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細(xì)菌與病毒的病原學(xué)檢查法演示文稿當(dāng)前1頁(yè),總共14頁(yè)。優(yōu)選細(xì)菌與病毒的病原學(xué)檢查法Ppt當(dāng)前2頁(yè),總共14頁(yè)。第一節(jié)細(xì)菌感染的微生物學(xué)檢查法一、細(xì)菌學(xué)診斷形態(tài)學(xué)檢查1.普通光學(xué)顯微鏡檢查法:2.暗視野顯微鏡檢查法:檢查活菌、螺旋體及其動(dòng)力3.熒光顯微鏡檢查法:病原菌的分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)鑒定:玻片凝集試驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):毒力、致病性毒力檢測(cè):LD50、ID50,毒素藥物敏感試驗(yàn):紙片擴(kuò)散法當(dāng)前3頁(yè),總共14頁(yè)。二、檢測(cè)病原菌成分抗原檢測(cè):凝集試驗(yàn)、對(duì)流免疫電泳、酶免疫技術(shù)、免疫熒光技術(shù)核酸檢測(cè):1.核酸雜交技術(shù):Southern印跡雜交、Northern印跡雜交、原位雜交2.PCR技術(shù)3.基因芯片4.16rRNA基因序列分析:編碼rRNA,保守區(qū)、可變區(qū)當(dāng)前4頁(yè),總共14頁(yè)。三、抗體的檢測(cè)(血清學(xué)診斷)凝集試驗(yàn):直接、間接、協(xié)同、冷凝集沉淀試驗(yàn):環(huán)狀、絮狀、雙向、對(duì)流電泳補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn):酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA):取雙份血清,抗體效價(jià)比早期高4倍以上有意義。當(dāng)前5頁(yè),總共14頁(yè)。第二節(jié)病毒感染的微生物學(xué)檢查法當(dāng)前6頁(yè),總共14頁(yè)。一、形態(tài)學(xué)檢查1.電子顯微鏡檢查直接鏡檢法:107顆粒/ml,電鏡觀察病毒顆粒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)免疫電鏡法(IEM):標(biāo)本+特異性抗體病毒顆粒聚集電鏡觀察輪狀病毒的糞便、HAV、HBV的血清、皰疹病毒的皰疹液,可早期診斷。2.光學(xué)顯微鏡檢查痘病毒、觀察包涵體、CPE當(dāng)前7頁(yè),總共14頁(yè)。二、病毒分離培養(yǎng)的方法1、動(dòng)物接種常用動(dòng)物:小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、猴等;接種途徑:皮下、皮內(nèi)、腦內(nèi)、腹腔、靜脈等接種;觀察:動(dòng)物出現(xiàn)感染癥狀,取病變組織進(jìn)一步檢查當(dāng)前8頁(yè),總共14頁(yè)。2、雞胚培養(yǎng):孵化9~14天的雞胚接種途徑有:絨毛尿囊膜、羊膜腔、尿囊腔、卵黃囊。鑒定:血凝和血凝抑制試驗(yàn)?zāi)蚰仪唤臃N羊膜腔接種當(dāng)前9頁(yè),總共14頁(yè)。卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種當(dāng)前10頁(yè),總共14頁(yè)。3、組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng):?jiǎn)螌蛹?xì)胞培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞培養(yǎng);原代細(xì)胞培養(yǎng):由新鮮組織制備二倍體細(xì)胞:二倍體性質(zhì),傳40~50代,人胚肺成纖維細(xì)胞傳代細(xì)胞系:由突變的二倍體細(xì)胞或腫瘤細(xì)胞建立的,HeLa細(xì)胞當(dāng)前11頁(yè),總共14頁(yè)。三、病毒在培養(yǎng)細(xì)胞中增殖的鑒定指標(biāo)細(xì)胞的變化:CPE紅細(xì)胞吸附(HAd):紅細(xì)胞凝集:病毒干擾作用:風(fēng)疹病毒,??刹《?Vero細(xì)胞。中和試驗(yàn)(NT):是病毒在活體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)中被特異性抗體中和而失去感染性的一種試驗(yàn)空斑形成試驗(yàn):蝕斑形成單位(PFU),感染性病毒的滴度用PFU/ml表示。四、病毒成分的檢測(cè)病毒抗原的檢測(cè):HIV和HBV抗原病毒核酸的檢測(cè)當(dāng)前12頁(yè),總共14頁(yè)。

ABCA:未感染的成纖維細(xì)胞。B:?jiǎn)渭儼捳畈《靖腥竞笫辜?xì)胞變圓。C:呼吸道合胞病毒感染后出現(xiàn)細(xì)胞融合。當(dāng)前13頁(yè),總共14頁(yè)。五、病毒抗體的檢測(cè):中和試驗(yàn):陽(yáng)性:可能以前

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