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新生兒溶血病兩種檢查方法的比較分析第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科肖瑞卿林武存等兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
新生兒母嬰血型不合溶血病,是由于孕婦與嬰兒血型不合引起的溶血病,主要包括ABO和Rh溶血病,主要檢測(cè)方法是患兒紅細(xì)胞上直接抗人-IgG(DAT)試驗(yàn)、血清游離抗體檢測(cè)及患兒紅細(xì)胞放散液鑒定三項(xiàng)試驗(yàn)。我們用兩種方法對(duì)母嬰血型不合進(jìn)行檢測(cè)并進(jìn)行了比較,現(xiàn)將結(jié)果分析報(bào)道如下:兩種方法檢查新生兒溶血病的比較11材料與方法
2.1標(biāo)本作ABO及Rh(D)血型鑒定,根據(jù)不同血型分為相合與不相合兩組。ABO血型不合的患兒標(biāo)本,離心分出上清,將紅細(xì)胞洗滌三次,分別配成3-5%的紅細(xì)胞混懸液及壓積紅細(xì)胞備用。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
2.2ABO不合三項(xiàng)檢查:患兒紅細(xì)胞做DAT試驗(yàn)患兒紅細(xì)胞放散抗體患兒血漿游離抗體
兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
2004年以前用抗人-IgG試驗(yàn)(試管)法鑒定。2004年后檢測(cè)紅細(xì)胞上不完全抗體,用DAT試驗(yàn);患兒血漿游離抗體試驗(yàn),患兒紅細(xì)胞放散及自身對(duì)照,用戴安娜卡式系統(tǒng)鑒定(抗體釋放用56℃熱放散法)。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
2.3洗滌A、B、O紅細(xì)胞及O型譜細(xì)胞,分別配成3-5%備用。
2.4母嬰ABO血型相合,用卡式鑒定,母血清加患兒紅細(xì)胞做交叉配血試驗(yàn),患兒自身對(duì)照,陰性即可停止試驗(yàn)。試驗(yàn)陽(yáng)性按ABO相合的要求,用Rh標(biāo)準(zhǔn)譜細(xì)胞做游離抗體與放散試驗(yàn),譜細(xì)胞由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。不相合按照ABO血型不合的做三項(xiàng)試驗(yàn)。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較12結(jié)果
3.1
585例中ABO血型相合的235例,不合350例,其中檢測(cè)出抗-A106例,抗-B58例。Rh抗體6例(抗-D4例、抗CD1例、抗cE1例),共檢測(cè)出抗體170例,占29%。無(wú)抗體415例,占71%。Rh血型抗體中,2例ABO血型不合,4例ABO血型相合,兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
3.2用抗人-IgG法檢測(cè)210例,陽(yáng)性51例,占24.29%。用卡式檢測(cè)375例,陽(yáng)性119例,占31.7%,詳細(xì)見(jiàn)表1。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
表1兩種方法檢查新生兒溶血病的比較方法
ABO
Rh相合
ABO相合ABO不相合抗-A抗-B抗-D抗CD抗cE抗人-IgG29174192118戴安娜卡式77411143232
兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
3.3
164例ABO陽(yáng)性病例分析三項(xiàng)試驗(yàn)均為陽(yáng)性108例,占65.9%;DAT試驗(yàn)陽(yáng)性118例,占71.9%;放散試驗(yàn)陽(yáng)性160例,占97.6%;游離抗體試驗(yàn)陽(yáng)性150例,占91.5%。詳細(xì)結(jié)果表2。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1表2164例ABO新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)不同陽(yáng)性比較項(xiàng)目
ABO
抗-A抗-B合計(jì)百分比
直抗、游離、放散792910865.9
游離、放散15233823.2
直抗、放散4263.7
單獨(dú)放散5384.9
直抗、游離3142.4注:6例Rh不合兩種方法三項(xiàng)試驗(yàn)均是陽(yáng)性兩種方法檢查新生兒溶血病的比較13討論
新生兒血型不合溶血病,是指母、嬰血型不合引起的新生兒同種免疫性溶血疾病。至今發(fā)現(xiàn)的人類26個(gè)血型系統(tǒng)中,以A、B、O血型不合新生兒溶血病為最常見(jiàn),其次為Rh血型系統(tǒng)。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
上海血液中心曾報(bào)告檢測(cè)834例新生兒溶血病,其中A、B、O溶血病712例(85.3%),Rh溶血病122例(14.6%)。我們檢測(cè)ABO不合占96.47%,Rh血型不合占3.5%。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
三項(xiàng)試驗(yàn),以放散陽(yáng)性比例最高,DAT試驗(yàn)陽(yáng)性比例最低,可能為新生兒由于發(fā)育不成熟,紅細(xì)胞上A、B抗原相對(duì)較少,DAT試驗(yàn)常顯陰性結(jié)果,紅細(xì)胞DAT試驗(yàn)結(jié)果陰性,不等于沒(méi)有結(jié)合IgG,只是抗體的數(shù)量還沒(méi)有達(dá)到DAT試驗(yàn)陽(yáng)性的要求。應(yīng)以放散結(jié)果為準(zhǔn),如果單是DAT試驗(yàn)與游離抗體試驗(yàn)陽(yáng)性應(yīng)于臨床癥狀結(jié)合予以治療。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
游離抗體和放散液鑒定結(jié)果:抗人-IgG法檢測(cè)210例,陽(yáng)性51例(24.29%??ㄊ綑z測(cè)375例,陽(yáng)性121例,占例31.7%。卡式陽(yáng)性檢出率明顯高于傳統(tǒng)的抗人-IgG法,結(jié)果同報(bào)道相符。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
卡式法是生物化學(xué)凝膠過(guò)濾技術(shù)和免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物,通過(guò)調(diào)節(jié)凝膠的濃度來(lái)控制凝膠間隙的大小。使其間隙只能允許游離的RBC通過(guò),抗原抗體結(jié)合的紅細(xì)胞則不能通過(guò),通過(guò)離心法,使游離RBC與凝集RBC分離。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
游離的紅細(xì)胞通過(guò)離心RBC沉積在凝膠管底部,則表明RBC未發(fā)生凝聚凝集,呈陰性反應(yīng)。若RBC聚集在凝膠帶上部或凝膠中,則表明RBC發(fā)生凝集,呈陽(yáng)性反應(yīng)。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1凝膠中已加抗人-IgG,加入樣本即可,從而簡(jiǎn)化了操作。結(jié)果穩(wěn)定且易保存,靈敏度高,能檢測(cè)到十分微弱的抗原抗體凝集反應(yīng)。樣本用量少,利于新生兒及少血樣本的檢測(cè),重復(fù)性好。操作標(biāo)準(zhǔn)化,減少了人員的隨意性操作,是一種可靠的試驗(yàn)方法。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1
HDN應(yīng)早檢測(cè)、早診
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