儀器分析-第十四章分子發(fā)光光譜法ppt課件

1、分子發(fā)光光譜法分子發(fā)光光譜法基本要求：基本要求：理解分子熒光和分子磷光的基本原理理解分子熒光和分子磷光的基本原理理解分子熒光激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、理解分子熒光激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、同步光譜和三維熒光光譜的含義同步光譜和三維熒光光譜的含義掌握分子熒光發(fā)射光譜的特性掌握分子熒光發(fā)射光譜的特性了解熒光光譜儀的組成和各部分作用了解熒光光譜儀的組成和各部分作用掌握熒光分析法和磷光分析法的主要掌握熒光分析法和磷光分析法的主要應(yīng)用范圍應(yīng)用范圍了解化學(xué)發(fā)光分析法的原理和應(yīng)用了解化學(xué)發(fā)光分析法的原理和應(yīng)用分子發(fā)光光譜法包括：光致發(fā)光分子熒光分子磷光化學(xué)發(fā)光生物發(fā)光靈敏度較紫外-可見吸收光譜法高幾個數(shù)量級。1 1 熒

2、光和磷光的基本機(jī)理熒光和磷光的基本機(jī)理分子熒光與磷光的產(chǎn)生：分子熒光與磷光的產(chǎn)生：01230123012S101240123S0S2T1T2內(nèi)轉(zhuǎn)換外轉(zhuǎn)換振動馳豫系間跨越1234吸收吸收熒光磷光p 對于大多數(shù)有機(jī)物分子，其電子數(shù)為偶數(shù)，凈自旋 之 和 為 S 0 ， 即 基 態(tài) 分 子 為 單 重 態(tài) M 2S+1=1）。p 分子處于激發(fā)態(tài)時，某個電子可能會改變自旋方向，即自旋平行，此時S1/2+1/2=1，分子處于這樣的激發(fā)態(tài)為三重態(tài)，以T表示。由于自旋平行比自旋配對的狀態(tài)更穩(wěn)定，因此三重態(tài)能級比單重態(tài)略低。p 根據(jù)光譜選律，分子直接被激發(fā)到三重態(tài)T1的概率比較小，因為是S0T1禁阻躍遷。分子

3、的去激發(fā)過程 速率最快，激發(fā)態(tài)壽命最短的途徑占優(yōu)勢。振動馳豫受激溶質(zhì)分子向溶劑分子轉(zhuǎn)移過剩的能量，以10-13s10-11s的極快速度熒光發(fā)射以10-9s10-7s左右的短時間內(nèi)發(fā)射光量子回到基態(tài)的各振動能級p 內(nèi)部轉(zhuǎn)換激發(fā)能轉(zhuǎn)化為熱能。其速度取決于此過程所包含的兩個能態(tài)之間的相對能量差。當(dāng)兩個電子能級非?？拷?，以至其振動能級有重疊時，內(nèi)部轉(zhuǎn)換十分容易發(fā)生。如兩個單重激發(fā)態(tài)或兩個三重激發(fā)態(tài)的較低激發(fā)態(tài)的高振動能級常常與較高激發(fā)態(tài)的低振動能級重疊，重疊的地方兩激發(fā)態(tài)能量一致，內(nèi)部轉(zhuǎn)換效率很高，速率很快，一般只需要10-13s10-11s的時間。p 外轉(zhuǎn)換激發(fā)態(tài)分子與溶劑和其它溶質(zhì)分子之間的相互作

4、用即能量轉(zhuǎn)換過程。它是熒光和磷光的競爭過程，因此該過程使發(fā)光強(qiáng)度減弱甚至消失，這種現(xiàn)象稱為“淬滅或“熄滅”。p 體系間跨越躍遷受激分子從激發(fā)單重態(tài)轉(zhuǎn)至能量較低的激發(fā)三重態(tài)。這一過程中分子的電子自旋倒轉(zhuǎn)，多重性發(fā)生變化。與內(nèi)部轉(zhuǎn)換一樣，如果兩能態(tài)的振動能級重疊，這種躍遷的概率增大。p 磷光發(fā)射經(jīng)過系間跨越后到達(dá)激發(fā)三重態(tài)，并經(jīng)過迅速的振動馳豫到達(dá)第一激發(fā)三重態(tài)T1的最低振動能級上，從T1態(tài)分子經(jīng)發(fā)射光返回基態(tài)稱為磷光發(fā)射。磷光發(fā)射屬于不同多重態(tài)之間的躍遷（ T1 S0 ），是“禁阻躍遷，因此磷光的壽命比熒光長得多，約為10-3s10s。p 由于分子結(jié)構(gòu)和所處環(huán)境不同，各去激發(fā)過程的速率不同。如熒

5、光發(fā)射過程較其它過程快，則可觀察到熒光現(xiàn)象。熒光的量子效率 發(fā)熒光的分子數(shù)與總的激發(fā)態(tài)分子數(shù)之比吸收的光子數(shù)發(fā)射的光子數(shù)iffKKKKf熒光發(fā)射過程速率常數(shù)，主要取決于分子結(jié)構(gòu)；Ki系間跨越、外轉(zhuǎn)換等其他無輻射躍遷的速率常數(shù)的總和，主要取決于環(huán)境。熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜熒光激發(fā)光譜固定發(fā)射波長，掃描激發(fā)波長得到的熒光強(qiáng)度激發(fā)波長的關(guān)系曲線，反映了在某一固定發(fā)射波長下，不同激發(fā)波長激發(fā)的熒光的相對效率。激發(fā)光譜用于進(jìn)行熒光測定時選擇恰當(dāng)?shù)募ぐl(fā)波長。熒光發(fā)射光譜固定激發(fā)波長，掃描發(fā)射波長得到的熒光強(qiáng)度發(fā)射波長的關(guān)系曲線，反映了在某一固定激發(fā)波長下，不同波長處分子的相對發(fā)射強(qiáng)度。熒光光譜用于進(jìn)行熒光

6、測定時選擇恰當(dāng)?shù)臏y定波長或濾光片。同步熒光光譜同時掃描激發(fā)和發(fā)射單色器波長的條件下，測繪光譜圖，所得熒光強(qiáng)度-激發(fā)波長或發(fā)射波長曲線為同步熒光光譜。 固定波長同步掃描熒光法：= em -ex不變 固定能量同步掃描熒光法：= (1/ex -1/em)不變 可變波長同步掃描熒光法：兩個單色器以不同的速率掃描特點：光譜簡化，譜帶窄化，減小光譜重疊，減小散射光的影響，選擇性提高，但損失其他光譜帶含有的信息并四苯的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜a）同步熒光光譜=3nmb）三維熒光光譜20世紀(jì)80年代發(fā)展起來，以熒光強(qiáng)度為激發(fā)波長和發(fā)射波長的函數(shù)得到的光譜圖，也稱為總發(fā)光光譜，等高線光譜等。 三維曲線光譜圖 平面顯示

7、的等強(qiáng)度線光譜圖特點：提高完整的光譜信息，可作為光譜指紋技術(shù)用于環(huán)境檢測和法庭試樣的判證。（a蒽和萘的三維熒光光譜圖（b8-羥基苯芘的等強(qiáng)度光譜圖熒光光譜的特征斯托克斯Stokes位移：在溶液中，熒光發(fā)射波長總是比其相應(yīng)的吸收激發(fā)光譜的波長長，該現(xiàn)象是1852年由Stokes發(fā)現(xiàn)，因此稱為Stokes位移。這種位移反映了熒光激發(fā)與發(fā)射間產(chǎn)生的能量損失來源于振動馳豫和溶劑的分子的馳豫作用）。鏡像對稱規(guī)則：吸收光譜形狀表明了第一激發(fā)態(tài)的振動能級結(jié)構(gòu)，熒光光譜形狀取決于基態(tài)中各振動能級的分布情況。一般基態(tài)中振動能級與第一激發(fā)態(tài)振動能級分布是類似的，因此熒光光譜的形狀和吸收光譜極為相似。苝的苯溶液的熒

8、光光譜和吸收光譜熒光光譜的特征熒光發(fā)射光譜的形狀與激發(fā)波長的選擇無關(guān)： 熒光物質(zhì)發(fā)射熒光的特性之一是不管引起物質(zhì)分子激發(fā)的波長是1還是2，熒光的波長都是3。 這是由于熒光分子無論被激發(fā)到哪一個激發(fā)態(tài)，處于激發(fā)態(tài)的分子經(jīng)振動馳豫即內(nèi)轉(zhuǎn)換等過程最終回到第一激發(fā)態(tài)的最低振動能級上，而分子熒光的發(fā)射總是從該能級躍遷到基態(tài)的各振動能級上，因此其形狀與激發(fā)波長無關(guān)。 反映在光譜圖上就是具有一個吸收帶和兩個吸收帶的不同物質(zhì)，一般都發(fā)射一個熒光譜帶個別例外）。p分子結(jié)構(gòu)p 躍遷類型：*量子效率高，因為躍遷摩爾吸光系數(shù)大100-1000倍，躍遷壽命短10-710-9s），n*（10-710-9s），其次，系間跨

9、越速率常數(shù)小p 共軛效應(yīng)：稠環(huán)化合物一般發(fā)強(qiáng)熒光p 取代基效應(yīng)：給電子基團(tuán)（-NH2, -OH, -OCH3, -NHCH3, -N(CH3)2等熒光增強(qiáng)，吸電子基團(tuán)（-Cl, -Br, -I, -NHCOCH3, -NO2, -COOH等熒光減弱p 結(jié)構(gòu)剛性效應(yīng)：平面剛性結(jié)構(gòu)有利于熒光發(fā)射, 熒光物質(zhì)吸附于固體表面可熒光增強(qiáng)影響熒光強(qiáng)度的因素COHHOOCOCOHHOOCOO酚酞，無熒光熒光素，強(qiáng)熒光氧橋鍵具有剛性平面結(jié)構(gòu)單鍵易旋轉(zhuǎn)，非剛性平面結(jié)構(gòu)p環(huán)境因素p 溶劑：介電常數(shù)、折射率、氫鍵，極性增加，*躍遷能量減小，熒光紅移p 溫度：溫度高，碰撞頻率增加，熒光效率下降p pH：酸性或堿性熒光

10、物質(zhì)影響大p 熒光猝滅：與溶劑或其他分子作用，熒光減弱稱為猝滅；引起熒光強(qiáng)度減弱的試劑稱為猝滅劑。動態(tài)猝滅碰撞靜態(tài)猝滅形成不發(fā)熒光化合物）p 內(nèi)濾作用：溶液中存在吸收激發(fā)光或發(fā)射光的物質(zhì)，導(dǎo)致熒光減弱，稱為內(nèi)濾自吸是一種內(nèi)濾）影響熒光強(qiáng)度的因素2-苯胺-6-萘磺酸的熒光發(fā)射光譜A 乙腈 B 乙二醇 C 30%乙醇-水 D 水8羥基喹啉在不同溶劑中的熒光表現(xiàn)溶劑溶劑介電常數(shù)介電常數(shù)熒光峰熒光峰/nm熒光效率熒光效率四氯化碳四氯化碳2.243900.002氯仿氯仿5.23980.041丙酮丙酮21.54050.055乙腈乙腈38.84100.064但是也有相反的情況，例如苯胺萘磺酸一類的化合物在戊

11、醇、丁醇、丙醇、乙醇和甲醇五種不同的醇溶液中，隨著溶劑極性增大，熒光效率減小。 由此可見，熒光峰的位置和強(qiáng)度與溶劑的關(guān)系，規(guī)律性不強(qiáng)，必須具體分子具體分析。熒光強(qiáng)度-168C-150C-78C 24C菲繞啉在聯(lián)二苯中不同溫度時的熒光光譜較高的溫度下，熱運動加快，溶質(zhì)分子與溶劑分子之間的碰撞機(jī)會增大，熒光效率下降。NH3+NH2NH-pH 13無熒光 藍(lán)色熒光 無熒光 金屬離子與有機(jī)試劑形成的熒光配合物，受pH的影響更大。一方面影響配合物的穩(wěn)定性，一方面影響配合物的組成。 例如，鎵離子與鄰二羥基偶氮苯在pH34溶液中形成1：1配合物，發(fā)熒光。在pH67溶液中則形成1：2配合物，不發(fā)熒光（ 1：2

12、 型平面結(jié)構(gòu)不存在） 。散射光和拉曼光對熒光分析的影響溶劑的瑞利散射光容器表面的散射光膠粒的散射光溶劑的拉曼光瑞利散射光溶劑分子吸收了頻率較低的光線后，不足以使分子中的電子躍遷到激發(fā)態(tài)，而只是上升到基態(tài)中較高的振動能級，并在極短的時間內(nèi)返回原能級，釋放與原激發(fā)光波長相同的光線，稱為瑞利散射光。沒有能量損失，而且在所有波長發(fā)生，波長越短，瑞利散射光強(qiáng)度越大。拉曼散射光和瑞利散射有關(guān)的另一種形式的散射光。它是由分子吸收了頻率較低的光上升到基態(tài)中較高的振動能級后，返回到稍高于或稍低于原來的能級時發(fā)射的光，其波長較激發(fā)光波長稍長或者稍短。一般說來，拉曼散射光比瑞利散射光弱。32032036036045

13、0450640640720720 （nmnm）熒光強(qiáng)度熒光強(qiáng)度硫酸奎寧水溶液在320nm光激發(fā)下熒光光譜中的各類型散射峰除了熒光峰之外，都會在空白試驗中出現(xiàn)。因此，當(dāng)熒光物質(zhì)的熒光峰與激發(fā)光波長靠近甚至重疊時，散射光會嚴(yán)重影響方法的靈敏度，應(yīng)設(shè)法減小或消除此影響。在測定前，先測空白溶液的發(fā)射光譜，然后選擇合適的激發(fā)波長。溶劑的散射光隨激發(fā)波長變化而變化，而熒光峰與激發(fā)波長無關(guān)，這樣通過改變激發(fā)波長即可消除散射的影響。320nm是一級瑞利散射光，640nm是二級瑞利散射光，450nm為熒光峰，360nm為水的一級拉曼光，720nm為水的二級拉曼光。2 2 分子熒光光譜儀分子熒光光譜儀光源光源入射

14、狹縫入射狹縫激發(fā)激發(fā)單色器單色器出射狹縫出射狹縫樣品池樣品池發(fā)射發(fā)射單色器單色器入射狹縫入射狹縫出射狹縫出射狹縫信號輸信號輸出裝置出裝置檢測器檢測器放大器放大器 光源氙燈和高壓汞燈、激光器 單色器激發(fā)單色器和發(fā)射單色器 樣品池四面透光的方形石英池 檢測器光電倍增管、電荷偶合元件檢測器可一次獲得熒光二維光譜3 3 分子熒光光譜的應(yīng)用分子熒光光譜的應(yīng)用 靈敏度高，檢測下限低靈敏度高，檢測下限低0.10.0010.10.001g/cm3g/cm3，熒光分析法的應(yīng)用廣泛，熒光分析法的應(yīng)用廣泛，可測定可測定6060余種元素，尤其是生物大分子的檢余種元素，尤其是生物大分子的檢測，還可以作為高效液相色譜及毛

15、細(xì)管電泳測，還可以作為高效液相色譜及毛細(xì)管電泳的檢測器。的檢測器。 定量分析：定量分析：FIaIaI0ItI0110-bc） I0 （1e-2.303bc） ! 4)2.303(! 3)2.303(! 22.30312.303! 4)2.303(! 3)2.303(! 2)2.303(2.3031324322.303-bcbcbcbcbcbcbcbcebc 對于很稀的溶液，即bc 0.05，此時上面的式子中第二項以后的各項可以忽略不計，即1e-2.303bc 2.303bcIf Ia I0 2.303bc因此，當(dāng)激發(fā)光強(qiáng)度一定，并且溶液濃度較小時，熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)濃度之間成正比：If Kc對

16、于較濃的溶液，其吸光度大于0.05時，熒光強(qiáng)度與濃度的線性關(guān)系將出現(xiàn)偏離。q 單組分直接測定q 單組分間接測定q 化學(xué)反應(yīng)轉(zhuǎn)化為熒光分子q 熒光猝滅法q 多組分的熒光測定q 熒光峰不重疊，選不同的發(fā)射波長；激發(fā)光譜明顯不同，熒光峰重疊，可選用不同的激發(fā)波長q 無機(jī)物分析：無機(jī)陽離子本身不發(fā)熒光，可與一些有機(jī)試劑形成熒光配合物，可以測定的元素已達(dá)60多種q 溶液單分子行為研究：羅丹明6G標(biāo)記DNAq 基因研究與檢測：DNA與小分子的相互作用等q 生物化學(xué)和生理醫(yī)學(xué)：能測定微量氨基酸和蛋白質(zhì)，還能研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，酶以及酶動力學(xué)和機(jī)理，細(xì)胞新陳代謝等q 藥物分析：分析低濃度的藥物，6巰基嘌呤是急性

17、白血病的重要藥劑，相關(guān)分析方法還較少。用高錳酸鉀將6巰基嘌呤氧化形成嘌呤6磺酸鹽，即可用熒光法進(jìn)行測定4 4 磷光光譜法磷光光譜法激發(fā)單重態(tài)與激發(fā)三重態(tài)振動能級重疊時，激發(fā)單重態(tài)與激發(fā)三重態(tài)振動能級重疊時，發(fā)生系間跨越，從激發(fā)單重態(tài)轉(zhuǎn)到能量較發(fā)生系間跨越，從激發(fā)單重態(tài)轉(zhuǎn)到能量較低的三重態(tài)，迅速振動馳豫到三重態(tài)最低低的三重態(tài)，迅速振動馳豫到三重態(tài)最低振動能級，在振動能級，在10-410-4秒至幾秒內(nèi)發(fā)射磷光回秒至幾秒內(nèi)發(fā)射磷光回到基態(tài)。到基態(tài)。磷光和熒光都是光致發(fā)光，磷光和熒光都是光致發(fā)光， 同樣具有兩個特同樣具有兩個特征光譜，即磷光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。征光譜，即磷光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜。當(dāng)激發(fā)光

18、強(qiáng)度一定和被測物質(zhì)濃度很低時，當(dāng)激發(fā)光強(qiáng)度一定和被測物質(zhì)濃度很低時，發(fā)射的磷光強(qiáng)度與濃度成正比。發(fā)射的磷光強(qiáng)度與濃度成正比。q三重態(tài)與基態(tài)間的能量差小，振動耦合強(qiáng)，增強(qiáng)了內(nèi)部轉(zhuǎn)換，非輻射躍遷的競爭大。q激發(fā)三重態(tài)的壽命長，同溶劑分子或其它溶質(zhì)分子碰撞概率大，在室溫下很少觀察到磷光現(xiàn)象。將溫度降低至液氮溫度77K），許多介質(zhì)均形成剛性玻璃體，碰撞和振動耦合降至最低限度，幾乎所有三重態(tài)得激發(fā)分子都會發(fā)出磷光。q室溫磷光：試樣固定在固體基體上、溶解在膠束溶液或環(huán)糊精溶液中，增強(qiáng)剛性，減少碰撞猝滅試樣管盛液氮的杜瓦瓶至發(fā)射單色器來自激發(fā)單色器磷光分析儀 測定磷光的儀器與熒光儀器基本相同。但為了在低溫下

19、測定，樣品試液的石英管必須放在盛液氮的杜瓦瓶中。因為發(fā)磷光的物質(zhì)常常發(fā)熒光，為了將二者分開，需一個附加的機(jī)械切光器，構(gòu)成磷光計。q磷光分子常用溶劑為按5：5：2比例混合的二乙醚：異戊烷：乙醇的化合物，稱為EPA混合溶劑，在液氮溫度時，成為透明的剛性玻璃體。q主要用于環(huán)境分析、藥物研究等。例如血清或血漿中乙酰水楊酸阿司匹林）、血清中普魯卡因、苯巴比妥等的測定。q磷光分析對于室溫下不發(fā)熒光或者熒光很弱，低溫下發(fā)磷光的十分有效。q熒光光譜重疊的兩組分，采用磷光分析有可能取得滿意的結(jié)果。例如吲哚和色氨酸的熒光光譜幾乎相同，但在低溫下磷光光譜易于區(qū)分。5 5 化學(xué)發(fā)光分析法化學(xué)發(fā)光分析法 化學(xué)反應(yīng)釋放的

20、能量激發(fā)了體系中化學(xué)反應(yīng)釋放的能量激發(fā)了體系中某種化學(xué)物質(zhì)分子，躍遷回基態(tài)產(chǎn)生的光發(fā)某種化學(xué)物質(zhì)分子，躍遷回基態(tài)產(chǎn)生的光發(fā)射。當(dāng)化學(xué)發(fā)光發(fā)生于生物體系時，稱為生射。當(dāng)化學(xué)發(fā)光發(fā)生于生物體系時，稱為生物發(fā)光。物發(fā)光。 提供足夠的能量提供足夠的能量 。通常是那些速度很快的。通常是那些速度很快的放能反應(yīng)，其焓變放能反應(yīng)，其焓變H H介于介于150150400KJ/mol400KJ/mol之間，多為氧化還原反應(yīng)。之間，多為氧化還原反應(yīng)。反應(yīng)歷程有利，激發(fā)生成大量的激發(fā)態(tài)分子。反應(yīng)歷程有利，激發(fā)生成大量的激發(fā)態(tài)分子。發(fā)光效率高?；瘜W(xué)激發(fā)效率發(fā)光效率高。化學(xué)激發(fā)效率發(fā)射效率發(fā)射效率化學(xué)發(fā)光的效率 化學(xué)發(fā)光

21、的發(fā)光效率CL又稱為化學(xué)發(fā)光的總量子產(chǎn)率：CL發(fā)光分子數(shù)/參加反應(yīng)的分子數(shù) CE EMCE為化學(xué)激發(fā)效率， EM為激發(fā)態(tài)分子的發(fā)光效率。 化學(xué)反應(yīng)的發(fā)光效率、光輻射的能量大小以及光譜范圍，完全由參加反應(yīng)的物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)決定，每一個化學(xué)發(fā)光反應(yīng)都有其特征的發(fā)光光譜和發(fā)光效率。普通CL都小于0.01。發(fā)光強(qiáng)度與反應(yīng)物濃度的關(guān)系 化學(xué)發(fā)光的發(fā)光強(qiáng)度ICL與化學(xué)發(fā)光效率CL和反應(yīng)物濃度之間具有如下關(guān)系：測量任一時間的發(fā)光強(qiáng)度就能確定此時反應(yīng)物的濃度。將上式積分，得化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度積分與反應(yīng)物濃度成正比，因此可以根據(jù)已知時間內(nèi)發(fā)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度積分與反應(yīng)物濃度成正比，因此可以根據(jù)已知時間內(nèi)發(fā)光總量實現(xiàn)反應(yīng)物的定

22、量。光總量實現(xiàn)反應(yīng)物的定量。dttdctICLCL)()(cdttdctICLCLCL)()(化學(xué)發(fā)光反應(yīng)類型 直接化學(xué)發(fā)光被測物參加反應(yīng)，產(chǎn)物發(fā)光A+B C*+DC* C+hv 間接化學(xué)發(fā)光被測物參加反應(yīng)，產(chǎn)物能量傳給其他分子，其他分子發(fā)光A+B C*+DC*+F C+F*F* F+hv測空氣中臭氧沒食子酸+O3 A*+O2 A*+羅丹明B 羅丹明B*+A 羅丹明B* 羅丹明B +hv 氣相化學(xué)發(fā)光反應(yīng) 臭氧與乙烯反應(yīng)生成激發(fā)態(tài)的甲醛而發(fā)光：CH2CH2O3 HCHO*HCOOH 此反應(yīng)發(fā)射光譜在300600nm，最大發(fā)射波長435nm。 臭氧與一氧化氮反應(yīng)生成激發(fā)態(tài)的二氧化氮：NOO3 N

23、O2*O2 此反應(yīng)發(fā)射光譜在600875nm。同樣SO2、CO等也與原子氧反應(yīng)發(fā)光，主要用于大氣污染監(jiān)測。 液相化學(xué)發(fā)光反應(yīng) 主要有魯米諾3-氨基苯二甲酰肼）、光澤精N,N-甲基二吖啶硝酸鹽），洛粉堿2,4,5-三苯基咪唑等。NHNHONH2OOOONH2O*H2O2OH-魯米諾，發(fā)光效率魯米諾，發(fā)光效率0.01-0.05，最低發(fā)射波長，最低發(fā)射波長425nm。NNONH2OH2O2OH-NNONH2ON2 +OO化學(xué)發(fā)光檢測儀器化學(xué)發(fā)光檢測儀器 化學(xué)發(fā)光分析的檢測儀器很簡單?；瘜W(xué)發(fā)光分析的檢測儀器很簡單。樣品池樣品池光檢測器光檢測器放大器放大器信號輸信號輸出裝置出裝置高壓穩(wěn)高壓穩(wěn)壓電源壓電源

24、n 化學(xué)發(fā)光反應(yīng)速度很快，因此樣品和反應(yīng)劑的混合與測定均在光電倍增管的窗口前進(jìn)行。n 利用注射器等將反應(yīng)劑和樣品以相同的方式加入樣品池，靠攪動或注射時的沖力混合，靜態(tài)下測定化學(xué)發(fā)光信號，根據(jù)峰面積或峰高進(jìn)行定量分析。n 樣品與反應(yīng)劑的混合、反應(yīng)以及檢測過程都在流動下進(jìn)行，其發(fā)光強(qiáng)度不能從頭到尾檢測，只能獲得其動力學(xué)曲線的一部分，利用峰高來定量，可進(jìn)行連續(xù)測定。化學(xué)發(fā)光分析的特點靈敏度高，特別是對于一些氣體及痕量金屬離子的測定，檢出限可達(dá)10-9級，個別達(dá)10-12級。設(shè)備簡單，操作方便，迅速，能進(jìn)行連續(xù)分析?；瘜W(xué)發(fā)光分析的應(yīng)用：環(huán)境監(jiān)測：毒氣臭氧、氮氧化物、一氧化碳、二氧化硫、硫化氫的檢測可達(dá)10-9，利用金屬離子催化魯米諾等體系的化學(xué)發(fā)光可檢測天然水和廢水中的金屬離子指示容量滴定的終點：魯米諾在過氧化氫和催化劑如Cu2+存在下，在pH8.0-8.5溶液中發(fā)光，可用作酸堿滴定的發(fā)光指示劑，特別適合于混濁液和深色溶液中進(jìn)行的酸堿滴定。化學(xué)