疫苗生產(chǎn)流程

疫苗，是指為了預防、控制傳染病的發(fā)生、流行，用于人體預防接種的疫苗類預防性生物制品。其原理是將病原微生物（如細菌、立克次氏體、病毒等）及其代謝產(chǎn)物，經(jīng)過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預防傳染病的自動免疫制劑。疫苗生產(chǎn)項目簡介第一頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介當我們拿到一個工程項目時，首先要做的就是明確設計的依據(jù)，這個依據(jù)應該包括：工藝技術、設備及公用輔助設施等有關基礎資料、生產(chǎn)規(guī)模、生產(chǎn)方式、生產(chǎn)班制,國家及行業(yè)主要有關規(guī)范和規(guī)定等，只有有了這些依據(jù)，我們下一步的工作才能做到有的放矢。然后就是確定工程范圍，明確我們要做的工作。第二頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介確定了以上的各項工作后，設計工作就要正式開始了，作為市場開發(fā)人員，我們要大致了解一下一般設計的基本原則，這樣能方便我們工作的開展：1、根據(jù)生產(chǎn)工藝特點和GMP實施指南要求，全面規(guī)劃，精心設計，在滿足生產(chǎn)需要的前提下，做好工藝設備平面布置，使之既符合消防安全又節(jié)約能耗、方便生產(chǎn)。

2、設計中要重視技術進步，認真吸取國內(nèi)外先進經(jīng)驗，積極慎重地采用新工藝、新設備以確保產(chǎn)品質(zhì)量和提高生產(chǎn)效率。選用運行可靠、質(zhì)量高的國產(chǎn)設備及國外設備。第三頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介

3、設計中要把節(jié)約和合理利用能源放在重要位置加以考慮。積極采用節(jié)能措施，盡量選用節(jié)能工藝和設備，充分利用地下資源，搞好水的循環(huán)利用。

4、設計中要精打細算，把有限的資金用在關鍵設備上，使資金使用更加合理化。

5、嚴格按照國家環(huán)保法和有關文件精神搞好“三廢”治理和職業(yè)安全衛(wèi)生設計工作。第四頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介生產(chǎn)工藝確定了，我們要根據(jù)工藝流程來進行工藝平面布置，在這里最重要的一點就是不能出現(xiàn)交叉污染的風險，這又要簡單的了解一下疫苗的分類。目前使用的絕大部分疫苗，都是用于預防病毒或細菌的感染的。它們主要分為三類：減毒活疫苗；滅活的全菌體或全病毒疫苗；組分疫苗—亞單位疫苗、多糖疫苗或結(jié)合型疫苗、類毒素等。第五頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介

(一)滅活疫苗：目前常用的有流行性乙型腦炎疫苗，狂犬病疫苗（二倍體細胞與地鼠腎細胞可用于生產(chǎn)狂犬病病毒固定毒滅活疫苗），流感滅活疫苗。常用甲醛為滅活劑，以滅活病毒核酸而不影響其抗原性。(二)減毒活疫苗:通常采用自然法或人工法，通過動物傳代或細胞傳代篩選對人毒力低的變異株病毒。常用的有脊髓灰質(zhì)炎疫苗、麻疹疫苗、流感溫度敏感突變株疫苗、流行性腮腺炎疫苗、風疹疫苗、黃熱病疫苗以及一些聯(lián)合疫苗（如麻疹、腮腺炎、風疹聯(lián)合疫苗）。第六頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介

(三)亞單位疫苗：用化學試劑裂解病毒，提取包膜或衣殼上的亞單位，除去其核酸，以此制成的疫苗稱亞單位疫苗。如流感病毒的包膜提取后制成的血凝素和神經(jīng)氨酸酶亞單位疫苗。下面是幾種疫苗的培養(yǎng)方法。第七頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介

疫苗名稱疫苗株死∕活制備細胞培養(yǎng)方法脊髓灰質(zhì)鹽疫苗滅活猴腎細胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)脊髓灰質(zhì)鹽疫苗活VERO細胞微載體培養(yǎng)狂犬病毒疫苗死人二倍體細胞微載體培養(yǎng)流行性乙型腦炎疫苗滅活人二倍體細胞多層滋養(yǎng)增殖器單純瘡疹死豚鼠胚成纖維細胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)第八頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介

(病毒生產(chǎn)制備的方法：1、動物接種，如狂犬病毒、腦炎蟲媒病毒采用鼠、兔腦內(nèi)接種后收取腦組織制成懸液。2、雞胚、鴨胚接種：如流感病毒、副流感病毒（NDV-F）、仙臺病毒等，目前尚無敏感細胞，常采用9～10日胚齡的尿囊腔接種，37℃孵育72小時收獲尿液，用雞紅血球測定血凝效價。Q熱用7日齡鴨胚進行卵黃囊接種收獲卵黃囊，馬腦炎病毒常采用10日齡雞胚體接種，收獲全胚體液等。第九頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介3、細胞培養(yǎng)法不同的病毒選用相應的敏感細胞，采用轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)、多層培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)或懸浮攪拌培養(yǎng)等方法,先大量增殖細胞，然后接種一定量的病毒,繼續(xù)培養(yǎng)適當時間時，凍融細胞后，離心收獲上清。以上病毒大量生產(chǎn)后可制作病毒疫苗（死疫苗或減毒活疫苗），也可用來作干擾素誘生劑或提取病毒表面抗原成分。第十頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介生產(chǎn)過程舉例１：發(fā)酵純化Ⅰ純化Ⅱ滅活吸附第十一頁，共52頁。二、生產(chǎn)過程舉例２：安全/抑制有效病原體安全/尤其產(chǎn)生不穩(wěn)定病毒去除雜質(zhì)及所需產(chǎn)物特性相近的外來物質(zhì)在輔助劑幫助下完成對大疫苗顆粒的滅菌過濾濾發(fā)酵

收集/滅活

加工

配制和灌裝

疫苗生產(chǎn)項目簡介第十二頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介無論一種疫苗在試驗階段是多么有效，但如果其最終產(chǎn)品懸液不能穩(wěn)定地儲存和運輸，那么它的商業(yè)價值就會受限，面對這一問題，人們開發(fā)了各種劑型，但目前常用的，也是最有效的方法還是凍干，制藥企業(yè)可以將其運用到那些昂貴的、不穩(wěn)定的疫苗生物制品的生產(chǎn)中。第十三頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介通過以上簡單的介紹，我們知道了疫苗生產(chǎn)包括原液生產(chǎn)和制劑生產(chǎn)，為了得到真正的能用于實際的疫苗，我們就需要建設用于疫苗生產(chǎn)的車間，為疫苗的生產(chǎn)提供環(huán)境和物料方面的支持，那么建設一個疫苗生產(chǎn)車間需要哪些專業(yè)的配合呢，下面我們分別進行說明。第十四頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介首先是工藝專業(yè)，因為已經(jīng)確定了工藝平面和設備平面布置，下面的主要工作就是配管了，工藝管道是物流的通道，是疫苗生產(chǎn)的血管，它為生產(chǎn)提供原料、水、蒸汽等。對于一般的疫苗項目來說，用到的主要的工藝管道包括：注射用水、純蒸汽、純水、壓縮空氣、氧氣、氮氣、冷卻水、廢水等系統(tǒng)，而對產(chǎn)品質(zhì)量起到關鍵作用的則是注射水、純水、純蒸汽系統(tǒng)。第十五頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介注射用水一般用純化水通過蒸餾法制得，化學純度可達99.999%，為保證注射用水的質(zhì)量，必須隨時監(jiān)控蒸餾法制備注射用水的各生產(chǎn)環(huán)節(jié)，定期清洗與消毒注射用水制造與輸送設備，嚴防內(nèi)毒素產(chǎn)生，一般應在八十攝氏度以上保溫、六十五攝氏度保溫循環(huán)或四攝氏度以下的無菌狀態(tài)下存放，并在制備后十二小時內(nèi)使用。第十六頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介純化水為飲用水經(jīng)蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其它適宜方法制備的水，水中不含任何附加劑，制備過程中應防止防止微生物污染，常用作溶劑或精洗用水，臨用前準備；純蒸汽作為滅菌消毒的一種介質(zhì)，是利用純化水或注射用水再次加熱蒸發(fā)產(chǎn)生的。工藝管道一般全部采用不銹鋼材質(zhì)。注射水和純蒸汽為電刨光316L，其余為機拋。第十七頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介以往工程實例第十八頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介疫苗的生產(chǎn)需要在一個相對潔凈的區(qū)域內(nèi)生產(chǎn)，這就要靠潔凈維護和潔凈空調(diào)來實現(xiàn)，下面先說說潔凈維護系統(tǒng)：作為生物醫(yī)藥廠房，它與其它潔凈廠房的區(qū)別不是很大，主要在于：

1、生物醫(yī)藥廠房對維護結(jié)構(gòu)（即壁板和頂板等）的密封性能要求更高；

2、生物醫(yī)藥廠房對維護結(jié)構(gòu)的平整度要求更高；第十九頁，共52頁。生物醫(yī)藥廠房建筑必須針對生物醫(yī)藥工程存在的氣溶膠泄露的可能發(fā)生環(huán)節(jié)進行全面考慮，在產(chǎn)生安全隱患的地方進行徹底的密封處理。生物醫(yī)藥廠房的維護結(jié)構(gòu)的密封性能和平整度性能主要體現(xiàn)在以下幾個方面：

1、雙圓弧天軌；疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十頁，共52頁。

2、圓弧轉(zhuǎn)角；疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十一頁，共52頁。

3、單圓弧收邊；疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十二頁，共52頁。

4、可調(diào)式地軌+PVC地面；疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十三頁，共52頁。

5、雙層玻璃觀察窗；疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十四頁，共52頁。

6、暗架龍骨吊頂；疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十五頁，共52頁。各種型材三維圖：疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十六頁，共52頁。整體效果：疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十七頁，共52頁。由以上圖片顯示，雙圓弧天軌、圓弧轉(zhuǎn)角、單圓弧收邊、可調(diào)式地軌+PVC地面、雙層玻璃觀察窗、暗架龍骨系統(tǒng)從根本上保證了生物醫(yī)藥廠房圍護結(jié)構(gòu)的平整性能和密封性能，從而最大程度上保證了生物醫(yī)藥廠房的安全性。疫苗生產(chǎn)項目簡介第二十八頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介潔凈維護為疫苗的生產(chǎn)提供了一個相對潔凈的環(huán)境，可以阻止外部的灰塵的進入，而對于內(nèi)部空氣的凈化與室內(nèi)產(chǎn)塵的清除，就要靠潔凈空調(diào)系統(tǒng)來實現(xiàn)了，目前，疫苗車間常用的空調(diào)系統(tǒng)為FFU與高效口聯(lián)合送風的方式，F(xiàn)FU的集中布置在軋蓋間和分裝間，此部分為整個疫苗生產(chǎn)線的核心中的核心部位。根據(jù)歐盟GMP要求，此部分必須用A+B的送風方式。即在設備區(qū)域必須滿足A級（相當于百級），在設備外側(cè)部位必須滿足B級（相當于靜態(tài)百級動態(tài)萬級）來保護A級區(qū)域。其余部位則通過高效送風口來實現(xiàn)潔凈度的要求。第二十九頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介在潔凈空調(diào)系統(tǒng)中，室外新風先通過新風過濾去除空氣中較大粒徑的雜質(zhì)，然后通過加熱、表冷、加濕段等來調(diào)節(jié)送風的溫濕度，目前常用的有兩種做法，一種是設置單獨的新風空調(diào)，達到新風處理的目的，此新風空調(diào)可滿足初步潔凈度的要求，還可以根據(jù)需求對溫濕度進行控制；另一種做法是不設置信封空調(diào)，所有的潔凈度和溫濕度都靠凈化空調(diào)來實現(xiàn)，對于空氣質(zhì)量相對較好，溫濕度負荷不是很大的地區(qū)，用第二種方法可以節(jié)省投資和占地面積，而對于空氣質(zhì)量不是很好或者溫濕度負荷較大的地區(qū)，則容易導致過濾器短時間內(nèi)堵掉、機組過大、不易調(diào)節(jié)等問題，所以具體選用哪種方式要根據(jù)具體情況來確定。第三十頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介經(jīng)過機組處理過的潔凈空氣通過風管送到各個潔凈區(qū)域，再經(jīng)過高效過濾器送到室內(nèi)，這與普通的空調(diào)送風沒有太大的區(qū)別，不同之處在于疫苗生產(chǎn)車間有消毒殺菌的需求，是生產(chǎn)過程中的重要一環(huán)，所以選擇一個好的殺菌方式是相當重要的，目前常用的就是用外置臭氧發(fā)生器消毒，可以滿足一般的消毒殺菌的要求，但對于部分有防爆要求的全新風房間，怎要根據(jù)具體的情況選擇合適的殺菌方式。第三十一頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介風管安裝實例保溫安裝實例第三十二頁，共52頁。疫苗生產(chǎn)項目簡介因為現(xiàn)在的集成度較高，好多地方手工控制都都不能滿足要求，所以無論工藝的管道、設備，還是空調(diào)機組和排風裝置，都要加自控裝置，對于疫苗生產(chǎn)車間來說，主要要控制的方面包括工藝管道系統(tǒng)的流量、溫度、TOC、電導率、PH值，暖通空調(diào)方面的塵埃粒子在線監(jiān)測等，下面分別作一介紹。第三十三頁，共52頁。疫苗車間自控組成潔凈空調(diào)自控系統(tǒng)冷凍站自控系統(tǒng)純水自控系統(tǒng)注射用水自控系統(tǒng)在線粒子檢測系統(tǒng)FFU控制系統(tǒng)門禁監(jiān)控系統(tǒng)系統(tǒng)集成第三十四頁，共52頁。自控框架圖第三十五頁，共52頁。自控網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)INTERNET互聯(lián)網(wǎng)企業(yè)管理網(wǎng)(局域網(wǎng)LAN)工業(yè)控制網(wǎng)(單環(huán)工業(yè)以太網(wǎng))現(xiàn)場總線(雙DP,RS485總線等型式)第三十六頁，共52頁?？刂平Y(jié)構(gòu)WEB服務器PCS7工程師/操作員+用戶通過IE登錄WEB服務器進入PCS7自控系統(tǒng)第三十七頁，共52頁。WEB服務器實現(xiàn)用戶遠程登錄系統(tǒng)頁面，支持電子簽名，跟蹤記錄.按用戶權(quán)限分級登陸。

系統(tǒng)集成數(shù)據(jù)服務器（OPC）收集所有子站的實時過程數(shù)據(jù)，建立歷史數(shù)據(jù)庫，支持在線數(shù)據(jù)存儲和查詢。文件報表輸出PCS-7工程師站自控系統(tǒng)組態(tài)、控制；潔凈室粒子狀態(tài)畫面；

FFU實時狀態(tài)畫面顯示；水系統(tǒng)實時動態(tài)控制第三十八頁，共52頁。分裝間藥品流程注射原液稀釋后拿到分裝線，灌裝加塞，送入凍干機。從凍干機拿出來的粉劑運到扎蓋機扎蓋后，變成成品運出車間。設備布局和藥品流程第三十九頁，共52頁。分裝間在線粒子計數(shù)采樣點布置點位布置:理瓶1#；灌裝頭2#壓塞3#；凍干機4~5#；0.5μ+5μ二通道,28.3L/min,激光在線粒子計數(shù).第四十頁，共52頁。采樣頭的安裝方式第四十一頁，共52頁?？照{(diào)自控原理圖1.房間溫度控制2.房間濕度控制3.房間壓差監(jiān)測4.系統(tǒng)風量控制5.高效壓差報警6.滅菌器\分裝烘洗線運行狀態(tài)第四十二頁，共52頁。FFU控制(群控方式)連接方式：1臺FFU控制器，分路網(wǎng)線連接現(xiàn)場FFU。工作站在值班室實現(xiàn)控制每組FFU的啟/停，無級調(diào)速，顯示FFU的運行狀態(tài)及故障報警工作狀態(tài)：開啟全部FFU,使?jié)崈羰疫_到A級工作狀態(tài)值班狀態(tài)：部分開啟FFU或降速運行,使?jié)崈羰冶３衷贐級狀態(tài)。第四十三頁，共52頁。EUGMP對滅菌生產(chǎn)操作區(qū)潔凈室的分類（動態(tài)）RoomclassificationMaximumconcentrationlimits(particles/m3fair)forparticles/AirborneViables(cfu/m)0.5μ5μViablecfu/m3

And/φ90mmsettleplateA–Operational3,5001(e)<1<1/4hrsB–Operational350,0002,000<10<5/4hrsC–Operational350,00020,000<100<50/4hrsD–Operational<200<100/4hrs0.5μ主要是控制潔凈室塵埃的主要指標,5μ主要為控制微生物