醫(yī)改新政下的醫(yī)院 藥學(xué)學(xué)科建設(shè)

提綱一、科學(xué)研究的基本原則二、基于臨床的藥學(xué)研究思維三、實列與評析四、研究的深入與擴展五、總結(jié)DrHuande-Li

2025/5/52DrHuande-Li

一、科學(xué)研究的基本原則

也是評價科研成果和審查論文的基本原則*共性原則*

創(chuàng)新性沒有創(chuàng)新不是科學(xué)研究*

科學(xué)性合邏輯.符合科學(xué)規(guī)律*

可行性環(huán)境.條件.能力*重復(fù)性其他人可重復(fù)的結(jié)果*需求性解決問題*效益性對學(xué)科發(fā)展產(chǎn)生效益2025/5/53DrHuande-Li一、科學(xué)研究的基本原則

個性原則

*

醫(yī)院的特色與條件*

本學(xué)科的特色與基礎(chǔ),研究的連續(xù)性*

個人的基礎(chǔ)與愛好*能力與目標相匹配*切忌跟風(fēng)2025/5/54DrHuande-Li

二、基于臨床的藥學(xué)研究思維(ID)研究思維(ID)的定義與分類研究者在開展某項研究課題時的思想和思考過程(ideas)

創(chuàng)新思維:

更新.創(chuàng)造新東西.改變.以新穎獨創(chuàng)的方法解決問題的思維過程，能突破常規(guī)思維界限,以超常規(guī)甚至反常規(guī)的方法、視角思考問題,提出與眾不同的解決方案,從而產(chǎn)生新的、獨到的、有社會意義的成果逆向思維:換個角度想問題,或許會得到意想不到的驚喜.用與一般思維方向相反的思維方式.也稱反向思維,“倒過來想”發(fā)散思維:

舉一反三,思維視野廣闊，呈現(xiàn)出多維發(fā)散“一題多解.“一字多寫”.“一物多用”等2025/5/55DrHuande-Li

二、基于臨床的藥學(xué)研究思維(ID)臨床藥學(xué)研究選題的基礎(chǔ)

以病人為中心、合理用藥為目標、解決臨床藥物治療與安全、有效、合理、經(jīng)濟用藥問題為核心的應(yīng)用或應(yīng)用基礎(chǔ)研究2025/5/56DrHuande-Li

二、基于臨床的藥學(xué)研究思維(ID)關(guān)注國家科學(xué)發(fā)展戰(zhàn)略和優(yōu)先資助領(lǐng)域，如國家自然科學(xué)基金委生命科學(xué)部“十三五”學(xué)科發(fā)展戰(zhàn)略和優(yōu)先資助領(lǐng)域圍繞安全、有效、合理、經(jīng)濟用藥的原則,密切關(guān)學(xué)科發(fā)展前沿,將最新研究成果用于臨床,研究選題應(yīng)緊密圍繞應(yīng)用或應(yīng)用基礎(chǔ),研究成果應(yīng)在本學(xué)科領(lǐng)域得到推廣應(yīng)用

臨床藥學(xué)研究選題的原則與聚焦點2025/5/57DrHuande-Li

三、實列與評析用代謝組學(xué)方法研究體內(nèi)藥物相互作用及不良反應(yīng)機理

MetabolomicsProteomicsGenomicsLipidsSugarsToxins

DNARNAProteinMetabolitesTissuesAndcellLipidSugarsToxinsextractLipidSugarsToxinsprofileCandiateEnzyme/proteinResponsibleEnzyme/proteinGeneticbasisisolationanalysisPathwayanalysis2025/5/58DrHuande-Li

三、實列與評析(軍科院廖明陽等)用代謝組學(xué)研究INH+RFP的肝毒性技術(shù)與方法:用NMR與模式識別技術(shù)為核心的代謝組學(xué)方法，在大鼠模型上觀察藥物毒性過程中尿液內(nèi)源性代謝產(chǎn)物譜的動態(tài)變化，與生化及病理學(xué)變化相比較，確定毒性效應(yīng)特征“信息譜”病理指標:給藥組與對照組比較,動物體重減輕,肝指數(shù)增加,合用組幅度改變明顯,INH+RFP表現(xiàn)協(xié)同作用.肝勻漿中MDA升高，TSH顯著降低,肝臟CYP4502E1活力增加,聯(lián)合用藥毒效應(yīng)增強2025/5/59DrHuande-Li

三、實列與評析用代謝組學(xué)研究INH+RFP的肝毒性代謝組學(xué)結(jié)果:3個給藥組從第1天起代謝物軌跡明顯偏離對照組和給藥前,14天時代謝物軌跡明顯與對照組分開，說明3個給藥組代謝成分發(fā)生改變，3種處理方式對肝臟損傷具不同毒性機制主成分分析和模式識別發(fā)現(xiàn):INH組:檸檬酸鹽.琥珀酸鹽.葡萄糖和馬尿酸鹽代謝成分降低,而氨基已磺酸增高RFP組:檸檬酸鹽,馬尿酸鹽和2-氧戊二酸代謝成分降低合用組:檸檬酸鹽,琥珀酸鹽,馬尿酸鹽和2-氧戊二酸代謝成分降低,氨基己磺酸增高說明:INH組和INH+RFP組出現(xiàn)典型性肝損害,給藥組均影響了三羧酸循環(huán),糖酵解途徑發(fā)生改變2025/5/510DrHuande-Li

三、實列與評析用代謝組學(xué)研究INH+RFP的肝毒性結(jié)論:INH+RFP合用肝毒性增加不僅與過氧化反應(yīng)增加有關(guān),且與RFP增加cyp4502E1活力有關(guān).代謝組學(xué)技術(shù)能夠區(qū)分機體不同中毒狀態(tài)，根據(jù)不同代謝表型能區(qū)分不同藥物毒性作用機制評析:INH+RFP合用所致肝毒性為常見臨床問題,是已知的現(xiàn)象，但機制不明,該研究用到了當時最新的代謝組學(xué)理論和技術(shù),有創(chuàng)新理論,創(chuàng)新技術(shù)的應(yīng)用，目的明確、解決臨床問題,屬創(chuàng)新研究思維2025/5/511DrHuande-Li

三、實列與評析現(xiàn)象:

腫瘤治療中，常發(fā)現(xiàn)初始治療效果好,但用藥一段時間療效下降，換另一藥物仍然耐藥原因:腫瘤細胞膜上存在耐藥蛋白,這種蛋白的表達及功能隨用藥時間延長而增強，并表現(xiàn)多藥耐藥現(xiàn)象啟發(fā):抗癌藥為細胞毒性藥物，此種耐藥現(xiàn)象其實質(zhì)就是機體對外來有害物的自我保護機制腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/512DrHuande-Li

三、實列與評析乳腺癌耐藥蛋白多藥耐藥相關(guān)蛋白P-糖蛋白P-gpMRPBCRPABC家族轉(zhuǎn)運蛋白腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/513DrHuande-Li

三、實列與評析P-糖蛋白P-gp很多臨床常用藥物是P-gp的底物P-gp是影響體內(nèi)藥代動力學(xué)和藥物相互作用的重耍轉(zhuǎn)運蛋，而且該蛋白在BBB等重要屏障上表現(xiàn)為單向轉(zhuǎn)運

P-gpMDR1編碼,1280aa,170KD*

藥物轉(zhuǎn)運蛋白也應(yīng)該為毒物轉(zhuǎn)蛋白

腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/514DrHuande-Li

三、實列與評析*P-

gp的表達與存在部位

腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/515DrHuande-Li

三、實列與評析*多種藥物為P-

gp的底物

15P-糖蛋白

抗腫瘤藥物抑酸.止吐藥中樞系統(tǒng)藥物

免疫抑制劑

心血管藥物抗病毒.抗細菌.抗真菌藥物腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/5DrHuande-Li

三、實列與評析*P-gp與CYP受共同基因調(diào)控,具同源性,誘導(dǎo)P-gp同時也誘導(dǎo)CYP活性,加速毒物滅活

Samesubstrates

SameregulationdirectionTogetherconstituteahighlyefficientbarrierformanyorallyabsorbeddrugs.ManydrugsandherbalactiveconstituentsaresubstratesforbothP-gpandCYP3A*MultiplecytochromeP-450subfamiliesareco-inducedwithP-gpbymanydrugs**

P-gp&CYP3ADrugDrugP-gpP-gpCYP3ACYP3A*PalD,MitraAK.LifeSci,2006,78(18).**TateishiT,etal.CancerLett,1999,138(1-2).腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/517DrHuande-Li

抗腫瘤時需抑制P-gp活性或表達下調(diào)中毒治療時誘導(dǎo)P-gp活性或表達上調(diào)

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/518DrHuande-Li

*誘導(dǎo)P-gp功能與表達能加速毒物外排,達到解毒

增加外排，減少腦內(nèi)蓄積，降低中樞毒性減少藥物外排，增加腦內(nèi)分布，增強療效P-gp表達和功能為研究藥物相互作用引入了新的思路

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/519DrHuande-Li

P-gp阿米替林（底物）

CYP3A4解毒劑(誘導(dǎo)劑)*尋找解毒劑(誘導(dǎo)劑)

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/520DrHuande-Li

誘導(dǎo)CYP3A4誘導(dǎo)P-gp*

尋找解毒劑(誘導(dǎo)劑)

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/521DrHuande-Li

2009首次提出“上調(diào)MDR1基因，誘導(dǎo)P-gp外向轉(zhuǎn)運解除中樞抑制藥物中毒的機制研究”(國自面上項目No:30873114）并隨研究深入,衍生出了系列課題三、實列與評析

腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/522DrHuande-Li

隨研究深入衍生出了系列課題甘草酸上調(diào)mdr1基因誘導(dǎo)血腦屏上P-gp外向轉(zhuǎn)運加速馬錢子堿的外排,

解除中樞毒性(省自科重點項目)基于Nrf2/ARE信號通路調(diào)控MRP2探討甘草與有毒中藥配伍減毒的機

制No.81202985基于PXR/CAR信號通路調(diào)控UGTs和MRP3探討甘草的配伍減毒機制

（No.81360665）通過ΣPK-ΣPD結(jié)合模型構(gòu)建甘草多靶器官"解毒指數(shù)"探討其解毒機

理（No.81473411）

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/523DrHuande-Li

*甘草解毒機制研究

“甘草能解百藥毒”甘草對多種藥物中毒.動物毒素中毒及機體代謝產(chǎn)物中毒有解毒作用,能緩解中毒癥狀,降低死亡率解毒機制是什么？甘草

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/524DrHuande-Li

腎上腺皮質(zhì)激素樣作用，增加肝臟解毒和代謝毒素的能力

與生物堿沉淀反應(yīng)類似吸附作用誘導(dǎo)CYP3A4代謝酶已有解毒機制的報告！

誘導(dǎo)P-gp?

三、實列與評析

*甘草解毒機制研究腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/525DrHuande-Li

體外BBB模型動物模型

假設(shè)甘草解毒機制與P-gp誘導(dǎo)有關(guān)*假設(shè)的論證

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/526

DrHuande-Li

假設(shè)的論證---細胞模型的建立與評價目的考察馬錢子堿P-gp底物特性,判斷P-gp對馬錢子堿在BBB上轉(zhuǎn)運的影響,為預(yù)防馬錢子堿中毒和解救提供參考體外BBB模型的建立和評價馬錢子堿和P-gp體外親和力研究P-gp對馬錢子堿在體外BBB轉(zhuǎn)運的影響方法

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/527

DrHuande-Li

假設(shè)的論證---細胞模型的建立與評價星形膠質(zhì)細胞（As）腦微血管內(nèi)皮細胞（BMEC）體外BBB細胞模型免疫熒光測定證實在BBB細胞上有大量P-gp表達

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/528

DrHuande-Li

假設(shè)的論證---中毒動物模型上的研究甘草酸對中毒劑量下馬錢子堿代謝動力學(xué)的影響從上調(diào)mdr1基因角度研究甘草酸的解毒機制馬錢子堿中毒動物模型研究目的

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/529

DrHuande-Li

假設(shè)的論證---中毒動物模型上的研究1UPLC-MS/MS法測定小鼠血漿及腦組織中馬錢子堿濃度2甘草酸對小鼠體內(nèi)馬錢子堿消除動力學(xué)和腦組織分布的影響3甘草酸、馬錢子堿對小鼠腦組織mdr1amRNA表達水平的影響

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/530

DrHuande-Li

假設(shè)的論證---中毒動物模型上的論證研究結(jié)果--1**#*

與B1相比,馬錢子堿腦/血比值曲線下面積有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)#與B7相比,馬錢子堿腦/血比值曲線下面積有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)甘草酸可使藥物腦內(nèi)分布減少維拉帕米可使藥物腦內(nèi)分布增加馬錢子堿自身可使藥物腦內(nèi)分布減少*馬錢子堿+甘草酸組腦血比值明顯下降甘草酸可使藥物腦/血比值明顯減少馬錢子堿+G使藥物腦內(nèi)分布顯著減少

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/531

DrHuande-Li

結(jié)果--2

假設(shè)的論證---中毒動物模型上的論證研究實時定量PCR法對小鼠腦組織mdr1a表達的測定甘草酸干預(yù)后，小鼠腦組織mdr1a表達量明顯增加

三、實列與評析腫瘤耐藥與解毒新機制研究的逆向思維2025/5/532

DrHuande-Li

四.研究的深入與擴展(發(fā)散思維)

抗抑郁藥金絲桃提取物+免疫抑制劑環(huán)孢素,HIV蛋白酶抑制劑indinavir免疫排斥或HIV

病毒載量增加CYP3A加速代謝與排泄PXRMDR1P-gp

2025/5/533

DrHuande-Li

四.研究的深入與擴展(發(fā)散思維)

MDR1CYP3AP-gpII相解毒酶共同組成解毒機制分布在肝和小腸的PXR和CAR感受外界異物時,對Ⅰ/Ⅱ相酶和Ⅲ相轉(zhuǎn)運體進行調(diào)控,促進異物外排,

PXR和CAR也被稱為“異物感受器”UGT和GST表達.活性及轉(zhuǎn)錄與PXR和CAR有關(guān),因此研究PXR,.CAR,對UGT和GST的調(diào)控可能是重要的解毒新機制

2025/5/534

DrHuande-Li

四.研究的深入與擴展(發(fā)散思維)Upstream

transcriptionfactorPXRorCAR

precipitate

alkaloids

adrenal

cortical

hormone-like

role

transporter（P-gp）ⅠPhaseemzymes

（P450）

ⅡPhaseemzymes

（UGT,GST）absorbedpoison

？Licoricedetoxifica-tion圍繞上述理論基礎(chǔ)，假設(shè)甘草解毒機制系對PXR和CAR的調(diào)節(jié)從而激活下游P-gp.Ⅰ/Ⅱ酶而實現(xiàn)

2025/5/535

DrHuande-Li

四.研究的深入與擴展EffectsofC-18epimersofglycyrrhizicacid

andTheirHydrolysisProductsonⅡphase

detoxificationenzymes

inratPart1

EffectsofC-18epimersofglycyrrhizicacid

andTheirHydrolysisProductsonⅡphase

detoxificationenzymes

inHepG2cellPart2

EffectsofC-18epimersofglycyrrhizicacid

andTheirHydrolysisProductsonⅡphase

detoxificationenzymes

byPXRandCARPart3EffectsofglycyrrhizinpreparationonthepharmacokineticsofparacetamolPart4

2025/5/536DrHuande-Li

四.研究的深入與擴展結(jié)果--1細胞:甘草提取物及18α/18β-GL對谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶GSTπ有誘導(dǎo)作用,但時間和劑量依賴性不明顯,對Ⅱ相酶UGT1A和UGT2B誘導(dǎo)作用呈劑量和時間依賴性動物:甘草提取物對UGT1A.UGT1A1.UGT1A6.UGT2B有明顯誘導(dǎo)作用,

對GSTπ有誘導(dǎo)作

用,18α/18β-GL對UGT及其部分同工酶有誘作用,其中18β-GL對Ⅱ相酶作用更明顯

2025/5/537DrHuande-Li

四.研究的深入與擴展結(jié)果--2分子水平:甘草提取物對UGT1A和UGT1A1蛋白表達有增強作用,

18α/18β-GL對UGT1A.UGT1A1.UGT1A6.UGT2B和GSTπ蛋白表達有增加作用,其中18α--對UGT1A6和UGT2B表達增加明顯,18β-GL對UGT1A1和UGT1A6蛋白表達增加有統(tǒng)計學(xué)意義人體:對乙酰氨基酚為模型藥,甘草酸二胺及葡醛內(nèi)酯干預(yù)后,對乙酰氨基酚及其結(jié)合物的主要藥動學(xué)參數(shù)

結(jié)果與非干預(yù)組比,

AUC0-24，AUC0–∞有統(tǒng)計學(xué)差異,推測甘草酸二胺能誘導(dǎo)Ⅱ相酶UGT,使對乙酰氨基酚代謝和排泄加速

2025/5/538DrHuande-Li

結(jié)果--3

四、研究的深入與擴展

2025/5/539DrHuande-Li

四.研究的深入與擴展

ourexperiment

resultanewtheoreticalsupportthatlicoriceusedindetoxificationinclinicalapplication

newideasforthedetoxificationoftraditionalChinesemedicineresearch

scientificandtheoreticalbasisforlicoriceclinicaldruginteractionstudies.

*結(jié)論—接受假設(shè)

2025/5/5402025/5/540DrHuande-Li

特非那丁

羥化特非那丁CYP3A4康唑類大環(huán)內(nèi)酯類葡萄柚汁Torsadespointes

效應(yīng)不良反應(yīng)的發(fā)生條件:超過推薦劑量60mgBid明顯的肝臟損害者伍用P450酶抑制劑心肌慢鉀離了通道阻斷四.研究的深入與擴展(發(fā)散思維)*由典型的藥物相互作用(DDI)到新藥開發(fā)DrHuande-Li

五、總結(jié)臨床藥學(xué)研究與選題應(yīng)符合科學(xué)研究的共性原則,更應(yīng)結(jié)合自身特點與條件的原則，基礎(chǔ)與持續(xù)是不可缺少的科研思維必需建立在科學(xué)問題上，并應(yīng)符合臨床需求,研

究結(jié)果和結(jié)論應(yīng)該產(chǎn)生效益(社會、經(jīng)濟)對學(xué)科發(fā)展有推動作用科學(xué)研究是艱苦的工作和創(chuàng)造，不僅要有敏銳的科研思維與能力，更要耐得住冷板凳和清苦要堅信，付出總會有回報

2025/5/