雄黃的炮制原理及藥效學(xué)研究

雄黃的炮制原理及藥效學(xué)研究

雄黃是黃氏家族的一種氧化物。主要含有2-羥基二硫酸（as2s2）和少量三氧化二硫酸（as2o3）等雜質(zhì)。雄黃性味為辛,溫;有毒。具有解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧的功效。臨床上內(nèi)服治療驚癇腫痛,外用治療疥癬、惡瘡、毒蛇螫傷。近年來有關(guān)報(bào)道還表明,雄黃對急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)、慢性粒細(xì)胞白血病(CUL)、骨髓增生異常綜合征(MDS)等惡性血液系統(tǒng)疾病均有顯著療效。由于雄黃有毒,《中國藥典》規(guī)定雄黃中As2S2的含量不得低于90%;雄黃入丸、散用時,用量僅為0.05~0.1g。而且,雄黃入藥時一般都要經(jīng)加工炮制和限量使用。雄黃入藥炮制始于《神農(nóng)本草經(jīng)》,歷代沿用的制法有干研法、水飛法、煮法、熬法、油煎法、復(fù)制法、火飛法等,其中使用歷史較久的當(dāng)屬創(chuàng)于漢代的干研法和始于宋代的水飛法?！吨袊幍洹芬?guī)定的炮制方法是水飛法。這些炮制方法的目的主要在于凈化、制粉、減毒和改變功效。近年來,大量藥學(xué)工作者以雄黃中As2S2、As2O3及微量元素的含量為化學(xué)指標(biāo),并結(jié)合毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)和藥效學(xué)實(shí)驗(yàn),探討了傳統(tǒng)炮制方法的原理,并對這些方法進(jìn)行了考察對比研究,結(jié)果表明:(1)雄黃有微毒,毒性成分為As2O3,雄黃使用不當(dāng)易引起中毒,甚至導(dǎo)致死亡。雄黃入藥炮制的主要目的是減毒、制粉、凈制。(2)雄黃炮制降毒的原理為:(1)As2O3能溶于水、醇、酸及堿類,100g水能溶解0.1~1gAs2O3,用水或酸液處理能將其溶除;(2)As2O3具有升華性,高溫加熱可使其升華逸出而被除去。1雄黃傳統(tǒng)制備毒毒法的研究1.1干研法的安全傳統(tǒng)的干研法制粉效率較高,但不能減少雄黃中As2O3的含量,因此從降低毒性、保證用藥安全方面考慮,干研法不宜作為雄黃的法定炮制方法。水飛法的用水量和水溫對降低雄黃成品中As2O3的效果有直接影響。在其他條件一致的情況下,增加用水量和提高用水溫度,可提高降低As2O3含量工藝的效率。水飛法可起到凈制作用,使成品中As2S2的含量顯著高于原藥材。1.2醋煮品對雄黃as2o3含量的影響原思通等用干研法將雄黃制成極細(xì)粉后,用50%醋液加熱煮沸雄黃制備醋煮品。結(jié)果表明,醋煮法能顯著降低雄黃樣品中As2O3含量,使As2O3含量降低約80%以上;而在總用液量相同或稍大的條件下,水飛法能使雄黃樣品中As2O3含量降低約30%~50%。此外,水飛法與醋煮法均能提高雄黃樣品中As2S2含量。但毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明,醋煮品的毒性顯著低于水飛品。這是因?yàn)锳s2O3在酸性及加熱條件下,溶解度提高,易于被洗除[2~4]。1.3不同途徑感染雄黃的效果文獻(xiàn)記載的蒙藥炮制方法主要有“濃鹽水飛去毒用”、“研粉脫脂酸牛奶浸后清水洗即可”、“酒浸兩日用”等?，F(xiàn)代中藥炮制學(xué)研究表明,蒙藥炮制法不會使雄黃中As2S2含量顯著損失僅酒浸晶損失率達(dá)07左右脫脂酸牛奶浸制可使雄黃中As2O3含量降低約80%左右;2%鹽水水飛法也可使其降低約35%,與純水水飛法比較無顯著性差異(P>0.10);酒浸法對雄黃中As2O3含量影響甚微(P>0.10),去毒效果不可靠,表明As2O3幾乎不溶于乙醇。張亞敏等進(jìn)一步考察了采用酸牛奶,按水飛法操作炮制雄黃的降毒作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在相同工藝條件下,酸奶飛法的降毒作用比水飛法好,與脫脂酸牛奶浸制法相近。雄黃經(jīng)酸奶炮制后對小鼠的急性毒性顯著降低;對大鼠血紅蛋白(Hb)、血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(SGPT)含量、臟器(心、肝、脾、肺、腎、胸腺)指數(shù)的影響均顯著低于雄黃生品,對大鼠的血象及尿液中白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、尿蛋白的含量均無影響,對心、脾、腎、胃腸均無影響。但雄黃炮制前后,對肝臟都有一定影響,表明雄黃炮制后毒性顯著降低,但仍有一定的毒副作用。1.4雄黃的存在是以as2o3為原料張亞敏等考察了文火悶煅、武火悶煅、馬福爐煅、香油熬化對雄黃中As2O3含量的影響。結(jié)果表明,大多數(shù)用火炮制品的含砷量都較生品高,推測可能是雄黃在高溫缺氧條件下仍會與少量氧發(fā)生反應(yīng)生成As2O3;但香油熬化品中As2O3的含量比生品和《中國藥典》規(guī)定的水飛品都少,其原因是在與氧氣隔絕的條件下,雄黃既不會反應(yīng)生成As2O3,且其中所含As2O3在加熱過程中升華逸出而被分離除去。另外,X射線分析報(bào)告提示雄黃與香油在加熱過程中會生成一些有機(jī)化合物,從而使可溶性砷的含量降低。此外,文火悶煅的雄黃含砷量雖超過了生品,但差別很小,說明若能控制好炮制條件即缺氧的條件,是可以控制As2O3生成的。因此,筆者認(rèn)為“香油熬化”、“文火悶煅”法若條件控制得好,對去毒仍是可行的,應(yīng)對“雄黃忌火煅”、“雄黃見火毒如砒”之說重新審視。2雄黃新制劑防水解毒法的研究2.1黃加氫球磨和預(yù)處理王允興等對加水球磨法的工藝進(jìn)行了改進(jìn)研究,提示雄黃加水球磨,水洗后在較低的溫度下干燥,既可保證較細(xì)的粒度,又可保證較低的可溶性砷含量。此法與傳統(tǒng)水飛法相近,且易于大規(guī)模生產(chǎn),似可代替水飛法。2.2相同工藝條件下水飛品中as2o3含量的變化陳青蓮等用稀醋酸、稀鹽酸代替食用水,按水飛法操作炮制雄黃。結(jié)果表明,在相同工藝條件下,50%稀醋酸和1%稀鹽酸制備的成品中的As2O3含量僅為水飛品的一半;且醋飛法能顯著增高As2S2的含量。酸飛法的去毒效果與酸液濃度成正比。2.3水洗法與傳統(tǒng)水飛法比較原思通等對雄黃用干研法制成極細(xì)粉,用水?dāng)嚢柘礈斐扇苄陨榈呐谥菩鹿に囘M(jìn)行了探索性研究。結(jié)果表明:(1)在總用水量相同的條件下,水洗法除可溶性砷效果與傳統(tǒng)水飛法相近。二法均能提高As2S2的含量,但均不顯著;(2)在總用水量不變的情況下,增加水洗滌的次數(shù)或減小雄黃粉粒度,是提高洗除As2O3效果的有效措施之一;(3)急性毒性實(shí)驗(yàn)表明,水洗品的毒性均低于干研品和水飛品,約為干研品的1/3左右。2.4雄黃洗滌劑的制備方法原思通等比較研究了水飛法、水洗法、酸洗法的去毒作用,并對酸洗法的工藝條件進(jìn)行了摸索和探討。結(jié)果表明:(1)降低可溶性砷效果為:稀醋酸洗法>稀鹽酸洗法>水洗法>水飛法;(2)水飛法、水洗法、酸洗法均可提高雄黃成品中As2S2的含量,其中以稀鹽酸洗滌法提高幅度較大;(3)水飛法、水洗法、酸洗法對雄黃樣品中微量元素含量均有不同程度的影響,尤以稀鹽酸洗法可使樣品中多數(shù)元素大幅度下降;醋洗可使雄黃所含的鉛、汞、鎘等對人體危害較大的幾種重金屬元素含量有不同程度的下降;(4)炮制品的毒性為:稀醋酸洗品<稀鹽酸洗品<水洗品<水飛品;(5)在酸液總用量不變的條件下,增加酸液濃度、洗滌次數(shù)和減小雄黃粉粒度,可提高洗除As2O3的效果。有人提出雄黃在粉碎條件下以水飛法為佳,洗滌時以酸洗法為佳,干燥時以晾干為佳。但考慮到水飛法在工業(yè)生產(chǎn)中難以實(shí)施,實(shí)際生產(chǎn)中采用了將雄黃粉碎成極細(xì)粉,加10倍量稀鹽酸攪拌洗滌30min,抽濾,水洗至中性,晾干的工藝。該法可使雄黃中As2O3含量從11.6mg·g-1降至1.59mg·g-1。2.5雄黃粉添加量和堿洗次數(shù)對as2o3含量的影響鐵步榮等根據(jù)As2S2不易溶于稀酸、稀堿,而As2O3為兩性偏酸,更易溶于堿液的性質(zhì),考察了堿洗法對As2S2和As2O3含量的影響。結(jié)果表明,堿洗法可顯著降低雄黃中As2O3含量,顯著優(yōu)于干研法和酸洗法,且成品中As2O3的含量低于《中國藥典》規(guī)定的限量標(biāo)準(zhǔn);堿洗和酸洗雄黃的失重一致;雄黃樣品中As2O3的含量在其他條件一致的情況下,隨堿液濃度的增高、堿洗次數(shù)的增加而減少,其中以3%氫氧化鈉(NaOH)堿洗效果最佳;隨著雄黃粉粒度減小,堿洗法洗除As2O3的效果越好,以120目最佳。但雄黃粉粒度若太小,則成品中As2O3的含量反而升高。裴月梅等綜合比較了水洗法、酸洗法、堿洗法的去毒效果,結(jié)果是酸洗法較好。3雄黃的降毒方法雄黃炮制降毒的原理及方法改進(jìn)研究表明:(1)高溫加熱炮制雄黃的方法不宜采取,雄黃加工過程中溫度應(yīng)控制在60℃。從歷代有關(guān)雄黃炮制研究的文獻(xiàn)資料記載中,也可看出高溫加熱法使用歷史均不長。(2)干研法不具有降毒作用,而水飛法具有凈制、去毒作用,因此干研法不可代替水飛法。在目前,宜選用水飛法,停用干研法,以保證臨床用藥安全。(3)《中國藥典》規(guī)定的雄黃水飛法并非是減少As2O3含量的最佳炮制方法。為將雄黃中的有毒成分嚴(yán)格控制在安全范圍內(nèi),《中國藥典》應(yīng)考慮選擇更好的雄黃炮制方法。(4)水洗法、酸洗法和堿洗法等方法,既簡化了傳統(tǒng)水飛法、酸奶飛法的操作工藝,又遵循了水飛法的炮制原理,使其具有與傳統(tǒng)炮制法相近的去毒、凈制作用。綜合比較雄黃新降毒方法的研究結(jié)果,一致認(rèn)為稀鹽酸洗法較佳,可考慮代替水飛法?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究和臨床用藥經(jīng)驗(yàn)證明,雄黃中的As2S2為主要有效成分,具有抑菌、抗病毒、抗腫瘤等作用。現(xiàn)代毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)顯示,雄黃西黃耆膠混懸液的半數(shù)致死量(LD50)為3.207g·kg-1,灌胃后可立即死亡,使肝肺充血。按礦物藥急性毒性分級,雄黃為低毒礦物藥;質(zhì)佳的湖南石門雄黃LD50>10g·kg-1(灌胃),較長時間內(nèi)服用對體重及血清尿素氮含量均有影響,腎間質(zhì)有充血及炎細(xì)胞浸潤,停藥后則有一定程度恢復(fù);As2O3的LD50為12mg·g-1,為高毒礦物藥,口服As2O3的中毒劑量為5~50mg,致死量為70~180mg(對70kg的人,約為0.76~1.95mg·kg-1)。由此可見,雄黃中的主要毒性成分為23符合中國藥典要求的雄黃在正常用法用量下對人體無嚴(yán)重毒副作用,若超量使用則易引起中毒。因此,降低雄黃毒性即指采用適當(dāng)?shù)呐谥品椒兓埸S,使成品中的毒性雜質(zhì)含量低于法定限量標(biāo)準(zhǔn)。人們對雄黃內(nèi)服用量的具體限定要求有爭議。1977年版《中國藥典》規(guī)定雄黃的內(nèi)服用量為0.3~1.0g;1995年版《中國藥典》將其內(nèi)服用量降為0.05~0.1g,但其收載的23個含雄黃中成藥中,約11個制劑中雄黃用量超過法定要求,有的甚至超量達(dá)5倍以上,這表明有時為達(dá)到較好的治療效果會超量使用雄黃。因此,有人提出現(xiàn)行《中國藥典》中規(guī)定雄黃的內(nèi)服限量太低,應(yīng)考慮提高此限量要求。由于近年來有報(bào)道表明,As2O3也具有抗腫瘤活性,尤其在治療APL等惡性血液性疾病方面有獨(dú)特療效,所以在研究雄黃的最佳炮制工藝時,不能單方面地追求降低As2O3,而應(yīng)結(jié)合藥效學(xué)、毒理學(xué)實(shí)驗(yàn)篩選確定最佳的降毒方法,將成品中As2O3的含量控制在安全而又合理的范圍內(nèi),滿足臨床治療需求。對As2O3的限量范圍進(jìn)行具體研究,為《中國藥典》確定雄黃用量和規(guī)定As2O3限量提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),也是篩選雄黃最佳炮制工藝所必須做的工作。4常用制作工藝的比較,主要有以下幾種綜上所述,在除去雄黃中劇毒成分As2O3的方法中,水飛法不如醋煮法、酸牛奶浸制法和酸奶飛法、酸飛法、酸洗法、堿洗法好;酸飛法比酸奶飛法好;水洗法與水飛法相近,但水飛法能顯著提高雄黃中As2S2的含量;酸洗法、堿洗法可大大降低As2O3含量,顯著優(yōu)于水洗法和水飛法,但凈化作用略差于水飛法;酸飛法比酸洗法好,但差異不顯著,因酸飛法還具有較強(qiáng)的凈制作用,所以若原藥材含雜質(zhì)較多,酸洗法不如酸飛法好。此外,油煮和煅制法需高溫加熱,操作條件難控制,