辛醇對紅藻氨酸致癇大鼠海馬CX32和CX43表達(dá)的影響的開題報告

辛醇對紅藻氨酸致癇大鼠海馬CX32和CX43表達(dá)的影響的開題報告一、研究背景和意義海藻中存在多種輔助作用氨基酸，其中甲基硫氨酸（Methionine，Met）、組氨酸（Histidine，His）和異亮氨酸（Isoleucine，Ile）具有抗癲癇作用，可減少致癇物質(zhì)的進(jìn)入。紅藻中富含Met、His等輔助作用氨基酸，具有抗氧化、抗腫瘤和保護中樞神經(jīng)系統(tǒng)等多種生理活性作用。辛醇是一種紅藻中提取出的天然產(chǎn)物，其衍生物辛醇-3-O-吡啶醇甘油醚（SPG）已被證實具有抗氧化、抗腫瘤和神經(jīng)保護等作用，而對其對紅藻氨酸對致癇大鼠海馬產(chǎn)生的影響還不完全清楚。因此，本研究旨在探究辛醇對紅藻氨酸致癇大鼠海馬CX32和CX43表達(dá)的影響，為進(jìn)一步研究其抗癲癇作用機制提供理論基礎(chǔ)。二、研究內(nèi)容和方法1.研究內(nèi)容本研究將通過以下幾個方面探究辛醇對紅藻氨酸致癇大鼠海馬CX32和CX43表達(dá)的影響：（1）大鼠模型制備及處理：采用氨丙酮誘導(dǎo)癲癇大鼠模型，分為陰性對照組、模型組和辛醇組，其中辛醇組將給予適量SPG處理。（2）腦組織標(biāo)本制備：在動物實驗結(jié)束后，采集大鼠腦組織樣本。（3）RT-PCR：利用實時熒光定量PCR技術(shù)檢測海馬CX32和CX43mRNA表達(dá)水平。（4）Westernblot：利用Westernblot技術(shù)檢測CX32和CX43蛋白表達(dá)水平。2.研究方法（1）動物模型制備和處理：將健康的SD大鼠隨機分為三組，分別是陰性對照組、模型組和辛醇組。模型組和辛醇組在氨丙酮注射后24小時日給予氨丙烯酸（30mg/kg），然后辛醇組日給予適量SPG（10mg/kg），其它組日給予等體積蒸餾水，持續(xù)10天；陰性對照組則不做任何處理。（2）海馬腦組織標(biāo)本的制備：在動物實驗結(jié)束后采集大鼠海馬腦組織，從腦的背側(cè)進(jìn)行解剖，小心地將兩側(cè)大腦半球分離，將海馬腦組織分離并保存。（3）Real-timePCR：從每個組的海馬組織中提取總RNA，利用反轉(zhuǎn)錄酶和實時熒光定量PCR技術(shù)，檢測CX32和CX43mRNA的表達(dá)。（4）Westernblot：將各組組織樣本中提取蛋白，利用Westernblot技術(shù)檢測CX32和CX43的蛋白表達(dá)。三、預(yù)期成果及研究意義該研究將通過動物模型和實驗，探究辛醇對紅藻氨酸致癇大鼠海馬CX32和CX43表達(dá)的影響，揭示其抗癲癇作用機制。預(yù)期成果包括海馬腦組織樣本、CX32和CX43mRNA表達(dá)水平和CX32、CX43蛋白表達(dá)水平的數(shù)據(jù)，將從分子層面揭示辛醇的抗癲癇作用，提供該類天然產(chǎn)物開發(fā)抗癲癇藥物的新思路和可能性。四、研究計劃預(yù)計本研究將分為以下幾個階段：第一階段：文獻(xiàn)調(diào)研和實驗設(shè)計（1個月）。第二階段：動物模型制備和處理、腦組織標(biāo)本制備（2個月）。第三階段：RNA提取、實時PCR檢測CX32和CX43mRNA表達(dá)、蛋白組提取、Westernblot技術(shù)檢測CX32和CX43蛋白表達(dá)（3個月）。第四階段：數(shù)據(jù)分析和論文撰寫（2個月）。五、參考文獻(xiàn)1.張迎英，石忠良，于小光.海藻中葡萄糖酸鹽及其衍生物的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代食品科技,2014.2.王小莉，耿彪，趙鑫宇.海藻中活性多糖的生物學(xué)研究進(jìn)展[J].海洋科學(xué)進(jìn)展,2015.3.RArundhathi,KiranmaiM,JayaprakashRaoK.AntiepilepticpotentialofmarineredalgaeHypneavalentiaeandLaurenciasnyderiaeinpentylenetetrazoleinducedseizures[J].AsianPacificJournalofTropicalBiomedicine,2012.4.BRahimiMovaghar,ENakhaei,SHLangariParast.Theefficacyofmethionineandvalproateonacuteandlong-termdeficitsinducedbyironchlorideinrats[J