生物安全手冊

生物安全手冊

文件編號：

第A/irA▲版優(yōu)廣

依據(jù)18015189:2012

《醫(yī)學(xué)實驗室一質(zhì)量和能力的專用要求》編制

編制：

審核：

批準(zhǔn)：

生效日期：年月日

XXX醫(yī)院檢驗科

目錄

一、生物安全管理體系

二、生物安全評估和管理

三、標(biāo)記和標(biāo)識管理

四、生物安全要求

五、醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序

六、個人防護(hù)裝備（PPE）

七、實驗室設(shè)備管理

八、實驗室操作程序

九、實驗室發(fā)生意外時處理

十、實驗室發(fā)生時溢出反應(yīng)

H^一、消毒和滅菌處理程序

十二、實驗室傳染性物質(zhì)的運送

十三、化學(xué)品、火和電的安全

生物安全管理體系

1.緊急事件電話和辦公室聯(lián)系方式

救護(hù)車/火警/警察

生物安全負(fù)責(zé)人

生物安全辦公室

2.生物安全管理機構(gòu)

生物安全負(fù)責(zé)人：

生物安全委員會委員：

實驗室生物安全責(zé)任人：白文華

實驗室生物安全管理員：白文華、王中華、凌靜、夏志茹、魯含笑。

生物安全辦公室：設(shè)在醫(yī)院疾病控制部內(nèi)

3.職責(zé)

3.1生物安全負(fù)責(zé)人

XXX為生物安全負(fù)責(zé)人。其主要職責(zé)是：

3.1.1負(fù)責(zé)建立本單位生物安全管理體系，落實生物安全管理責(zé)任部

門或責(zé)任人。

3.1.2定期召開生物安全管理會議，對實驗室生物安全相關(guān)的重大事

項作出決定。

3.1.3批準(zhǔn)和發(fā)布實驗室生物安全手冊、生物危害評估等重要文件。

3.1.4保持與生物安全辦公室的聯(lián)系。

3.2實驗室生物安全責(zé)任人

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XXX為實驗室生物安全責(zé)任人。其主要職責(zé)是:

3.2.1全面負(fù)責(zé)本實驗室生物安全工作。

3.2.2決定并授權(quán)進(jìn)入本實驗室的工作人員。

3.2.3監(jiān)督有關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的執(zhí)行，糾正違規(guī)行為并有權(quán)作

出停止實驗的決定。

3.2.4任命實驗室生物安全管理員具體落實實驗室生物安全管理工

作。

3.2.5負(fù)責(zé)制定和實施實驗室應(yīng)急處置預(yù)案。

3.2.6負(fù)責(zé)實驗室安全事故的現(xiàn)場處置和調(diào)查，并將調(diào)查結(jié)果以及處

理意見向生物安全辦公室報告。

3.2.7負(fù)責(zé)對涉及感染性物質(zhì)的研究計劃、方案以及操作程序等，實

施前的生物安全審查。

3.3實驗室生物安全管理員

實驗室生物安全管理員的主要職責(zé)是：

3.3.1負(fù)責(zé)實驗室生物安全保障以及技術(shù)規(guī)章方面的咨詢工作。

3.3.2就技術(shù)方法、程序和方案、生物因子、材料和設(shè)備進(jìn)行定期的

內(nèi)部安全檢查。

3.3.3糾正違反生物安全操作規(guī)程的行為。

3.3.4在出現(xiàn)潛在感染性物質(zhì)溢出或其他事故時，協(xié)助事故調(diào)查。

3.3.5檢查和監(jiān)督實驗室廢棄物的有效管理與安全處置。

3.3.6檢查和監(jiān)督實驗室各項消毒滅菌措施的落實情況。

3.4生物安全辦公室

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生物安全辦公室設(shè)在XXX,其主要職責(zé)是：

3.4.1負(fù)責(zé)組織制（修）訂和實施實驗室生物安全手冊、生物安全規(guī)

章制度、操作規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。

3.4.2負(fù)責(zé)對本院實驗室生物安全防護(hù)，微生物菌（毒）種和生物樣

本保存和使用，實驗室安全操作，實驗室廢氣、廢水、廢棄物處置和

消毒滅菌等規(guī)章制度實施情況進(jìn)行監(jiān)督、檢查，并定期評估實施效果。

3.4.3負(fù)責(zé)組織跟蹤國際國內(nèi)實驗室生物安全管理最新動態(tài)。提供實

驗室操作的咨詢以確保遵循國家相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。

3.4.4負(fù)責(zé)定期調(diào)查、了解實驗室工作人員的健康狀況和健康監(jiān)護(hù)情

況。決定必要的特殊醫(yī)學(xué)監(jiān)測。

3.4.5組織生物安全知識培訓(xùn)并評估培訓(xùn)效果。

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生物安全評估和管理

在建設(shè)實驗室或開展實驗活動之前，生物安全辦公室應(yīng)參照衛(wèi)生部

《名錄》組織各相關(guān)方面的專家對擬操作的生物因子的危害程度、實驗

活動的危險性、氣溶膠傳播的可能性、預(yù)防治療的獲得性、防護(hù)屏障的

安全性、應(yīng)急預(yù)案的有效性等因素進(jìn)行評估，確定相應(yīng)的生物安全防護(hù)

水平等級。

實驗室生物危害評估結(jié)果應(yīng)由醫(yī)院的法定代表人簽字認(rèn)可，并歸檔

保存。

生物安全負(fù)責(zé)人最終對實驗室內(nèi)的安全負(fù)責(zé)，其職責(zé)之一是指導(dǎo)現(xiàn)

行工作以判斷潛在的危害（生物安全評估），職責(zé)之二是實驗開始前采

用合適的安全程序（風(fēng)險管理）。

特定的實驗開始前需要預(yù)先進(jìn)行登記和通過生物安全負(fù)責(zé)人的批

準(zhǔn)。

風(fēng)險評估和風(fēng)險管理的5個“P”是指：

?Pathogen病原體-危險的生物因子

?Procedures規(guī)程-推薦的實驗操作和安全的操作規(guī)范

?Personnel人員-相應(yīng)的培訓(xùn)與技能

?Protectiveequipment防護(hù)設(shè)備-防護(hù)衣和安全設(shè)備

?Place地點-實驗室所在位置

實驗室工作的每一方面都應(yīng)考慮風(fēng)險評估和風(fēng)險管理的5個“P”。

正確地指導(dǎo)和風(fēng)險評估能幫助免受生物危害的暴露，以及最大程度減少

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實驗室受到感染的可能性。

1.風(fēng)險評估和風(fēng)險管理表

風(fēng)險評估風(fēng)險管理

?傳染因子類型（見附錄A）?登記

?感染途徑■生物安全辦公室

?感染性疾病發(fā)生過程■感染機構(gòu)

病原體

病毒性、致病性、數(shù)量、濃度、人群■約束機構(gòu)

中影響程度、昆蟲媒介的存在■疾控中心-選擇機構(gòu)

?氣溶膠風(fēng)險：超聲、離心、混勻、?建立一套結(jié)合安全使用的標(biāo)準(zhǔn)操作

混合、振動規(guī)程

?經(jīng)皮風(fēng)險：針頭、注射器、玻璃吸?遵守基本的生物安全規(guī)則

液管、解剖刀、低溫刀片/刀等?實驗室、工作區(qū)域、BSL-2或更高

規(guī)程

?飛濺/濺潑風(fēng)險：吸液管、接種環(huán)傳染因子實驗室內(nèi)的設(shè)備貼上標(biāo)識

?指導(dǎo)實驗室操作和檢查實驗設(shè)備

?用非傳染性材料做嘗試性試驗，以測

試新的規(guī)程/設(shè)備

?人員免疫?安全培訓(xùn)

■贅生物疾病?以前從事生物危害的經(jīng)歷

■感染?技術(shù)的熟練程度

■免疫抑制治療?立即向生物安全負(fù)責(zé)人和生物安全

■年齡、種族、性別、妊娠辦公室報告所有的暴露事件、被忽視

■手術(shù)（脾、胃切除）的事件以及相關(guān)疾病的癥狀

人員?免疫力?調(diào)查/核實事件/飛濺等，以防止再

?后暴露預(yù)防次發(fā)生

?血清庫

?對安全的態(tài)度

?安慰

?外傷、破損皮膚、濕疹、皮炎

?防護(hù)：?個人防護(hù)設(shè)備（PPE）:

?氣溶膠-可以吸入粒子直徑〈5阿1?口罩-HEPA,N-99,N-95,等

?飛濺/濺潑?面部（眼、鼻、嘴）防護(hù)-面具和安

?銳器全眼鏡、或蓋住下頜的面罩、前面

防護(hù)設(shè)備

無縫外衣或?qū)嶒炇彝庖?/p>

?手套

?生物安全柜

?安全離心管/轉(zhuǎn)子

?風(fēng)險組/生物安全等級、設(shè)備?基本的實驗室-門、易清潔的地方、

?氣溶膠風(fēng)險沖眼器、窗戶

地點

?受限制的過道?標(biāo)簽

?用直接氣流預(yù)防

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2.暴露途徑

生物因子要導(dǎo)致疾病發(fā)生，首先必須有足夠數(shù)量的因子進(jìn)入或侵入

人體，進(jìn)入的途徑有經(jīng)口、呼吸道、黏膜及與動物的接觸（叮、抓傷）,

當(dāng)生物危害物進(jìn)入人體，它產(chǎn)生疾病還需滿足其它條件，它們必須在人

體細(xì)胞、組織和/或器官內(nèi)生長繁殖，克服人體的自然免疫機制和變異

或適合人體的變化。

年齡、免疫狀況、職業(yè)、物理或地理環(huán)境等因素會導(dǎo)致個體對疾病

的不同易感性。

在涉及生物危害時，確定其最低感染量是很困難的。同一病原體相

同劑量在一個人身上可能無癥狀，而在另一人身上可能導(dǎo)致嚴(yán)重的癥狀

甚至致命。有些微生物只要一個進(jìn)入到人體就足以侵入并促使疾病的發(fā)

生，結(jié)核桿菌就是一個例子。暴露途徑的更多信息見下圖。

易案困于拘傳，逾任

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2.1實驗室內(nèi)傳染因子的傳播途徑

暴露途徑防護(hù)措施

黏膜：通過飛濺或濺潑暴露眼、鼻、嘴里的通過以下方式進(jìn)行面部的預(yù)防：

黏膜?戴護(hù)眼鏡或面罩

?在生物安全柜內(nèi)或保護(hù)罩后工作

?進(jìn)行規(guī)范的微生物操作

吸入：由于離心滲漏、溢出或產(chǎn)生氣溶膠的通過以下方式避免暴露氣溶膠：

操作如吸液、混勻等而吸入了可吸入?在生物安全柜內(nèi)工作

的氣溶膠粒子（直徑〈5阿1）。?離心時使用密封轉(zhuǎn)子或杯

?進(jìn)行規(guī)范的微生物操作

吞咽；口腔吸入、吃、喝、在實驗室里抽煙通過以下方式防止經(jīng)吞咽產(chǎn)生的暴露：

?不在實驗室內(nèi)吃、喝或吸煙

?始終使用手工吸液

?進(jìn)行規(guī)范的微生物操作

經(jīng)皮:被感染過的銳器刺傷完好或破損皮膚、通過以下方式防止皮膚破損：

動物叮咬、抓傷、濕疹?用塑料制品代替玻璃制品

?使用銳器要非常小心

?用后立即將銳器丟棄在堅固防漏容器內(nèi)

?適當(dāng)限制動物

?戴不易劃破的手套、袖套、

?用防水繃帶包扎好破損皮膚并戴雙層手套

接觸（間接傳播）：通過接觸污染面（如凳、通過以下方式防止間接暴露：

電話、電腦、設(shè)備把手等）的手來觸?工作臺面消毒

摸黏膜或破損皮膚，或?qū)嶒灪笙词植?工作后、脫去手套后總是洗手。

徹底。?不要用戴手套或不戴手套的手觸摸臉部（良

好的個人習(xí)慣）

?實驗室內(nèi)不使用化妝品。

在實驗室內(nèi)的任何時候始終執(zhí)行以下工作制度：

?不在實驗室內(nèi)吃、喝或吸煙

?工作結(jié)束后或脫去手套后總是洗手

?實驗室內(nèi)穿戴好個人防護(hù)設(shè)備，離開實驗室前務(wù)必脫去個人防護(hù)設(shè)

備

?不用口吸、始終用手工吸液

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?使用銳器格外小心

?用合適的設(shè)備抑制氣溶膠的產(chǎn)生

?對工作臺面、溢出物和廢棄物進(jìn)行消毒

3.生物安全等級

國家和衛(wèi)生部對微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室確立了從事生物危害

工作對應(yīng)的生物安全等級。提供了微生物操作、實驗室設(shè)備和安全設(shè)

施的結(jié)合使用，以及所選的感染因子與使用推薦的四種生物安全等級

的實驗室操作。

以下是「4級生物安全所要求的實驗室操作、防護(hù)設(shè)備、實驗室

設(shè)施和傳染因子的概括。

3.1所推薦的生物安全等級與相應(yīng)感染因子

生物安安全設(shè)備實驗室設(shè)備

感染因子規(guī)程

全等級（第一道屏障）（第二道屏障）

已知對健康成人標(biāo)準(zhǔn)微生物操作。不需要。?開放工作臺。

和動物不造成疾?防止節(jié)肢動物和嚙

病。齒動物進(jìn)入。

?實驗室靠近出口處

BSL-1

有洗手池。

?實驗室的窗戶有紗

窗。

?適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備。

能引起人或動BSL-1操作加：I級orII級生物安BSL-1加:

物發(fā)病，但一般?限制進(jìn)入全柜或其它物理防護(hù)?實驗室門應(yīng)帶鎖并

情況下對健康?生物危害警示標(biāo)記設(shè)備，這些設(shè)備應(yīng)用可自動關(guān)閉。

工作者、群體、?銳器謹(jǐn)慎使用于可能會產(chǎn)生飛濺或?應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)施、高壓

家畜或環(huán)境不?制定安全手冊，確定氣溶膠的感染因子的滅菌鍋。

會引起嚴(yán)重危所有廢物消毒和醫(yī)療監(jiān)操作；個人防護(hù)設(shè)備：

BSL-2

害的病原體。實督計劃外套、手套、所需要

驗室感染不導(dǎo)的面部防護(hù)

致嚴(yán)重疾病，具

備有效治療和

預(yù)防措施，并且

傳播風(fēng)險有限。

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能引起人或動BSL-2操作加：n級（B2）或in級生BSL-2加：

物嚴(yán)重疾病，或?控制進(jìn)入物安全柜和用于所有?自成隔離區(qū)，進(jìn)入實

造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)?所有廢棄物消毒感染因子操作的其它驗室的過道用物理方

損失，但通常不?實驗室衣服洗之前對物理防護(hù)設(shè)備；個人式隔開。

能因偶然接觸其進(jìn)行消毒防護(hù)設(shè)備：防護(hù)衣、?入口處采用自動關(guān)閉

而在個體間傳手套、需要的呼吸道雙層門。

BSL-3播，或能用抗生防護(hù)。清潔區(qū)設(shè)置淋?獨立的送排風(fēng)系統(tǒng)，

素抗寄生蟲藥浴裝置?？諝馀胖潦彝猓辉?/p>

治療的病原體。室內(nèi)循環(huán)。

?實驗室負(fù)壓

?實驗室污染區(qū)內(nèi)設(shè)不

排蒸汽的高壓蒸汽滅

菌器。

能引起人或動BSL-3操作加：按照ill級生物安全的BSL-3加：

物非常嚴(yán)重的?進(jìn)入實驗室前更衣?遠(yuǎn)離建筑物或單獨的

疾病，一般不能?出口處沖淋所有步驟進(jìn)行，全身區(qū)域

治愈，容易直?所有材料在出口處消穿上有空氣供應(yīng)系?安裝供應(yīng)、排放真空

接、間接或因偶毒系統(tǒng)

BSL-4然接觸在人與統(tǒng)、正壓個人防護(hù)衣。?BMBL上的其它需求

人，或動物與

人，或人與動

物，或動物與

動物之間傳播

的病原體。

根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB19489-2004《實驗室生物安全通用要求》編制

3.2生物安全評估

目前實驗室內(nèi)開展的病原體檢測的范圍為:

病毒名稱

危害程度分未經(jīng)培養(yǎng)的感

類染材料的操作

國際通用名中文名分類學(xué)地位

HepatitisAvirus甲型肝炎病毒小RNA病毒科第三類BSL-2

HepatitisBvirus乙型肝炎病毒嗜肝DNA病毒科第三類BSL-2

HepatitisCvirus丙型肝炎病毒黃病毒科第三類BSL-2

HepatitisDvirus丁型肝炎病毒衛(wèi)星病毒第三類BSL-2

Epstein-BarrvirusEB病毒皰疹病毒科第三類BSL-2

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Rotavirus輪狀病毒呼腸孤病毒科第三類BSL-2

PapiHomavirus

人乳頭瘤病毒乳多空病毒科第三類BSL-2

(human)

Human

immunodeficiency艾滋病毒（I型和

逆轉(zhuǎn)錄病毒科第二類BSL-2

virus(HIV)typylII型）

and2virus

HepatitisEvirus戊型肝炎病毒嵌杯病毒科第三類BSL-2

病原菌名稱樣本檢測所

危害程度

序號需生物安全

國際通用名中文名分類

實驗室級別

Mycobacterium第二類BSL-2

1.結(jié)核分枝桿菌

tuberculosis

2.Vibriocholerae霍亂弧菌第二類BSL-2

3.Staphylococcusspp葡萄菌屬第三類BSL-2

4.Streptococcusspp鏈球菌屬第三類BSL-2

5.Enterococcusspp腸球菌屬第三類BSL-2

6.Micrococcusspp微球菌屬第三類BSL-2

7.Moraxellaspp菌屬第三類BSL-2

8.Neisseriaspp奈瑟菌屬第三類BSL-2

9.Corynebacteriumspp棒狀桿菌屬第二類BSL-2

10.Bacillusspp芽胞桿菌屬第三類BSL-2

11.Listeriaspp李斯特菌屬第三類BSL-2

12.Erysipelothrixspp丹毒絲菌屬第三類BSL-2

13.Rhodococcusequi馬紅球菌第三類BSL-2

14.Nocardiaspp諾卡菌屬第三類BSL-2

15.Eikenellacorrodens嚙蝕艾肯菌第三類BSL-2

16.Enterobacteriaceae腸桿菌科第三類BSL-2

17.Vibriospp弧菌屬（除霍亂弧菌）第三類BSL-2

18.Aeromonasspp氣單胞菌屬第三類BSL-2

19.Plesiomonasspp鄰單胞菌屬第三類BSL-2

20.Pseudomonasspp假單胞菌屬第三類BSL-2

21.Acinetobacterspp不動桿菌屬第三類BSL-2

22.Flavobacteriumspp黃桿菌屬第三類BSL-2

23.Haemophilusspp嗜血菌屬第三類BSL-2

24.Pasteurellaspp巴斯德菌屬第三類BSL-2

25.Gardnerellaspp加德納菌屬第三類BSL-2

26.Legionellapneumophila嗜肺軍團(tuán)菌第三類BSL-2

27.Campy1obacterspp彎曲菌屬第三類BSL-2

28.Helicobacterspp螺桿菌屬第三類BSL-2

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29.Clostridiumspp梭菌屬第三類BSL-2

30.Bacteroidesspp擬桿菌屬第三類BSL-2

31.Fusobacteriumspp梭桿菌屬第三類BSL-2

Peptostreptococcus第三類BSL-2

32.厭氧消化鏈球菌

anaerobius

33.Actinomaduraspp放線菌屬第三類BSL-2

34.Arcanobacteriumspp隱秘桿菌屬第三類BSL-2

35.Chlamydiapneumoniae肺炎衣原體第三類BSL-2

36.Mycoplasmapneumoniae肺炎支原體第三類BSL-2

37.Ureaplasmaurealyticum解月尿月尿原體第三類BSL-2

38.Candidaalbicans白假絲酵母菌第三類BSL-2

39.Cryptococcusneoformans新生隱球菌第三類BSL-2

根據(jù)上述病原體檢測的表格，本中心的實驗室僅僅允許在生物安

全等級為1和2的實驗室里工作。

3.3生物安全檢查

生物安全辦公室應(yīng)定期組織人員對實驗室進(jìn)行生物安全檢查，每年

至少一次（可以和內(nèi)審一同進(jìn)行）。檢查的內(nèi)容可參照附錄B（一、二

級生物安全實驗室檢查表）。

檢查結(jié)果應(yīng)與實驗室人員和管理者一起討論，并輸入到管理者評審

中。對于在檢查過程中發(fā)現(xiàn)的所有不足之處，實驗室應(yīng)指定專人負(fù)責(zé)采

取改正措施。

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標(biāo)記和標(biāo)識管理

1.墻面標(biāo)志

1.1實驗室入口處的墻面上應(yīng)有實驗室名稱。

1.2實驗室入口處的墻面上應(yīng)有“病原微生物實驗室備案憑證”。

2.門上標(biāo)志

2.1實驗室入口處門上必須有生物危害警告標(biāo)志。標(biāo)志包括國際生物危

害符號、生物危害等級（如BSL-1或2或3）,有特殊要求的專用實驗

室應(yīng)標(biāo)明特殊進(jìn)入等要求。

生物危害

授權(quán)人員方可進(jìn)入

年利安全水平，__________________

優(yōu)任人i

累5J,聯(lián)系電IA：_________________

口大中.話：_______宗電電iit_____

必茶和剎I：述年行人

的撞權(quán)方可遇入

國際生物息寄警告標(biāo)志

2.2BSL-2實驗室入口處門上必須有人員出入限制標(biāo)志和相關(guān)信息，如

實驗室責(zé)任人的姓名、聯(lián)系電話等。

3.標(biāo)貼和顏色

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3.1在實驗室內(nèi)，生物危害符號應(yīng)貼在醫(yī)用垃圾容器、冰箱、冷凍箱、

培養(yǎng)皿和含BSL-2或BSL-3傳染因子的離心機、污水池、超聲腐蝕器及

生物安全柜等上。

3.2當(dāng)設(shè)備用于處理人血液標(biāo)本、其它潛在感染物質(zhì)或感染因子時，生

物危害符號應(yīng)臨時貼在相關(guān)的設(shè)備上。

3.3生物危害符號也應(yīng)貼在其它用于儲存、運送BSL-2或BSL-3傳染

因子、血液標(biāo)本或“其它潛在感染物質(zhì)”（注意：未懷疑包含傳染因

子或“其它潛在感染物質(zhì)”的運送可以不貼生物危害符號，而貼診斷

樣品標(biāo)志）的容器上。標(biāo)貼應(yīng)用帶子、線、粘膠或其它方式盡可能貼

近容器以防止松動或意外弄丟。

3.4生物危害警告標(biāo)志底色應(yīng)該是桔紅色帶熒光，字母和符號用對比明

顯的顏色。（可以購買）

如果有下列情況，生物危害警告標(biāo)志可以免貼：

（1）廢棄物是放在黃色有生物危害符號的袋內(nèi)；

（2）在儲存、轉(zhuǎn)移、運送、處理過程中，單個盛血液或“其它潛在

物質(zhì)”的容器被放置在貼有生物危害符號的第二個容器中。

（3）當(dāng)實驗室門上貼有生物危害警告標(biāo)志時，其室內(nèi)的儀器等物品

可免貼。

4.外送維修或處理的設(shè)備

4.1已污染或可能污染的設(shè)備外送維修或處理必須盡可能徹底消毒，

在設(shè)備上貼上生物危害警示。

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4.2對一些不能進(jìn)行徹底消毒的儀器設(shè)備，在外送之前，將這些儀器

設(shè)備盡可能的消毒（沖洗或擦干凈外部），并貼上生物危害警示。

4.3生物危害警示還必須注明哪些部分仍存在污染，生物危害符號貼

在污染區(qū)域附近。

生物危害警示

本設(shè)備的外部和內(nèi)部表面已消毒，已無任何生物危害。

本設(shè)備將作為（在口內(nèi)打勾）

服務(wù)/維修口重新安置口報廢口

消毒操作人員---------------------------------------

所使用的消毒劑_______________________________________

消毒日期_______________________________________

設(shè)備放置地點_______________________________________

實驗室聯(lián)系電話---------------------------------------

設(shè)備的以下區(qū)域仍存在污染

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生物安全要求和人員管理

以下的內(nèi)容描述了實驗人員的要求。每個專業(yè)科室負(fù)責(zé)人的職責(zé)

是確保實驗室能遵循規(guī)章制度。

1.生物物質(zhì)的使用登記

各專業(yè)科室實驗室生物安全責(zé)任人要完成和遞交“生物物質(zhì)的使

用登記表”。生物安全辦公室必須保存有關(guān)人員使用生物物質(zhì)的準(zhǔn)確

的信息（例如：微生物、細(xì)胞系、人源物質(zhì)、動物和毒物），并要求

各專業(yè)科室負(fù)責(zé)人每年遞交準(zhǔn)確信息，以及一年里有關(guān)生物物質(zhì)的增

加或刪除、房間位置的增加或刪除等變化。

1.1人類病毒

在開始研究人類致病因子前需要在生物安全辦公室登記。生物安

全辦公室必須在實驗開始前批準(zhǔn)全部包括有傳染性因子或潛在生物

危害的生物物質(zhì)導(dǎo)入動物。

實驗人員必須在新的實驗開始前接受生物安全培訓(xùn)。生物安全培訓(xùn)

由生物安全辦公室組織安排。生物安全負(fù)責(zé)人的職責(zé)是確保實驗室全體

人員得到適當(dāng)操作和技術(shù)的培訓(xùn)。

生物安全負(fù)責(zé)人和/或?qū)嶒炇疑锇踩?zé)任人在用風(fēng)險組2（生物

安全水平2）因子工作前必須到生物安全辦公室登記。風(fēng)險組2和較

高致病因子名單見附錄A。

生物安全辦公室將定期監(jiān)控設(shè)備和操作，同時回答任何關(guān)于安全

的問題。

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在下列情況發(fā)生之前必須聯(lián)系生物安全辦公室：

?開始用新的可感染因子工作

?改變現(xiàn)有工作的范圍或位置

?將可感染因子提供給中心內(nèi)外其他工作人員

?在實驗室安排非本實驗室的工作人員工作

1.2人類血液、體液、組織和其他潛在有傳染性的物質(zhì)

血液耐受致病標(biāo)準(zhǔn)適用于“職業(yè)暴露”于人類血液或其他潛在有

傳染性物質(zhì)下的工作人員。其他潛在有傳染物質(zhì)包括：

?人類細(xì)胞或組織培養(yǎng)

來自于人類（活的或死的）任何不固定的組織或器官，除了完整無缺

的皮膚。

?人類體液，包括尿液、糞、唾液或眼淚等。

?HIV—或HBV—包括培養(yǎng)液或其他溶液

?血液，器官或其他來自于感染了HIV或HBV或其他血液耐受致病

原的實驗動物組織。

如果工作人員沒有直接接觸血液或其他潛在有傳染物質(zhì)，但使用

那些用于處理或貯存血液，其他潛在有傳染物質(zhì)或血液耐受致病原的

儀器，那么此人也被認(rèn)為是職業(yè)暴露。

員工暴露于由人類血液、組織和體液，可引起一個重要的健康風(fēng)險，

它們含有血液耐受致病原諸如：

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人類免疫缺陷病毒（HIV）巴貝西蟲科羅拉多壁虱熱

乙型肝炎（HBV）疏螺旋體菌蟲媒病毒

丁型肝炎（HDV）布氏桿菌減少螺菌

丙型肝炎（HCV）鉤端螺旋體Creutzfeldt-Jakobvirus

HumanT-lymphotropic

瘧原蟲弗朗西斯菌

VirusTypeII型人類T—淋巴促激素病毒

Streptobacillus

密螺旋體

moni珠鏈桿菌HemorrhagicFeverviruses出血熱病毒

1.3動物

全部的研究實驗包括動物管理必須由生物安全負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)。一經(jīng)

批準(zhǔn)，必須在實驗開始前與生物安全辦公室聯(lián)系確保制定安全協(xié)議。

實驗人員必須與生物安全辦公室及有關(guān)安全人員溝通描述標(biāo)準(zhǔn)操作

規(guī)程概要。

2.生物安全柜

空氣清潔設(shè)備能確保中心員工的健康和安全，同時可保護(hù)實驗和

預(yù)防臨床傳染性物質(zhì)釋放到環(huán)境中。

生物安全柜的功效依賴于操作者的行為，如在設(shè)備中物品的定位

和實驗室人員的移動。

本中心的全部生物安全柜必須具有中心證明/服務(wù)合同以及至少

每年鑒定。生物安全辦公室聯(lián)系確定需每年鑒定的日期。

當(dāng)轉(zhuǎn)讓給新買主、報廢、從中心搬走或從其他單位或制造商獲得

生物安全柜時，須預(yù)先通知生物安全辦公室。如設(shè)備有服務(wù)或維修需

要（例如，更換熒光燈、開關(guān)等）應(yīng)聯(lián)系生物安全辦公室。在生物安

全柜被重新貯存、維修（內(nèi)部）或報廢前，必須由有證的技師用甲醛

等專業(yè)排污。

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購買生物安全柜應(yīng)與生物安全辦公室協(xié)調(diào)。生物安全辦公室評價

全部生物安全柜的購買要求。中心不購買和使用超凈工作臺，因為超

凈工作臺的空氣吹向工作表面而進(jìn)入操作者的面部和（皮膚）破損處。

超凈工作臺不能提供保護(hù)人員或環(huán)境防止可傳染性或潛在可傳染性

因子、過敏原、化學(xué)品或物質(zhì)。

3.人員管理

實驗室應(yīng)建立工作人員上崗考核制度，所有與實驗活動相關(guān)的人

員都應(yīng)經(jīng)過培訓(xùn)并取得上崗資質(zhì)。

培訓(xùn)對象應(yīng)包括實驗室管理人員、實驗室技術(shù)人員、樣本運輸人

員、廢棄物處置人員、儀器設(shè)備維修人員及保潔工等。實驗室相關(guān)人

員應(yīng)每年接受生物安全培訓(xùn)。培訓(xùn)組織機構(gòu)應(yīng)采取有效方法對培訓(xùn)的

效果進(jìn)行評估。中心應(yīng)建立人員培訓(xùn)檔案。

人為的失誤和不規(guī)范的操作會極大地影響所采取的安全措施對

實驗室人員的防護(hù)效果。因此，熟悉如何識別與控制實驗室危害的有

安全意識的工作人員，是預(yù)防實驗室感染、差錯和事故的關(guān)鍵。基于

這一原因，不斷地進(jìn)行安全措施方面的在職培訓(xùn)是非常必要的。一個

有效的安全規(guī)程首先始于實驗室管理者，管理者應(yīng)確保安全的實驗室

操作及程序融合到工作人員的基本培訓(xùn)中。安全措施方面的培訓(xùn)是新

工作人員崗前培訓(xùn)的有機組成部分，應(yīng)向工作人員介紹生物安全操作

規(guī)范和實驗室操作規(guī)程，包括安全手冊或?qū)嶒灥牟僮魇謨?。?yīng)采用諸

如簽名傳閱的方法，來確保工作人員閱讀并理解這些規(guī)程。專業(yè)科室

主任在對屬下工作人員進(jìn)行規(guī)范性實驗室操作技術(shù)培訓(xùn)時起著關(guān)鍵

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作用，生物安全委員會可以幫助進(jìn)行人員培訓(xùn)并研制教具和教案。

3.1培訓(xùn)規(guī)劃

不斷進(jìn)行崗位安全教育對于維持實驗室工作人員和后勤保障人

員的安全意識是很重要的。下列各項是保證生物安全培訓(xùn)規(guī)劃行之有

效的必備要素：

3.1.1需求評估。這一過程包括確定相關(guān)的任務(wù)、重要性等級（以發(fā)

生頻率、危害程度以及復(fù)雜性來表示）以及完成這些任務(wù)的必要步驟

等細(xì)節(jié)。

3.1.2確立培訓(xùn)目的。最令人滿意的情況是，期望受培訓(xùn)者在進(jìn)行培

訓(xùn)之后，能在工作中加以應(yīng)用。培訓(xùn)的目的是要了解開展實驗的條件

以及所需的熟練水平。

3.1.3規(guī)定培訓(xùn)的內(nèi)容和方法。培訓(xùn)內(nèi)容是受培訓(xùn)者為了實現(xiàn)實驗操

作目標(biāo)所必須掌握的知識或技術(shù)。通常由那些對工作和相關(guān)要求最為

了解的人員來確定生物安全培訓(xùn)規(guī)劃的內(nèi)容。其他的內(nèi)容可能集中在

練習(xí)如何解決工作中發(fā)生的問題，以及學(xué)習(xí)糾正人們在使用某一技術(shù)

過程中所犯的錯誤。還不能確定某種教學(xué)方法（專題講座、計算機輔

助教學(xué)、交互式影像方式等）是否會比另一種更好，教學(xué)方法的好壞

很大程度上取決于特定的培訓(xùn)需要、培訓(xùn)對象的構(gòu)成等。

人員培訓(xùn)的內(nèi)容應(yīng)包括實驗室生物安全的基本知識、基本技能、

消防和應(yīng)急處置預(yù)案、化學(xué)、生物危險和傳染預(yù)防、應(yīng)急救護(hù)等課程。

還應(yīng)包括：

A.吸入危險（氣溶膠產(chǎn)物），如何使用接種環(huán)、劃線接種瓊脂平

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板、移液、制作涂片、打開培養(yǎng)物、采血/血清標(biāo)本、離心等。

B.食入危險，如處理標(biāo)本、涂片以及培養(yǎng)物。

C.在使用注射器和針頭時刺傷皮膚的危險。

D.處理血液以及其它有潛在病理學(xué)危險的材料

E.感染性材料的清除污染和處理。

3.1.4考慮不同培訓(xùn)對象的差異。有效的培訓(xùn)一定要考慮培訓(xùn)對象的

特點。不同人員在資質(zhì)、讀寫、文化、口語以及培訓(xùn)前所掌握的技術(shù)

水平等方面都可能不一致。關(guān)于培訓(xùn)規(guī)劃能否提高受培訓(xùn)者的操作技

能和個人安全水平，這可能取決于培訓(xùn)所采用的方法。對某些人應(yīng)采

用更直觀的或“手把手”的方式更好；而其他人則以學(xué)習(xí)文字材料更

有效果。工作人員如有特別要求時也應(yīng)提出，例如對聽力缺陷人員的

課程調(diào)整。除了考慮這些因素外，建議制定安全培訓(xùn)規(guī)劃的人員要熟

悉了解成人教育的基本原則。

3.1.5針對不同的學(xué)習(xí)要求。教學(xué)內(nèi)容（例如培訓(xùn)課程、錄像、文字

材料等）不應(yīng)該同所教授的技術(shù)或主題相沖突、相抵制或沒有關(guān)聯(lián)。

例如，如果培訓(xùn)的目的是要提高解決問題的能力，那么在教育中就應(yīng)

該強調(diào)思維/推理而并非死記硬背，應(yīng)該要求培養(yǎng)創(chuàng)造性的行為和/

或相應(yīng)的反饋（肯定/正確/可靠）能力。此外，提供與實際工作條

件相似的實踐機會有助于將技能應(yīng)用到實際工作中。

3.1.6培訓(xùn)評估。培訓(xùn)評估有助于判斷培訓(xùn)是否達(dá)到了預(yù)定效果。培

訓(xùn)評估通常包括下列四種方式：

?檢查培訓(xùn)對象對所進(jìn)行培訓(xùn)的反應(yīng)

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?考核培訓(xùn)對象對所培訓(xùn)內(nèi)容的記憶和/或操作執(zhí)行情況

?評估培訓(xùn)對象在工作中的行為變化

?按培訓(xùn)機構(gòu)的目的或目標(biāo)來考查是否已有明確的效果。

對培訓(xùn)效果最完整的評估應(yīng)包括全部上述四個方面。僅考慮培訓(xùn)

對象對所進(jìn)行培訓(xùn)的反應(yīng)是一種最不有效的評估方法，因為這種反應(yīng)

與培訓(xùn)對象對培訓(xùn)內(nèi)容的實際掌握程度之間可能沒有關(guān)系，它也不應(yīng)

作為評估培訓(xùn)效果的唯一指標(biāo)。

3.1.7培訓(xùn)調(diào)整。由于衡量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)多種多樣，因此對培訓(xùn)效果的

評估很難表明培訓(xùn)規(guī)劃究竟是完全成功還是徹底失敗。通常的結(jié)果

為，培訓(xùn)對象與其他人相比，對課程內(nèi)容的某些部分會有更好的理解、

掌握和應(yīng)用。培訓(xùn)所造成的知識或能力上的不同或差異，可能提示是

否需要更長的培訓(xùn)時間、采用其他的培訓(xùn)方法或聘請更有能力的教

師。

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醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序

醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序由生物安全辦公室管理。程序的目的是對員工作定

期的健康評估，關(guān)注對特殊的生物因子員工可能的處理（方式）有關(guān)

的因素或條件。對特殊的員工醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序可以做一些預(yù)防測定，包

括免疫、定期身體檢查和采集血清樣本。實驗室應(yīng)定期對實驗人員開

展與其從事實驗活動相關(guān)的健康體檢，建立人員健康檔案。實驗室工

作人員應(yīng)在身體狀況良好的情況下進(jìn)入實驗區(qū)工作，若出現(xiàn)疾病、過

勞狀態(tài)或其他意外狀況，則不應(yīng)進(jìn)入實驗區(qū)或立即退出實驗區(qū)。

醫(yī)學(xué)監(jiān)督程序的目的是：

?推薦下列的合適的醫(yī)學(xué)預(yù)防（措施）

?做員工的定期評價以決定假如與工作相關(guān)的醫(yī)學(xué)條件是普遍的，

這樣的話，采取確定的測定以減輕他們的（影響）

對一個特定的員工醫(yī)學(xué)監(jiān)督的范圍將是非常不同和依賴于：

＞課題本身存在的潛在因素

＞那些直接或潛在暴露生物因子的員工與現(xiàn)在或以前健康狀況有關(guān)

的某些附加因素

醫(yī)學(xué)監(jiān)督將可提供員工可能導(dǎo)致的潛在暴露。

1.暴露于結(jié)核桿菌員工的篩選

面對職業(yè)暴露于結(jié)核桿菌的員工在中心生物安全辦公室登記。職

業(yè)安全和健康管理從下列范圍鑒定潛在暴露：

?可能處理肺結(jié)核菌的實驗室

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有風(fēng)險新員工在雇用時必須用肺結(jié)核皮膚試驗（PPD）測試TB暴

露以建立其基礎(chǔ)值。有風(fēng)險全體員工必須每年做PPD試驗。暴露于活

性TB案例中的員工必須報告在暴露時初始TB試驗基線和以后暴露3

個月測試的事件和經(jīng)歷。

2.免疫

在某些情況下，做特殊研究的人員要用合適的疫苗免疫，諸如狂犬

病，風(fēng)疹和麻疹。

疫苗建議

B型肝炎疫苗推薦給使用人類血液，體液或組織工作的人員

其他疫苗由員工健康醫(yī)生決定。

在一些案例中定期收集適當(dāng)?shù)纳鲜鲅鍢颖緶y定疫苗引起的抗體。

3.醫(yī)學(xué)限制

3.1懷孕

一般認(rèn)為在懷孕期間暴露于某些傳染因子例如母親被因子感染

可能會影響胎兒。懷孕的或?qū)言械膵D女要告知生物安全辦公室。員

工要與生物安全委員會及生物安全辦公室討論關(guān)于實驗操作與懷孕

的風(fēng)險問題。

生物安全辦公室是懷孕婦女詢問任何問題或涉及到有關(guān)她們工

作環(huán)境風(fēng)險的機構(gòu)，同時辦公室又扮演著懷孕員工和她們各自的部門

負(fù)責(zé)人之間的聯(lián)絡(luò)員角色。

3.2生殖生物學(xué)危害

生殖生物學(xué)危害包括但并不僅僅限于下列：

?巨細(xì)胞病毒（CMV）

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?B型肝炎病毒（HBV）

?E型肝炎病毒

?人類免疫缺陷病毒（HIV）

?人類細(xì)小病毒B19

?風(fēng)疹（德國麻疹）

?淋巴細(xì)胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒

?水痘帶狀皰疹病毒（雞疹）

只要需要，生物安全辦公室與各專業(yè)科室一起去評價實驗室工作

程序以確保最小的暴露。

3.3其它限制

經(jīng)過與員工及醫(yī)生討論后，制定員工的限制和推薦的基線。以條

件為例證明特殊預(yù)防HIV感染、免疫抑制條件和抑制免疫系統(tǒng)的藥

物治療。因此，假如你正處于上述任何條件，你必須將有關(guān)情況告知

你的醫(yī)生和辦公室。

4.員工血清貯存

許多傳染病并非明顯疾病條件引起?？深A(yù)先收集新進(jìn)員工、傳染

病實驗室員工的血清作為本底血清。

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個人防護(hù)裝備（PPE）

個人防護(hù)裝備是減少操作人員暴露于氣溶膠、飛濺物以及意外接

觸等危險的一個屏障。實驗室應(yīng)具備足夠的符合不同級別的個人防護(hù)

裝備，供實驗人員選擇和使用。

1.實驗服、隔離衣

進(jìn)入實驗區(qū)域必須穿實驗服，反復(fù)使用的實驗服必須是耐用的。

在二級生物安全實驗室里從事病原微生物學(xué)實驗和HBV、HCV、HIV等

血清學(xué)檢測工作時，應(yīng)該在實驗服外面穿上隔離衣。

每隔適當(dāng)?shù)臅r間應(yīng)更換實驗服以確保清潔，當(dāng)實驗服或隔離衣已

被危險材料污染時應(yīng)立即更換，放在指定的位置，告知保潔人員先消

毒再清洗。

實驗服、隔離衣不得穿離實驗區(qū)域。

2.手套

手套應(yīng)符合舒服、合適、耐磨、耐撕的要求。

在進(jìn)行實驗室一般性工作，以及在處理感染性物質(zhì)、血液和體液

標(biāo)本時，應(yīng)戴手套，并保證：

所戴手套無漏損；

戴好手套后應(yīng)完全遮蓋手及腕部；

在撕破、損壞或受污染時應(yīng)立即更換手套；

在完成工作后應(yīng)摘除手套并徹底洗手。用過的一次性手套應(yīng)丟棄在生物

垃圾袋內(nèi);

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手套不得戴離實驗室區(qū)域。

3.工作鞋

實驗區(qū)域必須穿不露腳趾的鞋，鞋應(yīng)舒適，鞋底防滑。推薦使用

皮制的不滲液體的鞋類。從事臨床基因擴(kuò)增檢驗項目和在二級生物安

全實驗室工作時應(yīng)穿一次性鞋套，在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時也應(yīng)

穿一次性鞋套。用過的鞋套應(yīng)丟棄在生物垃圾袋內(nèi)，鞋套不得穿離實

驗室區(qū)域。

4.護(hù)目鏡

在HIV初篩實驗室，應(yīng)備有護(hù)目鏡。在從事可能出現(xiàn)飛濺的工作

時應(yīng)戴護(hù)目鏡，可避免實驗物品飛濺對眼睛造成的傷害。護(hù)目鏡不得

戴離實驗室區(qū)域。

5.口罩、帽子

在無菌室從事無菌實驗時應(yīng)戴口罩、帽子。在從事可能出現(xiàn)飛濺的工

作時應(yīng)戴口罩、帽子。用過的口罩、帽子應(yīng)丟棄在生物垃圾袋內(nèi)，口

罩、帽子不得戴離實驗室區(qū)域。

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實驗室設(shè)備管理

實驗室所用設(shè)施、設(shè)備和材料應(yīng)符合國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)定要求。

1.生物安全柜

有生物安全柜的科室要有一個生物安全柜的操作規(guī)程。

合適地使用生物安全柜能提供一個清潔的工作環(huán)境。生物安全柜

能提供給人員、物品和環(huán)境的保護(hù)。

生物安全柜隔離來自被限制的生物危害材料區(qū)域人員的生物危

害。生物安全柜藉由經(jīng)過高效率微粒子空氣濾過器(HEPA)過濾空氣中

煙霧狀生物危害性材料。吸入的空氣在進(jìn)入生物安全柜工作區(qū)域之前

經(jīng)一個HEPA濾過器過濾。排氣也通過HEPA濾過器過濾。氣溶膠在

生物安全柜的工作區(qū)域中產(chǎn)生被包含在生物安全柜里面。

二級生物安全柜操作程序：

?如果使用，把紫外燈關(guān)掉；打開熒光燈和排風(fēng)機。

?用75%的乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┫舅械膬?nèi)部表面。

?將物品按程序放入生物安全柜內(nèi)的位置；不要阻塞進(jìn)氣孔。等候

2-3分鐘對工作區(qū)域清潔。

?在工作區(qū)域之內(nèi)，物品之間保持適當(dāng)?shù)拈g距。

?工作應(yīng)該從干凈的到污染的地方進(jìn)行。

?工作完畢后，讓柜內(nèi)的物品在移出之前運行2-3分鐘。

?用75%乙醇或適當(dāng)?shù)南緞┎潦盟械墓ぷ鞅砻妗?/p>

?關(guān)閉熒光燈和排風(fēng)機。

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需要注意的是：

A.生物安全柜運行正常時才能使用。

B.生物安全柜在使用中打開的玻璃觀察擋板不能超過規(guī)定高

度。

C.安全柜內(nèi)應(yīng)盡量少放器材或標(biāo)本，不能影響后部壓力排風(fēng)系

統(tǒng)的氣流循環(huán)。

D.安全柜內(nèi)不能使用明火，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會干擾氣流并

可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次

性無菌接種環(huán)。

E.所有工作必須在工作臺面的中后部進(jìn)行，并能夠通過玻璃觀

察擋板看到。

F.盡量減少操作者身后的人員活動。

G.操作者不應(yīng)反復(fù)移出或伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。

H.不要使實驗記錄本、移液器以及其它物品阻擋空氣格柵，因

為這將干擾氣體流動，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。

I.在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機應(yīng)至少運

行2?3分鐘。

J.在生物安全柜內(nèi)操作時，不能進(jìn)行文字工作。

許多生物安全柜裝備有殺菌的紫外線燈。照射時間、距離、灰塵

或碎片的出現(xiàn)和紫外燈強度影響紫外燈的殺菌效果。紫外燈的可見蘭

紫色光不指示有殺菌的效應(yīng)。紫外燈需要定期地清潔排除灰塵。紫外

燈可能損害眼睛、皮膚和實驗室設(shè)備。紫外燈應(yīng)該在有人進(jìn)入前被關(guān)

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閉。禁止使用到期的紫外燈。

2.離心沉淀程序

所有的離心沉淀將使用放入密封的離心轉(zhuǎn)子中的離心機保護(hù)桶

或密封的離心管。如果使用的是無效的小離心機安全杯，則應(yīng)該在生

物安全柜中操作離心機。操作離心機的每個人應(yīng)該熟悉相應(yīng)的操作程

序。在操作記錄簿上詳細(xì)記錄離心機和轉(zhuǎn)子使用情況以決定技術(shù)維修

的需要。

下列是被推薦的離心沉淀法程序：

?在使用離心管和瓶之前檢查它們有否壓力標(biāo)記。

?在生物安全柜里面輕輕裝滿所有的離心機管和瓶。在放入安全杯

或轉(zhuǎn)子前用消毒劑擦拭離心管。

?離心管決不要裝得太多，當(dāng)離心管裝得太滿可能發(fā)生泄漏。最大為

離心管的3/4。

?離心前離心管的蓋子處于蓋著狀態(tài)。

?所有的管子放入保護(hù)桶或密封轉(zhuǎn)子中。檢