分子生物學(xué)期末考試題目與答案

1、WORD格式分子生物學(xué)復(fù)習(xí)提綱一名詞解釋（ 1 Ori ：原核生物基因質(zhì)粒的復(fù)制起始位點(diǎn)，是四個(gè)高度保守的19bp組成的正向重復(fù)序列，只有 ori 能被宿主細(xì)胞復(fù)制蛋白質(zhì)識(shí)別的質(zhì)粒才能在該種細(xì)胞中復(fù)制。ARS：自主復(fù)制序列，是真核生物DNA復(fù)制的起點(diǎn)，包括數(shù)個(gè)復(fù)制起始必須的保守區(qū)。不同的 ARS 序列的共同特征是一個(gè)被稱為 A 區(qū)的 11bp 的保守序列。（ 2Promoter：?jiǎn)?dòng)子，與基因表達(dá)啟動(dòng)有關(guān)的順式作用元件，是構(gòu)造基因的重要成分，它是位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn) 5"端上游區(qū)大約 100200bp 以內(nèi)的具有獨(dú)立功能的 DNA 序列，能活化 RNA 聚合酶，使之與模板準(zhǔn)確地相結(jié)合并具

2、有轉(zhuǎn)錄起始的特異性。 3 -independent termination不依賴 因子的終止，指在不依賴 因子的終止反響中，沒有任何其他因子的參與， 核心酶也能在某些位點(diǎn)終止轉(zhuǎn)錄。強(qiáng)終止子（ 4SD sequence：序列核糖體小亞基識(shí)別位點(diǎn) ，存在于原核生物起始密碼上游個(gè)核苷酸處的一種個(gè)核苷酸的保守片段，它與 "端反向互補(bǔ)，所以可以將 mRNA 的 AUG 起始密碼子置于核糖體的適當(dāng)位置以便起始翻譯作用。Kozak sequence：存在于真核生物 mRNA 的一段序列，核糖體能夠識(shí)別 mRNA 上的這段序列，并把它作為翻譯起始位點(diǎn)。（ 5Operator：操縱基因，與一個(gè)或者一組

3、構(gòu)造基因相鄰近，并且能夠與一些特異的阻遏蛋白相互作用，從而控制鄰近的構(gòu)造基因表達(dá)的基因。Operon：操縱子，是指原核生物中由一個(gè)或多個(gè)相關(guān)基因以及轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)控元件組成的基因表達(dá)單元。包括操縱基因、構(gòu)造基因、啟動(dòng)基因。 6 Enhancer：增強(qiáng)子，能強(qiáng)化轉(zhuǎn)錄起始的序列的為增強(qiáng)子或強(qiáng)化子Silencer：沉默子，可降低基因啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的一段DNA 順式元件。與增強(qiáng)子作用相反。（ 7cis-acting element ：順式作用元件， 存在于基因旁側(cè)序列中能影響基因表達(dá)的序列，包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、調(diào)控序列和可誘導(dǎo)元件，本身不編碼任何蛋白質(zhì)，僅僅提供一個(gè)作用位點(diǎn)，與反式作用因子相互作用參與基因

4、表達(dá)調(diào)控。trans-acting factor：反式作用因子，是指直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。 具有三個(gè)功能構(gòu)造域，即 DNA 結(jié)合域、轉(zhuǎn)錄結(jié)合域、結(jié)合其他結(jié)合蛋白的構(gòu)造域。（ 8 Open reading frame (ORF)：開放式閱讀框架，是指一組連續(xù)的含有三聯(lián)密碼子的能夠被翻譯成為多肽鏈的 DNA 序列。它由起始密碼子開場(chǎng)， 到終止密碼子完畢。（ 9 Gene：基因，產(chǎn)生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列。 能轉(zhuǎn)錄且具有生物學(xué)功能的 DNA/RNA 的序列。（ 10DNA denaturation：DNA變性，DNA雙鏈

5、的氫鍵斷裂，最后完全變成單專業(yè)資料整理WORD格式鏈的過程。Hyperchromatic effect：增色效應(yīng)，在變性過程中，260nm紫外線吸收值先緩慢上升，當(dāng)?shù)竭_(dá)某一溫度時(shí)驟然上升，稱為增色效應(yīng)。復(fù)性 Renaturation)：熱變性的DNA緩慢冷卻，單鏈恢復(fù)成雙鏈。DNA Melting temperature (Tm) ：溶解溫度， 變性過程紫外線吸收值增加的中點(diǎn)稱為融解溫度。生理?xiàng)l件下為 8595。(11) RNA splicing：的剪接，SnRNA形成剪接體，剪接信號(hào)為GU供體AG受體從 mRNA 前體分子中切除內(nèi)含子，而使外顯子拼接形成成熟的過程。intron ：內(nèi)含子，存

6、在于原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或基因組DNA中，但不包括在成熟 mRNA 、rRNA 或 tRNA 中的那局部核苷酸序列。exon：外顯子，基因組DNA中出現(xiàn)在成熟RNA分子上的序列。(12) RNAi ：RNA干預(yù)，是利用雙鏈小RNA的高效、特異性降解細(xì)胞內(nèi)同源mRAN，從而阻斷體內(nèi)靶基因表達(dá)，使細(xì)胞出現(xiàn)靶基因缺失表型的方法。(13) polymerase chain reaction (PCR)：聚合酶鏈?zhǔn)椒错?，是體外酶促合成特異DNA 片段的一種方法 ,由高溫變性 (9297 )、低溫退火 4555復(fù)性及適溫延伸 (72、 Taq 酶 )等幾步反響組成一個(gè)周期 ,循環(huán)進(jìn)展 ,使目的 DNA 得以迅速擴(kuò)

7、增。(14) Southern blot：DNA印跡雜交，指利用具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定的條件下，可按堿基互補(bǔ)的原那么形成雙鏈，此雜交過程是高度特異的。由于核酸分子的高度特異性及檢測(cè)方法的靈敏性，綜合凝膠電泳和核酸內(nèi)切限制酶分析的結(jié)果，便可繪制出 DNA 分子的限制圖譜，此即 DNA 印跡雜交。Northern blot：RNA印跡雜交，首先通過電泳的方法將不同的RNA 分子依據(jù)其分子量大小加以區(qū)分，然后通過與特定基因互補(bǔ)配對(duì)的探針雜交來檢測(cè)目的片段。Western blot：蛋白質(zhì)印跡。通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)展著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定

8、蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中的表達(dá)情況的信息。二簡(jiǎn)答和問答題1RNA 的種類和功能答： mRNA 、tRNA 、rRNA 、反義 RNA 、snRNA，等等。 mRNA ，信使 RNA ，功能就是把 DNA 上的遺傳信息準(zhǔn)確無誤地轉(zhuǎn)錄下來，決定蛋白質(zhì)的氨基酸順序，完成遺傳信息傳遞過程。 tRNA ，轉(zhuǎn)運(yùn)， 根據(jù) mRNA 的遺傳密碼依次準(zhǔn)確地將它攜帶的氨基酸連結(jié)起來形成多肽鏈。 rRNA ，核糖體，一般與核糖體蛋白質(zhì)結(jié)合在一起，形成核糖體。反義 RNA ，與 mRNA 互補(bǔ)的 RNA 分子，從而抑制 mRNA 的翻譯，參與基因表達(dá)的調(diào)控。 snRNA，小核 RNA ，是真核生物轉(zhuǎn)錄后加工過程中

9、 RNA 剪接體的主要成分。專業(yè)資料整理WORD格式上述各種 RNA 分子均為轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物， mRNA 最后翻譯為蛋白質(zhì)，而 rRNA 、tRNA及 snRNA 等并不攜帶翻譯為蛋白質(zhì)的信息，其終產(chǎn)物就是 RNA 。 gRNA，引導(dǎo) RNA ，真核生物中參與 RNA 編輯的具有與 mRNA 互補(bǔ)序列的 RNA 。2DNA 半保存和半不連續(xù)復(fù)制答： DNA 半保存復(fù)制是： DNA 在進(jìn)展復(fù)制的時(shí)候鏈間氫鍵斷裂，雙鏈解旋分開，每條鏈作為模板在其上合成互補(bǔ)鏈，經(jīng)過一系列酶的作用生成兩個(gè)新的DNA 分子。 子代 DNA 分子 其中的一條鏈來自親代 DNA ，另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?，這種方式稱半保存復(fù)制。半不

10、連續(xù)復(fù)制是由于DNA 雙螺旋的兩股單鏈?zhǔn)欠聪蚱叫?，一條鏈的走向?yàn)?5' 3',另一條鏈為 3' 5',DNA 的兩條鏈都能作為模板以邊解鏈邊復(fù)制方式，同時(shí)合成兩條新的互補(bǔ)鏈。 但是，所有 DNA 聚合酶的合成方向都是 5"3"，所以在復(fù)制是， 一條鏈的合成方向和復(fù)制叉前進(jìn)方向一樣， 可以連續(xù)復(fù)制， 稱為前導(dǎo)鏈；另一條鏈的合成方向與復(fù)制叉前進(jìn)方向相反， 不能順著解鏈方向連續(xù)復(fù)制，必須待模板鏈解開至足夠長(zhǎng)度，然后從 5, 3"生成引物并復(fù)制子鏈。延長(zhǎng)過程中，形成岡崎片段，要等待下一段有足夠長(zhǎng)度的模板，再次生成引物而延長(zhǎng)，然后連接起來，

11、這條鏈稱滯后鏈。 因此就把前導(dǎo)鏈連續(xù)復(fù)制， 隨從鏈不連續(xù)復(fù)制的復(fù)制方式稱為半不連續(xù)復(fù)制。3端粒酶的工作原理答：原核生物的染色體是環(huán)狀的，其 5'最末端崗崎片段的 RNA 引物被降解后可借助另半圈 DNA 鏈向前延伸來填補(bǔ)。但 真核生物線性 DNA 在復(fù)制后，不能填補(bǔ) 5'末端的空缺， 從而會(huì)使 5'末端序列因此而縮短。 真核生物通過形成端粒構(gòu)造來解決此問題，復(fù)制使端粒 5'末端縮短，而端粒酶可外加重復(fù)單位到 5'末端上，結(jié)果便是維持端粒一定的長(zhǎng)度。端粒酶是一種含有 RNA 鏈的逆轉(zhuǎn)錄酶，它以所含的 RNA 引物為模板來合成DNA 端粒構(gòu)造。端粒酶可結(jié)合到

12、端粒的3'末端上， RNA 引物的 5'末端識(shí)別 DNA的 3'末端堿基并相互配對(duì)，以 RNA 鏈為模板使 DNA 鏈延伸，合成一個(gè)重復(fù)單位 TTTAGGG 后 ，酶再向前移動(dòng)一個(gè)單位。合成完畢后，端粒的 3'單鏈末端折回作為引物，合成其互補(bǔ)鏈。4原核 DNA 復(fù)制過程中遺傳信息的保真機(jī)制答： DNA 聚合酶 III 亞基具有 3'到 5'核酸外切酶的活性，在聚合過程中其有校對(duì)作用。DNA 聚合酶 III 的復(fù)雜亞基構(gòu)造由 10 種亞基組成使其具有更高的忠實(shí)性、協(xié)同性和持續(xù)性，如無校對(duì)功能，復(fù)制出錯(cuò)率僅為 7×10-6，具有校對(duì)功能后降

13、低至 5×10-9。 DNA 聚合酶 I 在 DNA 復(fù)制中起著，識(shí)別甲基化母鏈，切除、修復(fù)錯(cuò)誤復(fù)制的專業(yè)資料整理WORD格式核苷對(duì)的作用。 DNA 聚合酶 II 也在復(fù)制中起修復(fù)復(fù)制錯(cuò)誤的能力。綜上所述，所以 DNA 的復(fù)制有著高度的保真性。5* 原核和真核復(fù)制， mRNA 轉(zhuǎn)錄，蛋白翻譯，基因表達(dá)調(diào)控的異同答： 復(fù)制：原核生物與真核生物DNA 復(fù)制共同的特點(diǎn)：分為起始、延伸、終止三個(gè)過程；必須有提供 3"羥基末端的引物；親代 DNA 分子為模板，四種脫氧三磷酸核苷 (dNTP)為底物，多種酶及蛋白質(zhì) ： DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶、 DNA 解鏈酶、單鏈結(jié)合蛋白、引物酶、 DN

14、A 聚合酶、 RNA 酶以及 DNA 連接酶等 ;一般都為半保存復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制。原核生物與真核生物DNA 復(fù)制不同的特點(diǎn)：真核生物為線性DNA, 具有多個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)， 形成多個(gè)復(fù)制叉， DNA 聚合酶的移動(dòng)速度較原核生物慢。 原核生物一般為環(huán)形DNA ，具有單一復(fù)制起始位點(diǎn)。真核生物 DNA 復(fù)制只發(fā)生在細(xì)胞周期的S 期，一次復(fù)制開場(chǎng)后在完成前不再進(jìn)展復(fù)制，原核生物多重復(fù)制同時(shí)進(jìn)展。真核生物有多個(gè)復(fù)制子大小不一且并不同步。原核生物只有一個(gè)復(fù)制子。真核生物有五種 DNA 聚合酶，需要 Mg+ 。主要復(fù)制酶為 DNA 聚合酶 ，引物由 DNA 聚合酶合成。原核生物只有三種，主要復(fù)制酶為 DN

15、A 聚合酶 III 。真核生物末端靠端粒酶局部細(xì)胞補(bǔ)齊，而原核生物以多聯(lián)體的形式補(bǔ)齊。真核生物岡崎片段間的 RNA 引物由核酸外切酶 MF1 去除，而原核生物引物由 DNA 聚合酶 I 去除。專業(yè)資料整理WORD格式轉(zhuǎn)錄：原核生物與真核生物轉(zhuǎn)錄共同的特點(diǎn)：都分為分為起始、延伸、終止三個(gè)過程；都有啟動(dòng)子、終止子或終止信號(hào)、調(diào)控序列；所需原料都有聚合酶、等。原核生物與真核生物mRNA 轉(zhuǎn)錄不同的特點(diǎn)：真核生物轉(zhuǎn)錄起始 ,延伸 , 終止都需要因子的幫助原核的啟動(dòng)子為 -10box 和-35box，真核為 TATAbox。真核生物要進(jìn)展 5加帽(轉(zhuǎn)錄早期進(jìn)展30 nt) 、 3加尾mRNA 加 pol

16、yA)、切除內(nèi)含子、 編輯和修飾。(前體專業(yè)資料整理WORD格式原核生物 mRNA, tRNA, rRNA都 由同一種 RNA 聚合酶轉(zhuǎn)錄而真核是三種不同的酶。 原核生物轉(zhuǎn)錄終止是依靠終止子發(fā)夾構(gòu)造，真核生物是依賴轉(zhuǎn)錄信號(hào)專業(yè)資料整理WORD格式AAU 、AAG 蛋白質(zhì)翻譯：原核生物與真核生物蛋白質(zhì)翻譯的共同特點(diǎn)： 都分三步進(jìn)展，即翻譯的起始、肽鏈的延伸、肽鏈的終止及釋放 遺傳密碼一樣原核生物與真核生物 蛋白質(zhì)翻譯 不同的特點(diǎn)：翻譯起始核糖體識(shí)別序列原核是序列且有多個(gè)， 真核是先通過 5,"Cap 序列上的帽結(jié)合蛋白，找到 mRNA ，再通過 Kozak 序列找到翻譯起始 AUG 進(jìn)

17、入 P位。 原核是轉(zhuǎn)錄與翻譯相耦聯(lián)， 故翻譯也在細(xì)胞核內(nèi)， 而真核翻譯在細(xì)胞核外。fMetMet原核翻譯起始 tRNA 為 fMet-tRNA，真核為 Met-tRNA。真核翻譯有復(fù)雜的后加工系統(tǒng)，如糖基化、磷酸化-去磷酸化等，原核無?；虮磉_(dá)調(diào)控：原核生物與真核生物 基因表達(dá)調(diào)控 一樣的特點(diǎn)：表達(dá)為多層次原核生物與真核生物 基因表達(dá)調(diào)控 不同的特點(diǎn)： 原核是以操縱子進(jìn)展轉(zhuǎn)錄的調(diào)控，真核是受單基因控制。原核生物調(diào)控在 2 個(gè)水平轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控、翻譯水平的調(diào)控 ，真核在五個(gè)水平 DNA 水平的調(diào)控、 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控、 轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控、翻譯水平的調(diào)控、翻譯后水平的調(diào)控進(jìn)展基因表達(dá)調(diào)控。 真核生物

18、中有選擇性剪接，原核沒有。 原核的基因表達(dá)主要受環(huán)境等調(diào)控，真核是受激素等調(diào)控。6PCR 與細(xì)胞內(nèi) DNA 復(fù)制的異同一樣點(diǎn)：原料都是四種脫氧核苷酸、模板、都需要引物、都是單鏈DNA ，都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原那么。不同點(diǎn)：PCR 技術(shù)DNA 生物復(fù)制環(huán)境體外復(fù)制，加熱， 90 攝氏度左右體內(nèi)，溫和的環(huán)境酶主要是 DNA 聚合酶 、DNA 解旋酶， DNA 聚合酶，引物酶DNA 連接酶等各種酶引物需要人工合成的引物自己合成引物成分專業(yè)資料整理WORD格式步驟變性 -退火 -延伸解旋 -起始 -延伸 -完畢專業(yè)資料整理WORD格式大小一般只復(fù)制引物及以內(nèi)的片段整個(gè)基因組專業(yè)資料整理WORD格式起點(diǎn)由

19、引物決定原核Ori 、真核ARS專業(yè)資料整理WORD格式7Southern blot, Northern blot, Western blot三種分子生物學(xué)技術(shù)差異答：名稱檢測(cè)對(duì)象探針檢測(cè)原理處理過程用途SouthernDNA標(biāo)記單鏈核 核酸復(fù)性中 瓊脂糖電泳 基因檢測(cè)blot酸堿基配對(duì)專 后轉(zhuǎn)膜拷貝數(shù)一性NorthernRNA標(biāo)記單鏈核 核酸復(fù)性中 變性瓊脂糖 基因表達(dá)的blot酸堿基配對(duì)專 電泳后轉(zhuǎn)膜 檢測(cè)表達(dá)一性量Western蛋白抗體抗原抗體 SDS-PAGE 基因表達(dá)產(chǎn)blot特異性結(jié)合 后轉(zhuǎn)膜物蛋白的檢測(cè)8復(fù)制，轉(zhuǎn)錄，翻譯，調(diào)控中的各種保守序列及其功能復(fù)制Ori: 原核生物復(fù)制起點(diǎn)

20、ARS: 真核生物復(fù)制起點(diǎn)轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子：決定轉(zhuǎn)錄方向及模板鏈、轉(zhuǎn)錄效率操縱子原核：將轉(zhuǎn)錄與翻譯相耦聯(lián)終止子：終止轉(zhuǎn)錄翻譯SD 序列：原核生物翻譯起始，SD 序列的順序及位置對(duì)翻譯都有影響。Kozak 序列：真核生物翻譯起始調(diào)控轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控：增強(qiáng)子：作用于啟動(dòng)子，提高轉(zhuǎn)錄活性沉默子：作用于啟動(dòng)子，降低轉(zhuǎn)錄活性9乳糖操縱子和色氨酸操縱子(包括的衰減子 )的工作原理答：乳糖操縱子乳糖操縱子是個(gè)弱啟動(dòng)子，包括個(gè)構(gòu)造基因：、和，以及啟動(dòng)子、控制專業(yè)資料整理WORD格式子和阻遏子等。乳糖操縱子負(fù)控誘導(dǎo)模式： 無誘導(dǎo)物時(shí)， Lac基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生阻遏物單體，結(jié)合形成同源四體， Lac 同源四體與操縱區(qū) O 區(qū) D

21、NA 相結(jié)合，阻遏基因轉(zhuǎn)錄?；虿槐磉_(dá)。 當(dāng)有誘導(dǎo)物時(shí)， 誘導(dǎo)物使 Lac變成不能與 O 區(qū)相結(jié)合的非活化形式， RNA 聚合酶就可以與 Lac 啟動(dòng)子區(qū)相結(jié)合，起始轉(zhuǎn)錄基因。 mRNA 被轉(zhuǎn)錄成三個(gè)蛋白質(zhì)， 即貝塔 -半乳糖苷酶、 貝塔 -半乳糖苷透過酶、 貝塔 -半乳糖苷乙?；D(zhuǎn)移酶。圖解乳糖操縱子是個(gè)弱啟動(dòng)子， 在葡萄糖和乳糖都存在的情況下，大腸桿菌利用葡萄糖，是因?yàn)槠咸烟强山档?cAMP 濃度，阻礙其與 CAP 結(jié)合，而 cAMP-CAP 是激活 Lac 的重要組成局部， Lac 啟動(dòng)子表達(dá)受阻，就沒有貝塔 -半乳糖苷酶活性。 不能利用乳糖。 所以說 lac 操縱子強(qiáng)的誘導(dǎo)作用既需要乳

22、糖又需缺乏葡萄糖色氨酸操縱子色氨酸操縱子調(diào)控作用主要有三種方式:阻遏作用、弱化作用以及終產(chǎn)物Trp 對(duì)合成酶的反響抑制作用。阻遏作用 :trp 操縱子轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控是通過阻遏蛋白實(shí)現(xiàn)的。在有高濃度Trp存在時(shí) ,阻遏蛋白 - 色氨酸復(fù)合物形成一個(gè)同源二聚體 ,并且與色氨酸操縱子嚴(yán)密結(jié)合 ,因此可以阻止轉(zhuǎn)錄。 當(dāng) Trp 水平低時(shí) ,阻遏蛋白以一種非活性形式存在 ,不能結(jié)合 DNA 。在這樣的條件下 , trp 操縱子被 RNA 聚合酶轉(zhuǎn)錄 ,同時(shí) Trp 生物合成途徑被激活。弱化作用 : trp 操縱子轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控。在trp operon,前導(dǎo)區(qū)的衰減子有4 段特殊的序列，可形成不依賴 因子

23、的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào) 衰減子的工作機(jī)理： 堿基序列(即衰減子 )包括 4 個(gè)分別以 1、2、3 和 4 表示的片段 ,能以兩種不同的方式進(jìn)展堿基配對(duì) , 1 - 2和 3 -4 配對(duì) ,或 2 - 3配對(duì) , 3 - 4配對(duì)區(qū)正好位于終止密碼子的識(shí)別區(qū)。前導(dǎo)序列有相鄰的兩個(gè)色氨酸密碼子 ,當(dāng)培養(yǎng)基中 Trp 濃度很低時(shí) ,負(fù)載有 Trp 的tR2NATrp 也就少 ,這樣翻譯通過兩個(gè)相鄰色氨酸密碼子的速度就會(huì)很慢 ,當(dāng) 4 區(qū)被轉(zhuǎn)錄完成時(shí) ,核糖體滯留 1 區(qū),這時(shí)的前導(dǎo)區(qū)構(gòu)造是 2 - 3 配對(duì) ,不形成 3 - 4 配對(duì)的終止構(gòu)造 ,所以轉(zhuǎn)錄可繼續(xù)進(jìn)展。反之 ,核糖體可順利通過兩個(gè)相鄰的 色氨酸

24、 密碼子 ,在 4 區(qū)被轉(zhuǎn)錄之前 ,核糖體就到達(dá) 2 區(qū),這樣使 2 - 3 不能配對(duì) , 3 - 4 區(qū)可以配對(duì)形成終止子構(gòu)造 , 轉(zhuǎn)錄停頓。終產(chǎn)物 Trp 對(duì)合成酶的反響抑制作用由于基因表達(dá)必然消耗一定的能源和前體物 ,相對(duì)于阻遏和弱化作用 ,反響抑制作用更為經(jīng)濟(jì)和高效。三分析題1SDS-PAGE 和雙向電泳的原理 SDS-PAGE 是利用 SDS(帶負(fù)電 )和復(fù)原劑破壞蛋白的高級(jí)構(gòu)造 , 同時(shí) SDS 與蛋白定量結(jié)合 , 消除蛋白之間的電荷差異 ,使得蛋白的遷移率主要依賴分子量 (分子小跑得快 ) .加上不連續(xù)電泳，即 上層為濃縮膠 ,可將樣品壓縮到同一起跑線 , 下層為別離膠 ; 可獲

25、得更高的分辨率 .再用考馬斯亮藍(lán)進(jìn)展染色 .即可進(jìn)展蛋白分子量專業(yè)資料整理WORD格式的測(cè)定、蛋白濃度的測(cè)定、蛋白的鑒定。雙向電泳是蛋白質(zhì)組學(xué)中對(duì)蛋白質(zhì)組進(jìn)展研究的主要?jiǎng)e離方法，同時(shí)能別離成百上千種蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)在第一向根據(jù)電荷的不同等電聚焦 ，第二向根據(jù)分子量的不同進(jìn)展別離SDS-PAGE。別離后對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)展染色， 根據(jù)實(shí)際分析情況，分別進(jìn)展考馬斯亮蘭染色、銀染或熒光染色。2順式作用元件工作的原理答：順式作用元件，包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、調(diào)控序列和可誘導(dǎo)元件。要與反式作用因子作用， 才能促進(jìn)基因表達(dá)， 而反式作用因子在 DNA 水平和轉(zhuǎn)錄水平上作用，且具有組織特異性。3DNA 序列與蛋白功能表型非線形關(guān)系答：基因具有強(qiáng)大的容錯(cuò)機(jī)制密碼子的簡(jiǎn)并性，即使DNA 錯(cuò)配發(fā)生在編碼區(qū)也不會(huì)影響蛋白的表達(dá)。 真核生物存在不表達(dá)蛋白的內(nèi)含子 基因間隔區(qū)、非編碼區(qū)等變異，不引起蛋白的變化。 變異發(fā)生在蛋白質(zhì)的非功能區(qū)，不影響蛋白質(zhì)的功能。4PCR 的原理，包括它的特異