G試驗與GM試驗課件

G試驗與GM試驗微生物室范會侵襲性真菌病(invasivefungaldisease,IFD)概念：又稱侵襲性真菌感染，是指真菌侵入人體組織、血液，并在其中生長繁殖導致組織損害、器官功能障礙和炎癥反應的病理改變及病理生理過程。侵襲性真菌感染因素增加真菌感染的診斷診斷標準由危險因素、臨床特征、微生物學檢查和組織病理學檢查4部分組成。根據真菌感染的可能性將診斷結果分為三個級別:確診、擬診和疑似。真菌感染的診斷臨床特征---特異性？影像學---特異性？真菌涂片、培養(yǎng)---特異性？敏感性？時間病理---特異性！敏感性？早期、快速、特異、敏感、采樣方便G試驗與GM試驗G試驗檢測范圍檢測底物：（1-3）-β-D葡聚糖診斷：侵襲性真菌感染（IFD）檢測頻率：每周一至周五真菌細胞壁成分：念珠菌、曲霉、鐮刀霉、毛孢子菌、卡氏肺孢子菌、支頂孢、組織胞漿菌等不能檢測：結合菌（毛霉、根霉）、隱球菌G試驗原理----反應特異性G試驗----國產檢測方法國產：MB-80（金山川）.動態(tài)濁度法.cut-off：陰性＜10ug/ml，中介10-20ug/ml，陽性＞20ug/ml，兒童陽性＞50ug/ml國產：湛江安度斯生物有限公司.動態(tài)比色法.cut-off：陰性＜100.5pg/ml，中介100.5-151.5pg/ml，陽性＞151.5pg/ml標本：血漿G試驗----試劑盒鱟試劑來源：東方鱟、美洲鱟檢測方法：動態(tài)比濁法、動態(tài)比色法試劑反應性不同，檢測結果不同，cut-off值不同30名AML、MDS念珠菌血癥患者連續(xù)>2次G試驗陽性，可提高特異性、PPV（陽性預測值）確診或擬診IFD，平均比臨床癥狀出現早10dG試驗----影響因素G試驗----小結無熱源采血管、清潔的檢測環(huán)境高NPV，連續(xù)>2次G試驗陽性，可提高特異性和PPVIFD早期診斷.比出現臨床癥狀體征早約10天.比HRCT改變早約9天敏感性與感染程度（真菌負荷量）相關念珠菌定植不引起G試驗升高動態(tài)反應感染程度和抗真菌治療療效兒童BDG水平高于成人GM試驗GM試驗診斷：侵襲性曲霉菌感染（IA）檢測底物：半乳甘露聚糖.曲霉細胞壁成分.菌絲在組織中生長時釋放.熱穩(wěn)定.可溶性：serum、BALF、CSF檢測頻率：一周兩次GM試驗----方法及原理伯樂試劑.原理：雙抗體夾心法，采用小鼠單克隆抗體EBA-2，檢測人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖。天津貽諾琦.GM試驗----臨床價值曲霉菌定植時很少釋放入血，因此有利于鑒別侵襲與定植GM釋放量與菌量成正比，可反映感染程度連續(xù)檢測GM試驗可作為治療療效的監(jiān)測在造血干細胞移植患者中的診斷敏感性高非特異交叉反應：青霉較多、隱球菌GM試驗----27項研究薈萃分析推薦用于惡性血液腫瘤和HSCT(造血干細胞移植)受體不推薦用于SOT（實體器官移植）受體GM試驗----假陽性抗菌藥物：哌拉西林-他唑巴坦.采樣：用藥前，或藥物濃度最低時高劑量使用激素透析：不能清除大份子GM化療的嚴重黏膜炎的患者.谷類食物中的GM抗原通過腸道入血兒童和新生兒：假陽性占83%.母乳或配方食品中雙歧桿菌與GM有交叉反應交叉反應真菌：青霉、擬青霉、隱球菌、頭狀地霉、組織胞漿菌等GM試驗----假陰性抗真菌藥物.三唑類--降低GM水平.米卡芬凈--升高GM水平（能夠破壞真菌細胞壁，但不能清除）低侵襲性曲霉菌病低曲霉負荷量GM試驗----小結早期、快速、高特異性GM水平反映曲霉負荷量推薦用于惡性血液腫瘤、HSCT患者IPA可考慮BALF標本，并適當提高折點曲霉腦病可考慮CSF標本動態(tài)變化指導抗真菌藥物使用結合患者臨床情況進行分析G+GM----縮小病原譜病例一男性，55歲，因“反復喘息發(fā)作31年，復發(fā)伴發(fā)熱1月”入院既往史：支氣管哮喘，過敏性鼻炎，糖尿病查體：37.6℃，雙肺散在哮鳴音，未及濕羅音實驗室檢查：-血常規(guī)：WBC10.6×109/L,N51.5%,E15.2%-ESR78mm/h,CRP94.9mg/L-PPD皮試（-）-血ANA（-）-血清GM測定：陽性（3.193≥0.5）-痰真菌涂片及培養(yǎng)（-），細菌培養(yǎng)（-），抗酸（-）-肺功能：重度阻塞性通氣功能障礙，低氧血癥，支氣管擴張試驗（-）診斷：過敏性支氣管肺曲霉?。ˋBPA）治療及轉歸：抗炎、解痙、化痰、平喘，伊曲康唑+甲強龍靜脈滴注；治療后第三天出黑黃色痰栓，此后痰量漸少，氣急好轉，療程兩周后改伊曲康唑口服，激素遞減。病情穩(wěn)定后出院治療后化驗-血常規(guī)：WBC6.0×109/L,N86.5%,E0%-ESR7mm/h,CRP2.7mg/L病例二肝炎，右肺實變，右胸腔積液支氣管鏡做細菌、TB、真菌，血培養(yǎng)結果均陰性8月20日.痰涂片：在中性粒細胞內可見革蘭陽性球菌少量.痰培養(yǎng)：光滑念珠菌.治療：特治星+萬古霉素.PCT7.9ng/mlPCT(ng/ml)變化情況WBC內可見革蘭陽性球菌+光滑念珠菌不能脫機8月26日體溫：38℃，不能脫呼吸機WBC：15.0×109/L8月27日：會診COPD?非典病原體？PCP？真菌？抗菌藥物？檢查：G試驗PCT(ng/ml)變化情況WBC內可見革蘭陽性球菌+光滑念珠菌不能脫機G試驗（pg/ml）變化情況體溫的變化情況WBC（×109/L