)、B細(xì)胞(亞群)FcRIgE肥大細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞Fc受體(鏈)鈣黏蛋白（鈣黏蛋白（cadherin） 大多數(shù)分子胞外區(qū)含有大多數(shù)分子胞外區(qū)含有5個(gè)約有個(gè)約有110個(gè)氨個(gè)氨基酸殘基組成的重復(fù)結(jié)構(gòu)域，其中基酸殘基組成的重復(fù)結(jié)構(gòu)域，其中13重復(fù)結(jié)構(gòu)域有重復(fù)結(jié)構(gòu)域有Ca2+結(jié)合位點(diǎn)，結(jié)合位點(diǎn)，N端約端約110個(gè)氨基酸殘基是構(gòu)成鈣黏蛋白分子結(jié)合個(gè)氨基酸殘基是構(gòu)成鈣黏蛋白分子結(jié)合配體的部位，主要介導(dǎo)配體的部位，主要介導(dǎo)Ca2+依賴的相同依賴的相同分子間的相互黏附，稱同型黏附作用或分子間的相互黏附，稱同型黏附作用或同型識(shí)別。同型識(shí)別。 免疫學(xué)關(guān)系密切的主要有免疫學(xué)關(guān)系密

15、切的主要有E鈣黏蛋白、鈣黏蛋白、N鈣黏蛋白和鈣黏蛋白和P鈣黏蛋白三種，鈣黏蛋白三種，E、N、P分分別表示上皮、神經(jīng)和胎盤。鈣黏蛋白在別表示上皮、神經(jīng)和胎盤。鈣黏蛋白在調(diào)節(jié)胚胎形態(tài)發(fā)育和實(shí)體組織形成與維調(diào)節(jié)胚胎形態(tài)發(fā)育和實(shí)體組織形成與維持中具有重要作用。持中具有重要作用。E鈣黏蛋白還與上皮鈣黏蛋白還與上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞（內(nèi)淋巴細(xì)胞（intraepithelial lymphocyte,IEL）上的整合素）上的整合素E7黏黏附，參與附，參與T細(xì)胞歸巢。此外，腫瘤細(xì)胞鈣細(xì)胞歸巢。此外，腫瘤細(xì)胞鈣黏蛋白表達(dá)降低與腫瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移黏蛋白表達(dá)降低與腫瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移有有 黏附分子醫(yī)學(xué)意義黏附分子醫(yī)學(xué)意義一一

16、 黏附分子相關(guān)免疫缺陷病黏附分子相關(guān)免疫缺陷病 白細(xì)胞黏附缺陷癥（白細(xì)胞黏附缺陷癥（leukocyte adhesion deficiency,LAD） 一種常染色體隱性遺傳病，其臨床特一種常染色體隱性遺傳病，其臨床特征是反復(fù)發(fā)生難以治愈的感染。征是反復(fù)發(fā)生難以治愈的感染。LAD主要分為兩型：主要分為兩型： LAD-1型；型； LAD-2型。型。 LAD-1型患者型患者2（CD18）亞單位基）亞單位基因有突變，致使因有突變，致使2組整合素的組整合素的4個(gè)成個(gè)成員都表達(dá)缺陷，白細(xì)胞黏附、趨化員都表達(dá)缺陷，白細(xì)胞黏附、趨化作用和細(xì)胞毒功能（作用和細(xì)胞毒功能（CTL、NK和和ADCC）受損，患者可在

17、）受損，患者可在1歲內(nèi)死亡。歲內(nèi)死亡。 LAD-2型患者由于型患者由于1-3巖藻糖轉(zhuǎn)移酶巖藻糖轉(zhuǎn)移酶缺 陷 使 白 細(xì) 胞 不 表 達(dá)缺 陷 使 白 細(xì) 胞 不 表 達(dá) S l ex（CD15s），故不能與活化的血管），故不能與活化的血管內(nèi)皮細(xì)胞表面內(nèi)皮細(xì)胞表面E-選擇素結(jié)合，使白選擇素結(jié)合，使白細(xì)胞炎癥滲出作用受損。細(xì)胞炎癥滲出作用受損。Glantzman病病 該病又稱血小板功能不全癥，為該病又稱血小板功能不全癥，為常染色體隱性遺傳病。因血小板常染色體隱性遺傳病。因血小板表達(dá)表達(dá)gpb/a缺陷，使患者血缺陷，使患者血小板不能活化、凝聚，故出血時(shí)小板不能活化、凝聚，故出血時(shí)間延長，易引起出血。

18、間延長，易引起出血。二二 黏附分子與感染黏附分子與感染 病原利用黏附分子作為受體引起感染：病原利用黏附分子作為受體引起感染： CD4和和CD209是是HIV感染感染T細(xì)胞、樹細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和單核突狀細(xì)胞和單核-吞噬細(xì)胞的受體；吞噬細(xì)胞的受體； 鼻病毒以鼻病毒以ICAM-1作為感染受體；作為感染受體； 21整合素的整合素的I區(qū)是?？刹《臼荏w；區(qū)是?？刹《臼荏w； CD81是丙型肝炎病毒受體；是丙型肝炎病毒受體； 假結(jié)核耶爾森菌可結(jié)合假結(jié)核耶爾森菌可結(jié)合41；腸；腸道致病性大腸桿菌能結(jié)合道致病性大腸桿菌能結(jié)合41和和47； 惡性瘧原蟲感染紅細(xì)胞可結(jié)合惡性瘧原蟲感染紅細(xì)胞可結(jié)合CD34、ICAM-1

19、和血小板反應(yīng)蛋和血小板反應(yīng)蛋白，感染紅細(xì)胞與腦血管活化的白，感染紅細(xì)胞與腦血管活化的內(nèi)皮細(xì)胞表面內(nèi)皮細(xì)胞表面ICAM-1結(jié)合，認(rèn)結(jié)合，認(rèn)為是常見致死型大腦瘧疾病因。為是常見致死型大腦瘧疾病因。三、支氣管哮喘三、支氣管哮喘 支氣管黏膜上皮發(fā)生過敏性炎癥支氣管黏膜上皮發(fā)生過敏性炎癥時(shí)，時(shí)，ICAM-1水平增高，可介導(dǎo)水平增高，可介導(dǎo)嗜酸粒細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附、嗜酸粒細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞黏附、浸潤，釋放炎癥介質(zhì)引起臨床病浸潤，釋放炎癥介質(zhì)引起臨床病癥；癥； 用抗用抗ICAM-1單克隆抗體可緩解單克隆抗體可緩解該病的臨床癥狀。該病的臨床癥狀。四、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎四、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎 炎癥部位黏附分子如炎癥部位

20、黏附分子如LFA-1、VLA、CD44等表達(dá)明顯增高，并產(chǎn)生大量等表達(dá)明顯增高，并產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，可使血管內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞因子，可使血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM、CD31等表達(dá)增強(qiáng)，從而使白細(xì)胞與等表達(dá)增強(qiáng)，從而使白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞相互作用增強(qiáng)，促進(jìn)白細(xì)內(nèi)皮細(xì)胞相互作用增強(qiáng)，促進(jìn)白細(xì)胞浸潤；胞浸潤； 抗抗ICAM-1單克隆抗體治療，約單克隆抗體治療，約50患者癥狀有改善?；颊甙Y狀有改善。五、黏附分子與移植排斥五、黏附分子與移植排斥整合素、選擇素、黏蛋白樣家族和整合素、選擇素、黏蛋白樣家族和IgSF成員均參與移植排斥反應(yīng)過程：成員均參與移植排斥反應(yīng)過程：介導(dǎo)白細(xì)胞向介導(dǎo)白細(xì)胞向 移植部位浸潤；移植部位浸潤；

21、 提供提供T細(xì)胞活化的共刺激信號(hào)；細(xì)胞活化的共刺激信號(hào)；參與效應(yīng)細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞等。參與效應(yīng)細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞等。. 聯(lián)合應(yīng)用抗聯(lián)合應(yīng)用抗LFA-1單克隆抗體和免疫單克隆抗體和免疫抑制劑，可延長骨髓移植患者的存抑制劑，可延長骨髓移植患者的存活期；活期； 抗抗ICAM-1單克隆抗體和環(huán)孢霉素單克隆抗體和環(huán)孢霉素A聯(lián)合使用，可延長猴同種異體腎移聯(lián)合使用，可延長猴同種異體腎移植的存活期。植的存活期。六、黏附分子與腫瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移六、黏附分子與腫瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移 同型細(xì)胞間黏附作用減弱或與其同型細(xì)胞間黏附作用減弱或與其它類型細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)相互作它類型細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)相互作用的改變，均有助于腫瘤細(xì)胞浸用的改變，均有助

22、于腫瘤細(xì)胞浸潤和轉(zhuǎn)移。潤和轉(zhuǎn)移。 阻斷鈣黏蛋白功能抗體能增加腫阻斷鈣黏蛋白功能抗體能增加腫瘤轉(zhuǎn)移，而增加鈣黏蛋白表達(dá)則瘤轉(zhuǎn)移，而增加鈣黏蛋白表達(dá)則抑制腫瘤轉(zhuǎn)移；抑制腫瘤轉(zhuǎn)移； 乳腺癌發(fā)生早期階段即喪失表達(dá)乳腺癌發(fā)生早期階段即喪失表達(dá)E-鈣黏蛋白；鈣黏蛋白； 神經(jīng)膠質(zhì)瘤神經(jīng)細(xì)胞黏附分子神經(jīng)膠質(zhì)瘤神經(jīng)細(xì)胞黏附分子（NCAM）丟失，均與腫瘤高效）丟失，均與腫瘤高效率轉(zhuǎn)移相關(guān)。率轉(zhuǎn)移相關(guān)。. 通常癌細(xì)胞參與組織識(shí)別整合素通常癌細(xì)胞參與組織識(shí)別整合素表達(dá)減少，而遷移所必需整合素表達(dá)減少，而遷移所必需整合素表達(dá)上調(diào)表達(dá)上調(diào) 黑色素瘤細(xì)胞和癌引發(fā)的血管形成的內(nèi)皮黑色素瘤細(xì)胞和癌引發(fā)的血管形成的內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞V

23、3表達(dá)增強(qiáng)，表達(dá)增強(qiáng)，V3有廣泛的配有廣泛的配體，表達(dá)體，表達(dá)V3的癌細(xì)胞可向任何部位遷的癌細(xì)胞可向任何部位遷移；移； 識(shí)別層連蛋白和膠原的識(shí)別層連蛋白和膠原的21在結(jié)腸癌和在結(jié)腸癌和乳腺癌表達(dá)減少；乳腺癌表達(dá)減少； CD44在正常細(xì)胞廣泛表達(dá)，但具有遷移在正常細(xì)胞廣泛表達(dá)，但具有遷移性的癌細(xì)胞，如結(jié)腸癌、卵巢癌和前列性的癌細(xì)胞，如結(jié)腸癌、卵巢癌和前列腺癌表達(dá)降低。腺癌表達(dá)降低。. 黏附分子參與黏附分子參與CTL、NK細(xì)胞、巨細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞的殺腫瘤細(xì)胞噬細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞的殺腫瘤細(xì)胞作用作用 殺傷細(xì)胞與瘤細(xì)胞接觸主要由殺傷細(xì)胞與瘤細(xì)胞接觸主要由LFA-1/ICAM-1的相互作用介導(dǎo)；的相

24、互作用介導(dǎo)； CTL殺傷腫瘤細(xì)胞需要?dú)[瘤細(xì)胞需要CD2/LFA-3、CD8/MHC類分子等之間相互作用；類分子等之間相互作用； 腫瘤患者體液中可溶性腫瘤患者體液中可溶性ICAM-1水平?？伤匠？缮撸赡芤种粕?，可能抑制NK細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞對(duì)腫細(xì)胞等效應(yīng)細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。瘤細(xì)胞的殺傷作用。第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)胞因子細(xì)胞因子 細(xì)胞因子細(xì)胞因子 免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞合成并免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞合成并分泌的一類具有多種生物功能的活分泌的一類具有多種生物功能的活性分子。生物功能有：性分子。生物功能有： 介導(dǎo)細(xì)胞間的信息交換與相互調(diào)節(jié)；介導(dǎo)細(xì)胞間的信息交換與相互調(diào)節(jié)； 參與免疫應(yīng)答和炎癥

25、反應(yīng)過程；參與免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)過程； 刺激造血干細(xì)胞的再生和分化；刺激造血干細(xì)胞的再生和分化； 參與組織修復(fù)與傷口愈合等。參與組織修復(fù)與傷口愈合等。 細(xì)胞因子分類細(xì)胞因子分類1白細(xì)胞介素（白細(xì)胞介素（interleukin,IL）;2集落刺激因子（集落刺激因子（colony stimulating factor ，CSF）;3干擾素（干擾素（interferon，IFN）;4腫瘤壞死因子腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF).第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)胞因子的共同特點(diǎn)細(xì)胞因子的共同特點(diǎn) 一、理化特性一、理化特性 絕 大 多 數(shù) 細(xì) 胞 因 子 為 低 分 子 量絕 大 多

26、數(shù) 細(xì) 胞 因 子 為 低 分 子 量（1560KDa）的蛋白、糖蛋白或）的蛋白、糖蛋白或多肽，白細(xì)胞介素多肽，白細(xì)胞介素-8的分子量僅的分子量僅8kDa；成熟分泌型細(xì)胞因子所含氨；成熟分泌型細(xì)胞因子所含氨基酸多在基酸多在200個(gè)以內(nèi)；多數(shù)細(xì)胞因子個(gè)以內(nèi)；多數(shù)細(xì)胞因子以單體形式存在，有些細(xì)胞因子如以單體形式存在，有些細(xì)胞因子如IL-10、IL-12、IL-15等以二聚體形等以二聚體形式存在，式存在，TNF可形成三聚體形式?？尚纬扇垠w形式。二、分泌特點(diǎn)二、分泌特點(diǎn) 細(xì)胞因子來源細(xì)胞因子來源 一種細(xì)胞因子可來源于多種細(xì)胞，如一種細(xì)胞因子可來源于多種細(xì)胞，如IL-1，單核單核/巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、

27、淋巴細(xì)胞、成巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等均可合成分泌；纖維細(xì)胞等均可合成分泌； 一種細(xì)胞也可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，如單核一種細(xì)胞也可產(chǎn)生多種細(xì)胞因子，如單核/巨噬細(xì)胞可分泌巨噬細(xì)胞可分泌IL-1、IL-6、TNF-和和IL-18等。等。 分泌的短暫性和自限性分泌的短暫性和自限性 由于細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄的激活過程是十分短由于細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄的激活過程是十分短暫的，編碼細(xì)胞因子的暫的，編碼細(xì)胞因子的mRNA也不穩(wěn)定，也不穩(wěn)定，即刻降解。細(xì)胞因子的合成也是十分短即刻降解。細(xì)胞因子的合成也是十分短暫的，并表現(xiàn)為自限性。暫的，并表現(xiàn)為自限性。 自分泌和旁分泌的效應(yīng)方式自分泌和旁分泌的效應(yīng)方式 主要是以自

28、分泌（主要是以自分泌（autocrine）和旁分泌）和旁分泌（paracrine）的形式發(fā)揮效應(yīng)。如某種）的形式發(fā)揮效應(yīng)。如某種細(xì)胞因子只作用于分泌細(xì)胞本身，稱為細(xì)胞因子只作用于分泌細(xì)胞本身，稱為自分泌效應(yīng)；自分泌效應(yīng)； 若某種細(xì)胞因子作用于相鄰的細(xì)胞，稱為若某種細(xì)胞因子作用于相鄰的細(xì)胞，稱為旁分泌效應(yīng)；旁分泌效應(yīng)； 少數(shù)細(xì)胞因子，如少數(shù)細(xì)胞因子，如IL-1、IL-6、TNF- 也也可通過循環(huán)系統(tǒng)作用于遠(yuǎn)距離的細(xì)胞，可通過循環(huán)系統(tǒng)作用于遠(yuǎn)距離的細(xì)胞，稱為內(nèi)分泌效應(yīng)（稱為內(nèi)分泌效應(yīng)（endocrine）。）。三、生物學(xué)作用特點(diǎn)三、生物學(xué)作用特點(diǎn) 通過與受體結(jié)合發(fā)揮作用通過與受體結(jié)合發(fā)揮作用 細(xì)胞

29、因子受體與相應(yīng)的細(xì)胞因子具有較高細(xì)胞因子受體與相應(yīng)的細(xì)胞因子具有較高的親和力，其解離常數(shù)為：的親和力，其解離常數(shù)為：10-1010-12M，為抗原抗體親和力的為抗原抗體親和力的1001000倍。因此，倍。因此，細(xì)胞因子在很低的濃度下（細(xì)胞因子在很低的濃度下（Pmol/L或或10-12mol/L），就能對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生顯著的生物），就能對(duì)靶細(xì)胞產(chǎn)生顯著的生物學(xué)作用，即細(xì)胞因子具有高效性。若靶細(xì)學(xué)作用，即細(xì)胞因子具有高效性。若靶細(xì)胞本身細(xì)胞因子受體的表達(dá)水平改變或受胞本身細(xì)胞因子受體的表達(dá)水平改變或受體被某些分子封閉，均會(huì)影響細(xì)胞因子發(fā)體被某些分子封閉，均會(huì)影響細(xì)胞因子發(fā)揮作用。揮作用。 （二）生物學(xué)

30、效應(yīng)復(fù)雜性（二）生物學(xué)效應(yīng)復(fù)雜性多效性（多效性（pleiotropy）：指一種細(xì)胞因子可以）：指一種細(xì)胞因子可以對(duì)不同的細(xì)胞發(fā)揮不同的作用；對(duì)不同的細(xì)胞發(fā)揮不同的作用； 重疊性（重疊性（redundancy）：指兩種以上的細(xì)）：指兩種以上的細(xì)胞因子具有相同的或類似的生物學(xué)作用；胞因子具有相同的或類似的生物學(xué)作用； 協(xié)同性（協(xié)同性（synergy）：指兩種細(xì)胞因子同時(shí)）：指兩種細(xì)胞因子同時(shí)作用于一個(gè)靶細(xì)胞的效應(yīng)大于它們單獨(dú)作用作用于一個(gè)靶細(xì)胞的效應(yīng)大于它們單獨(dú)作用的效應(yīng)之和；的效應(yīng)之和； 拮抗性（拮抗性（antagonism）：是指一種細(xì)胞因子）：是指一種細(xì)胞因子可抑制另外一種細(xì)胞因子的某種生物

31、學(xué)作用；可抑制另外一種細(xì)胞因子的某種生物學(xué)作用；四、細(xì)胞因子的網(wǎng)絡(luò)性四、細(xì)胞因子的網(wǎng)絡(luò)性 一種細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子，同一種因一種細(xì)胞可分泌多種細(xì)胞因子，同一種因子對(duì)不同的靶細(xì)胞可能產(chǎn)生不同的作用；子對(duì)不同的靶細(xì)胞可能產(chǎn)生不同的作用；一種靶細(xì)胞也可能通過受體接受多種細(xì)胞一種靶細(xì)胞也可能通過受體接受多種細(xì)胞因子作用，對(duì)不同來源細(xì)胞因子信息進(jìn)行因子作用，對(duì)不同來源細(xì)胞因子信息進(jìn)行整合后作出反應(yīng)；整合后作出反應(yīng)； 細(xì)胞所產(chǎn)生細(xì)胞因子也將影響到其他細(xì)胞。細(xì)胞所產(chǎn)生細(xì)胞因子也將影響到其他細(xì)胞。例如巨噬細(xì)胞可以通過其所合成和分泌的例如巨噬細(xì)胞可以通過其所合成和分泌的細(xì)胞因子對(duì)多種細(xì)胞進(jìn)行調(diào)節(jié)，同時(shí)該細(xì)細(xì)胞

32、因子對(duì)多種細(xì)胞進(jìn)行調(diào)節(jié)，同時(shí)該細(xì)胞本身也接受多種來源的細(xì)胞因子的影響。胞本身也接受多種來源的細(xì)胞因子的影響。 免疫應(yīng)答過程中，參與免疫應(yīng)答細(xì)胞通過免疫應(yīng)答過程中，參與免疫應(yīng)答細(xì)胞通過細(xì)胞因子相互刺激、彼此約束，參與并細(xì)胞因子相互刺激、彼此約束，參與并調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，維持免疫系統(tǒng)穩(wěn)定平衡；調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答，維持免疫系統(tǒng)穩(wěn)定平衡； 細(xì)胞因子也參與神經(jīng)細(xì)胞因子也參與神經(jīng)-內(nèi)分泌內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)間免疫系統(tǒng)間的相互作用，它與激素、神經(jīng)肽、神經(jīng)的相互作用，它與激素、神經(jīng)肽、神經(jīng)遞質(zhì)共同組成細(xì)胞間信號(hào)分子系統(tǒng)。遞質(zhì)共同組成細(xì)胞間信號(hào)分子系統(tǒng)。分子量（kDa）17.5（IL-1）17.3（IL-1）IL-2活化的T

33、細(xì)胞、NK細(xì)胞1317.5促進(jìn)活化T細(xì)胞的增殖、分化和細(xì)胞因子產(chǎn)生；促進(jìn)CTL、NK和LAK細(xì)胞的增殖和殺傷活性；促進(jìn)B細(xì)胞的增殖、分化和抗體分泌；活化巨噬細(xì)胞，促進(jìn)其殺傷活性IL-3活化的T細(xì)胞、肥大細(xì)胞15.1促進(jìn)多能髓樣祖細(xì)胞向紅樣、巨核、單核、中性、嗜酸、樹突狀細(xì)胞分化， 阻止凋亡；促進(jìn)活化B細(xì)胞增殖；刺激PMN、Mo、Eo和嗜堿性粒細(xì)的活化，促進(jìn)Eo的ADCCIL-4活化的Th2細(xì)胞、肥大細(xì)胞、嗜鹼性粒細(xì)胞1819促進(jìn)活化B細(xì)胞的增殖、分化、Ig產(chǎn)生和類別轉(zhuǎn)換為IgG4和IgE；抑制NK和CTL的殺傷活性；促進(jìn)肥大細(xì)胞增殖；增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的功能；協(xié)同CSF刺激造血細(xì)胞種類主要產(chǎn)生細(xì)胞主

34、要生物學(xué)活性IL-1單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)胸腺細(xì)胞、T細(xì)胞的活化、增殖和分化；增強(qiáng)CTL和NK的殺傷活性；協(xié)同IL-4刺激B細(xì)胞增殖、分化和Ig的產(chǎn)生；刺激干細(xì)胞產(chǎn)生SCF并協(xié)同CSF促進(jìn)造血功能；活化內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)粘附分子表達(dá)和趨化性細(xì)胞因子釋放IL-5活化的Th2細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞3560誘導(dǎo)小鼠B細(xì)胞分化為抗體分泌細(xì)胞、IgA合成；協(xié)同IL-2促進(jìn)CTL分化；促進(jìn)人Eo激活、增殖和分化，趨化Eo；刺激嗜堿性粒細(xì)胞活化IL-6單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、T細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞1928刺激T細(xì)胞、B細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞和干細(xì)胞增殖；促進(jìn)B細(xì)胞產(chǎn)生Ig；促進(jìn)CTL、NK、干細(xì)胞

35、、巨核細(xì)胞分化IL-7骨髓和胸腺的基質(zhì)細(xì)胞 2028刺激B細(xì)胞前體、前B細(xì)胞的增殖；促進(jìn)前T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和T細(xì)胞增殖；誘導(dǎo)CTL和LAK的活性IL-8單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞810趨化中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和T細(xì)胞；活化中性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞IL-9活化T細(xì)胞1425促進(jìn)紅樣、髓樣細(xì)胞的生長和分化；促進(jìn)T、B細(xì)胞活化；促進(jìn)肥大細(xì)胞活化和分化(小鼠)IL-10活化的Th2細(xì)胞、單核細(xì)胞17抑制Th1細(xì)胞分泌細(xì)胞因子；抑制單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等分泌促炎因子；抑制單核細(xì)胞MHC類分子和協(xié)同刺激分子的表達(dá)和NO產(chǎn)生；刺激B細(xì)胞增殖和Ig分泌IL-11骨髓基質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞19促進(jìn)B細(xì)

36、胞分泌抗體；促進(jìn)漿細(xì)胞瘤生長；協(xié)同IL-3、IL-4等刺激骨髓干細(xì)胞、祖細(xì)胞和巨核細(xì)胞的分化和增殖；脂肪形成抑制因子，刺激肝細(xì)胞分泌急性期蛋白分子量（kDa）IL-12單核細(xì)胞、B細(xì)胞57.2促進(jìn)NK、LAK的殺傷活性和黏附分子表達(dá)；促進(jìn)活化T細(xì)胞、NK細(xì)胞和IFN-g 的分泌；促進(jìn)Thl 的分化；抑制IgE的產(chǎn)生；協(xié)同其它因子促進(jìn)造血干細(xì)胞增殖IL-13活化的T細(xì)胞、B細(xì)胞、肥大細(xì)胞17刺激B細(xì)胞增殖和分化，促進(jìn)IgE轉(zhuǎn)換；抑制單核巨噬細(xì)胞促炎因子產(chǎn)生IL-14活化的T細(xì)胞5060刺激活化B細(xì)胞增殖；抑制B細(xì)胞Ig的分泌IL-15單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、胎盤組織、肌肉組織1418刺激活化T細(xì)胞，

37、趨化T細(xì)胞，誘導(dǎo)CTL產(chǎn)生和促進(jìn)其殺傷活性；誘導(dǎo)NK細(xì)胞的早期分化，刺激NK增殖、殺傷和細(xì)胞因子產(chǎn)生；刺激活化B細(xì)胞增殖和Ig分泌IL-16活化的Th2細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞1417趨化和活化CD4+T細(xì)胞、單核細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞；誘導(dǎo)嗜酸性粒細(xì)胞黏附IL-17活化的CD4+T細(xì)胞1520激活NF-KB；誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞IL-6、IL-8、CM-CSF和PGE2的分泌和ICAM-1表達(dá)；協(xié)同刺激活化的T細(xì)胞增殖IL-18單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、角朊細(xì)胞18.3活化NK細(xì)胞，刺激其分泌IFN-g；促進(jìn)活化T細(xì)胞IL-2、IFN-g和GM-CSF的產(chǎn)生，抑制其IL-10產(chǎn)生種類主要產(chǎn)生細(xì)胞主要生物學(xué)活性.細(xì)

38、胞因子的受體 從細(xì)胞因子結(jié)合其受體開始，到某些基因轉(zhuǎn)錄的啟動(dòng)，要經(jīng)歷復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)分子間的相互作用，這樣的作用過程稱為細(xì)胞因子的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞因子受體都是跨膜蛋白，由胞膜外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū)組成. 細(xì)胞因子受體的分類 免疫球蛋白基因超家族 受體的細(xì)胞膜外區(qū)有一個(gè)或多個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域。 I型細(xì)胞因子受體家族 其胞膜外區(qū)有兩個(gè)不連續(xù)的半胱氨酸殘基和WSXWS基序。 II型細(xì)胞因子受體家族 其胞膜外區(qū)有四個(gè)不連續(xù)的半胱氨酸殘基。 III型細(xì)胞因子受體家族 有富含半胱氨酸的基序。 趨化因子受體家族 G蛋白偶聯(lián)受體，由7個(gè)疏水性的跨膜區(qū)組成，和相應(yīng)的配體結(jié)合后，經(jīng)偶聯(lián)GTP結(jié)合蛋白而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng).

39、多亞單位受體和細(xì)胞因子受體共用亞單位 I型細(xì)胞因子受體家族的多數(shù)成員屬多亞單位受體，其中一種亞單位是細(xì)胞因子結(jié)合亞單位，另一為細(xì)胞信號(hào)傳遞亞單位。多種I型細(xì)胞因子受體有共用的相同的信號(hào)傳遞亞單位。 可溶性細(xì)胞因子受體細(xì)胞因子的生物學(xué)作用一、參與非特異性免疫應(yīng)答 參與非特異性免疫應(yīng)答的細(xì)胞因子主要是由單核吞噬細(xì)胞分泌的，如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-等，它們可表現(xiàn)為抗病毒和抗細(xì)菌感染的作用。 IFN-、IL-15和IL-12是三種重要的抗病毒細(xì)胞因子，它們可抑制細(xì)胞合成DNA和RNA病毒復(fù)制所需的酶類，從而干擾病毒的復(fù)制；促進(jìn)NK細(xì)胞增殖，并增強(qiáng)其對(duì)病毒感染細(xì)胞的殺傷能力。 IL-1、

40、IL-6、TNF-和趨化因子是啟動(dòng)抗細(xì)菌炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵因子。它們促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)粘附分子，促進(jìn)炎癥細(xì)胞在感染部位浸潤和釋放炎癥介質(zhì)，從而抑制細(xì)菌增殖并清除它們。二、介導(dǎo)和調(diào)節(jié)特異性免疫應(yīng)答 介導(dǎo)和調(diào)節(jié)特異性免疫應(yīng)答的細(xì)胞因子主要由活化的T細(xì)胞分泌。 在免疫應(yīng)答的識(shí)別階段,IFN-通過刺激抗原提呈細(xì)胞表達(dá)MHC-II類分子,促進(jìn)抗原提呈作用和CD4T細(xì)胞的活化。相反IL-10則可減少M(fèi)HC-II類分子和B7分子的表達(dá),抑制抗原提呈和CD4+T細(xì)胞的活化。 在免疫應(yīng)答的反應(yīng)階段,IL-2、IL-4、IL-5、IL-6等可促進(jìn)T、B細(xì)胞的活化增殖和分化。 IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、

41、IFN-和TGF決定B細(xì)胞的轉(zhuǎn)化和Ig的類別轉(zhuǎn)換。 在免疫應(yīng)答的效應(yīng)階段,趨化因子可引起炎性細(xì)胞的浸潤。TNF-、IL-1、IFN-可促進(jìn)巨噬細(xì)胞的活化,增強(qiáng)其吞噬、消化細(xì)菌的能力。TNF-能直接作用靶細(xì)胞。IFN-和IL-2可增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒活性。三 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 apoptosis是一種具有時(shí)相性和空間性的細(xì)胞自主死亡過程。細(xì)胞凋亡廣泛參與胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、免疫反應(yīng)、正常組織更新等眾多生理過程。免疫應(yīng)答過程中,激活誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡是免疫應(yīng)答負(fù)調(diào)節(jié)機(jī)制之一。 TNF-在體外可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等細(xì)胞的凋亡；IL-2可誘導(dǎo)抗原活化后的細(xì)胞凋亡,從而限制免疫應(yīng)答的強(qiáng)度,避免造成免疫損傷

42、。另外,CK也參與細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié),Fas與其配體FasL的結(jié)合,介導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。IL-2,TNF,IFN-可通過促進(jìn)Fas的表達(dá),間接誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。四、刺激造血功能 骨髓基質(zhì)細(xì)胞和T細(xì)胞產(chǎn)生的具有刺激造血功能的細(xì)胞因子,在細(xì)胞生成方面具有重要作用,如SCF作用于造血干細(xì)胞,使其對(duì)多種集落刺激因子具有應(yīng)答性; GM-CSF,M-CSF和G-CSF促進(jìn)粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的分化成熟; EPO作用于骨髓紅細(xì)胞前體,促進(jìn)分化為成熟紅細(xì)胞。.細(xì)胞因子檢測(cè)方法細(xì)胞因子檢測(cè)方法 生生物物學(xué)學(xué)方方法法 免免疫疫學(xué)學(xué)方方法法 分分子子生生物物學(xué)學(xué)方方法法 .生物學(xué)方法測(cè)測(cè)定定CK對(duì)對(duì)特特定定靶靶細(xì)細(xì)胞胞生生物物活活

43、性性的的影影響響或或細(xì)細(xì)胞胞增增殖殖動(dòng)動(dòng)力力學(xué)學(xué)的的變變化化，間間接接反反映映CK水水平平和和功功能能強(qiáng)強(qiáng)弱弱。 生生物物學(xué)學(xué)檢檢測(cè)測(cè)的的結(jié)結(jié)果果表表示示為為相相對(duì)對(duì)單單位位或或生生物物活活性性單單位位 方方法法有有：3HTdR摻摻入入法法 四四甲甲基基偶偶氮氮唑唑鹽鹽（MTT）法法 結(jié)結(jié)晶晶紫紫比比色色法法 血血凝凝素素生生成成抑抑制制法法 評(píng)評(píng)價(jià)價(jià)：最最早早使使用用、最最普普及及。操操作作難難度度較較大大、靈靈敏敏度度低低、 許許多多因因子子相相互互干干擾擾、特特異異性性欠欠佳佳。 .免疫學(xué)方法免疫學(xué)方法 免免疫疫斑斑點(diǎn)點(diǎn)法法 抗抗體體固固相相載載體體硝硝酸酸纖纖維維膜膜加加受受檢檢標(biāo)標(biāo)本

44、本Ag-Ab 復(fù)復(fù)合合物物 酶酶標(biāo)標(biāo) Ab底底物物顯顯色色定定性性或或定定量量測(cè)測(cè)定定 酶酶聯(lián)聯(lián)免免疫疫吸吸附附實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)（ELISA）雙雙抗抗體體夾夾心心法法 放放免免法法（一一步步競競爭爭法法） 免免疫疫印印跡跡法法 免免疫疫 PCR 法法 評(píng)評(píng)價(jià)價(jià)：特特異異性性強(qiáng)強(qiáng)、重重復(fù)復(fù)性性好好、快快速速簡簡便便，但但僅僅能能反反映映細(xì)細(xì)胞胞因因子子的的抗抗原原性性，不不能能代代表表真真正正的的生生物物學(xué)學(xué)活活性性，敏敏感感性性也也低低于于生生物物活活性性檢檢測(cè)測(cè)法法。 .分子生物學(xué)測(cè)定法分子生物學(xué)測(cè)定法 CK 含含量量的的高高低低大大多多取取決決于于所所編編碼碼基基因因的的轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄錄、加加工工、翻翻譯

45、譯及及其其調(diào)調(diào)控控過過程程， 信信使使RNA（mRNA） 含含量量與與CK 含含量量直直接接相相關(guān)關(guān)，故故檢檢測(cè)測(cè) mRNA 水水平平可可間間接接推推算算 CK 的的合合成成和和分分泌泌量量。 .檢測(cè)檢測(cè)mRNA方法方法 原原位位雜雜交交:用用標(biāo)標(biāo)記記的的 DNA 或或 RNA 為為探探針針， 在在組組織織或或細(xì)細(xì)胞胞原原位位進(jìn)進(jìn)行行核核酸酸分分子子雜雜交交以以顯顯示示組組織織細(xì)細(xì)胞胞內(nèi)內(nèi)某某一一部部位位特特定定的的核核酸酸片片段段，其其優(yōu)優(yōu)點(diǎn)點(diǎn)是是可可以以對(duì)對(duì)特特定定核核酸酸片片段段進(jìn)進(jìn)行行組組織織細(xì)細(xì)胞胞的的定定位位。 Northern blot：單單鏈鏈 RNA 先先用用凝凝膠膠變變性性

46、電電泳泳分分離離，然然后后轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移移到到硝硝酸酸纖纖維維膜膜上上，進(jìn)進(jìn)行行雜雜交交、預(yù)預(yù)雜雜交交，顯顯示示結(jié)結(jié)果果。 核核酸酸酶酶保保護(hù)護(hù)分分析析：將將單單鏈鏈 DNA 探探針針與與待待檢檢 RNA 雜雜交交，由由于于核核酸酸酶酶 S1專專一一降降解解單單鏈鏈核核酸酸，雜雜交交后后形形成成雙雙鏈鏈的的部部分分可可受受保保護(hù)護(hù)不不被被降降解解，未未形形成成雙雙鏈鏈的的 DNA 或或 RNA 單單鏈鏈則則被被 S1 酶酶降降解解成成核核苷苷酸酸，通通過過凝凝膠膠變變性性電電泳泳分分離離，放放射射自自顯顯影影和和光光密密度度掃掃描描可可檢檢測(cè)測(cè) RNA 的的長長度度和和含含量量。 評(píng)評(píng)價(jià)價(jià)：高高度度敏

47、敏感感，可可提提前前預(yù)預(yù)知知 CK 的的分分泌泌情情況況，但但只只能能檢檢測(cè)測(cè)基基因因表表達(dá)達(dá)情情況況，不不能能直直接接提提供供 CK 濃濃度度及及活活性性，主主要要用用于于機(jī)機(jī)制制探探討討及及科科學(xué)學(xué)研研究究 細(xì)胞因子醫(yī)學(xué)意義細(xì)胞因子醫(yī)學(xué)意義 一、細(xì)胞因子與炎癥一、細(xì)胞因子與炎癥 細(xì)胞因子可能促進(jìn)細(xì)胞從血管中滲出細(xì)胞因子可能促進(jìn)細(xì)胞從血管中滲出與趨化：與趨化： IL-1、TNF-、IL-6可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞及白細(xì)胞表達(dá)粘附分子，促進(jìn)白細(xì)胞及白細(xì)胞表達(dá)粘附分子，促進(jìn)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附和滲出；胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附和滲出； IL-8和其他趨化因子可吸附中性粒細(xì)胞，和其他趨化因

48、子可吸附中性粒細(xì)胞，單核單核/巨噬細(xì)胞發(fā)生趨化能力。巨噬細(xì)胞發(fā)生趨化能力。 IL-1、TNF-、IFN-、GM-CSF、趨化、趨化性細(xì)胞因子等可激活單核性細(xì)胞因子等可激活單核/巨噬細(xì)胞、中巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，促進(jìn)它們進(jìn)一步分泌炎癥介性粒細(xì)胞，促進(jìn)它們進(jìn)一步分泌炎癥介質(zhì)；質(zhì)； IL-1、TNF-和和IL-6可促進(jìn)肝細(xì)胞合成多可促進(jìn)肝細(xì)胞合成多種急性期蛋白，同時(shí)也可作為用于體溫種急性期蛋白，同時(shí)也可作為用于體溫調(diào)節(jié)中樞，引起發(fā)熱癥狀調(diào)節(jié)中樞，引起發(fā)熱癥狀； 過量的炎癥介質(zhì)可造成病理性的組織損過量的炎癥介質(zhì)可造成病理性的組織損傷和彌漫性血管內(nèi)凝血，甚至引起感染傷和彌漫性血管內(nèi)凝血，甚至引起感染性休克。性休克。 臨床治療方面，可利用臨床治療方面，可利用IL-1R拮抗劑和有拮抗劑和有中和中和TNF-作用的抗作用的抗TNF-抗體治療細(xì)菌抗體治療細(xì)菌性膿毒血癥休克。其原理是二者能各自性膿毒血癥休克。其原理是二者能各自中和