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文檔簡介

1、HPLC 蒸發(fā)光散射檢測器的原理簡介蒸發(fā)光散射檢測器(EvaporativeLightScatteringDetector)設計用于高效液相色譜系統(tǒng)，分析任何揮發(fā)性低于流動相的化合物。ELSD的應用范圍包括：碳水化合物，藥物，脂類，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化劑，營養(yǎng)滋補品，及組合分子庫等。蒸發(fā)光散射檢測器消除了常見于其他HPLC檢測器的問題。示差檢測受溶劑前沿峰的干擾使得分析復雜化，并且由于對溫度極其敏感使得基線很不穩(wěn)定，與梯度洗脫不相容。另外，示差檢測器的響應不如ELSD靈敏。而低波長紫外檢測器在急變梯度條件下受基線漂移的困擾，并要求被分析化合物帶有發(fā)色團。ELSD則

2、不受這些限制。不同于這些檢測器，ELSD能在多溶劑梯度的情況下獲得穩(wěn)定的基線，使得分辨率更好、分離速度更快。另外，因為ELSD的響應不依賴于樣品的光學特性，所以ELSD檢測時樣品不要求帶有發(fā)色團或熒光基團。操作原理蒸發(fā)光散射檢測器的獨特檢測原理為，首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管中將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。步驟1:霧化霧化經(jīng)HPLC分離的柱洗脫液進入霧化器，在此與穩(wěn)定的霧化氣體（一般為氮氣）混合形成氣溶膠。氣溶膠由均勻分布的液滴組成，液滴大小取決于分析中采用的氣體流量。氣體流量越低形成的液滴越大，液滴越大則散射的光越多，從而提高了分析靈敏度

3、，但是越大的液滴在漂移管中越難蒸發(fā)。每種方法均存在產(chǎn)生最佳信號噪音比率的最優(yōu)化氣體流量。流動相流速越低要求適當霧化的氣體流量也越低。用內(nèi)徑為2.1mm的微徑柱代替內(nèi)徑為4.6mm標準型分析柱，能大大降低流動相流速，因而提高分析的靈敏度。步驟2:蒸發(fā)蒸發(fā)氣溶膠中揮發(fā)性成分在加熱的不銹鋼漂移管中蒸發(fā)。為特定應用設置適當?shù)钠乒軠囟?，取決于流動相組成和流速，以及樣品的揮發(fā)性。高有機含量流動相比高含水量流動相要求蒸發(fā)的漂移管溫度低。流動相流速越低比流動相流速越高要求蒸發(fā)的漂移管溫度越低。半揮發(fā)性樣品要求采用較低的漂移管溫度,以獲得最佳靈敏度。最佳溫度需要通過觀察各溫度時的信號噪音比率來確定。步驟3:檢測檢測懸浮于流動相蒸汽中的樣品顆粒從漂移管進入到光散射檢測池。在檢測池中，樣品顆粒散射激光光源發(fā)出的光而蒸發(fā)

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