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DB35DB35/T1938—2020飼料中沙門(mén)菌和沙雷菌二重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法Duplexreal-timePCRassayforSalmonellaandSerratiainfeeds2020-09-29發(fā)布2020-12-29實(shí)施福建省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I 1 1 1 1 2 2 2 2 4 51本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中沙門(mén)菌和沙雷菌二重實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法有關(guān)的檢測(cè)原理、主要儀器、GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)Real-timePCR：熒光PCR（Real-time將4.1中的培養(yǎng)物接種到亞硒酸鹽胱氨酸培數(shù)擴(kuò)增，在反應(yīng)過(guò)程中沙門(mén)菌特異的熒光探針跟靶核酸雜交，同時(shí)25.1恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃,42℃±1℃。3取8.1中的前增菌培養(yǎng)物1mL，接種于裝有10mLRV（6.3）的試管中，于42℃±1℃培養(yǎng)24h。8.3.1.1應(yīng)在樣本處理區(qū)進(jìn)行。取n個(gè)1.5mL滅菌離心管，其中n為待檢樣品應(yīng)在檢測(cè)區(qū)進(jìn)行。將8.3.3中加樣后的PCR管放入熒光PCR儀內(nèi)，記錄相應(yīng)樣品擺放順序。設(shè)定采集4陰性對(duì)照無(wú)Ct值顯示或Ct值為40，陽(yáng)性對(duì)照Ct值≤30.0，并且出現(xiàn)典檢測(cè)樣品Ct值為零或Ct值＞35.0時(shí)，報(bào)告沙門(mén)菌或居泉沙5培養(yǎng)液的配制A.1.1成分A.1.2制備A.2.1.1成分A.2.1.2制備A.2.2.1成分2O)4A.2.2.2制備6A.2.3溶液CA.2.3.1成分A.2.3.2制備A.2.4完全培養(yǎng)基A.2.4.1成分A.2.4.2制備A.3.1基礎(chǔ)液A.3.1.1成分A.3.1.2制備A.3.2.1成分
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