大腸桿菌試驗室能力驗證管理系統(tǒng)課件

微生物快速檢測技術(shù)及應用

主要內(nèi)容北京陸橋公司簡介31微生物快速檢測系列產(chǎn)品21即用型和顆粒劑型培養(yǎng)基EasyTestTM快速測試片顯色培養(yǎng)基在食品微生物檢測中的應用北京陸橋技術(shù)有限責任公司

BeijingLandBridgeTechnologyCo.,Ltd.北京陸橋技術(shù)有限責任公司隸屬于中國檢驗檢疫科學研究院成立于1992年，是國家質(zhì)檢系統(tǒng)成立最早的一家股份制高新技術(shù)企業(yè)。公司集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務為一體，同時利用其自營進出口權(quán)代理國外知名公司的檢測試劑及實驗室儀器設備。公司資質(zhì)2003年通過ISO9001質(zhì)量管理體系認證2003年通過ISO/IEC17025實驗室認可北京市高新技術(shù)企業(yè)先后承擔了多項國家級和市級的科研項目主持并參與多項國家標準的制修定陸橋現(xiàn)有系列產(chǎn)品產(chǎn)品口岸衛(wèi)檢試劑微生物檢測產(chǎn)品

植物疫病檢測產(chǎn)品轉(zhuǎn)基因檢測產(chǎn)品理化及農(nóng)獸藥殘留檢測產(chǎn)品實驗室儀器設備及消耗品

產(chǎn)品—微生物檢測產(chǎn)品即用型培養(yǎng)基Usual

detectionproducts

RapidorreadytouseEasyTest測試片

脫水合成干粉培養(yǎng)基配套試劑及原材料即用型培養(yǎng)基一次性平板培養(yǎng)基Textinhere樣品前處理前增菌選擇性分離傳統(tǒng)檢測產(chǎn)品新型快速檢測產(chǎn)品生化鑒定管原材料診斷血清顯色培養(yǎng)基免疫層析快速檢測試劑盒熒光定量PCR確認試驗微量生化管顆粒劑型培養(yǎng)基即用型和顆粒劑型培養(yǎng)基微生物快速檢測系列產(chǎn)品（一）需繁瑣的制備、滅菌等步驟，費時費力操作繁瑣基本為人工操作，工作量大耗費人力資源危害健康，污染環(huán)境粉塵多傳統(tǒng)干粉培養(yǎng)基的弊端我們需要更簡便、更安全、更省力的培養(yǎng)基產(chǎn)品類型傳統(tǒng)干粉培養(yǎng)基革新即用型培養(yǎng)基傳統(tǒng)干粉培養(yǎng)基的革新顆粒劑型培養(yǎng)基即用型培養(yǎng)基即用型培養(yǎng)基是在傳統(tǒng)干粉培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上進行再加工的一類方便快捷的微生物檢測產(chǎn)品。由專業(yè)人員完成稱量、溶解、分裝和高壓滅菌等培養(yǎng)基配制工作，再經(jīng)專業(yè)封口、包裝等，形成一系列即開即用型無菌產(chǎn)品；使用便捷；可保證批間穩(wěn)定性；避免實驗用水、高壓滅菌條件等造成的差異；即用性培養(yǎng)基的包裝和規(guī)格根據(jù)培養(yǎng)基的用途及操作的需求，即用型培養(yǎng)基產(chǎn)品有多種規(guī)格和包裝形式。兩種規(guī)格包裝：

10皿/包

2皿/包×10包開封使用，接菌培養(yǎng)可根據(jù)需要加工訂制各種

一次性平板培養(yǎng)基。

即用型培養(yǎng)基-一次性平板培養(yǎng)基即用型培養(yǎng)基—袋裝產(chǎn)品固體袋裝培養(yǎng)基液體袋裝培養(yǎng)基即用型袋裝液體產(chǎn)品—圖示封口雙保險：塑封和自封條雙層封口，避免漏液、方便操作特點：

樣品直接加入袋裝稀釋液或增菌液中直接作為均質(zhì)袋對其進行均質(zhì)均質(zhì)后，用自封條密封，直接用于培養(yǎng)底面設計獨特可直立擺放即用型袋裝固體產(chǎn)品—圖示使用：

—沸水加熱溶解；

—需要添加附加試劑的品種，用戶要自己添加。即用型培養(yǎng)基—試管裝產(chǎn)品

即用型九管培養(yǎng)基包括雙料和單料兩種，均已加入小導管。

即用型培養(yǎng)基—九管培養(yǎng)基雙料顆粒培養(yǎng)基簡介

顆粒培養(yǎng)基：顆粒狀的干燥培養(yǎng)基，是在干燥粉末培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上經(jīng)過獨特的工藝，顆?；伞?/p>

產(chǎn)品包裝：一盒顆粒劑型培養(yǎng)基中有20袋獨立鋁箔包裝。產(chǎn)品及使用方法使用方法：從豁口處撕開袋子，將顆粒培養(yǎng)基倒入盛有相應蒸餾水或去離子水的容器中，加熱煮沸至完全溶解，高壓滅菌后備用。無粉塵，環(huán)保無粉塵產(chǎn)生，減少粉塵及有毒成分的吸入，保護操作人員；減少實驗室設備和環(huán)境受到的粉塵污染，安全環(huán)保。干粉培養(yǎng)基顆粒劑型培養(yǎng)基操作簡捷，溶解方便無需稱量、操作簡捷溶解方便、有效提高工作效率干粉培養(yǎng)基加水后，易附著在瓶底或瓶壁上成塊。顆粒劑型培養(yǎng)基為均勻顆粒劑型，顆粒之間有較大間隙，加水后，能快速均勻分散于水中，更易溶解。不易吸潮、變質(zhì)

—獨立鋁箔密封包裝，密封性好，一次性使用完畢；

—顆粒劑型干燥培養(yǎng)基相比干粉培養(yǎng)基具有較小的比表面積，因此不容易吸潮和變質(zhì)。成份均一、質(zhì)量穩(wěn)定

顆粒劑培養(yǎng)基是通過先進的工藝制備而成，每個顆粒中的成份都是均勻分布的。因此，顆粒劑型培養(yǎng)基均勻性更好，質(zhì)量更穩(wěn)定。產(chǎn)品列表類別貨號名稱規(guī)格計數(shù)平板類GCM101平板計數(shù)瓊脂（PCA）300mL/袋*20袋/盒GCM107營養(yǎng)瓊脂（NA）GCM164孟加拉紅培養(yǎng)基GCM115結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA）計數(shù)MPN法類GCM102月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯（LST）300mL/袋*20袋/盒GCM103煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）GCM108乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基GCM301B10%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯225mL/袋*20袋/盒前增菌類GCM201緩沖蛋白胨水（BPW）225mL/袋*20袋/盒GCM3067.5%氯化鈉肉湯GCM301B10%氯化鈉胰蛋白胨大豆肉湯選擇性增菌類GCM203四硫磺酸鈉煌綠增菌液（TTB）100mL/袋*20袋/盒大腸埃希氏菌干制生化試劑盒1、干制試劑盒產(chǎn)品特點

大腸埃希氏菌干制生化鑒定試劑盒（DBI-01）是DBI干制生化鑒定系列產(chǎn)品中一個品種，其使用特制的小巧精致pvc試劑盒，采用特殊的干制工藝把一般的液體形式生化試劑制備成方便儲存、運輸和實驗操作的干制試劑盒產(chǎn)品。大腸埃希氏菌干制生化試劑盒1、干制試劑盒產(chǎn)品特點產(chǎn)品可以常溫儲存、運輸，較好的解決了液體形式試劑需要冷鏈儲存、運輸?shù)南拗啤Ｔ噭┖杏嗅槍π缘脑O定相關(guān)生化項目檢測特定菌株于一塊試劑盒上完成，使用目的明確，操作簡便。常溫保質(zhì)期為1年。大腸埃希氏菌干制生化試劑盒2、干制試劑盒使用方法A、從包裝袋中取出試劑盒，打開盒蓋，加入1mL無菌水到試劑盒的長條槽中。B、取一內(nèi)盛2mL無菌水試管，用接種針從平板上挑取單個菌落至無菌水中仔細研磨制成0.5麥氏濁度的均一菌懸液，分別加入試劑盒上的4個圓孔中，每孔0.2mL，蓋上盒蓋。C、置36±1℃下培養(yǎng)24h。注：該產(chǎn)品包裝為：10塊試劑條/盒，不包含滴加試劑，滴加試劑需另購。推薦購買量：15盒/CM1002，15盒/CM1003，5盒/CM1004微生物快速檢測系列產(chǎn)品（二）EasyTestTM快速測試片EasyTestTM測試片EasyTestTM微生物測試片是一種將脫水培養(yǎng)基附著于無紡布棉墊上的即用型檢測產(chǎn)品。優(yōu)點便捷——即用型產(chǎn)品，省去配制步驟，減少工作量?？焖佟s短檢測時間。24-48小時即出結(jié)果，提高實驗效率。準確——靈敏度高、特異性強。適用范圍1、食品微生物檢測

濾膜法檢測涂抹法檢測空氣沉降法檢測2、環(huán)境衛(wèi)生監(jiān)測樣品制備

根據(jù)標準要求進行樣品制備以GB4789.2-2010菌落總數(shù)測定為例：

稱取25g樣品，加入到225mL生理鹽水中，均質(zhì)混勻，此溶液為10-1稀釋液。按國標要求進行10倍梯度稀釋，取1mL上述稀釋液加入9mL生理鹽水中，依次制成10-2和10-3。

EasyTest測試片操作流程食品微生物檢測操作流程1、掀開上層透明膜2、取1mL樣液緩緩加入纖維墊上3、5s后，待樣液完全吸收4、緩緩將透明膜蓋回5、接種完成，正置培養(yǎng)培養(yǎng)條件：36±1℃/48±2h菌落顏色：紅色ET001菌落總數(shù)測試片ET003金黃色葡萄球菌測試片培養(yǎng)條件：36±1℃/24-30h菌落顏色：菌落中心黑色，周圍有藍綠色暈圈S.aureus培養(yǎng)條件：36±1℃/24±1h大腸菌群：藍綠色+紫色大腸桿菌：紫色

ET004大腸桿菌/大腸菌群測試片培養(yǎng)條件：26±1℃/48±2h菌落顏色：紅色，偶見暗紅色、橙色和黑色等其他顏色。注：由于霉菌酵母菌多具有產(chǎn)色素能力，所以菌落受色素影響而呈現(xiàn)多種顏色。ET005酵母菌/霉菌測試片Yeast/Mold培養(yǎng)條件：36±1℃/24±1h沙門氏菌：藍綠色大腸菌群：靛藍或藍紫色

ET006沙門氏菌測試片SalmonellaEasyTestTM快速測試片產(chǎn)品列表產(chǎn)品編碼名稱規(guī)格ET001菌落總數(shù)測試片AerobicCount25片/包ET002大腸菌群測試片Coliform25片/包ET003金黃色葡萄球菌測試片Staph.aureus25片/包ET004大腸桿菌/大腸菌群測試片E.coli/Coliform25片/包ET005酵母菌/霉菌測試片YeastandMold25片/包ET006沙門氏菌測試片Salmonella25片/包微生物快速檢測系列產(chǎn)品（三）ESM系列顯色培養(yǎng)基顯色培養(yǎng)基的原理顯色/熒光培養(yǎng)基是一類微生物生長培養(yǎng)基，含有與色原體（顏色反應）或熒光基團（光反應）相連接的酶底物。目標微生物自身代謝產(chǎn)生的種屬特異性酶與相應酶底物反應，釋放發(fā)色基團使培養(yǎng)物顯色，或者釋放熒光基團在紫外波長下使培養(yǎng)物顯現(xiàn)熒光。酶底物是種屬特異性的，通過調(diào)整培養(yǎng)體系可以進一步提高培養(yǎng)基的選擇性，某些情況下目標微生物不需要進一步的確證試驗。顯色培養(yǎng)基技術(shù)簡介僅18-24h就可得到初步檢驗結(jié)果。顯色明顯易于觀察，菌落外觀易于辨認。優(yōu)點酶與底物顯色反應特異性強，降低假陽性率?？捎行Эs短檢測時間降低對檢測人員技術(shù)水平要求減少后期鑒定工作量

沙門氏菌、單增李斯特氏菌、阪崎腸桿菌、O157、副溶血性弧菌、志賀氏菌標準其他金黃色葡萄球菌、大腸菌群、大腸桿菌常見檢測項目前增菌/選擇性增菌選擇性分離生化或/及血清學鑒定報告

——致病菌檢測流程顯色培養(yǎng)基在傳統(tǒng)培養(yǎng)基上與沙門特征相近的菌很多。向客戶推薦使用顯色培養(yǎng)基代替HE、XLD，可以大大減少后期生化鑒定的工作量。1沙門氏菌檢測顯色培養(yǎng)基在檢測中的應用沙門氏菌顯色培養(yǎng)基沙門氏菌：紫紅色菌落大腸桿菌：藍綠色菌落奇異變形桿菌：無色菌落弗氏志賀氏菌：無色菌落金黃色葡萄球菌：抑制培養(yǎng)條件：36±1℃/18-24hLB1増菌LB2増菌PALCAM和顯色結(jié)果生化鑒定在PALCAM等傳統(tǒng)培養(yǎng)基上，無法將單增李斯特與李斯特菌屬內(nèi)的其他李斯特菌相區(qū)分；李斯特菌顯色培養(yǎng)基，可以直接鑒定到種，將單增篩選出來，且準確率高；顯色培養(yǎng)基在檢測中的應用2單增李斯特氏菌檢測李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)條件：36±1℃/18-24h李斯特氏菌屬：藍綠色菌落

單增李斯特氏菌：藍綠色菌落,周圍有白色不透明暈圈綿羊李斯特氏菌：同單增一樣金黃色葡萄球菌：黃色菌落大腸桿菌：抑制BPW增菌改良LST肉湯顯色（DFI）生化鑒定國標結(jié)果無菌水EE肉湯顯色生化鑒定結(jié)果行標顯色培養(yǎng)基在檢測中的應用3阪崎腸桿菌檢測DFI瓊脂阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基相同點：阪崎腸桿菌均為藍綠色菌落不同點：配方不一致；所屬標準不同主要根據(jù)客戶使用標準，選擇用哪種產(chǎn)品顯色培養(yǎng)基在檢測中的應用4大腸桿菌O157檢測大腸O15:H7：（淺)紫紅色大腸桿菌：鐵藍色其他菌：抑制或呈無色、藍綠色、鐵藍色培養(yǎng)條件：36±1℃/18-24h大腸O157顯色培養(yǎng)基APW増菌液顯色培養(yǎng)基或TCBS生化鑒定結(jié)果副溶血性弧菌：紫紅色霍亂弧菌：藍綠色創(chuàng)傷弧菌：藍綠色顯色培養(yǎng)基在檢測中的應用5副溶血性弧菌檢測在傳統(tǒng)培養(yǎng)基TCBS上擬態(tài)、創(chuàng)傷弧菌與副溶血性弧菌都是綠色菌落，不能區(qū)分并且綠色菌落容易被大量黃色雜菌掩蓋，造成漏檢培養(yǎng)條件：36±1℃/18-24h弧菌顯色培養(yǎng)基顯色培養(yǎng)基在檢測中的應用6志賀氏菌檢測志賀氏菌顯色培養(yǎng)基原理利用糖代謝和特異性酶，針對非志賀菌產(chǎn)生的生化反應，分離出不同顏色的非目標菌落。目標菌白色，菌落大小1-3mm，菌落周圍為