維生素C含量測(cè)定方法綜述精學(xué)習(xí)教案

1、維生素維生素C含量含量(hnling)測(cè)定方法綜述精測(cè)定方法綜述精第一頁(yè)，共50頁(yè)。第1頁(yè)/共50頁(yè)第二頁(yè)，共50頁(yè)。第2頁(yè)/共50頁(yè)第三頁(yè)，共50頁(yè)。第3頁(yè)/共50頁(yè)第四頁(yè)，共50頁(yè)。CCCHOHOCHOOCHHOCH2OH第4頁(yè)/共50頁(yè)第五頁(yè)，共50頁(yè)。第5頁(yè)/共50頁(yè)第六頁(yè)，共50頁(yè)。第6頁(yè)/共50頁(yè)第七頁(yè)，共50頁(yè)。來(lái)測(cè)定維生素CCCOHOH第7頁(yè)/共50頁(yè)第八頁(yè)，共50頁(yè)。 原理原理(yunl)2，6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在酸性(sun xn)介質(zhì)中為紅色，堿性介質(zhì)中為藍(lán)色，與Vc反應(yīng)后，生成無(wú)色的還原型酚亞胺，因此，在酸性(sun xn)條件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶

2、液顯玫瑰紅色，即為終點(diǎn)；無(wú)需另加指示劑。第8頁(yè)/共50頁(yè)第九頁(yè)，共50頁(yè)。方法方法(fngf)取本品適量（約相當(dāng)于Vc50mg），用適量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸(c sun)試液20ml,再用水稀釋置刻度，搖勻；精密量取稀釋液適量（約相當(dāng)于Vc2mg）置50ml的錐形瓶中,加偏磷酸-醋酸(c sun)試液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液顯玫瑰紅色,并持續(xù)5s不褪；空白試驗(yàn)：取偏磷酸-醋酸(c sun)試液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。計(jì)算： (V-V0) F T WW 標(biāo)示(bio sh)量 標(biāo)示量%=反應(yīng)摩爾比反應(yīng)摩爾比100第9頁(yè)/共

3、50頁(yè)第十頁(yè)，共50頁(yè)。CCCHOHOCHOOCHHOCH2OHOClClNOHOHClClNOHCCOCHCOOOCHCH2OHHO 維生素C 2,6-二氯酚靛酚 維生素C 2,6-二氯酚靛酚（還原型） （氧化(ynghu)型，粉紅色） （氧化(ynghu)型） （還原型） + + = 第10頁(yè)/共50頁(yè)第十一頁(yè)，共50頁(yè)。第11頁(yè)/共50頁(yè)第十二頁(yè)，共50頁(yè)。222234622IS OIS O第12頁(yè)/共50頁(yè)第十三頁(yè)，共50頁(yè)。第13頁(yè)/共50頁(yè)第十四頁(yè)，共50頁(yè)。第14頁(yè)/共50頁(yè)第十五頁(yè)，共50頁(yè)。第15頁(yè)/共50頁(yè)第十六頁(yè)，共50頁(yè)。第16頁(yè)/共50頁(yè)第十七頁(yè)，共50頁(yè)。第17頁(yè)/

4、共50頁(yè)第十八頁(yè)，共50頁(yè)。第18頁(yè)/共50頁(yè)第十九頁(yè)，共50頁(yè)。HHHHHH第19頁(yè)/共50頁(yè)第二十頁(yè)，共50頁(yè)。第20頁(yè)/共50頁(yè)第二十一頁(yè)，共50頁(yè)。第21頁(yè)/共50頁(yè)第二十二頁(yè)，共50頁(yè)。第22頁(yè)/共50頁(yè)第二十三頁(yè)，共50頁(yè)。第23頁(yè)/共50頁(yè)第二十四頁(yè)，共50頁(yè)。原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果(ji gu)維生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有顯著差異，而片劑輔料旋光度保持不變差示旋光法消除輔料的影響，直接測(cè)出該制劑的含量討論討論與與第24頁(yè)/共50頁(yè)第二十五頁(yè)，共50頁(yè)。方法方法(fngf)TEXT1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取維生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸鈉

5、0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷卻(lngqu)的蒸餾水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液。TEXT原理原理(yunl)方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第25頁(yè)/共50頁(yè)第二十六頁(yè)，共50頁(yè)。2）比旋光度與溶液pH值的關(guān)系量取10.0mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)液于50mL量瓶中,用水稀釋至50mL。測(cè)定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氫氧化鈉(qn yn hu n)固體(每次約50mg),每次溶解后,測(cè)定一次溶液的pH及其旋光度,得到維生素C溶液的pH及旋光度關(guān)系原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第26頁(yè)/共50頁(yè)第二十七頁(yè)，共50頁(yè)。選定

6、選定(xun dn)pH為為2.2和和6.2第27頁(yè)/共50頁(yè)第二十八頁(yè)，共50頁(yè)。2）差示旋光度與溶液濃度(nngd)關(guān)系吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)液各兩份,分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容；一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容，靜置3min后,用220mm測(cè)定管，以前者為空白，測(cè)定后者的差示旋光度(a)。文獻(xiàn)結(jié)果：線性方程為a=0 205*C+ 005，r=09964原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第28頁(yè)/共50頁(yè)第二十九頁(yè)，共50頁(yè)。3）輔料干擾試驗(yàn)取混合(hnh)輔料20mg(淀粉、硬脂酸鎂、

7、EDTA、糊精等按處方比例混勻)兩份分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容,一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容,濾去不溶物,濾液在兩種pH值測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：輔料的差示旋光度為零，說(shuō)明輔料對(duì)維生素C含量的測(cè)定不干擾。原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第29頁(yè)/共50頁(yè)第三十頁(yè)，共50頁(yè)。4）穩(wěn)定性試驗(yàn)(shyn)同一測(cè)試樣品，在120min內(nèi)，每隔3min測(cè)定一次差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：差示旋光度基本不變?cè)碓?yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第30頁(yè)/共50頁(yè)第三十一頁(yè)，共50頁(yè)。5）回收率試驗(yàn)精密稱取維生素C精制品5

8、00.0mg兩份，分別(fnbi)置于50mL容量瓶中，各加入20mg輔料，分別(fnbi)用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液，測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：平均回收率為97.8，變異系數(shù)cv為1.03原理原理(yunl)方法方法(fngf)結(jié)果結(jié)果討論討論與與第31頁(yè)/共50頁(yè)第三十二頁(yè)，共50頁(yè)。方法方法(fngf)TEXT6）樣品測(cè)定(cdng)取維生素C片劑10片，稱重研碎后分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液(相當(dāng)于含Vc 20mg/mL)，濾去不溶物，測(cè)定(cdng)濾液的差示旋光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算其含量。TEXT原理原理(yunl)討論討論方法方法結(jié)果結(jié)果

9、與與第32頁(yè)/共50頁(yè)第三十三頁(yè)，共50頁(yè)。方法方法(fngf)TEXT1）維生素易被氧化,空氣及水中的氧均可使其氧化分解，配制溶液時(shí)使用新沸冷卻水,同時(shí)加人EDTA作為穩(wěn)定劑；2）樣品測(cè)定時(shí)，片劑部分物質(zhì)不能完全溶解，必須過(guò)濾除去(ch q)，然后測(cè)定濾液的差示旋光度。TEXT原理原理(yunl)討論討論方法方法結(jié)果結(jié)果與與第33頁(yè)/共50頁(yè)第三十四頁(yè)，共50頁(yè)。第34頁(yè)/共50頁(yè)第三十五頁(yè)，共50頁(yè)。第35頁(yè)/共50頁(yè)第三十六頁(yè)，共50頁(yè)。第36頁(yè)/共50頁(yè)第三十七頁(yè)，共50頁(yè)。第37頁(yè)/共50頁(yè)第三十八頁(yè)，共50頁(yè)。操作方法與結(jié)果（1）試紙的制備 2,6-二氯靛酚鈉 (DCP-Na)溶于

10、無(wú)水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，濾紙?jiān)谑⒂蠨CP-Na乙醇溶液的展開(kāi)缸中浸漬3min，邊浸邊搖展開(kāi)缸，使濾紙均勻著色，充分被染料溶液所飽和。取出懸掛于暗處，晾干后，立即放入干燥器中避光保存(bocn)，備用。 第38頁(yè)/共50頁(yè)第三十九頁(yè)，共50頁(yè)。（2）緩沖溶液的配制(pizh) 稱取檸檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，加入1M 氫氧化鈉 420ml，并用蒸餾水稀釋至刻度，此溶液的pH應(yīng)為3.5。否則，用酸或堿調(diào)整 pH值，保存于冰箱中。 第39頁(yè)/共50頁(yè)第四十頁(yè)，共50頁(yè)。3）掃描條件確定 在制備的染料試紙(shzh)上定量點(diǎn)上維生素C對(duì)照品進(jìn)行掃描 ，維 生素

11、C在 290nm 處有最大吸收，420nm處無(wú)吸收，故選擇1=290nm， 2=420nm雙波長(zhǎng)反射式鋸齒掃描。原理原理(yunl)方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第40頁(yè)/共50頁(yè)第四十一頁(yè)，共50頁(yè)。4）線性實(shí)驗(yàn)）線性實(shí)驗(yàn) 4.1）對(duì)照品溶液的配制）對(duì)照品溶液的配制 精密稱取維生素精密稱取維生素C標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品100mg，用緩沖溶液配成，用緩沖溶液配成lmg/ml的標(biāo)準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密稱取維生素溶液。精密稱取維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)準(zhǔn)溶液1、2、3、4、5ml，分別置于，分別置于10ml容量瓶中，用緩沖溶容量瓶中，用緩沖溶液稀釋至刻度。液稀釋至刻度。4.2）測(cè)定）測(cè)定 用用5l定量毛細(xì)管，分別吸取上述

12、溶液各定量毛細(xì)管，分別吸取上述溶液各5 l，點(diǎn)于試紙上，點(diǎn)于試紙上 。點(diǎn)樣后晾干，并。點(diǎn)樣后晾干，并將試紙將試紙 固定在固定在20cm20cm玻璃板上，放入薄層掃描儀。測(cè)定玻璃板上，放入薄層掃描儀。測(cè)定A 的積分值的積分值 (峰面積峰面積)作作為縱坐標(biāo)為縱坐標(biāo)Y ，點(diǎn)樣量為橫，點(diǎn)樣量為橫 坐標(biāo)坐標(biāo)X，得一直線，得一直線(zhxin)方程方程 Y=15692X+130225，r= 09991 原理原理(yunl)方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第41頁(yè)/共50頁(yè)第四十二頁(yè)，共50頁(yè)。方法方法(fngf)TEXT5）樣品的含量測(cè)定 取維生素 C片10片，研細(xì)，精密稱取平均片重一片的粉末，放入100ml

13、容量瓶中，加入緩沖液至刻度，振搖，使維生 素 C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml 移至10ml容量瓶中，用緩沖液稀釋至刻度。用 5 l定量毛細(xì)管點(diǎn)樣品溶液與不同濃度(nngd)的標(biāo)準(zhǔn)液于同一試紙上 ，然后掃描 測(cè)定峰面積，由工作曲線法計(jì)算維生素C片中的維生素C含量。TEXT原理原理方法方法結(jié)果結(jié)果討論討論與與第42頁(yè)/共50頁(yè)第四十三頁(yè)，共50頁(yè)。6）回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取維生素C對(duì)照(duzho)品20mg，其它原輔料適量，置 10ml容量瓶中，加緩沖液稀釋至刻度，振搖，濾過(guò) ，棄初濾液。分別吸取續(xù)濾液與對(duì)照(duzho)品維生 素 C液各5 l點(diǎn)于同一試紙上，按上述條件進(jìn)行掃描測(cè)定。第43頁(yè)/共50頁(yè)第四十四頁(yè)，共50頁(yè)。點(diǎn)樣時(shí)各點(diǎn)間距應(yīng)大于10mm，掃描測(cè)不定期波長(zhǎng)可做少量變