探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化VIP

1、.培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化.基基 礎(chǔ)礎(chǔ) 回回 扣扣1、酵母菌、酵母菌酵母菌是單細(xì)胞真核生物。生長周期短，增殖速度快，還可以用酵母菌作為實驗材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判斷細(xì)胞的死活探究膜的透性）.2、種群數(shù)量的變化、種群數(shù)量的變化 種群數(shù)量的變化包括增長、波動、穩(wěn)定、下降等種群數(shù)量的變化包括增長、波動、穩(wěn)定、下降等 “S”型曲線有一個型曲線有一個K值，即環(huán)境容納量。值，即環(huán)境容納量。 種群數(shù)量的增長也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培種群數(shù)量的增長也受到許多環(huán)境因素（如溫度、培養(yǎng)液的養(yǎng)液的pH、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等、培養(yǎng)液的養(yǎng)分種類和濃度、代謝產(chǎn)物等

2、）的影響。）的影響。.探究過程 1 1提出問題：提出問題： 2 2作出假設(shè)：作出假設(shè)： 3 3設(shè)計實驗：設(shè)計實驗： 4 4進行實驗：進行實驗： 5 5分析結(jié)果和分析結(jié)果和 表達交流：表達交流： 6 6得出結(jié)論：得出結(jié)論：培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？培養(yǎng)液中酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的？酵母菌在開始一段時間呈酵母菌在開始一段時間呈“J J”型增長，隨著時間型增長，隨著時間的推移，由于資源和空間有限，呈的推移，由于資源和空間有限，呈“S S”型增長。型增長。 連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)5 5天，每天用顯微鏡和血球計數(shù)天，每天用顯微鏡和血球計數(shù)板計數(shù)出酵母菌種群密度板計數(shù)出酵母菌種群密度

3、各小組匯報實驗結(jié)果，結(jié)合前各小組匯報實驗結(jié)果，結(jié)合前4 4天的結(jié)果，天的結(jié)果，畫出酵母種群增長的曲線圖并進行分析。畫出酵母種群增長的曲線圖并進行分析。 酵母菌在開始一段時間呈酵母菌在開始一段時間呈“J J”型增長，但型增長，但隨著時間的推移，由于資源和空間有限，隨著時間的推移，由于資源和空間有限，將呈將呈“S S”型增長，并最終將全部死亡。型增長，并最終將全部死亡。 .3 3設(shè)計實驗：設(shè)計實驗： 將將10mL10mL無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中；無菌馬鈴薯培養(yǎng)液或肉湯培養(yǎng)液加入試管中； 將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻；將酵母菌接種入試管中的培養(yǎng)液中混合均勻； 將試管在將試管在

4、2828條件下連續(xù)培養(yǎng)條件下連續(xù)培養(yǎng)5d5d； 每天取樣計數(shù)酵母菌數(shù)量；每天取樣計數(shù)酵母菌數(shù)量； 分析結(jié)果，得出結(jié)論。分析結(jié)果，得出結(jié)論。是否設(shè)置對照組和多組重復(fù)實驗？是否設(shè)置對照組和多組重復(fù)實驗？如何取樣計數(shù)？記錄表怎樣設(shè)計？計數(shù)時有哪些注意事項？如何取樣計數(shù)？記錄表怎樣設(shè)計？計數(shù)時有哪些注意事項？.計數(shù)室計數(shù)室計數(shù)室（中間大方格）的長和寬各為計數(shù)室（中間大方格）的長和寬各為1mm1mm，深度為，深度為0.1mm0.1mm，其體積為，其體積為_mm_mm3 3 ，合，合_mL_mL。1mm0.1110-4血球計數(shù)板血球計數(shù)板:一種專門計數(shù)較大單細(xì)胞微生物的儀器一種專門計數(shù)較大單細(xì)胞微生物的儀

5、器.計數(shù)室計數(shù)室計數(shù)室分為計數(shù)室分為25中格中格（雙線邊雙線邊）每一中格又分為每一中格又分為16小格小格計數(shù)室是由計數(shù)室是由_個小格組成個小格組成2516=400.如何計數(shù)？如何計數(shù)？五點取樣法五點取樣法樣方法樣方法每每mL培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量培養(yǎng)液中酵母菌數(shù)量= =A ( (平均每個中格酵母細(xì)胞數(shù)平均每個中格酵母細(xì)胞數(shù)) )25104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)A1A2A5A3A4.第第 1 1 天天.第第 4 4 天天第第 6 6 天天.第第 7 7 天天死亡死亡.酵母菌數(shù)量變化記錄表酵母菌數(shù)量變化記錄表.計數(shù)時有哪些注意事項？計數(shù)時有哪些注意事項？從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管從試管中吸出培

6、養(yǎng)液進行計數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾次輕輕震蕩幾次； 如果酵母菌濃度過大，應(yīng)先如果酵母菌濃度過大，應(yīng)先稀釋稀釋。對于壓在中格界線上的酵母菌，一般只取對于壓在中格界線上的酵母菌，一般只取相鄰兩邊及夾角相鄰兩邊及夾角計數(shù)；計數(shù)；對于已經(jīng)出芽的酵母菌，對于已經(jīng)出芽的酵母菌，芽體達到母細(xì)胞大小一半芽體達到母細(xì)胞大小一半時，即可時，即可作為兩個菌體計算；作為兩個菌體計算；已死亡的酵母菌不計數(shù)已死亡的酵母菌不計數(shù)。每個樣品一般計數(shù)三次，取其每個樣品一般計數(shù)三次，取其平均值平均值。.培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化 .死亡死亡.在計數(shù)前，還應(yīng)有哪些步驟？需注意些什么？在計數(shù)前，還應(yīng)有

7、哪些步驟？需注意些什么？ 培養(yǎng)液配制培養(yǎng)液配制 滅菌滅菌 接種接種 培養(yǎng)培養(yǎng).試管試管編號編號培養(yǎng)液培養(yǎng)液/mL/mL無菌水無菌水/mL/mL酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL溫度溫度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828 針對針對“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化化”，有人提出了新的問題，某同學(xué)按下表完，有人提出了新的問題，某同學(xué)按下表完成了有關(guān)實驗。成了有關(guān)實驗。 .溫度、營養(yǎng)物質(zhì)對酵母菌生長的影響溫度、營養(yǎng)物質(zhì)對酵母菌生長的影響 .試管試管編號編號培養(yǎng)液培養(yǎng)液/mL/mL無菌水無菌水/mL/mL

8、酵母菌母酵母菌母液液/mL/mL溫度溫度（）A A10100.10.12828B B10100.10.15 5C C10100.10.12828.以計數(shù)酵母菌為例以計數(shù)酵母菌為例(1)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù)用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌懸液的酵母菌個數(shù).(2)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù)樣品稀釋的目的是便于酵母菌懸液的計數(shù),以每小以每小方格內(nèi)含有方格內(nèi)含有4-5個酵母細(xì)胞為宜個酵母細(xì)胞為宜,一般稀釋一般稀釋10倍即可倍即可. (3)將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈將血球計數(shù)板用擦鏡紙擦凈,在中央的計數(shù)室上加在中央的計數(shù)室上加蓋專用的厚玻片蓋專用的厚玻片.(4)將稀釋后的酵母菌懸液將稀釋

9、后的酵母菌懸液,用吸管吸取一滴置于蓋玻用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣片的邊緣,使菌液緩緩滲入使菌液緩緩滲入,多余的菌液用吸水紙吸取多余的菌液用吸水紙吸取,捎待片刻捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi)使酵母菌全部沉降到血球計數(shù)室內(nèi).血球計數(shù)板的使用血球計數(shù)板的使用.(5)計數(shù)時計數(shù)時,如果使用如果使用16格格25格規(guī)格的計數(shù)室格規(guī)格的計數(shù)室,要按要按對角線位對角線位,取左上取左上,右上右上,左下左下,右下右下4個中格個中格(即即100個個小格小格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù).如果規(guī)格為如果規(guī)格為25格格16格的計數(shù)板格的計數(shù)板,除了取其除了取其4個對角方位外個對角方位外,還需再數(shù)中央的一個中格還需

10、再數(shù)中央的一個中格(即即80個小方格個小方格)的酵母菌數(shù)的酵母菌數(shù). (6)當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌當(dāng)遇到位于大格線上的酵母菌,一般只計數(shù)大方一般只計數(shù)大方格的上方和左方線上的酵母細(xì)胞格的上方和左方線上的酵母細(xì)胞 (7)對每個樣品計數(shù)三次對每個樣品計數(shù)三次,取其平均值取其平均值,按下列公式計按下列公式計算每算每1ml菌液中所含的酵母菌個數(shù)菌液中所含的酵母菌個數(shù). .3.計算公式計算公式(1)16格格25格的血球計數(shù)板計算公式格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=100小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/100400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)(2)25格格x16格的血球計數(shù)板計算公

11、式格的血球計數(shù)板計算公式:酵母細(xì)胞數(shù)酵母細(xì)胞數(shù)/ml=80小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)小格內(nèi)酵母細(xì)胞個數(shù)/80400104稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù). 怎樣進行酵母菌的計數(shù)？怎樣進行酵母菌的計數(shù)？ 對一支試管中的培養(yǎng)液對一支試管中的培養(yǎng)液( (可定為可定為10ml)10ml)中的酵母菌中的酵母菌逐個計數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測的方法：逐個計數(shù)是非常困難的，可以采用抽樣檢測的方法：先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計數(shù)室底吸

12、去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計數(shù)室底部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內(nèi)部，將計數(shù)板放在載物臺的中央，計數(shù)一個小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計算中的酵母菌的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算計算中的酵母菌總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為總數(shù)，蓋玻片下，培養(yǎng)液厚度為0.1mm0.1mm，可算出，可算出10ml10ml培培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)的公式：2.52.510104 4x(xx(x為小方格內(nèi)酵為小方格內(nèi)酵母菌數(shù)母菌數(shù)) ). 從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，建議你將試管輕輕從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，建議你將試管輕輕振蕩幾次。這是為什么？振蕩幾次。

13、這是為什么？ 本探究需要設(shè)置對照嗎？如果需要請討論對照組應(yīng)怎樣本探究需要設(shè)置對照嗎？如果需要請討論對照組應(yīng)怎樣設(shè)計和操作；如果不需要，請說明理由。設(shè)計和操作；如果不需要，請說明理由。 需要做重復(fù)實驗嗎？需要做重復(fù)實驗嗎？ 目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保目的是使培養(yǎng)液中的酵母菌均勻分布，以保證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差證估算的準(zhǔn)確性，減少誤差。 不需要，本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定不需要，本實驗旨在探究培養(yǎng)液中酵母菌在一定條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實驗，獲得平均數(shù)條件下的種群數(shù)量變化，只要分組實驗，獲得平均數(shù)值即可。值即可。 不用重復(fù)，只要分組實驗獲得平均值即可。不用重復(fù)，只要分組

14、實驗獲得平均值即可。.5 5、怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計？怎樣記錄結(jié)果？記錄表怎樣設(shè)計？ 如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計數(shù)，應(yīng)采取怎樣如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多，難以計數(shù)，應(yīng)采取怎樣的措施？的措施？第第1 1天天第第2 2天天第第3 3天天第第4 4天天第第5 5天天第第6 6天天第第7 7天天第第1 1組組第第2 2組組第第3 3組組-第第n n組組平均值平均值 搖勻試管取搖勻試管取1mL1mL酵母菌培養(yǎng)液稀釋酵母菌培養(yǎng)液稀釋n n倍后，倍后，再用血球計數(shù)板計數(shù)，再用血球計數(shù)板計數(shù)，所得數(shù)值所得數(shù)值乘以乘以n n2.52.510104 4，即為即為10mL10mL酵母菌液中酵母菌個數(shù)。

15、酵母菌液中酵母菌個數(shù)。只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。只計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的酵母菌數(shù)。7 7 對于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計數(shù)？對于壓在小方格界線上的酵母菌，應(yīng)當(dāng)怎樣計數(shù)？. 設(shè)計實驗：設(shè)計實驗：A組為實驗組，裝培養(yǎng)液組為實驗組，裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28。B組裝培養(yǎng)液組裝培養(yǎng)液10 mL，酵母菌母液，酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度5，與，與A組形成溫度條件對照。組形成溫度條件對照。C組不裝培養(yǎng)液，只裝無菌水組不裝培養(yǎng)液，只裝無菌水10mL,酵母菌母液酵母菌母液0.1mL,環(huán)境溫度環(huán)境溫度28，與，與A組形成營養(yǎng)條件對照。組形成營養(yǎng)條件對照。. 計數(shù)計數(shù)計數(shù)：首先取樣，每計數(shù)：首先取樣，每 天取樣時間大體一致，并要遵守?zé)o天取樣時間大體一致，并要遵守?zé)o菌操作規(guī)范。菌操作規(guī)范。每次取樣前要試管振蕩搖勻每次取樣前要試管振蕩搖勻，正確地使用，正確地使用1mL刻度吸管將刻度吸管將lmL酵母菌培養(yǎng)液移入酵母菌培養(yǎng)液移入1支干凈的試管里，支干凈的試管里，然后然后用滴管吸取用滴管吸取1滴培養(yǎng)液滴在已蓋在血球計數(shù)板網(wǎng)格上滴培養(yǎng)液滴在已蓋在血球計數(shù)板網(wǎng)格上的蓋