蛋白質(zhì)的分離、純化和相對分子量的測定課件_第1頁
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文檔簡介

Protein 蛋白質(zhì)的分離純化一、蛋白質(zhì)分離純化的一般原則總目標(biāo)：增加制品純度或比活1.預(yù)處理：因動(dòng)/植物/細(xì)菌而異2.粗提：采用鹽析/等電點(diǎn)沉淀/有機(jī)溶劑等方法將蛋白質(zhì)沉淀。3.精制：采用電泳技術(shù)和層析技術(shù)是不同蛋白質(zhì)分離。4.結(jié)晶二、蛋白質(zhì)的分離純化方法（一）根據(jù)分子大小不同的純化方法 1、透析和超過濾利用蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜將其 與小分子物質(zhì)分開半透膜為玻璃紙或纖維素材料血液透析小分子溶出小分子被帶出透析機(jī)透析液加壓血液2、密度梯度（區(qū)帶）離心6000080000轉(zhuǎn)/分重力60萬80萬倍3、凝膠過濾（二）利用溶解度差別的純化方法 1.等電點(diǎn)沉淀 調(diào)整溶液pH 不同蛋白在各自 pI處依次沉淀 2.鹽溶和鹽析3.有機(jī)溶劑分級分離法降低介電常數(shù)爭奪水化膜（三)根據(jù)電荷不同的分離方法電泳原理：蛋白質(zhì)在非等電點(diǎn)時(shí)所帶總電荷不為0分子大小不同，電場中移動(dòng)速度也不同2 離子交換層析雙向電泳離子交換層析（五）利用對配體的特異生物學(xué) 親和力的純化方法親和色譜顆粒具有極強(qiáng)的專一性六、蛋白質(zhì)含量測定和純度鑒定（略）

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