儀器分析資料完整版

1、名詞解釋1固定相：由層析基質(zhì)組成，包括固體物質(zhì)(如吸附劑、離子交換劑)和液體物質(zhì)(如固定在纖維素或硅膠上的液體)，這些物質(zhì)能與相關(guān)的化合物進行可逆性的吸附、溶解和交換作用。2流動相：在層析過程中推動固定相上的物質(zhì)向一定方向移動的液體或氣體。3保留時間：指被測組分從進樣開始到柱后出現(xiàn)濃度最大值所需的時間。4遷移時間：粒子在外加電場作用下在緩沖液中定向移動所消耗的時間。5靈敏度：一定濃度或者一定質(zhì)量的試樣進入檢測器后，產(chǎn)生一定的響應信號。響應信號對進樣量的變化率即為靈敏度。6校準曲線：表示被測“量”的實際值與計量器具的示值之間的關(guān)系(或特性)曲線。7分離選擇性：用某種分析方法分離測定某組分時，能夠

2、避免樣品中其他共存組分干擾的能力。8紫外截止波長：小于該波長輻射通過溶劑時，溶劑對此波長產(chǎn)生嚴重吸收。9調(diào)整保留時間：指扣除死時間后的保留時間。10保留因子：指一定溫度、壓力下，在兩相間達分配平衡時，組分在固定、流動相兩相間的分子數(shù)或物質(zhì)的量之比。11選擇性因子：指組分2的調(diào)整保留值與另一組分1的調(diào)整保留值之比。12檢出限：也稱敏感度，是指檢測器恰能產(chǎn)生和噪聲相鑒別的信號時，在單位體積或時間需向檢測器進入的物質(zhì)質(zhì)量。13定量校正因子：為了使檢測器產(chǎn)生的響應信號能真實地反映物質(zhì)的含量而對響應值進行校正的量。14正相-液液色譜法：即流動相的極性小于固定液極性的液-液法。15電滲流：是一種電動現(xiàn)象。

3、當一個電場加在一個帶電荷的表面（例如pH3的玻璃毛細管的內(nèi)壁）或者多孔的固體介質(zhì)（例如土壤）的兩端，同時該表面或介質(zhì)處在電解質(zhì)溶液中的時候，溶液會以某一固定的速度流動。16電泳：在外加電場的影響下，帶電的膠體粒子或離子在介質(zhì)中作定向移動的現(xiàn)象。17淌度：離子在給定介質(zhì)中單位時間和單位場強下移動的距離。與粒子的凈電荷、半徑及介質(zhì)粘度等有關(guān)。18焦耳熱：由兩端高電壓引起的電解質(zhì)離子流的自熱。載流導體中產(chǎn)生的熱量Q。19臨界膠束濃度：表面活性劑分子在溶劑中締合形成膠束的最低濃度即為臨界膠束濃度。20法拉第電流：在電極反應中，電荷通過電極溶液界面形成的電流，稱為法拉第電流法拉第電流引起的化學反應的量與

4、通過的電量成正比，即遵循法拉第定律，所以稱為法拉第電流。21充電電流：當溶液中沒有可在電極上起反應的雜質(zhì)時，殘余電流全部是電容電流。22殘留電流：外加電壓在未達到被測物質(zhì)的分解電壓之前，溶液中只有微小的電流通過，稱為殘余電流。23極限電流：電解時電極發(fā)生濃差極化，在微電極表面的金屬離子濃度隨著外加電壓的增加而迅速降低，直至實際上變?yōu)榱?，此時電流不再隨外加電壓的增加而增加，而受金屬離子從溶液本體擴散到達電極表面的速率所控制，并達到一個極限值，稱為極限電流。24指示電極：用來指示溶液中離子活度變化的電極,其電極電位值隨溶液中離子活度的變化而變化,在一定的測量條件下,當溶液中離子活度一定時,指示電極

5、的電極電位為常數(shù).參比電極:在進行電位測定時,是通過測定原電池電動勢來進行的,電動勢的變化要體現(xiàn)指示電極電位的變化,因此需要采用一個電極電位恒定,不隨溶液中待測離子活度或濃度變化而變化的電極作為基準,這樣的電極就稱為參比電極.25對電極：也就是反電極，陰極材料。比如鉑對電極、碳對電極等。用的最多的就是Pt對電極！26離子選擇性電極：是一種以電位法測量溶液中某種特定離子活度的指示電極。電極極化（濃差極化）：電極電位將偏離其原來的平衡電位而發(fā)生所謂極化現(xiàn)象，由于電解時在電極表面濃度的差異而引起的極化現(xiàn)象。27線性電位掃描：電壓隨時間的變化是一條直線。28三角波掃描：電壓隨時間的變化呈三角形。29電

6、噴霧離子化：用屬于一種軟電離源的噴霧離子源,使大質(zhì)量的有機分子生成帶多電荷的離子。這是大氣壓離子化技術(shù)。離子受力進入溶液（微滴），之后微滴在強靜電場中，被干燥的氣體氣化，這將使分子分裂，增加電荷濃度，增大帶同性電荷離子之間的推斥力，使之超過凝聚力，離子變?yōu)闅鈶B(tài)。30化學發(fā)光：簡稱為 CL分析法是分子發(fā)光光譜分析法中的一類，它主要是依據(jù)化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發(fā)光強度在一定條件下呈線性定量關(guān)系的原理，利用儀器對體系化學發(fā)光強度的檢測，而確定待測物含量的一種痕量分析方法。31濃差極化：電極上有電流通過時，電極表面附近的反應物或產(chǎn)物濃度變化引起的極化。32離子對試劑：是由強親水離子形成，

7、反作用于樣品分子的中性離子對。因此，可用于同時分離帶電分子和非帶電分子。33色譜分辨率：是定量描述混合物中相鄰兩組分在色譜柱中分離情況的主要指標。色譜分辨等于相鄰兩組分色譜峰保留值之差與兩個組分色譜峰基線寬度總和之半的比值。34zeta電位：Zeta電位又叫電動電位或電動電勢，剪切面（緊密層與擴散層的交界面）對遠離界面的流體中某點的電位即為zeta電位，是表征膠體分散系穩(wěn)定性的重要指標。35（表面活性劑）膠束：指當表面活性劑的正吸附到達飽和后繼續(xù)加入表面活性劑，其分子則轉(zhuǎn)入溶液中，因其親油基團的存在，水分子與表面活性劑分子相互間的排斥力遠大于吸引力，導致表面活性劑分子自身依賴范德華力相互聚集，

8、形成親油基向內(nèi)，親水基向外，在水中穩(wěn)定分散，大小在膠體級別的粒子。36（毛細管電泳）電動進樣：將毛細管的進樣端插入裝有試樣溶液的試管中，試樣管中插入電極與檢測端的緩沖液間施加進樣電壓，并維持一定時間，試樣溶液在電泳和電滲流作用下進入毛細管，然后再將試樣溶液換成載體緩沖液，電泳即將進行。37雙電層：電極與電解質(zhì)溶液界面上存在的大小相等符號相反的電荷層。38金屬電極電位：金屬浸于電解質(zhì)溶液中，顯示出電的效應，即金屬的表面與溶液間產(chǎn)生電位差，這種電位差稱為金屬在此溶液中的電位或電極電位。39電極電位：兩種導體接觸時，其界面的兩種物質(zhì)，可以是固固，固液，液液，因兩相中的化學組成不同，故將在界面處發(fā)生物

9、質(zhì)遷移，若進行遷移的物質(zhì)帶有電荷，則將在兩相之間產(chǎn)生一個電位差。40膜電位：當玻璃電極浸入被測溶液時，玻璃膜出于內(nèi)部溶液和待測溶液之間，跨越玻璃膜產(chǎn)生的電位差叫做膜電位。膜內(nèi)部溶液和外部溶液有不同的PH時，內(nèi)表面和外表面與溶液接觸而電荷分布不同，跨越膜兩側(cè)有一定的電位差，稱為膜電位。41擴散電位：電解質(zhì)的鹽溶液中當從濃度高的一側(cè)向濃度低的一側(cè)擴散時，在組成鹽的陰、陽兩種離子的淌度存在差別的情況下，濃度高的離子就領(lǐng)先，濃度低的離子就遲后，因為這種關(guān)系溶液中就產(chǎn)生了電位差，這就是擴散電位。42液接電位：在兩種組成不同或濃度不同的溶液接觸界面上，由于溶液中正負離子擴散通過界面的遷移率不相等，破壞界面

10、上的電荷平衡，形成雙電層，產(chǎn)生一個電位差。PH電極：是PH計上與被測物質(zhì)接觸的部分，用來測電極電位的裝置，通常為玻璃電極，即指示電極。43芯片液相：一種芯片技術(shù)與流式細胞術(shù)相結(jié)合的新技術(shù)。即將DNA、抗體等附著于微球表面作為探針，在液相中與待測物結(jié)合，再加入熒光標記的報道分子，借助流式細胞儀檢測微球表面熒光標記物。44微柱液相：各種原理1簡述液相色譜的檢測器的工作原理：紫外可見檢測器原理是基于被測試樣組分對特定波長紫外線的選擇性吸收，組分濃度與吸光度的關(guān)系遵守比爾定律。Lambert-Beer定律的具體內(nèi)容，即當一束單色光透過流動池時，若流動相不吸收光，則吸收度A與吸光組分的濃度C和流動池的光

11、徑長度L成正比.。特點：具有很高的靈敏度，對溫度和流速不敏感，可用于梯度洗脫，結(jié)構(gòu)簡單；缺點是不適用于對紫外光完全不吸收的試樣，溶劑的選用受限制。（B）熒光檢測器工作原理：熒光強度F與吸收光強度成正比.。對于稀溶液，熒光強度與熒光物質(zhì)溶液濃度、摩爾吸光系數(shù)、吸收池厚度、入射光強度、熒光的量子效率及熒光的收集效率等成正相關(guān)。在其他因素保持不變的條件下，物質(zhì)的熒光強度與該物質(zhì)溶液濃度成正比,這是熒光檢測器的定量基礎(chǔ)。熒光檢測器屬于溶質(zhì)型檢測器，可直接用于定量分析。（C）電導檢測器：電導檢測器的作用原理是根據(jù)物質(zhì)在某些介質(zhì)中解離后所產(chǎn)生的電導變化來測定解離物質(zhì)的含量。電導檢測器的響應受溫度影響較大，

12、因此要求嚴格控制溫度。它的特點是穩(wěn)定性較好，價格低，應用范圍廣。（D）安培檢測器：安培檢測器的工作原理是HPLC中被分離的電活性物質(zhì)流經(jīng)電極表面時，由于溶液與電極間的電勢差，電活性物質(zhì)會得到或失去電子，因此，溶液和電極間會發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移，形成電流，該電流的強度復合法拉第定律。通過記錄電流隨時間的變化即可得到電流和待測物的關(guān)系。它的特點是恒電位檢測、高靈敏度、高分辨率、操作比較簡便。（E）光電二極管陣列檢測器：紫外可見光度檢測器的一個重要進展，先使光源發(fā)出的紫外或可見光通過液相色譜流通池，在此被流動相中的組分進行特征吸收，然后通過入射狹縫進行分光，使所得含有吸收信息的全部波長，聚焦在陣列上同時被檢

13、測，并用電子學方法及計算機技術(shù)對二級管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)。（F）示差折光檢測器：借連續(xù)測定流通池中溶液折射率的方法來測定試樣濃度的撿測器，溶液的折射率是純?nèi)軇┖图內(nèi)苜|(zhì)的折射率乘以各物質(zhì)的濃度之和，因此溶有試樣的流動相和純流動相之間折射率之差，表示試樣在流動相中的濃度。（G）蒸發(fā)光散射檢測器：色譜柱1后的流出物在通向散射室7的途中與高流速N2混合形成微小均勻的霧狀液滴。流動相不斷蒸發(fā)，溶質(zhì)分子形成懸浮在溶劑蒸汽中的小顆粒，被氮氣載帶進入散射室，在此，溶脂顆粒受到激光束的照射。其散射光由光電二極管檢測產(chǎn)生電信號，電信號的強弱取決于散射室中溶質(zhì)顆粒的大小與數(shù)量。2HPLC進樣裝置：1注射器進樣裝置

14、，試樣用微量注射器刺過裝有彈性隔膜的進樣器，針尖直達上端固定相或多孔不銹鋼濾片，然后迅速按下注射芯，試樣以小滴的形式到達固定相床層的頂端，缺點是不能承受高壓，可采用停流進樣的方法。2高壓定量進樣閥。通過進樣閥直接向壓力系統(tǒng)內(nèi)進樣而不必停止流動相流動的一種進樣裝置。簡述反相液相色譜分離的原理：在高效液相色譜中認為溶質(zhì)在固定相上的保留主要是疏溶劑作用，當溶質(zhì)分子進入極性流動相后,即占據(jù)流動相中相應的空間,而排擠一部分溶劑分子。當溶質(zhì)分子被流動相推動與固定相接觸時,溶質(zhì)分子的非極性部分或非極性因子會將非極性固定相上附著的溶劑膜排擠開,而直接與非極性固定相上的烷基官能團相結(jié)合吸附形成締合絡合物,構(gòu)成單

15、分子吸附層。這種疏溶劑的吸附作用是可逆的,當流動相極性減少時,這種疏溶劑斥力下降,會發(fā)生解締,并將溶質(zhì)分子解放而被洗脫下來。反相色譜中疏水性越強的化合物越容易從流動相中擠出去,在色譜柱中滯留時間也長,所以反相色譜法中不同的化合物根據(jù)它們的疏水特性得到分離。3.毛細管電泳法的儀器裝置：主要包括高壓電源，毛細管，檢測器和兩個貯液槽。毛細管的兩端分別浸在含有同樣電解質(zhì)溶液的電極槽中，毛細管內(nèi)也充滿次緩沖液，一端為進樣端，另一端連接在線檢測器。4.毛細管電泳原理：電泳遷移：在高壓電場下，帶電離子向相反的方向移動。電滲遷移：當毛細管內(nèi)充滿緩沖溶液時，毛細管壁上的硅羥基發(fā)生解離，生成氫離子溶解在溶液中，這

16、樣就使毛細管壁帶上負電荷與溶液形成雙電層，在毛細管的兩端加上直流電場后，帶正電的溶液就會整體的向負極端移動，這就形成了電滲流。CE在操作緩沖溶液中，帶電粒子的運動速度等于電泳速度和電滲速度的矢量和，電滲速度一般大于電泳速度，因此即使是陰離子也會從陽極端流向陰極端。加大緩沖溶液的酸度、在緩沖溶液中加入有機試劑都會減少硅羥基的解離，減小電滲流分離模式。5.毛細區(qū)帶電泳（CZE）的原理和特點：分離原理：在整個分離區(qū)中充滿組成恒定的緩沖溶液，溶質(zhì)基于各自遷移速率的不同而分離。CZE是CE中最基本、應用最廣泛的分離模式，其條件選擇和控制也是其他分離模式的基礎(chǔ)，在條件的選擇上需要考慮的因素有緩沖溶液組成與

17、PH、電滲控制、電場強度、溫度等。CZE除了分離生物大分子（蛋白，肽，DNA，糖）外，還可以用于小分子（氨基酸，藥物）及離子（有機，無機）的分離，甚至還可以分離各種顆粒(硅膠顆粒）。6.毛細管凝膠電泳(CGE)的原理和特點：分離原理：以起”分子篩”作用的凝膠做支持物在毛細管內(nèi)進行的區(qū)帶電泳，按分子大小分離組分。毛細管內(nèi)填充凝膠或其他篩分介質(zhì)，如交聯(lián)或非交聯(lián)的聚丙烯酰胺。荷質(zhì)比相等，但分子的大小不同的分子，在電場力的推動下在凝膠聚合物構(gòu)成的網(wǎng)狀介質(zhì)中電泳，其運動受到網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的阻礙。大小不同的分子經(jīng)過網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)時受到的阻力不同，大分子受到的阻力大，在毛細管中遷移的速度慢；小分子受到的阻力小，在毛細管

18、中遷移的速度快，從而使它們得以分離。缺點：柱制備較困難，壽命偏短。常用于蛋白質(zhì)，寡聚核苷酸，RNA，DNA片段分離和測序。7.簡述膠束電動力學毛細管色譜（MEKC，MECC）的分離原理及特點：分離原理：涉及物質(zhì)在兩相間的分配。兩項之一是電泳移動的相，即帶電荷的分子或分子聚集體，稱為MECC的載體。一般以陰離子表面活性劑為載體，濃度大于其臨界膠束濃度，SDS在水中聚成球形膠束，電荷朝外，烷基藏于內(nèi)部，膠束表面具有較大的凈負荷，表現(xiàn)有較大的朝向陽極的電泳遷移率，但是多數(shù)緩沖液有較強的電滲流，方向朝陽極。電滲流略大于膠束移動，形成一個快速流動水相（緩沖液相）和慢速移動的膠束相（其作用類似于色譜固定相

19、，稱為準固定相），溶質(zhì)則在此兩相間分配。在MECC中，分離是借助疏水性和親水性的差異來實現(xiàn)的，疏水性強的溶質(zhì)保留大。除CZE的實驗條件外，還受膠束濃度，種類及性質(zhì)的影響。在小分子，中性化合物，手性對映體，各種藥物分析中受重視。特點：柱效高、分析速度快、分析時間短、樣品用量少、低耗、費用低、簡便，是唯一既能分離中性溶質(zhì)又同時能分離帶點組分的CE模式。8.簡述毛細管等電聚焦（CIEF)原理及特點：當向毛細管內(nèi)充有的兩性電解質(zhì)載體兩端施加直流電壓時，管內(nèi)將建立一個由陽極到陰極逐步升高的PH梯度。而蛋白質(zhì)分子是典型的兩性電解質(zhì)，所帶電荷與溶液PH有關(guān)，在酸性溶液中帶正電荷，在堿性溶液中則帶負電荷，當其

20、表現(xiàn)電荷數(shù)為零時溶液的PH稱為蛋白質(zhì)的等電點。不同蛋白質(zhì)具有不同的等電點。因此，不同等電點的蛋白質(zhì)在電場作用下，將遷移至管內(nèi)適當?shù)腜H梯度某些適當位置，形成一窄聚焦區(qū)帶而得到分離。9.簡述毛細管等速電泳（CITP）原理及特點：采用兩種不同的緩沖液系統(tǒng)，一種是前導電介質(zhì)，充滿整個毛細管柱，另一種稱尾隨電解質(zhì)，置于一端的貯液槽中，前者的淌度高于任何試樣組分，被分離的組分按其不同的淌度夾在中間以同一速率移動，實現(xiàn)分離。CITP是一種較老的方式，目前較多被用于其他CE分離模式中作為柱前濃縮手段用于富集試樣。簡述毛細管電滲色譜（CEC）的分離原理及特點：分離原理：在毛細管壁上結(jié)合涂漬或填充HPLC固定相

21、微粒，以試樣與固定相之間的相互作用為分離機制，以電滲流為驅(qū)動力推動流動相，使樣品分子根據(jù)它們在色譜固定相和流動相間吸附、分配平衡常數(shù)的不同和電泳速率不同而達到分離分析。特點：高效、高選擇性、高分辨率、快速和富集、預濃縮樣品，將HPLC發(fā)展的固定相引入到CE中，增加了選擇性，選擇性比毛細管電泳高，但又保持了CE的固有優(yōu)點， CEC的理論塔板數(shù)遠遠高于HPLC，分離柱效高，分離效率比HPLC高，是一種有發(fā)展前景的分離模式。10非水毛細管電泳：簡述毛細管電泳進樣技術(shù)中電動進樣與壓力進樣的方法與特點。電動進樣：用電滲作為推動流體前進的驅(qū)動力，整個流型呈扁平形的塞式流，使溶質(zhì)區(qū)帶在毛細管內(nèi)原則上不會擴散

22、。壓力驅(qū)動：使柱中流型呈現(xiàn)拋物線形，導致溶質(zhì)區(qū)帶本身擴散，引起柱效下降。離子選擇性電極的原理：是一類利用膜電勢測定溶液中離子的活度或濃度的電化學傳感器，當它和含待測離子的溶液接觸時，在它的敏感膜和溶液的相界面上產(chǎn)生與該離子活度直接有關(guān)的膜電勢。電極膜對特定的離子具有選擇性響應，并且電極膜的點位與待測離子含量之間的關(guān)系符合能斯特公式。11簡述離子選擇性電極的類型及原理：離子選擇性電極主要有以下幾類：晶體（膜）電極，均相膜電極，非均相膜電極，非晶體（膜）電極，剛性基質(zhì)電極，活動載體電極，敏化電極等。晶體（膜）電極，原理：由于晶格缺陷（空穴）引起離子的傳導作用。接近空穴的可移動離子移動至空穴中，一定

23、的莫電機，按其空穴大小、形狀、電荷分布，只能容納一定的可移動離子，而其他離子則不能進入，由此顯示選擇性。如硫化銀膜電極，氟離子選擇性電極，鹵化銀-硫化銀膜電極。剛性基質(zhì)電極，原理：選擇性主要取決于玻璃組成，改變組分的相對含量會使選擇性表現(xiàn)大的差異。如鈉玻璃電極，PH玻璃電極?；顒虞d體電極（液膜電極），原理：由浸有某種液體離子交換劑的惰性多孔膜作電極膜制成。通過液膜中敏感離子與溶液中的敏感離子交換而被識別和檢測。敏化電極是指氣敏電極、酶電極、細菌電極及生物電極等。這類電極的結(jié)構(gòu)特點是在原電極上覆蓋一層膜或物質(zhì)，使得電極的選擇性提高。典型電極為氨電極。以氨電極為例，氣敏電極是基于界面化學反應的敏化

24、電極，事實上是一種化學電池，由一對離子選擇性電極和參比電極組成。試液中欲測組分的氣體擴散進透氣膜，進入電池內(nèi)部，從而引起電池內(nèi)部某種離子活度的變化。而電池電動勢的變化可以反映試液中欲測離子濃度的變化。12簡述PH計測定PH的電化學原理：pH計以玻璃電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極。當玻璃電極浸入被測溶液時玻璃膜處于內(nèi)部溶液和待測溶液之間，這時跨越玻璃膜產(chǎn)生電位差。它與氫離子活度之間關(guān)系符合能斯特方程。13簡述液相色譜進樣器工作原理，使用中應注意哪些事項？與GC相比，HPLC柱要短得多，因此由于柱本身所產(chǎn)生的峰形展寬相對要小些。即，HPLC的展寬多因一些柱外因素引起。這些因素包括：進樣系統(tǒng)

25、、連接管道及檢測器的死體積。液相色譜進樣器是將樣品溶液準確送入色譜柱的裝置，進樣裝置包括兩種。1.隔膜注射進樣：使用微量注射器進樣。裝置簡單、死體積小。但進樣量小且重現(xiàn)性差。2.高壓進樣閥：目前最常用的為六通閥。由于進樣量可由樣品管控制，因此進樣準確，重復性好使用注意事項:1.過濾樣品，確保樣品中不含固體顆2.用流動相或比流動相弱的溶劑溶解樣品3.合適的進樣體積，比如定量環(huán)為20ul，進樣體積應為010ul，或者20ul，進樣20ul時注射樣品量應至少60ul以上。4.定期清洗進樣閥，14簡述離子對色譜的分離原理與應用特點：離子對色譜法是將一種（或多種）與溶質(zhì)分子電荷相反的離子（稱為對離子或反

26、離子）加到流動相或固定相中，使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子對化合物，從而控制溶質(zhì)離子的保留行為。特點：離子對色譜法，特別是反相離子對色譜法解決了以往難分離混合物的分離問題，諸如酸、堿和離子、非離子的混合物，特別是一些生化試樣如核酸、核苷、兒茶酚胺、生物堿以及藥物等的分離。另外，還可以借助離子對的生成給試樣引入紫外吸收或發(fā)熒光的基團，以提高檢測的靈敏度。15簡述毛細管開管柱與填充柱的特點：開管柱：用內(nèi)壁上涂附有固定相的空心的毛細管柱進行組分分離的色譜法。與填充柱色譜法相比，其分離效率高、分析速度快、樣品用量少。填充柱的填料可以是多孔性粒狀系縛劑或在惰性載體顆粒表面均勻的涂敷一層很薄的固定液膜。

27、填充柱常用內(nèi)徑2-5mm，長0.5-10m的金屬管或玻璃管。填充柱制備簡單，可供選用的載體、固定液、吸附集種類很多，因而具有廣泛的選擇性，有利于解決各種各樣組分的分離分析問題，應用比較普遍。此外，填充柱的樣品負荷量大，可用于制備色譜其缺點是柱滲透性較小，傳質(zhì)阻力較大，柱子不能過長，因而分離效率較低16電位滴定法的原理：利用指示電極電位的突躍來指示滴定終點。進行電位滴定時，在待測溶液中插入一個指示電極，并與一參比電極組成一個工作電池。隨著滴定劑的加入，由于發(fā)生化學反應，待測離子或與之有關(guān)的粒子的濃度不斷變化，指示電極電位也發(fā)生相應的變化，而在化學計量點附近發(fā)生電位的突躍，因此，測量電池電動勢的變

28、化，就能確定滴定終點。17簡述內(nèi)標法的特點，及內(nèi)標物的選擇原則內(nèi)標法的特點：當只需要測定試樣中某幾個組分，而且試樣中所有組分不能全部出峰時，可采用此法。內(nèi)標法是一定量的純物質(zhì)作為內(nèi)標物。內(nèi)標物的選擇是重要的。它是試樣中不存在的純物質(zhì)；加入的量應接近于被測組分；同時要求內(nèi)標物的色譜峰位于被測組分色譜峰附近，或幾個被測組分色譜峰的中間，并與這些組分完全分離；還應注意內(nèi)標物與欲測組分的物理及物理化學性質(zhì)（如揮發(fā)度，化學結(jié)構(gòu)，極性以及溶解度等）相近，這樣，當操作條件變化時，更有利于內(nèi)標物及欲測組分做均勻的變化。 18電位分析法基本原理：電位分析法是利用物質(zhì)的電化學性質(zhì)進行分析的一大類分析方法。電化學分

29、析法主要包括電位分析法、庫侖分析法和伏安分析法與極譜分析法等。包括直接電位法和電位滴定法。直接電位法是利用專用電極將被測離子的活度轉(zhuǎn)化為電極電位后加以測定，如用玻璃電極測定溶液中的氫離子活度，用氟離子選擇性電極測定溶液中的氟離子活度1（見離子選擇性電極）。電位滴定法是利用指示電極電位的突躍來指示滴定終點。兩種方法的區(qū)別在于：直接電位法只測定溶液中已經(jīng)存在的自由離子，不破壞溶液中的平衡關(guān)系；電位滴定法測定的是被測離子的總濃度。電位滴定法可直接用于有色和混濁溶液的滴定。在酸堿滴定中，它可以滴定不適于用指示劑的弱酸。能滴定K小于510-9的弱酸。在沉淀和氧化還原滴定中，因缺少指示劑，它應用更為廣泛。

30、電位滴定法可以進行連續(xù)和自動滴定。循環(huán)伏安法基本原理：一種常用的電化學研究方法。該法控制電極電勢以不同的速率，隨時間以三角波形一次或多次反復掃描，電勢范圍是使電極上能交替發(fā)生不同的還原和氧化反應，并記錄電流-電勢曲線。根據(jù)曲線形狀可以判斷電極反 應的可逆程度，中間體、相界吸附或新相形成的可能性，以及偶聯(lián)化學反應的性質(zhì)等。常用來測量電極反應參數(shù)，判斷其控制步驟和反應機理，并觀察整個電勢掃描范圍內(nèi)可發(fā)生哪些反應，及其性質(zhì)如何。對于一個新的電化學體系，首選的研究方法往往就是循環(huán)伏安法，可稱之為“電化學的譜圖”。本法除了使用汞電極外，還可以用鉑、金、玻璃碳、碳纖維微電極以及化學修飾電極等。19三電極體

31、系工作原理：三電極即在滴汞電極和參比電極之外還增加了一個輔助電極（也稱對電極），以確保滴汞電極的電位完全受外加電壓所控制，而參比電極則保持恒定。三電極體系含兩個回路，一個回路由工作電極和參比電極組成，用來測試工作電極的電化學反應過程，另一個回路由工作電極和輔助電極組成，起傳輸電子形成回路的作用。在三電極體系中，當參比電極和工作電極間的電位差產(chǎn)生偏離時，其偏差信號通過參比電極電路反饋回放大器的輸出端，調(diào)整放大器的輸出使工作電極電位恢復到預計值，于是工作電極就能完全受外加電壓U的控制，起到消除電位失真的作用。20極譜分析原理：在微電極表面的金屬離子（ Cd2+ ）的濃度隨著外加電壓的增加而迅速降低

32、，直至實際上變?yōu)榱悖藭r電流不再隨外加電壓的增加而增加，而受Cd2+從溶液本體擴散到電極表面的速度所限制，并達到一個極限值，稱為極限電流，其擴散速度與溶液本體Cd2+濃度有關(guān)，因此根據(jù)極限電流即可測定溶液中金屬離子的濃度。21極譜定性定量基礎(chǔ)：波的高度（擴散電流id）與溶液中Cd2+的濃度有關(guān)，這就是極譜定量分析的依據(jù)。電流等于擴散電流一半時的滴汞電極的電位則稱為半波電位E1/2，不同物質(zhì)在相同條件下具有不同的E1/2，這就是極譜定性分析的依據(jù)。22溶出伏安法：又稱反向溶出極譜法，這種方法是使被測的物質(zhì)，在待測離子極譜分析產(chǎn)生極限電流的電位下電解一定的時間，然后改變電極的電位，使富集在該電極上

33、的物質(zhì)重新溶出，根據(jù)溶出過程中所得到的伏安曲線來進行定量分析。原理：溶出安伏法包含電解富集和電解溶出兩個過程首先是電解富集過程它是將工作電極固定在產(chǎn)生極限電流電位進行電解，使被測物質(zhì)富集在電極上為了提高富集效果，可同時使電極旋轉(zhuǎn)或攪拌溶液，以加快被測物質(zhì)輸送到電極表面富集物質(zhì)的量則與電極電位、電極面積、電解時間和攪拌速度等因素有關(guān)。基本過程：預電解目的是富集。在一定底液和攪拌條件下，進行恒電位電解，將被分析物富集于工作電解上。富集物質(zhì)的量與電解的電極電位、電極面積、電解時間和攪拌速度等因素有關(guān)。其預電解電位，在理論上應比該條件下的半波電位負0.2/n伏；在實際上應比該條件下的半波電位負0.2-

34、0.5伏。電解時間，因電極的種類和被分析物的濃度不同而不同。一般說來，對一定的電極而言，被分析物的濃度愈低預電解時間愈長。對懸汞電極，當濃度為10-6mol/L時，需要5分鐘；10-9mol/L時，需要60分鐘。休止期目的是使電極上的電解沉積物均勻分布。減小電解電流或停止攪拌一定時間。一般為3-4分鐘。溶出目的是產(chǎn)生溶出伏安曲線。溶出過程的電位變化方向與預電解過程相反；對于陽極溶出來說，工作電極電位逐漸變正；對于陰極溶出來說，工作電極電位逐漸變負。23安培檢測：分光光度計的一起構(gòu)造及其定量分析原理：光源，單色器，比色皿，檢測器和顯示器五大部分。光源發(fā)出的光經(jīng)入口狹縫及反射鏡反射到光柵，色散后經(jīng)

35、出口狹縫得到所需波長的單色光束。然后光束分別由反射鏡反射到試樣池和參比池上，光電倍增管接受其通光量，接微型計算機處理數(shù)據(jù)。原理：利用可見光及紫外光之燈管作為光源，通過濾光鏡調(diào)整色調(diào)后，經(jīng)聚焦后通過單色光分光棱鏡，在經(jīng)過狹縫選擇波長，使成單一且特定波長的光線，而后射入樣品管中的水樣中，最后射入光電管中將光能轉(zhuǎn)換為電器訊號，藉由樣本及空白水樣間所吸收的光能量差，標準溶液的能量吸收值相比較，便可標定樣本中的待測物濃度。24液相色譜法有幾種類型？他們的保留機理是什么？樣品組分的出峰次序如何？在這些類型的應用中，最適宜分離的物質(zhì)是什么？液相色譜法的類型有：液液分配色譜法、化學鍵合色譜法、液固色譜法、離子

36、交換色譜法、離子對色譜法、空間排阻色譜法等。其中，（1）液液分配色譜法保留機理是：試樣組分在固定相和流動相之間的相對溶解度存在差異，因而溶質(zhì)在兩相間進行分配。分配系數(shù)越大，保留值越大；適用于分離相對分子質(zhì)量為200到2000的試樣，不同官能團的化合物及同系物等。（2）化學鍵合色譜法保留機理和最適宜分離的物質(zhì)與液液分配色譜法相同。（3）液固色譜法保留機理是：根據(jù)物質(zhì)吸附作用不同來進行分離，作用機制是溶質(zhì)分子和溶劑分子對吸附劑活性表面的競爭吸附。如果溶劑分子吸附性更強，則被吸附的溶質(zhì)分子相應的減少；適用于分離相對分子質(zhì)量中等的油溶性試樣，對具有不同官能團的化合物和異構(gòu)體有較高的選擇性。（4）離子交

37、換色譜法保留機理是：基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動相具有相同電荷的溶質(zhì)離子進行可逆交換，依據(jù)這些離子對交換劑具有不同親和力而將它們分離；適用于凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)。（5）離子對色譜法保留機理是：將一種（或多種）與溶質(zhì)分子電荷相反的離子加到流動相中，使其與溶質(zhì)離子結(jié)合形成疏水型離子化合物，從而控制溶質(zhì)離子的保留行為；適用于各種強極性的有機酸，有機堿的分離分析。（6）空間排阻色譜法保留機理是：類似于分子篩作用，溶質(zhì)在兩相之間按分子大小進行分離，分子太大的不能今年、進入膠孔受排阻，保留值?。恍〉姆肿涌梢赃M入所有膠孔并滲透到顆粒中，保留值大；適用于分子量大的化合物（如高分子聚合物）和溶于水

38、或非水溶劑，分子大小有差別的試樣。25選擇液相色譜流動相需要綜合考慮哪些因素？（1)應避免使用會引起柱效損失或保留特性改變的溶劑。（2）溶劑要與檢測器匹配。對于紫外吸收檢測器，應注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。所謂溶劑的紫外截止波長指當小于截止波長的輻射通過溶劑時，溶劑對此輻射產(chǎn)生強烈吸收，此時溶劑被看作是光學不透明的，它嚴重干擾組分的吸收測量。對于折光率檢測器，要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動相，以達最高靈敏度。（3）高純度。由于高效液相靈敏度高，對流動相溶劑的純度也要求高。不純的溶劑會引起基線不穩(wěn)，或產(chǎn)生“偽峰”。痕量雜質(zhì)的存在，將使截止波長值增加50100nm。（4

39、）對試樣要有適宜的溶解度，否則在柱頭易產(chǎn)生沉淀。(5)低粘度。若使用高粘度溶劑，勢必增高壓力，不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度過于低的溶劑也不宜采用，例戊烷、乙醚等，它們易在色譜柱或檢測器內(nèi)形成氣泡，影響分離。26簡述色譜定性的依據(jù)是什么？主要由哪些方法及特點？根據(jù)組分在色譜柱中的保留值不同進行定性分析。主要定性方法：直接根據(jù)色譜柱保留值定性；根據(jù)相對保留值r21進行定性；混合進樣；多柱法；保留指數(shù)法；聯(lián)用技術(shù)；利用選擇性檢測器。27簡述液相色譜儀的儀器構(gòu)成主要包括哪些部分？貯液器、高壓泵、梯度洗脫裝置、壓力表、進樣器、色譜柱、餾分收集器、檢測器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置。2

40、8液相色譜固定相：1液液色譜法，鍵合色譜法及離子對色譜法固定相：（1）全多孔型擔體：顆粒均勻地多孔球體，由于其顆粒小，傳質(zhì)距離短，因此柱效高，柱容量也不小。（2）表層多孔型擔體，又稱薄殼型微珠擔體：玻璃微珠，表層上附有一層多孔硅膠。傳質(zhì)速度快，裝填容易，重現(xiàn)性好。2液固吸附色譜法固定相，同液液。3離子交換色譜法固定相（1）薄膜型離子交換樹脂：以薄殼珠為擔體，表面涂離子交換樹脂。（2）離子交換鍵合固定相：用化學反應將離子交換基團鍵合在惰性擔體表面。一種是鍵合薄殼型，擔體是薄殼珠。另一種是鍵合微粒擔體型離子交換樹脂，擔體是微粒硅膠。室溫下即可分離，柱效高，試樣容量較前者大。又可分為陽離子及陰離子交

41、換樹脂。陽離子交換樹脂又可分為強酸性與弱酸性樹脂，陰離子交換樹脂也分為強堿性及弱堿性樹脂。4.排阻色譜法固定相，分為軟質(zhì)、半硬質(zhì)和硬質(zhì)凝膠三種。軟質(zhì)凝膠適用于水為流動相，只能用于常壓排阻色譜法，半硬質(zhì)如交聯(lián)聚苯乙烯凝膠，適用于非極性有機溶劑，不能用于丙酮、乙醇類極性溶劑，能耐較高壓力，流速不宜大。硬質(zhì)凝膠如多孔硅膠，化學穩(wěn)定性好，熱穩(wěn)定性好，機械強度高，可在柱中直接更換溶劑，缺點是吸附問題。可控孔徑玻璃珠，具有恒定的孔徑和較窄的粒度分布，色譜柱易于填充均勻，對流動相溶劑體系、壓力、流速、PH或離子強度等都影響較小，適用于較高流速下操作。29電滲流（EOF）與那些因素有關(guān)系：電場強度、毛細管材料

42、、溶液ph、溶液濃度及相關(guān)性質(zhì)、添加劑及溫度。30設計一種可能同時測定苯與甲苯混合物的儀器分析方法。原理：色譜定性分析的任務是確定色譜圖上各色譜峰代表何種組分，根據(jù)各色譜峰的保留值進行定性分析。在一定的色譜操作條件下，每種物質(zhì)都有一確定不變的保留值（如保留時間），故可以作為定性分析的依據(jù)，只要在相同色譜條件下，對已知純樣和待測試樣進行色譜分析，分別測量各組分峰的保留值，若某組分峰的保留值與已知純樣相同，則可以認為兩者為同一物質(zhì)。這種色譜定性分析方法要求色譜條件穩(wěn)定，保留值測定準確。確定了各個色譜峰代表的組分后，即可對其進行定量分析，色譜定量分析的依據(jù)是混合物中各組分的質(zhì)量含量與其相應的響應信號

43、（峰高或峰面積）呈正比，如果被分析試樣中所有組分都能產(chǎn)生信號，利用歸一法即可計算出各組分的含量。具體操作方法如下：1、純樣保留時間的測定：分別用微量進樣器吸取苯、甲苯純樣0.1L，直接由進樣口注入色譜儀，用氫火焰離子化檢測器（FID）檢測，測定各組分的保留時間。2、苯、甲苯混合物的分析：用微量進樣器吸取混合物樣品0.2L注入色譜儀，連續(xù)記錄各組分的保留時間、峰高和峰面積。3、數(shù)據(jù)處理：混合物中各組分的保留時間與純苯、甲苯的保留時間做對照，若保留時間一致，表明混合物中有該組分存在。歸一法計算，由峰面積確定各組分質(zhì)量含量。31組成儀器各個主要部分的作用及原理.1、真空系統(tǒng)，質(zhì)譜儀的離子源、質(zhì)量分析

44、器、檢測器必須處于高真空狀態(tài)。通常用機械泵預抽真空，然后用擴散泵高效率并連續(xù)的抽氣。2、進樣系統(tǒng)，將樣品氣化為蒸氣送入質(zhì)譜儀離子源中。樣品在進樣系統(tǒng)中被適當加熱后轉(zhuǎn)化為即轉(zhuǎn)化為氣體。3、離子源，被分析的氣體或蒸氣進入離子源后通過電子轟擊（電子轟擊離子源）、化學電離（化學電離源）、場致電離（場致電離源）、場解析電離（場解吸電離源）或快離子轟擊電離（快離子轟擊電離源）等轉(zhuǎn)化為碎片離子，然后進入質(zhì)量分析器。4、質(zhì)量分析器自離子源產(chǎn)生的離子束在加速電極電場作用下被加速獲得一定的動能，再進入垂直于離子運動方向的均勻磁場中，由于受到磁場力的作用而改變運動方向作圓周運動，使不同質(zhì)荷比的離子順序到達檢測器產(chǎn)生

45、檢測信號而得到質(zhì)譜圖。5、離子檢測器，通常以電子倍增管檢測離子流。32電子轟擊離子源EI ：電子在電離室中轟擊氣體中的原子或分子，使之成為失去電子的正離子或者分子離子，分子離子繼續(xù)受到電子攻擊最終成為多種碎片離子。局限性：有機物中分子質(zhì)量較大或者極性大難氣化，熱穩(wěn)定性差的化合物在加熱和電子轟擊下，分子易破碎，難以給出完整的分子離子信息。33化學電離源：在離子源內(nèi)充滿一定壓強的反應氣體，如甲烷氨氣等，用高能量的電子轟擊反應氣體使之電離，電離后的反映分子在與試樣分子碰撞分子離子反應形成準分子離子QM+和少數(shù)碎片里子。優(yōu)點：CI圖譜中準分子離子往往是最強峰，QM+屯段相對分子質(zhì)量，碎片峰較少圖譜較簡

46、單易于解釋。缺點：不適用于難回發(fā)，熱不穩(wěn)定或極性較大的有機物。場致電離源的質(zhì)譜圖上，分子離子峰很清楚，但碎片峰則較弱，因而對于相對分子質(zhì)量的測定有利，但缺乏分子結(jié)構(gòu)信息。34場解析電離源，電離原理與場致電離相同，解吸試樣分子所需能量遠低于氣化所需能量，因而有機化合物不會發(fā)生熱分解，即使熱穩(wěn)定性差的試樣仍能得到很好的分子離子峰，分子中的C-C 鍵一般不會斷裂，因而很少生成碎片離子。總之，場致電離和場解析電離源都是對電子轟擊源的必要補充，使用復合離子源，則可同時獲得完整分子和官能團信息。35四極濾質(zhì)器：又稱四極質(zhì)譜儀，儀器有四根截面為雙曲面或圓形的棒狀電機組成，兩組電極間施加一定的直流電壓和頻率為

47、射頻范圍的交流電壓。當離子束進入筒形電極所包圍的空間后，離子做橫向擺動，在一定的直流電壓交流電壓和頻率，以及一定的尺寸等條件下，只有某一種（或一定范圍）和荷質(zhì)比的離子能夠達到收集器并發(fā)出信號（這些信號稱共振離子），其他粒子在運動的過程中撞擊在筒形電極上而被過濾掉，最后被真空泵抽走。進行電壓掃描和頻率掃描可以使荷質(zhì)比不同的離子依次達到收集器（檢測器）而形成質(zhì)譜圖。36離子阱質(zhì)譜計：直流電壓和高頻電壓加在環(huán)形電極和端蓋電極之間，兩端電極都處于地電位，在適當條件下由離子源注入的特定的m/z的離子在阱內(nèi)穩(wěn)定區(qū)，其軌道振幅保持一定大小并可長時間留在徑內(nèi)，反之不穩(wěn)態(tài)粒子振幅很快增長，撞擊到電極而消失，質(zhì)量掃描方式和四極濾質(zhì)器相似，即在恒定的直流交流比下掃描高頻電壓得到質(zhì)譜圖。37