化學(xué)合成多肽藥物藥學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）

(試行) （一）合成工藝的選擇 （二）物料及控制 2（三）生產(chǎn)工藝 4 4 4 4 5 6（一）劑型的選擇 6（二）處方篩選及工藝開發(fā) 7（三）工藝描述及中間體控制 9（一）原料藥的質(zhì)量研究 9 4、含量測(cè)定 （二）制劑的質(zhì)量研究 指導(dǎo)原則(試行)工藝選擇時(shí)應(yīng)結(jié)合目標(biāo)肽鏈的長短和氨基酸特性綜合考慮。需充分考慮凍干條件的合理性，提供詳細(xì)的凍干工藝參數(shù)，全氨基酸、手性異構(gòu)體、同分異構(gòu)體、二肽衍生物、β-丙氨表1Fmoc保護(hù)氨基酸中常見的雜質(zhì)雜質(zhì)描述保護(hù)不完全氨基酸游離氨基酸（未保護(hù)）或部分保護(hù)的氨基酸手性異構(gòu)體含有手性中心的氨基酸可能存在，如D-氨基酸中存在L-氨基酸二肽衍生物如Fmoc-Leu-OH中存在Fmoc-Leu-Leu-OHβ-丙氨酸（Ala）雜質(zhì)在使用9-芴甲基N-琥珀酰亞胺碳酸酯（Fmoc-OSu）時(shí)，可能產(chǎn)生Fmoc-β-Ala-OH和Fmoc-β-Ala-AA-OH同分異構(gòu)體如亮氨酸（Leu）中存在異亮氨酸（Ile）量標(biāo)準(zhǔn)制定肽段的質(zhì)控項(xiàng)目，如鑒別、純度和含量測(cè)定等。肽段有關(guān)物質(zhì)考察應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注可能引入到終產(chǎn)品中的其他法也可以使用。檢測(cè)方法應(yīng)確保方法靈敏度符合檢測(cè)要求。列及其修飾情況），并酌情采用其他方法確證其高級(jí)結(jié)構(gòu)。轉(zhuǎn)角等）和三級(jí)結(jié)構(gòu)，且與肽鏈所處的溶液環(huán)境密切相關(guān)。可先通過文獻(xiàn)資料等論述說明是否存在高級(jí)結(jié)構(gòu)，如存在，化學(xué)合成多肽藥物制劑研究應(yīng)遵循小分子化學(xué)藥物的《化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求》需要，開發(fā)臨床需求廣泛、順應(yīng)性好的劑型，如長效制劑、工藝開發(fā)時(shí)，應(yīng)充分了解引起多肽藥物不穩(wěn)定的因素，在擬定生產(chǎn)工藝中應(yīng)盡量避免多肽藥物長期或短期處于不表2多肽藥物的不穩(wěn)定因素產(chǎn)生原因影響因素化學(xué)不穩(wěn)定性多肽序列中含有Met、易氧化的氨基酸殘基金屬離子等去酰胺化Gln或C端酰胺等水解等多肽序列中含有Cys等屬離子等多肽序列中含有-SH、-團(tuán)物理不穩(wěn)定性多肽與包材、濾膜等發(fā)生相互作用多肽的表面性質(zhì)、包材和濾膜多肽分子的微環(huán)境發(fā)溫度、pH值等合成多肽原料藥的質(zhì)量研究除參考小分子化學(xué)藥物的表3合成多肽原料藥的質(zhì)控項(xiàng)目檢查項(xiàng)注釋鑒別（HPLC）供試品溶液與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致，推薦采用等劑量混合進(jìn)樣，應(yīng)得到單峰質(zhì)譜（MS）量)±1.0Da范圍內(nèi)，大于2kDa的多肽建議使用高分辨率儀器（AAA）應(yīng)明確水解和衍生化方法檢查氨基酸比值應(yīng)明確水解、衍生化方法和計(jì)算方法，需開展方法學(xué)驗(yàn)證反離子含量應(yīng)明確是否存在反離子；根據(jù)多肽藥物結(jié)構(gòu)中的理論反離子含量在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中擬定合理的上下限范圍肽相關(guān)雜質(zhì)（或稱有關(guān)物質(zhì)）應(yīng)采用雜質(zhì)對(duì)照品進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證（如工藝雜質(zhì)、降解雜質(zhì)、差向肽雜質(zhì)等關(guān)注方法的專屬性殘留溶劑重點(diǎn)關(guān)注生產(chǎn)過程中接近終產(chǎn)品工藝步驟所用到的溶劑元素雜質(zhì)參考ICHQ3D根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果對(duì)可能引入的元素雜質(zhì)進(jìn)行控制水分多肽通常具有引濕性，水分可能顯著影響藥物的含量和穩(wěn)定性，應(yīng)根據(jù)開發(fā)過程和穩(wěn)定性考察的歷史批次數(shù)據(jù)在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中設(shè)定水分的可接受標(biāo)準(zhǔn)。含量測(cè)定（HPLC）可參考有關(guān)物質(zhì)/鑒別方法（與對(duì)照品比較）注：注射用原料藥建議對(duì)微生物限度和細(xì)菌內(nèi)毒素進(jìn)行研究。表4肽相關(guān)雜質(zhì)的類別及來源類別描述來源缺失肽缺少一個(gè)/多個(gè)氨基酸合成或降解插入肽存在一個(gè)/多個(gè)額外的氨基酸起始物料或合成錯(cuò)結(jié)肽存在一個(gè)/多個(gè)（與目標(biāo)序列）不同的氨基酸起始物料或合成差向肽存在一個(gè)/多個(gè)差向異構(gòu)化的氨基酸起始物料，合成或降解Asp/Asn相關(guān)雜質(zhì)含有門冬氨酸/琥珀酰亞胺的序列分別從Asp或Asn的側(cè)鏈?zhǔn)ニ虬倍h(huán)化到主鏈含β-Asp的序列合成或儲(chǔ)存過程中門冬氨酸/琥珀酰亞胺中間體的水解開環(huán)Asp立體異構(gòu)體（非對(duì)映異構(gòu)體）門冬酰胺/琥珀酰亞胺中間體差向異構(gòu)化，然后在合成或儲(chǔ)存過程中開環(huán)斷鏈產(chǎn)物合成或儲(chǔ)存過程中門冬酰胺/琥珀酰亞胺中間體的完全水解焦谷氨酸含有N端谷氨酰胺或谷氨酸的序列合成聚合物端基具有反應(yīng)活性或二硫鍵改變等引發(fā)肽聚合合成或降解含硫雜質(zhì)巰基氧化二硫鍵氧化或還原合成或降解其他谷氨酰胺、門冬酰胺或C端的脫酰胺合成或降解氨基官能團(tuán)的乙?；铣苫蚪到庥捎诓糠蛛南嚓P(guān)雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)與主成分較為相似，），生，采用相應(yīng)檢測(cè)手段測(cè)定每個(gè)氨基酸手性異構(gòu)體的含量，有關(guān)物質(zhì)檢查方法學(xué)驗(yàn)證過程中應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注專屬性問（2）非肽雜質(zhì)非肽雜質(zhì)是工藝過程中引入的與目標(biāo)分子結(jié)構(gòu)不相關(guān)的此類雜質(zhì)的研究可參照小分子化學(xué)藥物相關(guān)指導(dǎo)原則進(jìn)行。代表性的化合物或接近終產(chǎn)品工藝步驟生成的化合物進(jìn)行4、含量測(cè)定化學(xué)合成多肽制劑的質(zhì)量研究基本思路和要求可參照雜質(zhì)分析方法的選擇和相關(guān)驗(yàn)證工作可參考原料藥部PharmaceuticalIngredient(ChemicalEntitiesandBiotechnological/BiologicalEntities).(Mutagenic)ImpuritiesinPharmaceuticalstoLim