標(biāo)準(zhǔn)解讀

GB/T 19495.4-2004 是一項中國國家標(biāo)準(zhǔn)，全稱為《轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 第4部分：核酸定性PCR檢測方法》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品中特定核酸序列進(jìn)行定性檢測的方法和要求，旨在確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，適用于轉(zhuǎn)基因植物及其產(chǎn)品中轉(zhuǎn)基因成分的定性檢測。

標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容概覽：

  1. 范圍：明確了該標(biāo)準(zhǔn)適用于哪些類型的樣本，即轉(zhuǎn)基因植物及其制品中轉(zhuǎn)基因DNA的定性檢測。

  2. 規(guī)范性引用文件：列出了實施該標(biāo)準(zhǔn)時需要參考的其他相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)或國際標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)，這些文件對于理解和執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)至關(guān)重要。

  3. 術(shù)語和定義：解釋了在標(biāo)準(zhǔn)中使用的一些關(guān)鍵術(shù)語，如PCR（聚合酶鏈反應(yīng)）、引物、模板DNA等，幫助讀者理解基本概念。

  4. 試劑和材料：詳細(xì)描述了進(jìn)行PCR實驗所需的各種試劑、耗材的質(zhì)量要求及來源，包括DNA提取試劑、PCR緩沖液、引物、DNA聚合酶等。

  5. 儀器設(shè)備：列舉了執(zhí)行PCR檢測所必需的實驗室設(shè)備，如PCR擴(kuò)增儀、離心機(jī)、電泳設(shè)備等，并對其性能要求進(jìn)行了說明。

  6. 樣品制備：提供了從樣品采集到DNA提取的具體操作步驟，確保從復(fù)雜樣本中有效提取出目標(biāo)DNA，為后續(xù)PCR檢測做準(zhǔn)備。

  7. PCR反應(yīng)體系與條件：詳細(xì)規(guī)定了PCR反應(yīng)的組成成分比例、反應(yīng)體積、循環(huán)參數(shù)（如退火溫度、延伸時間等），以確保PCR反應(yīng)的高效與特異性。

  8. 結(jié)果判定：說明了如何通過凝膠電泳等方法觀察并判定PCR產(chǎn)物，從而判斷樣品中是否存在目標(biāo)轉(zhuǎn)基因序列。

  9. 精密度和準(zhǔn)確度：通過實驗數(shù)據(jù)闡述了該檢測方法的重復(fù)性、再現(xiàn)性以及與其他驗證方法的一致性，確保檢測結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

  10. 試驗報告：規(guī)定了檢測報告應(yīng)包含的信息，如樣品信息、檢測方法、實驗條件、結(jié)果分析及結(jié)論等，以便于結(jié)果的記錄和交流。

實施意義：

該標(biāo)準(zhǔn)為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的質(zhì)量控制、市場監(jiān)管及消費(fèi)者信息透明化提供了科學(xué)依據(jù)和技術(shù)手段，有助于保障食品安全、促進(jìn)生物技術(shù)健康發(fā)展，并滿足國際貿(mào)易中對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測的標(biāo)準(zhǔn)化需求。通過統(tǒng)一的檢測流程和評判標(biāo)準(zhǔn)，可以有效提升檢測效率和結(jié)果的可比性。


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  • 2004-04-13 頒布
  • 2004-04-13 實施
?正版授權(quán)
GB/T 19495.4-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法_第1頁
GB/T 19495.4-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法_第2頁
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GB/T 19495.4-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法-免費(fèi)下載試讀頁

文檔簡介

ICS67.050B04中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T：19495.4-一2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法Detectionofgeneticallymodifiedorganismsandderivedproducts-QualitativePCRmethodsbasedonnucleicacid2004-04-13發(fā)布2004-04-13實施中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會

GB/T19495.4-2004三次前言范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語和定義4防污染措施5抽樣和制樣6原理試劑8儀器設(shè)備檢測步驃10結(jié)果判定·結(jié)果表述·12測試報告·附錄A（規(guī)范性附錄)物種特異性檢測方法附錄B（規(guī)范性附錄)篩選檢測方法·22附錄C（規(guī)范性附錄)結(jié)構(gòu)基因特異性檢測方法32附錄D（規(guī)范性附錄）品系特異性檢測方法45參考文獻(xiàn)52

GB/T19495.4—2004GB/T19495《轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測》為系列標(biāo)準(zhǔn)：GB/T19495.1—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測通用要求和定義：GB/T19495.2—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測實驗室技術(shù)要求：GB/T19495.3—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸提取純化方法；-GB/T19495.4—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法；GB/T19495.5—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定量PCR檢測方法；-GB/T19495.6—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測基因芯片檢測方法;GB/T19495.7—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測抽樣和制樣方法；-GB/T19495.8—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測蛋白質(zhì)檢測方法本部分附錄A、附錄B、附錄C、附錄D為規(guī)范性附錄，本部分由國家認(rèn)證認(rèn)可監(jiān)督管理委員會提出并歸口。中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局和中華人民共和國天津出入境檢驗檢疫局負(fù)責(zé)起草，國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局動植物檢疫實驗所、中華人民共和國廣州出人境檢驗檢疫局、中華人民共和國遼寧出人境檢驗檢疫局、中華人民共和國江蘇出人境檢驗檢疫局、上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院參加起草。本部分起草人：潘良文、鄭文杰、沈禹飛、劉炬、張舒亞、朱水芳、草文、曹際娟、張大兵、祝長青、蔣原、潘愛虎、張明。本部分系首次發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T19495.4—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定性PCR檢測方法1范圍GB/T19495的本部分規(guī)定了轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測的核酸定性PCR方法。本部分適用于種子、飼料、食品和環(huán)境樣品中轉(zhuǎn)基因成分的定性PCR檢測2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過GB/T19495的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件.其隨后所有的修改單(不包括勒誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵根據(jù)本部分達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本部介。GB/T19495.1—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測通用要求和定義GB/T19495.2—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測實驗室技術(shù)要求GB/T19495.3-2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸提取純化方法GB/T19495.5—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定量PCR檢測方法GB/T19495.7—2004轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測油樣和制樣方法語和定義見GB/T19495.1確立的術(shù)語和定義適用于本部分防污染措施按照GB/T19495.2-2004的規(guī)定執(zhí)行5抽樣和制樣按照GB/T19495.7-2004規(guī)定的方法執(zhí)行。原理6.1一般原理定性分析包括對測試樣品目標(biāo)核酸序列的篩選檢測和(或）特異性檢測在設(shè)置合適的對照和在檢測下限的情況下，定性檢測結(jié)果要清楚判斷樣品是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，本檢測方法包括：目標(biāo)序列的擴(kuò)增和檢測;擴(kuò)增片段特異性的確證。6.2PCR擴(kuò)增目標(biāo)序列的擴(kuò)增是在反應(yīng)緩沖液中,脫氧核糖核酸三磷酸、寡核苷酸引物在DNA聚合酶的作用下進(jìn)行的催化反應(yīng)。在反應(yīng)混合體系中不應(yīng)存在DNA聚合酶的抑制劑。DNA擴(kuò)增是一個循環(huán)的過程通過加熱使雙螺旋DNA變性成為單鏈核酸；在合適的溫度下引物和目標(biāo)序列發(fā)生退火反應(yīng)；在合適的溫

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