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文檔簡介
ICS65.020.01
B15
DB52
貴州省地方標(biāo)準(zhǔn)
DB52/T1501.13—2020
農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范
第13部分:辣椒抗枯萎病
Technicalspecificationforevaluationofcropresistancetodiseases
Part13:pepperresistancetowilt
2020-05-22發(fā)布2020-09-01實(shí)施
貴州省市場監(jiān)督管理局發(fā)布
DB52/T1501.13—2020
農(nóng)農(nóng)作物抗病性鑒定技術(shù)規(guī)范第13部分:辣椒抗枯萎病
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了辣椒抗枯萎病(FusariumoxysporumSchlecht.)的鑒定方法和抗病性評價。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于貴州區(qū)域種植的辣椒品種(系)和種質(zhì)資源對枯萎病的抗病性鑒定和評價。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB8321農(nóng)藥安全技術(shù)使用
3術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本文件。
3.1
辣椒枯萎病FusariumoxysporumSchlecht.
由尖孢鐮刀菌引起的真菌性病害,見附錄A中的A.1、A.2、A.3。
3.2
嚴(yán)重度severity
利用分級的方法表示病害發(fā)生的嚴(yán)重程度。
3.3
人工接種artificialinoculation
在適宜條件下,通過人為接種的方式將人工培養(yǎng)或收集的病原物置于植物適當(dāng)部位并使之發(fā)病的過
程。
3.4
感病對照品種susceptiblecontrolvariety
為保證抗病性結(jié)果一致性,而選用的對枯萎病抗病性較差的辣椒品種。本標(biāo)準(zhǔn)建議選用美國特大甜
椒(檢疫證號:2207242014040249)。
1
DB52/T1501.13—2020
4鑒定方法
4.1育苗
挑取飽滿的種子,洗凈后在常溫水中浸泡15min,然后以種子5~6倍的水量燙種,水溫為52℃,
15min后立即從熱水中取出,冷卻后,無菌水沖洗,置于滅菌紗布上,于恒溫培養(yǎng)箱中保濕催芽4d~5d,
每2d換1次紗布。
采樣漂浮育苗,泡沫漂浮盤規(guī)格為162孔/盤,每孔為3.1cm×3.1cm,育苗盤用5%次氯酸鈉溶液消
毒,育苗土(草炭:蛭石:珍珠巖為1:1:1)經(jīng)高溫蒸汽滅菌(121℃,1h)。選取發(fā)芽良好的種子
單粒播于裝有育苗基質(zhì)的育苗盤內(nèi),覆3mm的育苗土,壓實(shí),然后將播種的泡沫漂浮盤放入盛水的盤子
中。用自來水配制營養(yǎng)液。在18℃~25℃的自然條件下育苗。育苗期間不進(jìn)行病害防治,蟲害防治中
農(nóng)藥的使用應(yīng)符合GB8321.1的規(guī)定。
4.2接種體的制備
選取鑒定、保存的致病力強(qiáng)的枯萎病菌菌株,接種在PDA培養(yǎng)皿上,置于28℃恒溫培養(yǎng)7d~10d,
待病菌長滿培養(yǎng)皿后,用無菌水清洗孢子,將菌株孢子懸浮液混合后,稀釋為1×105個/ml,備用。
4.3人工接種
4.3.1接種時期
辣椒幼苗2片真葉展平后,塑料花缽和栽培基質(zhì)土的消毒方法同5.1的育苗盤和育苗土,選擇長勢
一致健康的幼苗移栽到7cm×7cm的塑料花缽中,3株/缽,移栽緩苗2d后進(jìn)行接種,3次重復(fù)。
4.3.2接種方法
用注射器吸取20ml的1×105個/ml含量的病菌孢子懸浮液澆透每個花缽中的土壤進(jìn)行接種,每份材
料接種12缽,每次試驗(yàn)均設(shè)感病對照,重復(fù)3次,置于白天為26℃,夜間為23℃,光照14h,強(qiáng)度為
15000Lux的培養(yǎng)箱中進(jìn)行潛育發(fā)病,適時澆水。
4.4病情調(diào)查
4.4.1調(diào)查時間
接種60d后調(diào)查病情,共調(diào)查1次。
4.4.2調(diào)查方法
鑒定每份材料的發(fā)病情況,隨機(jī)調(diào)查20株辣椒植株的根系、葉和莖稈的發(fā)病情況,根據(jù)病害癥狀
描述,逐株記載嚴(yán)重度。
4.4.3病情分級
根據(jù)辣椒根系、葉和莖稈的病害癥狀,將嚴(yán)重度進(jìn)行分級,見表1。
2
DB52/T1501.13—2020
表1辣椒枯萎病嚴(yán)重度分級及其癥狀描述
嚴(yán)重度分級癥狀
0無癥狀
110%以下的須根腐爛,葉片正常
310.1%~20%的須根腐爛,葉片正常
510.1%~50%的主根腐爛,20.1%~50%的須根腐爛,或葉片輕度黃化
50%以上的主根腐爛,20.1%~50%的須根腐爛,葉片黃化嚴(yán)重,莖基部出現(xiàn)黑褐色腐爛,植株出現(xiàn)可逆
7
的萎蔫
9全部主根腐爛,50%以上的須根腐爛,莖基部和莖稈出現(xiàn)黑褐色腐爛,植株不可逆的萎蔫和植株枯死
4.4.4結(jié)果計(jì)算
利用表1中的嚴(yán)重度分級,按式(1)計(jì)算病情指數(shù)(DI),記載表見附錄B中的表B.1。
(各級病株數(shù)相應(yīng)級數(shù)值)
病情指數(shù)(DI)100..................(1)
調(diào)查總株數(shù)最高病級
5抗病性評價
5.1有效鑒定判定
同批次鑒定中,感病對照品種的病情指數(shù)大于75時,視為該批次鑒定有效。
5.2抗病性評價
依據(jù)3次重復(fù)的病情指數(shù)平均值確定其對辣椒枯萎病的抗病性水平為免疫、高抗、抗、中抗、中感
和高感,其評價見附錄B中的表B.2。
表2辣椒枯萎病抗病性評價
抗性級別病情指數(shù)(DI)抗病性評價
0DI=0免疫(IM)
10<DI≤10高抗(HR)
310<DI≤35抗?。≧)
535<DI≤55中抗(MR)
755<DI≤75中感(MS)
975<DI高感(HS)
3
DB52/T1501.13—2020
AA
附錄A
(資料性附錄)
辣椒枯萎病原、癥狀和發(fā)生流行規(guī)律
A.1病菌學(xué)名和形態(tài)描述
病原為尖孢鐮刀菌萎蔫?;停‵usariumoxysporumf.sp.vasinfectum)和辣椒?;停‵usarium
oxysporiumf.sp.capsici)等,其為無性型真菌,梗孢目(Moniliales)痤孢科(Tubercular)鐮刀菌屬
(Fusarium)尖孢鐮孢鐮刀菌(FusariumoxysporumSchlecht.)。其中尖孢鐮刀菌萎蔫?;停‵usarium
oxysporumf.sp.vasinfectum)較為常見,在PDA培養(yǎng)基上密生氣生菌絲,白色,絮狀。培養(yǎng)初期,培
養(yǎng)基上無色素產(chǎn)生,后期有紫色沉淀。分生孢子梗分枝或在菌絲上直接形成產(chǎn)孢細(xì)胞,產(chǎn)孢細(xì)胞單瓶梗
具分枝。小型分生孢子數(shù)量多,單細(xì)胞,無色,光滑,橢圓形到腎形,大小為(6.3~13.8)μm×(2.5~
4.0)μm。大型分生孢子,無色或淺褐色,長而略彎,呈鐮刀狀,基部有足細(xì)胞,具2~6個橫隔膜,
多為3個隔膜,大小為(25.0~40.0)μm×(3.0~5.0)μm。厚垣孢子,頂生或間生,偶爾串生,短
橢圓形或圓形,深褐色,壁厚,光滑,直徑7.5μm~11.3μm。
A.2癥狀
苗期發(fā)病,在發(fā)病初期,植株葉片中午萎蔫似缺水狀,葉色暗沉,夜間恢復(fù),可持續(xù)2d~3d。隨
病程延續(xù),葉片半邊或全葉變黃,植株萎蔫不再恢復(fù),拔出后可見根頸部出現(xiàn)水漬狀褐色病斑或腐爛,
莖稈發(fā)病出現(xiàn)暗色壞死。成株期發(fā)病時,發(fā)病初期,植株下部葉片開始萎蔫似缺水狀,后期萎蔫程度不
斷加重,葉片枯萎褪綠,葉片黃化,并大量脫落,根莖表皮呈褐色,皮層極易剝落,從莖基部縱剖,可
見維管束變褐。發(fā)病嚴(yán)重時,全株葉片萎蔫,枯死。
A.3發(fā)生流行規(guī)律
枯萎病菌主要以菌絲體和厚壁孢子在病殘體和土壤中越冬,在溫濕度適宜的條件下,菌絲體可產(chǎn)生
大量的分生孢子,通過灌溉水、土壤耕作、地下害蟲等傳播。孢子發(fā)芽后從根部傷口或自然裂口或根冠
侵入。侵入后,開始時擴(kuò)展緩慢,至進(jìn)入維管束的導(dǎo)管后,擴(kuò)展速度加快。病菌分泌一些分解酶,致使
導(dǎo)管內(nèi)積累多膠物質(zhì)而堵塞導(dǎo)管,同時病菌分泌毒素毒害辣椒,因而使染病植株表現(xiàn)萎蔫、枯死??菸?/p>
病的發(fā)病條件與栽培管理、氣候條件、土壤狀況及品種抗病性等因素有關(guān)。
4
DB52/T1501.13—2020
BB
附錄B
(資料性附錄)
辣椒枯萎病抗病性鑒定調(diào)查記載表和評價表
B.1辣椒枯萎病抗病性鑒定田間調(diào)查記載表
見表B.1。
表B.1辣椒枯萎病抗病性鑒定調(diào)查記載表
播種(移栽)日期:鑒定地點(diǎn):
接種日期:調(diào)查人:
記錄人:調(diào)查日期:
鑒定分級
重復(fù)總株數(shù)
編號013579
I
1II
III
I
2II
III
I
3II
III
5
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B.2辣椒枯萎病抗病性評價表
見表B.2。
表B.2辣椒枯萎病抗病性評價表
重復(fù)I重復(fù)II重復(fù)III平均綜合抗性綜合抗性
序號鑒定品種
病情指數(shù)病情指數(shù)病情指數(shù)病情指數(shù)級別評價
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
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