高效液相色譜法測定大黃蟲丸中芍藥苷的含量

1、高效液相色譜法測定大黃蟲丸中芍藥苷的含量【摘要】目的建立高效液相色譜法測定大黃蟲丸中芍藥苷含量的方法。方法采用HypersilDS2柱4.62505；流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液1585；柱溫30；檢測波長230n。結(jié)果芍藥苷線性范圍0.121.08g，平均回收率=98.78%，RSD=1.35%。結(jié)論該方法簡便、可靠、準確，可用于該制劑中白芍的質(zhì)量控制。【關(guān)鍵詞】大黃蟲丸芍藥苷高效液相色譜法Abstrat：bjetiveTestablishaethdfrdeterinatinfPaeniflrininDahuangZhehngPill.ethdsAnHPLethdasdevelpedand

2、theHypersilDS2lun4.62505asused.Thebilephaseasaetnitrile-0.1%rthphsphriaid(1585).Thedetetinavelengthasat230nandthelunteperatureas25.ResultsThereasagdlinearrrelatinshipintherangef0.121.08g,theaveragereveryas98.78%,RSD=1.35%.nlusinTheethdisnvenient,reliableandaurate.ItissuitablefrdeterinatinfthententfP

3、aeniflrininDahuangZhehngPill.Keyrds：DahuangZhehngPill;Paeniflrin;HPL大黃蟲丸收載于?中國藥典?2022年版部1，主要由熟大黃、土鱉蟲、水蛭、桃仁、白芍、黃芩等12味中藥組成，成效活血化淤，通經(jīng)消癥。用于瘀血內(nèi)停而致腹部腫塊、肌膚甲錯、經(jīng)閉不行等，臨床療效確切。但原藥為蜜丸，劑型落后，本實驗擬對其進展二次開發(fā)，原方中藥味較多，?中國藥典?含量測定只對方中熟大黃中大黃素進展了含量測定，對用量較大的白芍未進展定量，實驗采用高效液相色譜法建立了該藥中芍藥苷的含量測定方法，為進一步開發(fā)該制劑打下基矗1器材1.1儀器AngilentHP1

4、100高效液相色譜儀；G1314A紫外檢測器；KQ-500DE型超聲儀。1.2藥品大黃蟲丸廣東陽江制藥廠，批號051104，051218，060320；陰性樣品自制。1.3試劑及材料芍藥苷對照品批號中國藥品生物制品檢定所，批號0715-200211；高效液相使用乙腈為色譜純，水為高純水；其余試劑均為分析純。2方法2.1含量測定色譜條件色譜柱為AngilentHypersilDS2柱4.6250，5；流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液15:85；柱溫30；流速1.0l/in；檢測波長230n；進樣量10l。2.2對照品溶液的制備精細稱芍藥苷對照品適量，加甲醇制成每毫升含0.6g的溶液，作為對照品貯備

5、液。2.3標準曲線的繪制分別精細汲取對照品貯備液0.2，0.6，1.0，1.4，1.8l置10l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，備用。各精細汲取10l注入液相色譜儀中，測定，測得峰面積，以對照品進樣量為橫坐標，吸光度為縱坐標做標準曲線，線性范圍為0.121.08g，回歸方程Y=941.6X+6.2919，r=0.9999。2.4供試品溶液的制備取本品，研細，取約1g，精細稱定，置具塞錐形瓶中，精細加甲醇50l，稱定重量，超聲功率250，頻率40kHz，40處理40in，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精細量取續(xù)濾液10l，通過氧化鋁-活性炭柱(中性氧化鋁3g，濕法裝柱，上覆

6、層析用活性炭1g，甲醇預(yù)洗)，用甲醇50l洗脫，搜集洗脫液，水浴濃縮至適量，轉(zhuǎn)移至10l量瓶中，并加甲醇稀釋至刻度，搖勻，以微孔濾膜0.45濾過，作為供試品液。HPL圖譜見圖1。2.5陰性實驗按處方比例，制得缺白芍制劑，按供試品項下方法制備陰性樣品，進展高效液相測定，證明陰性無干擾。2.6精細度實驗取芍藥苷對照品溶液60.8g/l，重復(fù)進樣5次，測得峰面積分別為580.27545，580.94385，583.23654，582.19873，583.49573，RSD=0.24%,說明儀器精細度良好。2.7穩(wěn)定性實驗取供試品溶液批號051104，每隔2h進樣測定1次，共進樣6次，測得芍藥苷的峰面

7、積值分別為345.85455，348.25948，351.16549，347.02654，349.98742，346.14215。RSD=0.62%，說明樣品溶液在10h內(nèi)測定穩(wěn)定。2.8重復(fù)性實驗取樣品批號0511045份，按供試品制備項下分別提取，精制，測定，芍藥苷含量分別為1.8026，1.8374，1.8244，1.8149，1.7886(g/g)，RSD=1.04%，說明實驗重復(fù)性良好。2.9加樣回收率實驗取樣品批號0511045份，分別參加芍藥苷對照品適量，按樣品制備項下方法制備。結(jié)果見表1。表1芍藥苷加樣回收率實驗結(jié)果略2.10樣品測定分別取3批樣品，按供試品溶液制備項下制備供試

8、品，分別進樣，測定即得。測定結(jié)果見表2。表2不同批次樣品中芍藥苷的含量測定結(jié)果略?中國藥典?2022年版部中白芍藥材中芍藥苷含量不得少于1.6%，推算得知大黃蟲丸中芍藥苷含量應(yīng)不得少于1.44g/g，因此以上3批樣品含量均合格，二次開發(fā)制劑中芍藥苷的含量應(yīng)以此為根據(jù)。3討論原方中藥味較多，直接使用溶劑提取進展液相測定干擾較大，因此實驗考察了供試品制備方法中提取溶劑甲醇，稀乙醇、提取方法回流、超聲、提取時間20，40，60in、過柱上樣量、洗脫量的條件，結(jié)果以正文所述方法最好，樣品可以到達較好的別離。試比擬了3種流動相2：甲醇-水-冰醋酸49501；乙腈-0.1%磷酸溶液1585；乙腈-水(1387)，結(jié)果以流動相別離效果最好，應(yīng)選擇流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液1585。該含量測定方法簡便，快速，重現(xiàn)性好，既可以為進一步開