《單純皰疹病毒研究》課件

單純皰疹病毒研究目錄病毒基礎(chǔ)病毒簡(jiǎn)介、結(jié)構(gòu)和流行病學(xué)感染與表現(xiàn)感染機(jī)制、臨床表現(xiàn)和診斷方法治療與預(yù)防單純皰疹病毒簡(jiǎn)介病毒科屬屬于皰疹病毒科α亞科主要類型包括HSV-1和HSV-2兩種血清型臨床意義可引起多種疾病HSV-1和HSV-2的區(qū)別HSV-1主要感染口腔和面部主要通過(guò)唾液傳播可引起口腔皰疹和角膜炎HSV-2主要感染生殖器區(qū)域主要通過(guò)性接觸傳播可引起生殖器皰疹病毒結(jié)構(gòu)概覽核心基因組雙鏈DNA病毒衣殼二十面體結(jié)構(gòu)包膜結(jié)構(gòu)含有多種糖蛋白病毒基因組基本特征約152kb的線性雙鏈DNA結(jié)構(gòu)組成由L（長(zhǎng)）和S（短）兩個(gè)片段組成編碼功能編碼70多種蛋白病毒蛋白分類調(diào)節(jié)蛋白控制基因表達(dá)非結(jié)構(gòu)蛋白參與病毒復(fù)制結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)成病毒粒子重要的病毒糖蛋白gB和gC負(fù)責(zé)病毒初步吸附gD介導(dǎo)病毒與受體結(jié)合gH和gL促進(jìn)膜融合過(guò)程流行病學(xué)數(shù)據(jù)非洲美洲歐洲亞洲大洋洲HSV-1感染概況38億全球感染人數(shù)占世界人口近一半67%成人感染率50歲以上人群30%生殖器感染年輕人群中逐年增加HSV-2感染概況1全球感染總數(shù)約5.20億人感染2主要臨床表現(xiàn)引起生殖器皰疹3年齡相關(guān)性感染率隨年齡增長(zhǎng)而上升傳播途徑密切接觸傳播直接接觸感染部位性接觸傳播性行為中病毒傳遞母嬰傳播分娩過(guò)程中感染高危人群多個(gè)性伴侶者接觸風(fēng)險(xiǎn)增加免疫功能低下者病毒易復(fù)發(fā)新生兒免疫系統(tǒng)發(fā)育不完全病毒感染機(jī)制概述初次感染病毒進(jìn)入表皮細(xì)胞復(fù)制潛伏感染病毒在神經(jīng)節(jié)內(nèi)潛伏再激活在應(yīng)激等因素下復(fù)發(fā)病毒進(jìn)入細(xì)胞的過(guò)程受體結(jié)合與細(xì)胞表面受體結(jié)合膜融合通過(guò)膜融合或內(nèi)吞作用進(jìn)入核心釋放釋放病毒核心到細(xì)胞質(zhì)病毒復(fù)制周期潛伏感染機(jī)制神經(jīng)節(jié)潛伏病毒在三叉神經(jīng)節(jié)或骶神經(jīng)節(jié)潛伏LAT基因表達(dá)表達(dá)潛伏相關(guān)轉(zhuǎn)錄本免疫逃逸逃避宿主免疫系統(tǒng)識(shí)別再激活機(jī)制誘導(dǎo)因素物理應(yīng)激情緒壓力免疫抑制紫外線照射分子機(jī)制VP16蛋白激活即刻早期基因表達(dá)病毒DNA復(fù)制啟動(dòng)臨床表現(xiàn)概述口腔皰疹唇部和口腔黏膜皰疹生殖器皰疹生殖器區(qū)域皰疹角膜炎角膜感染腦炎中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染口腔皰疹前驅(qū)期疼痛、刺痛或灼熱感水皰期形成含液體水皰潰瘍期水皰破裂形成潰瘍結(jié)痂痊愈7-10天愈合生殖器皰疹初次感染癥狀嚴(yán)重廣泛水皰和潰瘍可伴全身癥狀復(fù)發(fā)感染癥狀較輕病程短局部癥狀為主無(wú)癥狀排毒無(wú)臨床癥狀病毒仍能傳播傳播主要途徑新生兒皰疹發(fā)病機(jī)制主要通過(guò)產(chǎn)道暴露感染臨床表現(xiàn)皮膚-眼-口型、中樞神經(jīng)系統(tǒng)型、播散型嚴(yán)重后果高致死率和神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥皰疹性腦炎發(fā)病機(jī)制病毒沿神經(jīng)軸突逆行傳播至大腦臨床特點(diǎn)發(fā)熱、頭痛、意識(shí)改變和局灶性神經(jīng)癥狀醫(yī)療措施早期抗病毒治療至關(guān)重要其他臨床表現(xiàn)角膜炎角膜樹(shù)枝狀潰瘍皮膚感染手指皰疹（皰疹性瘭疽）免疫抑制患者廣泛性持續(xù)性感染診斷方法概述高級(jí)診斷基因分型和耐藥檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)病毒培養(yǎng)和分子檢測(cè)初步診斷臨床癥狀和體征識(shí)別病毒分離培養(yǎng)樣本收集水皰液、拭子或組織樣本接種培養(yǎng)接種到敏感細(xì)胞系細(xì)胞病變觀察觀察特征性細(xì)胞病變效應(yīng)病毒鑒定免疫熒光或分子方法確認(rèn)核酸檢測(cè)技術(shù)樣本處理提取病毒DNA1PCR擴(kuò)增特異性引物擴(kuò)增病毒基因?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)熒光探針檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物結(jié)果分析定性或定量分析血清學(xué)檢測(cè)1IgM檢測(cè)初次感染后1-2周出現(xiàn)2IgG檢測(cè)感染后4-6周達(dá)高峰3IgG滴度變化四倍滴度變化提示近期感染類型特異性檢測(cè)檢測(cè)方法靈敏度特異性臨床應(yīng)用糖蛋白G特異性ELISA85-98%>96%血清學(xué)區(qū)分類型特異性PCR>95%>98%直接檢測(cè)病毒DNAWesternblot95%>95%確認(rèn)試驗(yàn)治療策略概述抗病毒藥物阻斷病毒復(fù)制對(duì)癥治療緩解不適癥狀預(yù)防復(fù)發(fā)抑制性治療和生活調(diào)整常用抗病毒藥物阿昔洛韋首選藥物伐昔洛韋口服生物利用度高泛昔洛韋半衰期長(zhǎng)，耐藥發(fā)生率低膦甲酸鈉用于耐藥病例抗病毒藥物作用機(jī)制激活過(guò)程病毒胸苷激酶磷酸化藥物轉(zhuǎn)化為活性三磷酸形式抑制作用抑制病毒DNA聚合酶阻斷病毒DNA合成耐藥問(wèn)題胸苷激酶缺失或突變DNA聚合酶基因突變用藥方案類型藥物劑量療程初次感染阿昔洛韋200mg5次/日7-10天復(fù)發(fā)感染伐昔洛韋500mg2次/日3-5天抑制治療泛昔洛韋250mg2次/日數(shù)月至數(shù)年特殊人群的治療孕婦阿昔洛韋相對(duì)安全需評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)獲益比剖宮產(chǎn)可能需要免疫功能低下患者需更高劑量療程延長(zhǎng)可能靜脈給藥新生兒高劑量靜脈阿昔洛韋盡早治療密切監(jiān)測(cè)并發(fā)癥對(duì)癥治療措施局部用藥鎮(zhèn)痛凝膠、抗病毒軟膏冷敷減輕炎癥和不適感疼痛管理非甾體抗炎藥或其他鎮(zhèn)痛藥保持濕潤(rùn)防止?jié)兏稍锖土验_(kāi)預(yù)防復(fù)發(fā)的策略長(zhǎng)期抑制性治療頻繁復(fù)發(fā)者使用低劑量抗病毒藥物避免誘發(fā)因素防曬、減壓、避免刺激性食物健康生活方式加強(qiáng)免疫力、充足睡眠、均衡飲食心理干預(yù)減輕壓力、認(rèn)知行為療法疫苗研發(fā)概述研發(fā)歷史數(shù)十年努力主要策略滅活、亞單位、DNA等主要挑戰(zhàn)潛伏感染和免疫逃逸研究現(xiàn)狀多種候選疫苗在臨床試驗(yàn)中4滅活疫苗研究原理化學(xué)或物理方法滅活病毒保留抗原性誘導(dǎo)體液免疫為主優(yōu)缺點(diǎn)安全性較高免疫原性相對(duì)較弱需要佐劑增強(qiáng)效果亞單位疫苗研究90%gD抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率使用gD-2為抗原的疫苗58%短期保護(hù)率在HSV血清陰性女性中35%長(zhǎng)期保護(hù)率保護(hù)效力隨時(shí)間下降DNA疫苗研究原理含編碼病毒蛋白的質(zhì)粒DNA免疫反應(yīng)誘導(dǎo)細(xì)胞和體液免疫臨床前結(jié)果動(dòng)物模型中顯示一定保護(hù)效力臨床試驗(yàn)初期安全性和免疫原性研究階段減毒活疫苗研究基因修飾刪除或突變關(guān)鍵毒力基因免疫效果誘導(dǎo)強(qiáng)烈的多方面免疫反應(yīng)安全隱患潛在的病毒重組或毒力恢復(fù)風(fēng)險(xiǎn)新型疫苗策略mRNA疫苗包裹在脂質(zhì)納米顆粒中的mRNA病毒樣顆粒無(wú)感染性但保留抗原結(jié)構(gòu)3基因編輯疫苗CRISPR技術(shù)修飾病毒基因組疫苗評(píng)價(jià)指標(biāo)保護(hù)效力預(yù)防感染和疾病的能力免疫原性誘導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答能力3安全性不良反應(yīng)發(fā)生率和嚴(yán)重程度疫苗研發(fā)面臨的挑戰(zhàn)免疫逃逸機(jī)制研究糖蛋白介導(dǎo)gC結(jié)合補(bǔ)體阻斷激活gE作為Fc受體結(jié)合抗體干擾抗原呈遞潛伏期逃逸基因表達(dá)極度受限LAT基因抑制凋亡微RNA干擾免疫識(shí)別免疫調(diào)節(jié)蛋白阻斷干擾素通路抑制NK細(xì)胞活性干擾T細(xì)胞功能動(dòng)物模型研究小鼠模型易于操作，成本低豚鼠模型自然復(fù)發(fā)，接近人類病程靈長(zhǎng)類模型免疫學(xué)特征最接近人類病毒與宿主相互作用受體識(shí)別糖蛋白與細(xì)胞受體結(jié)合信號(hào)激活宿主細(xì)胞信號(hào)途徑改變細(xì)胞因子調(diào)控炎癥和免疫應(yīng)答網(wǎng)絡(luò)表觀遺傳調(diào)控組蛋白修飾和染色質(zhì)重塑4病毒基因組學(xué)研究1全基因組測(cè)序高通量測(cè)序技術(shù)比對(duì)病毒基因組基因功能分析突變體研究確定基因功能進(jìn)化分析研究基因組變異和進(jìn)化關(guān)系蛋白質(zhì)組學(xué)研究單細(xì)胞技術(shù)應(yīng)用技術(shù)原理分離單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行基因表達(dá)分析研究細(xì)胞水平的異質(zhì)性研究發(fā)現(xiàn)感染細(xì)胞存在亞群差異病毒復(fù)制與宿主基因表達(dá)關(guān)系免疫細(xì)胞功能狀態(tài)識(shí)別基因編輯技術(shù)應(yīng)用技術(shù)原理CRISPR-Cas9靶向切割特定DNA序列功能驗(yàn)證敲除病毒基因驗(yàn)證其功能治療探索靶向和切除潛伏病毒基因組病毒與神經(jīng)系統(tǒng)70%三叉神經(jīng)節(jié)潛伏率成年人三叉神經(jīng)節(jié)HSV-1檢出率40%骶神經(jīng)節(jié)潛伏率成年人骶神經(jīng)節(jié)HSV-2檢出率30%皰疹性腦炎病死率未經(jīng)治療的病例病毒與免疫系統(tǒng)先天免疫Toll樣受體識(shí)別1細(xì)胞免疫CD8+T細(xì)胞清除感染細(xì)胞體液免疫中和抗體阻斷病毒入侵免疫記憶記憶T細(xì)胞和B細(xì)胞形成病毒與腫瘤致癌關(guān)聯(lián)與某些頭頸部癌癥相關(guān)可能與部分生殖器癌癥相關(guān)機(jī)制尚未完全闡明溶瘤治療修飾HSV用于腫瘤治療特異性感染和裂解腫瘤細(xì)胞激活抗腫瘤免疫反應(yīng)新型抗病毒藥物研究靶點(diǎn)發(fā)現(xiàn)病毒關(guān)鍵蛋白和必需過(guò)程藥物設(shè)計(jì)計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)和高通量篩選臨床前評(píng)估體外活性和動(dòng)物模型有效性快速診斷技術(shù)發(fā)展即時(shí)檢測(cè)15-30分鐘出結(jié)果多重檢測(cè)同時(shí)檢測(cè)多種病原體AI輔助診斷提高診斷準(zhǔn)確性和效率預(yù)防策略個(gè)人衛(wèi)生避免接觸感染部位安全性行為使用安全套、減少性伴侶數(shù)量母嬰預(yù)防產(chǎn)前篩查、適時(shí)剖宮產(chǎn)疫苗展望有效疫苗將顯著降低感染率社會(huì)心理學(xué)研究疾病恥辱感尤其影響