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文檔簡(jiǎn)介
1、選修1基礎(chǔ)知識(shí)點(diǎn)匯編 課題1果酒和果醋和制作一、果酒制作 1原理:菌種 ,屬于核生物,新陳代謝類型 ,有氧時(shí),呼吸的反應(yīng)式為: ;無氧時(shí),呼吸的反應(yīng)式為: 。2條件:繁殖最適溫度,酒精發(fā)酵一般控制在。(傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源)3菌種來源: 現(xiàn)在工廠化生產(chǎn)果酒,為提高果酒的品質(zhì),更好地抑制其它微生物的生長(zhǎng),采取的措施是 。4實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程圖 挑選葡萄沖洗_果酒 果醋5根據(jù)教材P4操作提示設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟及裝置。充氣口作用 ;排氣口作用 ;出料口作用 。排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是 。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉 ;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口 。6實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與評(píng)價(jià):可通過嗅覺和品
2、嘗初步鑒定,并用_檢驗(yàn)酒精存在。可觀察到的現(xiàn)象為. 。思考1為什么在酒精發(fā)酵過程中往往“先通氣后密封”?思考2酒精發(fā)酵過程中發(fā)生“先來水后來酒”現(xiàn)象,其原因是什么?思考3葡萄酒呈現(xiàn)深紅色的原因?思考4酵母菌是如何進(jìn)行生殖的?二、果醋的制作: 當(dāng) 、 都 時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成 ;當(dāng)缺少 時(shí),醋酸菌將 變?yōu)?,再將 變?yōu)?。1原理:菌種:_,屬于_核生物,新陳代謝類為_ 。醋酸生成反應(yīng)式是_。2條件:最適合溫度為_,需要充足的_。3菌種來源:到_ 或_ 購(gòu)買。4設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)流程及操作步驟: 果酒制成以后,在發(fā)酵液中加入_或醋曲,然后將裝置轉(zhuǎn)移至 0C條件下發(fā)酵,適時(shí)向發(fā)酵液中_。如果沒有充氣
3、裝置,可以將瓶蓋打開,在瓶蓋上紗布,三、操作過程應(yīng)注意的問題(1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。(2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約 的空間。目的是: (3)制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d左右,可通過 對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。(4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d,并注意適時(shí)通過 充氣。四、【疑難點(diǎn)撥】認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?2.認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如:榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;若發(fā)酵裝置是用帶蓋的瓶子釀酒,每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋(目的:排出
4、CO2,防止瓶子爆裂)、不要完全揭開瓶蓋,并且隨后再擰緊(為了盡量不讓氧氣進(jìn)入瓶中)等。3.制葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在1825 ?制葡萄醋時(shí),為什么要將溫度控制在3035 ?4.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過充氣口充氣?五、課題成果評(píng)價(jià)(一)果酒的制作是否成功發(fā)酵后取樣,通過嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定。此外,還可用顯微鏡觀察酵母菌,并用重鉻酸鉀檢驗(yàn)酒精的存在。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想,請(qǐng)學(xué)生分析失敗原因,然后重新制作。(二)果醋的制作是否成功首先通過觀察菌膜的形成、嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定,再通過檢測(cè)和比較醋酸發(fā)酵前后的pH作進(jìn)一步的鑒定。此外,還可以通過在顯微鏡下觀察發(fā)酵液中是否有醋酸菌,并統(tǒng)計(jì)其數(shù)
5、量作進(jìn)一步鑒定。在不滅菌的情況下,如何使酵母菌成為優(yōu)勢(shì)菌種?絕大多數(shù)微生物無法適應(yīng)缺氧、酸性環(huán)境。利用酵母菌兼性厭氧特點(diǎn),將混合菌置于缺氧、酸性環(huán)境下,可將酵母菌和其他好氧菌區(qū)分開。課題2腐乳的制作 一、腐乳制作的原理1腐乳的發(fā)酵有多種微生物的協(xié)同作用,如 、 、 、 等,其中起主要作用的是 。它是一種絲狀 ,常見于 、 、 、 上。新陳代謝類型是。2等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的分解成小分子的和;脂肪酶可以將水解成和。3傳統(tǒng)的腐乳制作中,豆腐塊上生長(zhǎng)的毛霉來自 。 現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的條件下,將優(yōu)良菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免,保證。二、腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程: 讓豆腐長(zhǎng)出毛霉 密
6、封腌制。三、實(shí)驗(yàn)材料含水量 的豆腐,粽葉,盤子,鹽,黃酒,米酒,糖,香辛料等,廣口玻璃瓶, 。四、實(shí)驗(yàn)步驟1將豆腐切實(shí)3cm3cm1cm若干塊2豆腐塊放在鋪有干粽葉的盤內(nèi),每塊豆腐等距離排放,豆腐上再鋪干凈粽葉,再用保鮮膜包裹。3將平盤放在溫度為的地方,毛霉逐漸生長(zhǎng),大約5d后,豆腐表面叢生直立菌絲。4當(dāng)毛霉生長(zhǎng)旺盛,呈淡黃色時(shí),去除保鮮膜及粽葉,散熱及水分,同時(shí)散去霉味約36h。5豆腐涼透后,將豆腐間的菌絲拉斷,整齊排在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制。6長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊(以下稱毛坯)分層擺放,分層加鹽,并隨層高而增加,在瓶口表面鋪鹽,以防止,約腌制8d。7將黃酒、米酒和糖、香辛料等混合制成鹵湯。鹵湯中酒精
7、含量控制在 為宜。(12)8廣口玻璃瓶刷洗干凈,用高壓鍋在1000C蒸汽滅菌30min,將腐乳成坯擺入瓶中,加入鹵湯和輔料后,將瓶口用 ,用膠條【疑難點(diǎn)撥】鹵湯的作用是調(diào)節(jié)腐乳的 色、香、味 ,并可以抑制微生物的生長(zhǎng)1王致和為什么要撒許多鹽,將長(zhǎng)毛的豆腐腌起來?鹽在該過程中起什么作用?2配制鹵湯時(shí),一般將酒精含量控制在12%左右,過高過低都不行,為什么?3.豆腐坯用食鹽腌制,其作用是什么? 4.腐乳在釀造后期發(fā)酵中添加適量酒的目的是什么?5.鹵湯中香辛料的作用是什么?6.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事?7.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?8.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外
8、部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有害嗎?它的作用是什么?五、課題成果評(píng)價(jià)(一)是否完成腐乳的制作學(xué)生是否完成腐乳的制作依據(jù)是:能夠合理地選擇實(shí)驗(yàn)材料與用具;前期發(fā)酵后 ,后期發(fā)酵制作 。(二)腐乳質(zhì)量的評(píng)價(jià)制作成功的腐乳應(yīng)該具有以下特點(diǎn): 。(三) 能否總結(jié)不同條件對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響。 思考:1用鹽量對(duì)腐乳制作有哪些影響?2發(fā)酵溫度對(duì)腐乳制作有什么影響?3發(fā)酵時(shí)間對(duì)腐乳制作有什么影響?原因:(1)相對(duì)面積大(即體表面積與體積的比很大),物質(zhì)交換的速率快。(2)對(duì)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化利用快。微生物所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)五大類:碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、水和無機(jī)鹽。呼吸作用的主要意義:(1
9、)為生物的生命活動(dòng)提供能量;(2)為其他化合物的合成提供原料課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1.培養(yǎng)基的種類包括 固體 培養(yǎng)基和 液體 培養(yǎng)基等。瓊脂是從紅藻中提取的 多糖 ,在配制培養(yǎng)基中用作為 凝固劑 。 2.【補(bǔ)充】培養(yǎng)基的類型及其應(yīng)用:標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基類型配制特點(diǎn)主要應(yīng)用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加入瓊脂較多菌種分離,鑒定,計(jì)數(shù)半固體培養(yǎng)基加入瓊脂較少菌種保存液體培養(yǎng)基不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn),連續(xù)培養(yǎng)化學(xué)組成合成培養(yǎng)基由已知成分配制而成,培養(yǎng)基成分明確菌種分類、鑒定天然培養(yǎng)基由天然成分配制而成,培養(yǎng)基成分不明確工業(yè)生,產(chǎn)降低成本目的用途鑒別培養(yǎng)基添加某種指示劑或化學(xué)藥劑菌種的鑒別選擇培養(yǎng)基添加(或缺少)某
10、種化學(xué)成分菌種的分離12 培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水 、 無機(jī)鹽 、 碳源 、 氮源 四類營(yíng)養(yǎng)成分。思考2從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來看,培養(yǎng)基中為什么都含有這些營(yíng)養(yǎng)成分? C、H、O、N、P、S是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的基本元素,約占原生質(zhì)總量的97以上。【補(bǔ)充】碳源:如CO2、糖類、脂肪酸等有機(jī)物,構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物,并提供能量。氮源:如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等,主要用來合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作為碳源,又可以作為氮源,如氨基酸等。3. 培養(yǎng)基除滿足微生物生長(zhǎng)的 pH 、 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 和 氧氣 等要求。【補(bǔ)充】生長(zhǎng)因子:某些微生物正常生長(zhǎng)代謝
11、過程中必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機(jī)小分子,如某些氨基酸、堿基、維生素等。思考3牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供 糖 、 維生素 和 有機(jī)氮 等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。思考4培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要添加 維生素 ,培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為 酸性 ,培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將pH調(diào)節(jié)為 中性或微堿性 。1. 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 防止外來雜菌的入侵 。2.無菌技術(shù)包括:(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行 清潔和消毒 ;(2)將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行 滅菌 ;(3)為避免周圍微生物污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 酒精燈火焰附近 旁進(jìn)行;(4)避免已滅菌處理的材料用具與 周圍物品 相接觸。比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度
12、消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能思考5無菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外,還具有的目的是 防止感染實(shí)驗(yàn)操作者 。4. 消毒方法:(1)日常生活經(jīng)常用到的是 煮沸 消毒法; (2)對(duì)一些不耐高溫的液體,則使用 巴氏 消毒法(作簡(jiǎn)要介紹);(3)對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑 石炭酸或煤酚皂 等溶液以增強(qiáng)消毒效果,然后使用 紫外線 進(jìn)行物理消毒。(4)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用 酒精 進(jìn)行消毒;(5)飲水水源用 氯氣 進(jìn)行消毒。5.滅菌方法:(1)接種環(huán)、接種針、試管口等使用 灼燒
13、滅菌法; (2)玻璃器皿、金屬用具等使用 干熱 滅菌法,所用器械是 干熱滅菌箱 ; 3)培養(yǎng)基、無菌水等使用 高壓蒸汽 滅菌法,所用器械是 高壓蒸汽滅菌鍋 。 (4)表面滅菌和空氣滅菌等使用 紫外線 滅菌法,所用器械是 紫外燈 。思考6對(duì)接種環(huán)滅菌時(shí)要用酒精燈的 充分燃燒 層火焰灼燒可能伸入試管或培養(yǎng)皿的部位。思考7利用干熱滅菌箱對(duì)玻璃器皿滅菌時(shí)物品不能擺得太擠,目的是避免妨礙熱空氣流通。思考8物品裝入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌后,要首先打開排氣閥,煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣,其目的是 有利于鍋內(nèi)溫度升高 ;隨后關(guān)閉排氣閥繼續(xù)加熱,氣壓升至 100k Pa,溫度為 121 ,并維持 1530 min;最后切
14、斷熱源,使溫度自然降溫,氣壓務(wù)必降至 零 時(shí)打開鍋蓋,其目的是防止 容器中的液體暴沸 【補(bǔ)充】培養(yǎng)基的配制原則:目的要明確:根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類型和配制量。營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào):培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。例如:碳氮比41時(shí),谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產(chǎn)生谷氨酸少;碳氮比為31時(shí),菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。pH要適宜:細(xì)菌培養(yǎng)基pH中性或偏堿性,霉菌培養(yǎng)基呈酸性。2實(shí)驗(yàn)操作 1)計(jì)算:根據(jù)配方比例,計(jì)算100mL培養(yǎng)基各成分用量。2)稱量:準(zhǔn)確稱取各成分。稱取牛肉膏和蛋白胨時(shí)動(dòng)作要迅速,目的是防止牛肉膏吸收空氣中水分。3)溶化:加水加熱熔化牛肉膏;加入蛋白胨
15、和氯化鈉繼續(xù)加熱;加入瓊脂;用蒸餾水定容到100mL。整個(gè)過程不斷用玻棒攪拌,目的是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。4)調(diào)pH:用1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至偏堿性。5 )滅菌:將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中,加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌;所用培養(yǎng)皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。6 )倒平板:待培養(yǎng)基冷卻至50在火焰旁右手拿錐形瓶,左手拔出棉塞; 右手拿錐形瓶,使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰;左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙,右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿,立刻蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后,將平板倒過來放置。思考1錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是消滅瓶口的雜菌,防止雜菌感染培養(yǎng)基。思考2倒平板的目的是防止培養(yǎng)基冷卻
16、過程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。思考3若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基,則該平板能否培養(yǎng)微生物?為什么?不能。空氣中雜菌會(huì)在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖,并污染皿內(nèi)培養(yǎng)基。思考4配制斜面培養(yǎng)基中,試管要加塞棉塞的目的是保持通氣并防止雜菌感染。思考5試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是增大接種面積。27 接種 1)微生物接種的最常用方法是平板劃線法和稀釋涂布法,另外還有穿刺接種和斜面接種等。2)平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。其操作步驟是:將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán),并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。將菌種試管口通過火焰達(dá)到
17、消滅試管口雜菌的目的。將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。將皿蓋打開一條縫隙,把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃35條平行線,蓋上皿蓋,不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。灼燒接種環(huán),冷卻后從第一區(qū)劃線末端開始向第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)上述過程,完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。思考6取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上的微生物;除第一次劃線外,其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種;取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行,其目的是防止高溫殺死菌種;最后灼燒接種環(huán)的目的是防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。思考7在第1次劃線后都
18、從上次劃線末端開始的目的是獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。3)稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋,并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí),即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。4)系列稀釋操作:取盛有9mL水的無菌試管6支,編號(hào)101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液注入編號(hào)為101試管中,并吹打3次,使之混勻。從101倍液中吸取1mL菌液注入到編號(hào)為102試管內(nèi)吹打均勻,獲得102倍液。依此類推。思考8操作中試管口和移液管應(yīng)在離火焰12cm處。整個(gè)操作過程中使用了1支移液管。3結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 1)培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是
19、對(duì)照,若有菌落形成,說明培養(yǎng)基滅菌不徹底。2)在肉湯培養(yǎng)基上,大腸桿菌菌落呈白色,為圓形,光滑有光澤,邊緣整齊。3)培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小不同(相同、不同);菌落分布位置相同(相同、不同)。原因是時(shí)間越長(zhǎng),菌落中細(xì)菌繁殖越多,菌落體積越大;菌落的位置不動(dòng),但菌落數(shù)增多。思考9在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落,原因有培養(yǎng)基滅菌不徹底或雜菌感染等。思考10頻繁使用的菌種利用臨時(shí)保藏法保存,長(zhǎng)期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后,保存在4冰箱中,每36個(gè)月轉(zhuǎn)種培養(yǎng)一次,缺點(diǎn)是保存時(shí)間較短,容易發(fā)生污染和變異;后者將菌種與無菌體積等量混合后保存在20(三)課堂總結(jié)、點(diǎn)
20、評(píng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基無菌技術(shù)純化大腸桿菌培養(yǎng)基的配制配制培養(yǎng)基的原則配制培養(yǎng)基的方法計(jì)算稱量溶化調(diào)pH分裝加棉塞滅菌倒平板平板劃線法稀釋涂布法系列稀釋平板涂布(四)實(shí)例探究例1關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽 D.無機(jī)氮源也能提供能量解析:不同的微生物,所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對(duì)微生物的具體情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng),它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同時(shí)是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同時(shí)是能源,如葡萄糖;有的碳源同時(shí)是氮源,也是能源,如蛋白胨。對(duì)于
21、C選項(xiàng),除水以外的無機(jī)物種類繁多,功能也多樣。如二氧化碳,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源;NaHC O3,可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽;而NaCl則只能提供無機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng),無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。答案:D例2下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是A.防止雜菌污染 B.消滅雜菌 C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌 D.滅菌必須在接種前解析:滅菌是微生物發(fā)酵過程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。A說的是滅菌的目的,因?yàn)榘l(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種,整個(gè)發(fā)酵過程不能混入其他微生物(雜菌),所以是正確的;B是錯(cuò)誤的,因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染,但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌,
22、而是消滅全部微生物。C是正確的,因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌;發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專門接種的,滅菌必須在接種前,如果接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。B編號(hào)成分含量粉狀硫10g(NH4)2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100ml例3右表是某微生物培養(yǎng)基成分,請(qǐng)據(jù)此回答:(1)右表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是 。(2)若不慎將過量NaCl加入培養(yǎng)基中。如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基,可再加入 ,用于培養(yǎng) 。(3)若除去成分,加入(CH2O),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。(4)表中營(yíng)養(yǎng)成分共有 類。(5)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化后
23、分裝前,要進(jìn)行的是 。(6)右表中各成分重量確定的原則是 。(7)若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分是 。答案:自養(yǎng)型微生物 含碳有機(jī)物 金黃色葡萄球菌 固氮微生物 3 調(diào)整pH 依微生物的生長(zhǎng)需要確定 瓊脂(或凝固劑)(五)鞏固練習(xí) 1不可能作為異養(yǎng)微生物碳源的是 A牛肉膏 B含碳有機(jī)物 C石油 D含碳無機(jī)物2根瘤菌能利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的組別是ANH3,(CH2O),NaCl BN2,(CH2O),CaCl2 C銨鹽,CO2,NaCl DNO2,CO2,CaCl23配制培養(yǎng)基的敘述中正確的是A制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂 B加入青霉素可得到放線菌C培養(yǎng)自生固氮菌不需氮源 D發(fā)酵工程一般用半固
24、體培養(yǎng)基4自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是A碳源 B氮源 C無機(jī)鹽 D特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)5下表是有關(guān)4種生物的能源、碳源、氮源和代謝類型的概述。其中正確的是( )生 物硝化細(xì)菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒狀桿菌能 源氧化NH3N2的固定分解糖類等有機(jī)物光 能碳 源C02糖類糖類糖類氮 源NH3N2NH4+、NO3-尿 素代謝類型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)兼性厭氧型自養(yǎng)需氧型A根瘤菌、谷氨酸棒狀桿菌 B硝化細(xì)菌、酵母菌C酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌 D硝化細(xì)菌、根瘤菌6甲、乙、丙是三種微生物,下表、是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在種正常生長(zhǎng)繁殖;甲能在中正常生長(zhǎng)繁殖,而乙和丙都不能;乙能在
25、中正常生長(zhǎng)繁殖,甲、丙都不能。下列說法正確的是 ( )粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10gNH)2SO40.4gH2O100mlMgSO49.25gCaCl20.5g+-+-+A、甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物 B、甲、乙、丙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C、甲固氮微生物、乙自養(yǎng)微生物、丙異養(yǎng)微生物 D、甲異養(yǎng)微生物、乙固氮微生物、丙自養(yǎng)微生物7微生物(除病毒外)需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過代謝來維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)的說法正確的是A乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B微生物生長(zhǎng)中不可缺少的一些微量的無機(jī)物稱為生長(zhǎng)因子 C培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物
26、的增殖越有利 D生長(zhǎng)因子一般是酶或核酸的組成成分,微生物本身合成這些生長(zhǎng)因子的能力往往不足。8某一種細(xì)菌株要從環(huán)境中提取現(xiàn)成的亮氨酸(20種氨基酸中的一種)才能生長(zhǎng),此菌株對(duì)鏈霉素敏感。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株,想篩選出表中細(xì)菌菌株類型。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)昴康?,選用的培養(yǎng)基類型是()注:亮氨酸鏈霉素“”加入“”不加入如:不加亮氨酸:加入鏈霉素選項(xiàng)篩選出不需要亮氨酸的菌株篩選出抗鏈霉素的菌株篩選出不需要亮氨酸的抗鏈霉素的菌株9要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他的細(xì)菌分離出來,應(yīng)將它們接種在 A加入氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上 B不加入氮源和不加殺菌劑的培養(yǎng)基上C加入氮源,不加殺菌劑的培養(yǎng)基上 D不含氮源和殺菌
27、劑的培養(yǎng)基上10酵母菌培養(yǎng)液中常含有一定濃度的葡萄糖,但當(dāng)葡萄糖濃度過高時(shí),反而抑制微生物的生長(zhǎng),原因是A碳源供應(yīng)太充足 B細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離C改變了酵母菌的pH值 D葡萄糖不是酵母菌的原料答案:DACAC CDBBB課余作業(yè) 、收集生活中與微生物有關(guān)的實(shí)例,并通過所學(xué)知識(shí)對(duì)其進(jìn)行解釋、我們打針輸液時(shí),首先要用酒精擦拭針刺處,為什么?新課程學(xué)教案 專題2 課題2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)一、基礎(chǔ)知識(shí) 1篩選菌株 (1)實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理:人為提供有利于 生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等),同時(shí) 或 其他微生物生長(zhǎng)。 (2)選擇培養(yǎng)基:在微生物學(xué)中,將允許 種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)
28、 和 其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。(3)配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù) 根據(jù)選擇培HYPERLINK /養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng) 微生物;培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng) ;的微生物.加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。 2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目(1)測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有 和 。(2)稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理 當(dāng)樣品的 足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的一個(gè) 。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。此外,測(cè)定
29、微生物數(shù)量的常用方法還有 直接計(jì)數(shù)。 3設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的 。例如為了排除培養(yǎng)基是否被雜菌污染了,需以培養(yǎng) 的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。 二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 關(guān)于土壤中某樣品細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)操作步驟如下: 1 取樣:從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中取樣。應(yīng)先 3 cm左右,再取樣,將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的 中。 2制備 :準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基 將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯 選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目,因此,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為 ,用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。 3微生物的 與觀察 將10g土樣加入盛有90
30、 mL無菌生理鹽水的錐形瓶中(體積為250 mL),充分搖勻,吸取上清液 ,轉(zhuǎn)移至盛有 的生理鹽水的無菌大識(shí)管中,將土樣以1、101、102 依次等比稀釋至107稀釋度,并按照由107103稀釋度的順序分別吸取 進(jìn)行平板涂布操作。每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基、1個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。 將涂布好的培養(yǎng)皿放在30溫度下培養(yǎng),及時(shí)觀察和記錄。 挑選選擇培養(yǎng)基中不同形態(tài)的菌落接入含 4細(xì)菌的計(jì)數(shù) 當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),選取菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下,至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù),然后求出 ,并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。三:思考與討論(1)如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品
31、中的菌落數(shù)?(2)為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎? 五、能力提升(能力提升,自測(cè)評(píng)估)1要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他的細(xì)菌分離出來,應(yīng)將它們接種在() A加入氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上 B不加入氮源和不加殺菌劑的培養(yǎng)基上C加入氮源,不加殺菌劑的培養(yǎng)基上 D不含氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上2將圓褐固氮菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上,經(jīng)過一段時(shí)間培養(yǎng),就能夠得到( )A菌絲 B無一定形態(tài)的群體 C單個(gè)細(xì)菌 D菌落3在接種操作的過程中,不正確的是( )A要將接種環(huán)灼燒滅菌 B取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌C將接種環(huán)伸入
32、試管內(nèi),先接觸長(zhǎng)菌多的部位 D接種后還要將管口滅菌加塞4高壓蒸氣滅菌的原理是( )A高壓使細(xì)菌DNA變性 B高壓使細(xì)菌蛋白質(zhì)凝固變性 C高溫燙死細(xì)菌 D高溫使細(xì)菌DNA變性5、尿素是尿素分解菌的氮源,因此在配制培養(yǎng)基時(shí)( )A葡萄糖在培養(yǎng)基中含量越多越好 B尿素分解菌無固氮能力,故培養(yǎng)基中的尿素為化合態(tài)氮C尿素分解菌有固氮能力,故培養(yǎng)基中尿素為無機(jī)氮D尿素在培養(yǎng)基中含量越少越好6、在做本課題實(shí)驗(yàn)時(shí),甲同學(xué)篩選出的菌落與其他同學(xué)不同,并且他在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)并沒有設(shè)置對(duì)照。思考下列問題: (1)你認(rèn)為出現(xiàn)甲同學(xué)這種結(jié)果的原因可能是什么?(2)要幫助甲同學(xué)排除可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素,需要設(shè)置 ,實(shí)驗(yàn)方案
33、有兩種:一種方案是可以由其他同學(xué)用與甲同學(xué) 進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果結(jié)果與甲同學(xué)一致,則證明甲同學(xué) ,如果結(jié)果不同,則證明甲同學(xué)存在操作 或 的配制有問題。另一種方案是將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加 的情況下進(jìn)行培養(yǎng),作為空白對(duì)照,以證明培養(yǎng)基是否受到 。(3)由此問題你得出的啟示是什么?7、在105稀釋度下求出3個(gè)平板上菌落數(shù)的平均值是63,那么每克樣品中的菌落數(shù)是多少?8、在微生物實(shí)驗(yàn)中,一般用瓊脂培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)菌等微生物,它在加熱后呈液化的溶膠狀態(tài),在室溫下又呈半透明的凝膠狀態(tài)。在凝膠狀態(tài)下其表面及內(nèi)部的不同部位可生長(zhǎng)大量的不同代謝類型的肉眼可見的細(xì)菌菌落。請(qǐng)用下列材料和用具,設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來判定某種細(xì)
34、菌的異化作用類型。材料用具“某種細(xì)菌菌菌種、瓊脂試管培養(yǎng)基2支,無菌接種設(shè)備、恒溫箱、水浴鍋。寫出實(shí)驗(yàn)過程: 實(shí)驗(yàn)可能會(huì)出現(xiàn)哪些結(jié)果?并對(duì)每一結(jié)果作出相應(yīng)的鑒定。專題2課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)參考答案:課前預(yù)學(xué)一、1(1)目的菌珠 抑制 阻止 (2)特定 抑制 阻止(3)自養(yǎng) 能固氮的微生物;2(1)有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。(2).稀釋度 細(xì)菌 30-300 顯微鏡 3.非測(cè)識(shí)因素 可信度 無雜菌污染二、1. 土壤,鏟去表層土。2. 培養(yǎng)基 多于 對(duì)照 3.培養(yǎng) 1ml 9ml 0.1mL 4.30-300 平均數(shù)三:思考與討論1統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)
35、計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值,再按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算2這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2185萬,放線菌數(shù)約為477萬,霉菌數(shù)約為23.1萬。因此,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。課堂導(dǎo)學(xué) 三、嘗試解題 1解析:碳源是提供碳元素的物質(zhì),氮源是提供氮元素的物質(zhì)。所以碳源是葡萄糖,氮源是尿素。絕大多數(shù)生物都能利用葡萄糖,但是,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,所以這種培養(yǎng)基對(duì)微生物有選擇作用。選擇的原則是只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(zhǎng)。 答
36、案:(1)葡萄糖 尿素 (2)有選擇作用。因?yàn)榇伺浞街心蛩厥俏ㄒ坏?,因此,只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長(zhǎng)。 啟示:選擇培養(yǎng)基篩選微生物的原理:人為提供有利于目的茵株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。 2 解析:在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí),一定要涂布至少3個(gè)平板作為重復(fù)組,才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性,所以 A、B不正確。C項(xiàng)雖涂布了3個(gè)平板,但是,其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另兩個(gè)相差太遠(yuǎn),說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,因此,不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。 答案:D啟示:在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí),一定要涂布至少3個(gè)平板作為重復(fù)組;在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),一定要考慮所設(shè)置的重復(fù)
37、組的結(jié)果是否一致,結(jié)果不一致,意味著操作有誤,需重新實(shí)驗(yàn)。 3 解析:將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目,因此,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對(duì)照。對(duì)照遵循的原則是單一變量,所以與選擇培養(yǎng)基一樣接種、培養(yǎng)。 答案:C 啟示:對(duì)照實(shí)驗(yàn)是指除了被測(cè)識(shí)的條件以外,其他條件都相同的實(shí)驗(yàn),其作用是比照實(shí)驗(yàn)組,排除任何其他可能原因的干擾,證明確實(shí)是所測(cè)識(shí)的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。五、能力提升 1、D 2、D 3、C 4、B 5、D6(1)可能的原因有兩種:一是由于土樣不同,二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。 (2) 對(duì)照實(shí)驗(yàn) 一樣的土樣 , 無誤, 失誤 培養(yǎng)基 土樣
38、污染。 (3)啟示:做實(shí)驗(yàn)時(shí)一定要設(shè)置對(duì)照。76.3107。8. .(2)將2支瓊脂培養(yǎng)基試管置于水浴鍋中加熱熔化;待培養(yǎng)基冷卻至凝固前,用無菌接種設(shè)備將某細(xì)菌接種于一試管培養(yǎng)基中,搖動(dòng)試管,使細(xì)菌均勻混于培養(yǎng)基內(nèi),另一支試管不接種作對(duì)照;將恒溫箱內(nèi)調(diào)至適宜的溫度,等瓊脂凝固后,將兩支試管置于恒溫箱內(nèi)培養(yǎng),每天觀察培養(yǎng)基的菌落并記錄,連續(xù)觀察幾天,直至結(jié)果清晰為止。(3)若某菌落只生長(zhǎng)在培養(yǎng)基表面則其為好氧性細(xì)菌;若某菌落只生長(zhǎng)在培養(yǎng)基底部,則其為厭氧性細(xì)菌;若試管培養(yǎng)基的內(nèi)部和表面均有菌落生長(zhǎng),則其為兼性厭氧細(xì)菌;對(duì)照試管若無菌落出現(xiàn)說明培養(yǎng)基滅菌和無菌操作合乎要求,若對(duì)照有菌落出現(xiàn),則說明
39、培養(yǎng)基滅菌操作不合乎要求,整個(gè)實(shí)驗(yàn)應(yīng)重做。課題3 分解纖維素的微生物的分離一、課題背景分析 纖維素是一種由 首尾相連而成的高分子化合物,植物每年產(chǎn)生的纖維素能被土壤中的某些微生物分解利用,是因?yàn)樗鼈兡墚a(chǎn)生 。對(duì)這些微生物的研究與利用,使人們能夠利用秸稈等廢棄物生產(chǎn) ,用 處理服裝面料等。二.基礎(chǔ)知識(shí): 1、纖維素在生物圈的分布狀況? 答:纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。植物的根、莖、葉等器官都含有大量的纖維素。其中 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。2、纖維素酶的組成及作用?纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 、 和 ,前兩種酶使纖維素分解成 ,第三種酶將 分解成葡萄
40、糖。(二)纖維素分解菌的篩選回答下列問題:1、纖維素分解菌的篩選方法 ,這種方法能夠通過顏色反應(yīng)直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選2、纖維素分解菌的篩選方法的原理 剛果紅是一種染料,它可以與纖維素形成 ,但并不和 、 發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解為中心的 。這樣我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌針對(duì)性練習(xí)1下列關(guān)于纖維素酶的說法,錯(cuò)誤的是DA、纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種 B、纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C、纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁 D、葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖三、實(shí)驗(yàn)操作 分離分解纖維素的微生物實(shí)驗(yàn)流程:土
41、壤取樣 梯度稀釋 。旁欄思考題本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同?提示:本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。土壤取樣采集土樣時(shí),應(yīng)選擇富含纖維素的環(huán)境。若找不到合適環(huán)境,可將濾紙埋在土壤中一個(gè)月左右,也會(huì)有能分解纖維素的微生物生長(zhǎng)。旁欄思考題取樣的環(huán)境是怎樣的,作出這種選擇的理由是什么?選擇 的環(huán)境,如樹林中多年落葉形成的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等等。根據(jù)生物與環(huán)境的互相依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中 的含
42、量相對(duì)提高,因此從這種土壤中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。旁欄思考題將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?提示:將濾紙埋在土壤中能使 ,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約 cm左右腐殖土壤中。(二)選擇培養(yǎng)1.選擇培養(yǎng)的目的:增加 ,以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。2.旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么? 是液體培養(yǎng)基,原因是配方中無凝固劑。這個(gè)培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?有選擇作用,本配方中的碳源是纖維素,所以能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn),說明選擇培養(yǎng)基的作用
43、用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基與之對(duì)照。3、選擇培養(yǎng) 將土樣加入裝有30ml選擇培養(yǎng)基的錐形瓶中,將錐形瓶固定在搖床上,在一定溫度下震蕩培養(yǎng)12天,直至培養(yǎng)液變渾濁。也可重復(fù)選擇培養(yǎng)旁欄思考題為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物?提示:在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用(三)梯度稀釋 按照課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋101107倍。將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上。(四)將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上1.制備培養(yǎng)基:參照課本旁欄中的比例配制。 2.倒平板
44、操作。 3.涂布平板:將稀釋度為104106的菌懸液各取0.1ml涂布到平板培養(yǎng)基上,30倒置培養(yǎng),菌落周圍會(huì)出現(xiàn)明顯的透明圈。4.挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(參照課本剛果紅染色法,挑選產(chǎn)生透明圈的菌落,一般即為分解纖維素的菌落。)(五)剛果紅染色法方法一:先 ,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)。方法二:在 時(shí)就加入剛果紅。旁欄思考題這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?提示:方法一 缺點(diǎn)是操作煩瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。 方法二 優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問題。缺點(diǎn)一是由于培養(yǎng)基中還含有淀粉類物質(zhì),可以使能產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng);缺
45、點(diǎn)二有些微生物具有降解色素的能力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅,形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。針對(duì)性練習(xí)2有關(guān)選擇培養(yǎng)正確的敘述是( A )A、可以增加纖維素分解菌的濃度 B、可以減少纖維素分解菌的濃度C、所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基 D、所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基四、結(jié)果分析與評(píng)價(jià) (一)培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落?設(shè)置對(duì)照,若對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中無菌落生長(zhǎng)則說明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。(二)分離的結(jié)果是否一致 如果不同,分析產(chǎn)生不同結(jié)果的原因。五、課題延伸本課題對(duì)分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選,但
46、是這只是分離純化的第一步。為確定得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行 的實(shí)驗(yàn),纖維素酶的測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進(jìn)行定量的測(cè)定。 選修1 專題3 課題1 菊花的組織培養(yǎng)一、植物組織培養(yǎng)的基本過程: 1、 細(xì)胞分化:在植物的個(gè)體發(fā)育過程中,細(xì)胞在 、 、 上產(chǎn)生 的過程,稱為細(xì)胞分化。 愈傷組織:離體的植物組織或細(xì)胞,在培養(yǎng)了一段時(shí)間以后,通過細(xì)胞分裂形成的細(xì)胞 而 、是一種 的呈 狀態(tài)的 細(xì)胞。 脫分化(也叫 ):由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生 的過程。 再分化:脫分化產(chǎn)生的 繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新 等器官的過程。2、植物組織培養(yǎng)的原理: 。3、植物組織培養(yǎng)過程:(在
47、 和 的條件下) 二、影響植物組織培養(yǎng)的因素: 1、植物材料的選擇:(材料的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成?。?不同植物組織,培養(yǎng)的 差別很大(所以植物材料的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易)。 同一植物材料的 、 等也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。(菊花的組織培養(yǎng),一般選擇 植株的莖上部 。)2、適宜的培養(yǎng)基: 常用的:MS培養(yǎng)基的主要成分:大量元素: ,微量元素: 、I、Co,有機(jī)物:甘氨酸、煙酸、肌醇、 、 等 植物激素: 、 、赤霉素等3、植物激素: 啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素是 和 。植物激素的濃度、使用的 、用量的 等,都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。激素的使用順序?qū)?shí)驗(yàn)結(jié)果影響
48、: 先使用生長(zhǎng)素,后使用細(xì)胞分裂素,有利于 ,但細(xì)胞 ;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素,細(xì)胞既 也 ; 同時(shí)使用, 頻率提高。激素的比例對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響:生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素,有利于 的分化; 生長(zhǎng)素60(1)酶活性最強(qiáng)時(shí)的pH是_。(2)蛋白塊消失的時(shí)間與酶活性強(qiáng)弱的關(guān)系是_。(3)請(qǐng)以2種方法改進(jìn)實(shí)驗(yàn),使實(shí)驗(yàn)在更短的時(shí)間內(nèi)完成。(4)在人體消化道中,能分泌本實(shí)驗(yàn)中酶的部位是_。(5)為確認(rèn)蛋白塊的消失是由于酶的作用,還應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行什么設(shè)計(jì) 答案 (1)2(2)酶活性越大,蛋白質(zhì)分解越快,蛋白塊消失的時(shí)間越短(3)方法:將題給溫度由25提高至大約37。方法:將原題中正方體蛋白塊處理得更?。ㄈ缜谐?
49、.50.50.5=0.125 cm(4)胃(答小腸不給分,因pH與題意不符)(5)另增加一個(gè)試管,放入等量的蛋白塊并將pH調(diào)得適當(dāng),但不加酶溶液例9、 DNA在NaCl溶液中溶解度有二重性,隨著NaCl溶液的變化而變化。(1)請(qǐng)?jiān)谙铝蠳aCl溶液中選出溶解度能使DNA析出最徹底的一種( )和溶解度最高的一種( )A. 0.14mol/l B. 2mol/l C. 0.15mol/l D. 0.3mol/l(2)DNA不溶于酒精溶液,但細(xì)胞中的某些物質(zhì)卻可以溶于酒精溶液,利用這一原理可以_,可以推測(cè)溶于酒精中的物質(zhì)可能有_。(3)利用DNA與_變藍(lán)色的特性,將該物質(zhì)作為鑒定_的試劑。其實(shí)驗(yàn)過程要
50、點(diǎn)是向放有_的試管中加熱4ml的_?;旌暇鶆蚝?,將試管置于_5min,待試管_,觀察試管中溶液顏色的變化,這個(gè)實(shí)驗(yàn)也說明DNA耐_溫。答案:(1)A;B (2)除去雜質(zhì);某些脂類、蛋白質(zhì)、糖類或其他大分子物質(zhì) (3)二苯胺;DNA;DNA;二苯胺試劑;沸水中水浴加熱;冷卻后;高例10、關(guān)于DNA在NaCl溶液中的溶解度,下面敘述中正確的時(shí)( D )隨著NaCl溶液濃度的增大,DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大隨著NaCl溶液濃度的減少,DNA在NaCl溶液中的溶解度也減少DNA在NaCl溶液中的溶解度與NaCl溶液的濃度無關(guān)當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14mol/l時(shí),DNA的溶解度最低例11
51、、在“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中,將提取獲得的含有DNA的粘稠物(還含有較多雜質(zhì))分別處理如下:放入0.14mol/l的NaCl溶液,攪拌后過濾,得濾液A和粘稠物a放入2mol/l的NaCl溶液,攪拌后過濾,得濾液B和粘稠物b放入冷卻的95%的酒精溶液中,攪拌后過濾,得濾液C和粘稠物c 以上過程獲得的濾液和粘稠物中因含DNA少而可以放棄的是 A、b、C 。專題4酶的研究課題2探討加酶洗衣粉的洗滌效果一、基礎(chǔ)知識(shí)(1.酶制劑;蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纖維素酶。 堿性蛋白酶、堿性脂肪酶;氨基酸、肽。 2.溫度、酸堿度、表面活性劑;基因工程)思考你能寫出蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶的作用示意
52、圖嗎?蛋白酶蛋白酶肽酶蛋白質(zhì)多肽氨基酸淀粉酶淀粉淀粉酶淀粉麥芽糖脂肪酶脂肪甘油脂肪酸 C1C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶纖維素纖維二糖氨基酸3在本課題中,我們主要探究有關(guān)加酶洗衣粉的三個(gè)問題:一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉對(duì)衣物污漬的 效果有什么不同;二是在什么溫度下使用加酶洗衣粉 最好,三是 的洗衣粉,其洗劑效果有哪些區(qū)別。(洗滌;效果;添加不同種類的酶)二、實(shí)驗(yàn)操作1探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉對(duì)衣物污漬的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)遵循的原則:實(shí)驗(yàn)變量為洗滌劑,設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)遵循 原則、 原則,有效地控制其他變量,如水的用量、污染物的量、所用實(shí)驗(yàn)用布的質(zhì)地大小、兩種洗衣粉的用量,攪拌及洗滌時(shí)間。(對(duì)照;控制單一變量
53、)(2)實(shí)驗(yàn)過程取兩只大燒杯并,用量筒分別量500mL蒸餾水放入其中,放入400C的水浴鍋保溫。(將制好的污染布和洗衣粉(一組為和,另一組為和)分別放入兩只燒杯中。(普通洗衣粉、污染布;加酶洗衣粉、污染布)用玻璃棒同時(shí)充分?jǐn)嚢钑r(shí)間,一段時(shí)間后攪拌可重復(fù)進(jìn)行。(相同)過相同的時(shí)間后觀察洗滌效果,探究加酶洗衣粉使用時(shí)的最適溫度。2不同種類的酶洗衣粉對(duì)同一污漬的洗滌效果(1)實(shí)驗(yàn)原理:不同種類的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有,所以對(duì)不同污漬的洗滌效果不同。(專一性)(2)實(shí)驗(yàn)過程:根據(jù)表格設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟編號(hào)污漬類型洗滌效果蛋白酶脂肪酶淀粉酶復(fù)合酶普通洗衣酶1雞血2牛奶3菜油4番茄汁5墨水6染料【疑難
54、點(diǎn)撥】1普通洗衣粉中包含哪些化學(xué)成分?提示:普通洗衣粉中通常包含有:表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白劑等成分,有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。2在本課題中你打算使用什么方法和標(biāo)準(zhǔn)判斷洗滌效果?提示:可在洗滌后比較污物的殘留狀況,如:已消失、顏色變淺、面積縮小等,3含有蛋白酶的洗衣粉的洗劑效果好,可以用絲綢作為實(shí)驗(yàn)材料嗎?不能。因?yàn)榻z綢的主要成分是蛋白質(zhì),它會(huì)被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,損壞衣物。4.酶能直接添加到洗衣粉中嗎?為什么?科學(xué)家是如何解決這一難題的?不能,因?yàn)橄匆路壑械谋砻婊钚晕镔|(zhì)會(huì)降低酶的活性。將基因工程生產(chǎn)出的酶用特殊水溶性物質(zhì)包裹起來,與洗衣粉的其它成分隔離
55、開來。5.為什么說加酶洗衣粉能減少對(duì)環(huán)境的污染?加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量,使洗滌劑朝低磷、無磷的方向發(fā)展。6.影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有哪些?閱讀課本資料一、資料二,結(jié)合已有的生活經(jīng)驗(yàn)可以知道,影響加酶洗衣粉洗滌效果的因素有水溫、水量、水質(zhì)、洗衣粉的用量,衣物的質(zhì)料、大小及浸泡時(shí)間和洗滌的時(shí)間等?!狙a(bǔ)充】普通洗衣粉的化學(xué)成分有:表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白粉等成分,有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素,以及填充劑等。三、課題成果評(píng)價(jià)本課題的評(píng)價(jià)可以分為三個(gè)方面:一是設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案是否思路清晰、科學(xué)性和操作性強(qiáng);二是實(shí)驗(yàn)報(bào)告是否全面,是否涵蓋了本課題所要求達(dá)到的目標(biāo)
56、;三是能否根據(jù)自己的探究成果,結(jié)合生活中的實(shí)際情況,設(shè)計(jì)一份宣傳板報(bào)或有關(guān)加酶洗衣粉的使用說明材料,供家人或本校的教職員工參考。學(xué)生完成課題后,應(yīng)該得出以下三方面的結(jié)論。1加酶洗衣粉與普通洗衣粉洗滌效果的比較分析。2各種不同品牌的加酶洗衣粉對(duì)油漬、血漬和奶漬等污物的不同的洗滌效果分析。3使用加酶洗衣粉時(shí)應(yīng)注意的一些事項(xiàng)。課題3酵母細(xì)胞的固定化一、基礎(chǔ)知識(shí)酶:優(yōu)點(diǎn):催化效率高,低耗能、低污染,大規(guī)模地應(yīng)用于食品、化工等各個(gè)領(lǐng)域。 實(shí)際問題(不足):對(duì)環(huán)境條件敏感,易失活;溶液中的酶很難回收,不能再次利用,提高了生產(chǎn)成本;反應(yīng)后的酶會(huì)混合在產(chǎn)物中,如不除去,會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量。 設(shè)想: 。(將酶固定在
57、不溶于水的載體上)固定化酶:優(yōu)點(diǎn) 。(酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時(shí),固定在載體上的酶可反復(fù)利用) 實(shí)際問題(不足):一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實(shí)踐中,很多產(chǎn)物的形成 都是通過一系列的酶促反應(yīng)才能得到的 設(shè)想: 。(酶是由細(xì)胞合成的,能否將合成酶的細(xì)胞直接固定)固定化細(xì)胞:優(yōu)點(diǎn) 。(成本低,操作更容易。對(duì)酶活性的影響更小,可催化一系列的反應(yīng),容易回收) 不足: 。(固定后的細(xì)胞中的酶與反應(yīng)物不容易接近,可能導(dǎo)致反應(yīng)效果下降。特別是大分子物質(zhì)難以自由通過細(xì)胞膜,因此,固定化細(xì)胞的應(yīng)用也受到限制。)類型優(yōu)點(diǎn)不足直接使用酶催化效率高,低耗能、低污染等。對(duì)環(huán)境條件非常敏感,容易失活
58、;溶液中的酶很難回收,不能被再次利用,提高了生產(chǎn)成本;反應(yīng)后酶會(huì)混在產(chǎn)物中,可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。固定化酶酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,同時(shí),固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng),而在生產(chǎn)實(shí)踐中,很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反應(yīng)才能得到的。固定化細(xì)胞成本低,操作更容易。固定后細(xì)胞中的酶與反應(yīng)物不容易接近,可能導(dǎo)致反應(yīng)效果下降等。二、固定化酶的應(yīng)用實(shí)例1、高果糖漿是指 。(果糖含量為42%左右的糖漿)2、高果糖漿的生產(chǎn)原理:葡萄糖異構(gòu)酶葡萄糖異構(gòu)酶果糖葡萄糖3、能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是 。使用固定化酶技術(shù),將這種酶固定在一種 上,再將這些酶顆粒裝到一個(gè)反應(yīng)柱內(nèi),柱子底端裝上分布著許多小孔的 。酶顆粒無法通過篩板的小孔,而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中,將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入,使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱,與 接觸,轉(zhuǎn)化成果糖,從反應(yīng)柱的下端流出
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