寄生蟲課件 寄生原蟲學(xué)習(xí)資料

獸醫(yī)原生動(dòng)物蟲學(xué)獸醫(yī)原生動(dòng)物學(xué)研究寄生于動(dòng)物體的原生動(dòng)物及其引起的疾病和防治的一門科學(xué)。原生動(dòng)物又稱原蟲，是單細(xì)胞動(dòng)物，能由一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行和完成生命活動(dòng)的全部功能。原生動(dòng)物寄生于動(dòng)物的腔道、體液、組織和細(xì)胞內(nèi)，可致病或不致病。原蟲的形態(tài)和生活史1原蟲的發(fā)現(xiàn)與構(gòu)造17世紀(jì)列文虎克Leeuwenhoek（1632.10.24－1723.08.26）發(fā)明顯微鏡，并發(fā)現(xiàn)兔肝球蟲和賈第鞭毛蟲1888年巴貝斯氏發(fā)現(xiàn)羅馬尼亞流行的巴貝斯蟲病（血紅蛋白尿）的病原體1893年史密斯證明該蟲由蜱傳播，后他又和基爾本氏發(fā)現(xiàn)雙芽巴貝斯蟲的生活史1897年羅斯氏證明蚊子為鳥瘧原蟲的媒介，闡明了瘧原蟲的生活史全世界已發(fā)現(xiàn)45000種原蟲，其中一些為寄生原蟲2Morphology大小，形狀1-30μm細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)、表膜67891.結(jié)腸小袋蟲2.毛滴蟲3.球蟲卵囊

4.伊氏錐蟲5.微漿體6.雙芽梨形蟲

7.泰勒梨形蟲8.龔地弓形蟲

9.利什曼原蟲原蟲形態(tài)內(nèi)質(zhì)外質(zhì)胞核食物泡圖1－2原蟲構(gòu)造模式圖3蟲體構(gòu)造表膜Pellicle:三層結(jié)構(gòu)的單位膜

由外膜和緊靠其下方的微管或原纖維組成表膜復(fù)合體使蟲體保持一定的形態(tài)和完整性參與蟲體的攝食、排泄、感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)有很強(qiáng)的抗原性可以不斷更新：如錐蟲3蟲體構(gòu)造胞質(zhì)

Cytoplasm基質(zhì)

Matrix：蛋白質(zhì)

ectoplasm-外質(zhì)：凝膠狀，硬度，形狀

運(yùn)動(dòng)、營(yíng)養(yǎng)、呼吸、攝食、排泄、感覺(jué)

endoplasm-內(nèi)質(zhì)：

溶膠狀，代謝，含有細(xì)胞核和相當(dāng)數(shù)量的食物泡、空泡、貯存物質(zhì)等。細(xì)胞器

OrganellesEndoplasmicreticulum：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Golgibody：高爾基體Mitochondria：線粒體Lysosomes：溶酶體Kinetoplast:動(dòng)基體–特化的細(xì)胞器，運(yùn)動(dòng)細(xì)胞器。

3蟲體構(gòu)造運(yùn)動(dòng)細(xì)胞器是分類的依據(jù)鞭毛：胞質(zhì)的絲狀延伸部分，鞭毛蟲，錐蟲纖毛：短而細(xì)，纖毛蟲偽足：外質(zhì)暫時(shí)突出的部分，阿米巴波動(dòng)脊：孢子蟲，依靠波動(dòng)脊在液體中滑行子孢子、裂殖子和動(dòng)合子胞核Nucleus：生存、繁殖核膜根據(jù)染色質(zhì)的多寡和分布情況

泡狀核染色質(zhì)少，分散致密核染色質(zhì)多，均勻而致密3蟲體構(gòu)造4Lifecycleofprotozoa

無(wú)性生殖二分裂法

binaryfission出芽生殖

budding：胞核先分裂成大小不等但仍相連接的2個(gè)部分，原生質(zhì)隨著核的分支而向核的周圍集中，形成2個(gè)芽狀突起，而后分裂成2個(gè)新個(gè)體。裂體生殖

multiplefission

胞核先分裂多次，然后各個(gè)核周圍的胞質(zhì)緊縮而形成數(shù)個(gè)新個(gè)體。裂殖體，裂殖子4Lifecycleofprotozoa有性生殖

接合生殖conjugation

2個(gè)形態(tài)相同的原蟲一時(shí)性的結(jié)合在一起，互相交換核質(zhì)，然后分開，各自分裂成新的個(gè)體。

配子生殖

gametogony

裂殖子–大配子體、小配子體–配子–合子–子孢子、孢子囊（孢子生殖：合子-孢子體-子孢子）A.一個(gè)宿主體內(nèi)完成B.兩個(gè)宿主體內(nèi)完成傳播者：媒介生物性傳播

機(jī)械性傳播裂殖生殖:裂殖體(裂殖子)配子生殖:配子母細(xì)胞(大配子,小配子)孢子生殖:子孢子4Lifecycleofprotozoa孢子化卵囊肌胃飼料和飲水等機(jī)械、酶釋放子孢子小腸胰蛋白酶、膽汁子孢子釋放得到促進(jìn)盲腸：上皮細(xì)胞固有層滋養(yǎng)體(trophozoite)4.1艾美耳屬裂殖生殖（schizogony）裂殖體（schizont）第一世代裂殖子（merozoite）

宿主細(xì)胞破壞（第2.5～3天）子孢子進(jìn)入腸腔上皮細(xì)胞發(fā)育為第2代裂殖體、裂殖子宿主細(xì)胞破壞進(jìn)入腸腔（第5天）第3代裂殖體大配子小配子合子卵囊（oocyst）排出體外感染后7天發(fā)育為具有感染性的卵囊直接發(fā)育型無(wú)需中間宿主三個(gè)階段無(wú)性生殖：寄生部位上皮細(xì)胞裂殖生殖有性生殖：配子生殖大配子（雌性）小配子（雄性）合子（上皮細(xì)胞）孢子生殖：合子卵囊孢子囊和子孢子（感染性卵囊）內(nèi)生性發(fā)育外生性發(fā)育外界環(huán)境在兔體內(nèi)在外界環(huán)境12345678910111213141516171718192021艾美爾球蟲發(fā)育史1～6.無(wú)性繁殖

7～17.有性繁殖

17～20.發(fā)育成侵襲性卵囊

21.孢子體游出5原生動(dòng)物的分類動(dòng)物界原生動(dòng)物門Sarcomastigophora肉足鞭毛亞門

錐蟲科、錐蟲屬──TrypanosomaevansiApicomplexa頂器亞門

Sporozoa孢子蟲綱

Piroplasmea梨形蟲目：巴貝斯蟲科

泰勒蟲科

Eucoccidia真球蟲目：艾美耳科─球蟲

隱孢子蟲科–隱孢子蟲

肉孢子蟲科─弓形蟲屬

住肉孢子蟲屬Ciliophora纖毛蟲亞門結(jié)腸小袋纖毛蟲Toxoplasmagondii弓形蟲ToxoplasmagondiiItsgenusname,toxoplasma,isderivedfromtheGreek"toxon,"meaningarcorcrescentshape.

Itsspeciesname,gondii,isderivedfromitsdiscoveryhost,hamster-likerodentknownasthegundi（櫛趾鼠））.Obligateintracellularparasite發(fā)現(xiàn)歷史NicolleandManceaux(1908)北非梳趾鼠體內(nèi)Splendore（1908）巴西實(shí)驗(yàn)室家兔體內(nèi)WolfandCowen（1937）人體內(nèi)Dubey（1970）發(fā)現(xiàn)生活史于恩庶（1955）首次發(fā)現(xiàn)兔和貓弓形蟲1977年上海發(fā)現(xiàn)豬的無(wú)名高熱病ClassificationProtozoa,Apicomplexa頂復(fù)亞門Sporozoasida孢子蟲綱Eucoccidiorida真球蟲目Toxoplasmatinae弓形蟲亞科

Toxoplasma弓形蟲屬

Toxoplasmagondii

剛地弓形蟲

Hosts:

Definitivehosts:Membersofthecatfamily(Felidae)

Intermediatehosts:allwarmbloodedanimalsLifeCycle終末宿主有性繁殖中間宿主無(wú)性繁殖Morphology速殖子：Tachyzoite緩殖子：Bradyzoite卵囊/孢子：oocyst(Sporozoite)配子體：Gametocyte:

macrogamete,

microgameteTachyzoitesinlymphtissueTachyzoites:fastreplicating,responsibleforacutetoxoplasmosis.Size:2-4μmX4-7μmTachyzoitesinascites速殖子超微結(jié)構(gòu)電鏡下蟲體表膜分兩層；核位于蟲體后半部，核仁位置不定，核前沿有高爾基體；前端有類錐體及極環(huán)，膜下微管起于極環(huán)，通常有22條；棒狀體8-10條；線粒體1至數(shù)個(gè)。IntracellulartachyzoitesofToxoplasmagondii.Parazitohporousvacuole:homeforparasitesreplication,cancontain>64parasites.

Bradyzoites:slowreplicating,encagedintissuecysts,formedduringchronicinfection.Mainlyfoundinthebrainandmuscletissues.

組織包囊：tissuecyst,直徑5–50μm，cancontain

>1000bradyzoitesTissuecystsIncatintestinalepitheliuma-c:merozoited-f:schizontMicro-gametesIncatintestinalepitheliumTheoocystcontainstwosporocysts,eachofwhichcontainfoursporozoites.OnlycatswillproduceToxoplasmaoocysts;approximatediameter=10μm.

感染不同階段蟲體，在貓?bào)w內(nèi)的潛隱期也不同，攝入包囊后一般3~10天即有卵囊排出，而感染孢子化卵囊則需要18天以上；貓食入速殖子后也能產(chǎn)生卵囊，但潛隱期的變化范圍較大(一般13天以上才排出卵囊)。

卵囊在適宜的環(huán)境條件下，經(jīng)1~5天發(fā)育為具有感染性的孢子化卵囊。UnsporulatedoocystSporulatedoocyst>60%40-60%20-40%10-20%<10%Pappasetal,IJP,2009Toxoplasmainfection---ubiquitous全世界抗體陽(yáng)性率20-50%,有些地區(qū)高達(dá)90%我國(guó)0.7-38.6%

廣泛流行原因：生活史多期具感染性,抵抗力強(qiáng)中間宿主廣泛，與人類關(guān)系密切能在中間宿主間傳播卵囊存活的時(shí)間長(zhǎng),環(huán)境抗性好，可被節(jié)肢動(dòng)物和蚯蚓機(jī)械性傳播；包囊對(duì)冰凍和干燥抵抗力差，4度能存活68天。在宿主體內(nèi)存活的時(shí)間長(zhǎng)EpidemiologyToxoplasmosisAcuteinfection:typicallycausesamild,flu-likeillness(fever,lossofappetite;unwillingnesstostand;huddlingtogether)ornosymptomsatallinhealthyindividuals,butcancauseseriouscomplicationsinpatientswithcompromisedimmunesystems---AIDSpatients,organtransplantationpatientsChronicinfection:life-long,parasitesformcystsinbrainandmuscles.Canbeactivatedtoacuteinfectionwhenimmunefunctiongoesdown.

behavioral/psychologicaldisorders---risk-takingpersonality,suicide,schizophrenia…Congenitaltoxoplasmosis:firstinfectionduringpregnancyleadstoinfectedfetus,causingabortion,prematurebirthandbrain/nervoussystemdamagesininfants.急性感染臨床癥狀(豬)潛伏期3-7天體溫40-42℃，稽留7-10天，病豬精神沉郁食欲減少至廢絕，但常飲水，伴有便秘或下痢呼吸急促，呈腹式呼吸或犬坐式呼吸；流清鼻涕；眼內(nèi)出現(xiàn)漿液性或膿性分泌物鼻鏡干燥，被毛逆立，結(jié)膜潮紅。在病的后期，病豬體表，尤其是耳、下腹部、后肢和尾部等因淤血及皮下滲出性出血而呈紫紅斑呼吸困難，并常因呼吸窒息而死亡。懷孕母豬高熱、廢食、精神萎頓和昏睡。死胎、流產(chǎn)、弱仔、怪胎。母豬常在分娩后迅速自愈。Congenitalinfection死胎、流產(chǎn)、弱仔、怪胎孕期弓形蟲檢查OcularToxoplasmosis先天性弓形蟲眼病:有小眼球無(wú)眼球、先天性無(wú)虹膜、脈絡(luò)膜缺損、玻璃體動(dòng)脈殘存、視神經(jīng)萎縮、先天性白內(nèi)障和斜視等炎癥損害引起視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎OcularToxoplasmosis后天性弓形蟲眼病:局限性滲出性視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎，患眼視力下降，眼底病變多位于黃斑部或視盤周圍，病灶處視網(wǎng)膜灰白色水腫，境界不清，2～3個(gè)月后視網(wǎng)膜水腫滲出逐漸消退，最后呈瘢痕性病灶.并發(fā)癥包括繼發(fā)性青光眼、黃斑囊樣水腫、視網(wǎng)膜血管阻塞視網(wǎng)膜新生血管形成、脈絡(luò)膜新生血管形成等，可致視力喪失。BehaviorchangescausedbyToxoplasmachronicinfectionSchizophreniarisk-takingpersonality,suicideHostcells’immunecontrolofToxoplasmatachyzoitesImmuneevasionmechanismsOtherimmuneevasionmechanisms組織學(xué)隔離胞內(nèi)寄生釋放可溶性抗原

代謝抑制DiagnosisSabine-FeldmanDyeTestSerum+Toxoplasmacells+complement+methylenebluePositive:noTOXOstainNegative:BlueTOXOcellsDiagnosisSerologicaltests

ELISAAgglutinationTest

DiagnosisDetectionofT.gondiiDNA

RegularPCRLAMPPCRLAMPPCRLAMP

PCRDiagnosis:PathogenexaminationObservationofparasitesinpatientspecimens,suchasbronchoalveolarlavagematerialfromimmuno-compromisedpatients,orlymphnodebiopsy.Animalinoculation治療1．磺胺嘧啶（SD）+甲氧芐氨嘧啶（TMP）2．磺胺嘧啶+乙胺嘧啶3．長(zhǎng)效磺胺4．吡嗪磺+甲氧芐氨嘧啶DHPS:二氫葉酸合成酶DHFR-TS:四氫葉酸還原酶PreventionSanitationProhibitionofcat,mouseSerologicalmonitoringdrugprophylaxiPreventinfectionfromfoodPeelorwashallfruitsandvegetablesthoroughlybeforeeating.Freezemeatforseveraldaysatsubzerotemperaturesbeforecooking.Tissuecystsrarelysurvivefreezingatthesetemperatures.Avoideatingraworundercookedmeat,andnevertastemeatbeforefullycooked.Usehot,soapywatertowashhandsoranythinginthekitchenthatcontactsrawmeat,poultry,seafoodorunwashedfruitsandvegetables.Avoiddrinkingunpasteurizedmilk.PreventinfectionfromenvironmentChangeanddisposeofcatlitterdaily.Oocystsincatfecestakeatleastadaytosporulateandbecomeinfectiousaftertheyareshed.Weargloveswhengardeningorwhenincontactwithsoilorsand,asinfectiousoocystsfromcatfecescanspreadandsurviveintheenvironmentformonths.Avoiddrinkinguntreatedwater.Coveroutdoorsandboxeswhennotbeingused.豬場(chǎng)弓形蟲病預(yù)防1畜舍應(yīng)經(jīng)常保持清潔，定期消毒2豬場(chǎng)內(nèi)禁止養(yǎng)貓，并經(jīng)常滅鼠3血清學(xué)監(jiān)測(cè)4藥物預(yù)防RiskfactorsforhumaninfectionExposuretoorconsumptionofraworundercookedmeatDrinkingunpasteurizedgoatmilkContactwithsoilEatingunwashedrawvegetablesorfruitsCleaningcatlitterboxesHostcellinvasionbyToxoplasma

-amodelMorrissetteandSibley,2002HelicalglidingHost-cellinvasionHostcellinvasionbyToxoplasma-amodel弓形蟲重要蛋白質(zhì)的功能蟲體表面蛋白(SAG)弓形蟲表面蛋白作為弓形蟲的主要表面抗原（surfaceantigen，SAG）被宿主免疫系統(tǒng)所識(shí)別，而成為殺傷蟲體的主要部位。這些抗原主要介導(dǎo)蟲體與宿主的粘附。ROP

此是由棒狀體這種特殊的細(xì)胞器釋出，也是一類蛋白質(zhì)家族，共有11種。對(duì)棒狀體蛋白研究較多的主要是ROP1和ROP2。棒狀體蛋白定位于棒狀體這種特殊的細(xì)胞器，分為兩類：ROP：位于棒狀體后段肥大部分，包括ROP激酶(ROP17,ROP18,ROP16…),假激酶(ROP5…),主要用于抵御宿主細(xì)胞的免疫殺蟲機(jī)制等RON：位于棒狀體前段，主要參與蟲體對(duì)宿主的入侵。弓形蟲重要蛋白質(zhì)的功能致密顆粒蛋白(GRA)這是弓形蟲致密顆粒細(xì)胞器內(nèi)所含的蛋白質(zhì)成分,是弓形蟲分泌排泄抗原的重要組成部分，在修飾調(diào)理弓形蟲納蟲泡結(jié)構(gòu)中以及宿主細(xì)胞的基因表達(dá)中起重要作用，又稱為致密顆粒抗原（densegranulesantigen，GRA）。弓形蟲重要蛋白質(zhì)的功能微線體蛋白（micronemalprotein，MIC）

這是由弓形蟲蟲體前端散布的微線體分泌的、介導(dǎo)對(duì)宿主細(xì)胞的粘附與入侵的粘性蛋白。主要可分為兩類：

一類為具有跨膜性質(zhì)的微線體蛋白，包括MIC2、MIC6、MIC7、MIC8、MIC9和MIC12等，典型的全長(zhǎng)跨膜MIC一般含有信號(hào)肽、黏附區(qū)域、跨膜區(qū)域、分類揀選信號(hào)等；

另一類為不具有跨膜特性的可溶性黏附蛋白，如MIC1、MIC3、MIC4和MIC5等，這一類蛋白質(zhì)在蟲體內(nèi)往往與其他跨膜蛋白形成復(fù)合體而被轉(zhuǎn)運(yùn)、加工、分泌和發(fā)揮黏附特性。弓形蟲重要蛋白質(zhì)的功能本實(shí)驗(yàn)室在弓形蟲研究方面所開展的工作分離了8株弓形蟲地方分離株，并進(jìn)行了抗性研究弓形蟲病流行病調(diào)查弓形蟲SAG1、ROP2、MIC3和GRA6基因的克隆及其原核表達(dá)利用上述基因的原核表達(dá)產(chǎn)物建立了間接ELISA方法利用MIC3的原核表達(dá)產(chǎn)物建立了LAT方法弓形蟲感染的PCR鑒定方法DNA疫苗的研究家畜運(yùn)輸應(yīng)激對(duì)弓形蟲慢性感染活化的影響本室關(guān)于弓形蟲病研究的主要內(nèi)容

—診斷與預(yù)防保護(hù)力評(píng)價(jià)1.弓形蟲診斷研究1.1診斷—病原學(xué)(PCR)敏感性&特異性PCR的應(yīng)用

對(duì)多種動(dòng)物弓形蟲的檢測(cè)

對(duì)發(fā)生流產(chǎn)疫情奶牛場(chǎng)弓形蟲病的檢測(cè)LAT的應(yīng)用特點(diǎn)不足弓形蟲疫苗---現(xiàn)狀疫苗種類特點(diǎn)不足核酸疫苗保護(hù)力強(qiáng)持久穩(wěn)定基因工程疫苗保護(hù)力強(qiáng)生產(chǎn)過(guò)程復(fù)雜技術(shù)難度大

弓形蟲疫苗---現(xiàn)狀弓形蟲疫苗---現(xiàn)狀滅活的蟲株蟲體初提物重組蛋白---SAG1，GRA1，ROP2...DNA疫苗---MIC2,HSP70,GRA4...減毒的基因敲除蟲株---SAG1，BAG1，ROP1...

---CPSII商業(yè)化的疫苗---減毒活體疫苗（TOXOVAX)。啟示不能完成生活周期的突變蟲株（比如不能形成緩殖子）或許能作為活體疫苗Stress緩殖子的分化發(fā)育具體方法1用CRISPR/CAS9進(jìn)行全基因組篩選，找出對(duì)緩殖子分化發(fā)育有重要影響的基因。驗(yàn)證目標(biāo)基因的功能。老鼠體內(nèi)，急性Vs慢性感染，表達(dá)差異〉5倍。411個(gè)基因體外，速殖子Vs緩殖子，表達(dá)差異〉3倍。287個(gè)基因148個(gè)基因具體方法2：分析已有的基因表達(dá)數(shù)據(jù)庫(kù)具體方法3Stress緩殖子的分化發(fā)育在緩殖子期特異表達(dá)致死基因，殺死緩殖子以阻斷緩殖子分化和慢性感染的形成。3種可能的藥物靶標(biāo)寄生蟲必須的代謝酶/途徑，宿主細(xì)胞里不存在或者不重要---抑制靶標(biāo)的藥物。寄生蟲里活躍的酶/途徑，宿主細(xì)胞里不存在---可以將無(wú)毒的藥物前體轉(zhuǎn)化成有毒的藥物以殺死寄生蟲。宿主細(xì)胞里不必須的，但對(duì)寄生蟲存活非常關(guān)鍵的途徑---抑制靶標(biāo)的藥物。伊氏錐蟲病又稱蘇拉(Surra)病，是由伊氏錐蟲寄生于馬屬動(dòng)物、牛、駱駝和犬等家畜體內(nèi)的血液和造血器官所引起的進(jìn)行性消瘦、貧血、黃疸、發(fā)熱和心機(jī)能障礙為特征的動(dòng)物原蟲病。馬屬動(dòng)物發(fā)病急，死亡率高。其它動(dòng)物多呈慢性過(guò)程。Pathogen

：Trypanosomaevansi大?。?8-34×1-2μm平均24×2μm細(xì)長(zhǎng)柳葉形，前端比后端尖點(diǎn)狀動(dòng)基體生毛體–鞭毛–游離鞭毛長(zhǎng)6μm游離鞭毛Freeflagellum波動(dòng)膜Undulatingmenbrance核nuclus動(dòng)基體kinetoplastPathogen

：Trypanosomaevansi大小：18-34×1-2μm平均24×2μmlifecycle宿主內(nèi)(造血臟器、血液、淋巴液)→吸血昆蟲（機(jī)械性傳播）→新宿主宿主體內(nèi)行縱二分裂法傳播者：虱蠅、虻、螯蠅(采采蠅)生存：虻體內(nèi)33-44h螯蠅22h3h內(nèi)具感染性infective伊氏錐蟲病Epidemiology1.易感動(dòng)物

家畜中，易感順序?yàn)椋厚R、騾、犬>驢、駱駝>水牛、黃牛、牦牛但以水牛帶蟲最為嚴(yán)重

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小白鼠>大白鼠、貓>家兔、豚鼠

野生動(dòng)物：地鼠等

傳染來(lái)源：帶蟲動(dòng)物：水牛可帶2-3年，駱駝5年3.途徑：機(jī)械傳播虻類：5科80多種蠅類：4屬6種4.發(fā)病季節(jié)

a.與昆蟲一致5-10月份

b.冬季1-3月份體質(zhì)差、帶蟲動(dòng)物發(fā)病5.動(dòng)物年齡：青年>幼年6.地理分布亞洲、非洲我國(guó)：南方及西北華北、東北很少EpidemiologyPathogenesis蟲體繁殖肝臟低血糖乳酸增加

CNS體溫增高、機(jī)能障礙

毒素網(wǎng)狀內(nèi)皮S紅細(xì)胞溶解貧血黃疸心肌心肌能障礙抗原脫落免疫復(fù)合物水腫壞死

ClinicalsignsA.馬屬動(dòng)物帶呈急性經(jīng)過(guò)(1)Latentperiods4→7dT↑400C間歇熱，稽留數(shù)日，經(jīng)短時(shí)間歇，再行發(fā)作。(2)發(fā)熱期間，R頻數(shù)，P↑，尿量少，尿色深黃，粘稠，間歇期間，癥狀緩解。(3)反復(fù)數(shù)次發(fā)作后，體表水腫，結(jié)膜、眼臉黃染，精神沉郁、消瘦。(4)血液學(xué)變化：RC急劇↓最低200萬(wàn)左右，Hb減少至30%，血沉加快。B.牛

多呈慢性經(jīng)過(guò)(1)Latentperiods6-12d，不定期的間歇熱，最高可達(dá)410C，間歇2d至數(shù)月不等。(2)病牛消瘦、體表干枯、皮膚龜裂、結(jié)痂；(3)精神沉郁，四肢無(wú)力，走路搖晃(4)妊娠牛流產(chǎn)、死胎；所產(chǎn)犢牛有因胎盤感染而于生后死亡。(5)RC↓至300萬(wàn)左右，Hb↓50%(6)急性型多發(fā)于春耕和夏收期間的肥壯牛及寒冬季節(jié)，機(jī)體抵抗力下降時(shí)。Clinicalsigns犬：急性、致死性，常見癥狀–間歇熱、頭部、腿和腹壁水腫，類似狂犬病的神經(jīng)癥狀。豬：無(wú)癥狀或溫和型癥狀山羊：慢性過(guò)程鹿：慢性過(guò)程，水腫、貧血、消瘦、神經(jīng)癥狀駱駝：類似于馬，慢性常見

被毛干枯、脫落，眼結(jié)膜充血淤血

黏液或膿性分泌物。駝峰萎縮，

淋巴結(jié)腫大，腹下四肢水腫。Diagnosis(一)臨床癥狀(二)血液學(xué)查蟲：多次檢查

A.涂片檢查：薄血膜和涂片用姬姆薩染色

B.集蟲檢查：紅細(xì)胞壓積管離心技術(shù)(三)血清學(xué)反應(yīng)a.對(duì)流免疫電泳b.補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)c.McAb-ELISA(四)動(dòng)物接種小白鼠：易感，但耗時(shí)。(五)鑒別診斷

A.馬傳貧血液學(xué)無(wú)蟲

B.血孢子蟲病查蟲Diagnosis治療A．萘磺苯酰脲俗稱拜耳205，又稱那嘎諾爾，英國(guó)產(chǎn)為安錐波劑量與用法：馬、牛12mg/kg

配成10%溶液iVB.甲基硫酸喹嘧胺俗稱安錐賽，抗錐靈我國(guó)已生產(chǎn)

5mg/kg10%溶液

皮下注射C.血蟲凈俗稱貝尼爾

3.5mg/kg5%深部imD.治療注意事項(xiàng)：

(1)藥量要足，否則易產(chǎn)生抗藥性

(2)觀察期要長(zhǎng)，防止過(guò)早使用引起復(fù)發(fā)(3)2種以上藥物配合使用療效好預(yù)防

A.藥物預(yù)防

1.安錐賽預(yù)防鹽，一次3-3.5個(gè)月

2.拜耳205治療，一次1.5-2個(gè)月

B.消滅媒介

C.隔離病原，嚴(yán)格檢疫人畜共患寄生原蟲病---

隱孢子蟲病(Cryptosporidiosis)隱孢子蟲病(Cryptosporidiosis)病原是真球蟲目隱孢子蟲屬Cryptosporidium寄生于人、牛等家畜胃腸道上皮細(xì)胞，可引起犢牛和羔羊嚴(yán)重腹瀉和禽類嚴(yán)重呼吸道癥狀為特征的一類寄生原蟲病。隱孢子蟲在艾滋?。ˋIDS）病人中的感染率高達(dá)48%。隱孢子蟲是一種世界性分布的嚴(yán)重危害人和動(dòng)物健康的人獸共患寄生蟲病。隱孢子蟲--兒童殺手PathogenCryptosporidiumC.parvum：微小C.andersoni：安氏C.muris：小鼠C.meleagridis：火雞C.bailayi：貝氏C.suis：豬隱孢子蟲有多個(gè)種種名主要宿主卵囊長(zhǎng)度（μm）卵囊寬度（μm）卵囊長(zhǎng)/寬C.muris（鼠隱孢子蟲）嚙齒、哺乳類動(dòng)物8.0~9.2（8.4）5.8~6.4（6.2）1.25~1.59（1.35）C.parvum（微小隱孢子蟲）哺乳動(dòng)物4.8~5.6（5.2）4.2~4.8（4.6）1.04~1.33（1.16）C.wrairi（魏氏隱孢子蟲）豚鼠4.8~5.6（5.4）4.0~5.0（4.6）1.04~1.33（1.17）C.felis（貓隱孢子蟲）貓3.2~5.1（4.6）3.0~4.0（4.0）1.15C.andersoni（安氏隱孢子蟲）反芻動(dòng)物6.0~8.1（7.4）5.0~6.5（5.5）1.07~1.50（1.35）C.canis（犬隱孢子蟲）犬4.8~5.6（4.95）4.3~4.9（4.7）1.05C.hominis（人隱孢子蟲）人類4.4~5.9（5.2）4.4~5.4（4.86）1.0~1.09（1.07）C.suis（豬隱孢子蟲）豬4.48~5.1（4.6）4.17~5.（4.2）1.0~1.1（1.09）C.bovis（牛隱孢子蟲）牛4.76~5.35（4.9）4.17~4.76（4.6）1.06C.fayeri（費(fèi)氏隱孢子蟲）有袋類動(dòng)物4.5~5.1（4.9）3.8~5.0（4.3）1.02-1.18（1.14）C.meleagridis（火雞隱孢子蟲）火雞，人類4.5~6.0（5.2）4.2~5.3（4.6）1.00~1.33（1.13）C.baileyi（貝氏隱孢子蟲）雞，火雞6.0~7.5（6.6）4.8~5.7（5.0）1.05~1.79（1.33）C.galli（雞隱孢子蟲）雀類，雞8.0~8.5（8.25）6.2~6.4（6.3）1.25~1.37（1.30）C.serpentis（蛇隱孢子蟲）蛇類，蜥蜴5.6~6.6（6.2）4.8~5.6（5.3）1.04~1.33（1.16）C.varanii

(C.saurophilum,蜥蜴蛇隱蟲）蜥蜴，蛇類4.4~5.6（5.0）4.2~5.2（5.7）1.04~1.12（1.09）C.molnari（摩氏隱孢子蟲）海魚3.23~5.45（4.7）3.02~5.04（4.4）1.00~1.71（1.05）C.scophthalmi（菱鲆隱孢子蟲）比目魚3.7~5.03（4.44）3.03~4.69(3.91)1.05~1.34（1.14）FromXiao,2004卵囊呈圓形或橢圓形，囊壁光滑，其上有裂縫。無(wú)微孔、極粒和孢子囊。每個(gè)卵囊內(nèi)含有4個(gè)裸露的香蕉形子孢子和1個(gè)殘?bào)w，殘?bào)w由1個(gè)折光體和一些顆粒組成。Cryptosporidium:Anintracellular,

butextracytoplasmicparasite蟲體寄生于宿主粘膜上皮細(xì)胞表面微絨毛刷狀緣內(nèi)帶蟲空泡中，帶蟲空泡來(lái)源于宿主上皮細(xì)胞的微絨毛，直接與宿主細(xì)胞的胞漿膜相連。蟲體與宿主細(xì)胞相融合，融合區(qū)的電子密度較高，位于基部的蟲體表膜反復(fù)折疊形成板層狀的外觀，此為營(yíng)養(yǎng)器。奶牛隱孢子蟲鏡檢結(jié)果分離純化的微小隱孢子蟲卵囊40×

分離純化的安氏隱孢子蟲卵囊40×CryptosporidiumspeciesaretinyparasitesEnvironmentalstage(oocysts卵囊):4-5

mInvasivestages(sporozoites子孢子&merozoites裂殖子):~1x4-5

mLifecycle脫囊excystation裂殖生殖

schizogonymerogony配子生殖

gametogony受精fertilization卵囊形成oocystformation孢子生殖

sporogony隱孢子蟲生活史---能在一個(gè)宿主中完成薄壁型卵囊：自體感染厚壁型卵囊：排出體外EpidemiologySusceptiblehost：兒童、免疫抑制病人、牛、羊、馬、犬、貓，150多種哺乳動(dòng)物和人；30多種鳥類、淡水魚和海魚，57種爬行動(dòng)物。不具有很明顯的宿主特異性。Routeoftransmission：peroralinfection，也可經(jīng)空氣傳播。Infectivesource：oocyst對(duì)外界有很強(qiáng)的抵抗力，50%以上的氨水和30%以上的福爾馬林作用30分鐘才能殺死卵囊。Prevalence：全球性分布，犢牛感染率高達(dá)80%；人隱孢子蟲病在60多個(gè)國(guó)家都有報(bào)道。歐美1-3%，亞洲5%，非洲10%。奶牛感染的季節(jié)性在1－12月中隱孢子蟲卵囊檢測(cè)的陽(yáng)性率

24%8.3%奶牛感染的日齡差別17.28%7.5%%豬感染的日齡差異不同日齡豬的感染率日齡Days%%%不同月份豬隱孢子蟲感染率豬感染的季節(jié)性差異月份上海奶牛隱孢子蟲蟲種的初步鑒定蟲體

形態(tài)與已公布序列的比對(duì)結(jié)果小鼠接種RFLP

結(jié)果A與微小隱孢子蟲99.2%可擴(kuò)增蟲卵(3∕10)不能被限制性內(nèi)切酶EcoT14Ⅰ切開B與安氏隱孢子蟲同源性達(dá)98.4%不可擴(kuò)增能被限制性內(nèi)切酶EcoT14Ⅰ切開Pathogenesis改變寄居的宿主細(xì)胞活動(dòng)從腸管吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損傷腸道微絨毛數(shù)量減少體積變小成熟的腸細(xì)胞脫落雙糖酶活性降低乳糖和其他糖進(jìn)入大腸降解促進(jìn)細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)形成揮發(fā)性脂肪酸改變滲透壓或在腸腔積累不吸收的高滲營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)腹瀉Clinicalsigns牛腸型隱孢子蟲?。籂倥８篂adiarrhea伴隨昏睡、食欲不振inappetence、發(fā)熱fever、脫水dehydration；繼發(fā)輪狀病毒和冠狀病毒感染。牛胃型隱孢子蟲?。喊櫸柑帯⑶嗄昱；虺赡昱．a(chǎn)奶下降，血漿胃蛋白酶原濃度升高，消瘦，無(wú)腹瀉癥狀。Clinicalsigns禽類隱孢子蟲?。焊腥倦u、鴨、火雞、鵪鶉等精神沉郁、嗜睡、厭食、體重減輕、咳嗽、打噴嚏、咯咯叫及呼吸困難等。Diagnosis生前診斷：糞便集卵法，油鏡下觀察死后診斷：刮腸粘膜涂片，姬姆薩染色或齊尼氏染色I(xiàn)mmunologicandmolecularbiologictechniques

IFT、ELISA，、PCR動(dòng)物接種齊一尼氏法：涂片、干燥、火焰固定，用稀釋石炭酸復(fù)紅液染色10分鐘，水洗，再用0.5％的醋酸處理，不超過(guò)30秒鐘，充分水洗，用1％美蘭輕度復(fù)染20秒鐘，水洗、干燥、鏡檢。綠色背景上紅色的蟲體DiagnosisNestedPCR-RFLP建立根據(jù)GenBank上公布的隱孢子蟲18SrRNA基因進(jìn)行引物設(shè)計(jì)隱孢子蟲卵囊的消化和基因組DNA提取PCR產(chǎn)物DNA片段的純化、克隆、重組質(zhì)粒的鑒定

測(cè)序及序列分析

Nested-PCR

敏感性、特異性實(shí)驗(yàn)

RFLP酶切

安氏隱孢子實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方法TaqMan探針?lè)ㄒ铮篎：5‘-attacgtccctgccctttg-3’，R：5‘-ttgttacgacttctccttcctct-3’，安氏隱孢子蟲特異性TaqMan探針

（5‘-(FAM)cagtagcaaatacatagcaagggaagtttc(TAMRA)-3’。特異性

TaqMan探針?lè)ǎ号Ｔ窗彩想[孢子蟲（C.andersoni）能夠擴(kuò)增出曲線，C.parvum、雞貝氏隱孢子蟲、弓形蟲、新孢子蟲和大腸桿菌均無(wú)擴(kuò)增曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線Ct值與質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的5－1×106拷貝/μl范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系敏感性試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，此技術(shù)可以檢測(cè)到5個(gè)拷貝的質(zhì)粒稀釋品1.安氏隱孢子蟲2.微小隱孢子蟲3.雞貝氏隱孢子蟲4.弓形蟲E5.新孢子蟲6.大腸桿菌

Treatment

隱孢子蟲的治療尚無(wú)理想藥物加強(qiáng)衛(wèi)生和提高免疫力

Prevention綜合性預(yù)防措施：減少或預(yù)防卵囊的傳播64.2oC5min，72.4oC1min巴斯德消毒器：71oC5/10/15s水溶性或氣體氨、過(guò)氧化氫消除卵囊感染性臭氧ozone：水中的卵囊免疫抑制病人應(yīng)避免與任何湖水、溪水接觸，不與幼齡動(dòng)物接觸。遷移動(dòng)物到清潔環(huán)境，注意糞便的有效處理和環(huán)境衛(wèi)生措施。

新孢子蟲病

(Neosporosis)病原是球蟲目新孢子蟲屬的犬新孢子蟲（Neosporacanium），寄生于犬、羊、牛、馬等家畜體內(nèi)中樞神經(jīng)系統(tǒng)centralnervoussystem、肌肉muscle、肝liver、腦brain及其它內(nèi)臟組織，可引起致死性原蟲病，并可致孕畜流產(chǎn)或死胎，新生兒四肢運(yùn)動(dòng)障礙和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。

Pathogen

Neosporacanium速殖子呈卵圓形，新月形或小球形，依分裂階段而不同。大小為：3-7μm×1-5μm

寄生于神經(jīng)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、肌細(xì)胞、肝細(xì)胞，腎小管上皮細(xì)胞等典型細(xì)胞器均與弓形蟲速殖子相同：3層質(zhì)膜，22根膜下微管，2個(gè)頂環(huán)，1個(gè)類錐體，1個(gè)極環(huán)，150個(gè)微線體，8-12個(gè)前棒狀體和4-6個(gè)后棒狀體，1個(gè)高爾基復(fù)合體，1-3個(gè)線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，核及核仁。2025/5/9137致密顆粒棒狀體微線體新孢子蟲速殖子新孢子蟲緩殖子棒狀體致密顆粒(引自SpeerCA,1999)頂環(huán)質(zhì)膜透射電鏡照片牛外周血白細(xì)胞接種Vero細(xì)胞1h內(nèi)觀察蟲體培養(yǎng)102天時(shí)觀察分離的蟲體在顯微鏡下的觀察

Pathogen

組織包囊呈圓形或卵圓形，直徑107μm，僅見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)。囊壁光滑，厚約4μm，呈分支狀類小管結(jié)構(gòu)。慢殖子細(xì)長(zhǎng)，6-8μmx1-1.8μm,其內(nèi)細(xì)胞器與速殖子基本一樣，僅棒狀體數(shù)量少，支鏈淀粉顆粒更多。新孢子蟲小鼠腦涂片流產(chǎn)胎牛腦組織包囊

Pathogen

卵囊在犬科動(dòng)物腸道中形成卵囊直徑10-11μm，孢子化時(shí)間24h.孢子化卵囊內(nèi)含2個(gè)孢子囊，每個(gè)孢子囊內(nèi)含4個(gè)子孢子，形態(tài)與弓形蟲卵囊相似。

Lifecycle在終末宿主體內(nèi)有速殖子、組織包囊、卵囊；犬既是中間宿主又是終末宿主。蟲體在中間宿主組織內(nèi)有速殖子和囊性病原體（組織包囊）兩種形式。中間宿主體內(nèi)速殖子寄生于細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)內(nèi)出芽生殖方式繁殖。感染神經(jīng)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)細(xì)胞、肌細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞和其它體細(xì)胞。組織包囊主要見于中間宿主的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，囊壁厚度達(dá)4μm。薄壁組織包囊（0.3-1.0μm）見于自然感染犬新孢子蟲的牛和犬的肌肉。Epidemiology終末宿主：犬和狐貍中間宿主：牛、綿羊、山羊、馬、鹿傳播途徑：經(jīng)乳、經(jīng)口、垂直傳播食用胎膜可能是犬感染的途徑世界性分布，對(duì)牛的危害嚴(yán)重，是牛流產(chǎn)的主要原因。牛血清抗體80%陽(yáng)性牛體內(nèi)垂直傳播

Pathogenesis垂直傳播，導(dǎo)致流產(chǎn)或胎兒運(yùn)動(dòng)障礙和神經(jīng)系統(tǒng)疾病Clinicalsigns病犬厭食癥，吞咽困難，四肢乏力，運(yùn)動(dòng)失調(diào)，視覺(jué)反應(yīng)降低；神經(jīng)癥狀根據(jù)蟲體寄生部位而不同，后肢比前肢更嚴(yán)重，時(shí)常呈強(qiáng)直狀態(tài)；死胎或產(chǎn)出弱犬。牛流產(chǎn)，5-6個(gè)月妊娠期多發(fā)，春末秋初多發(fā)。犢牛（<2月齡）神經(jīng)癥狀，前后肢彎曲或過(guò)伸、眼球突出或兩眼不對(duì)稱;共濟(jì)失調(diào)、膝反射降低等。眼球突出或兩眼不對(duì)稱；出生缺陷–腦積水和脊髓狹窄。新孢子蟲感染引起感染動(dòng)物神經(jīng)和肌肉功能障礙新孢子蟲感染引起孕畜的頻繁流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎木乃伊胎死胎流產(chǎn)胎牛Lesions–犬多灶性心肌炎或心內(nèi)膜炎：由一個(gè)中心壞死灶和大量的漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和少量嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)的黃色炎癥區(qū)帶。-新孢子蟲速殖子群落多發(fā)性肌炎：骨骼肌、顳肌、喉肌、食道肌–新孢子蟲炎性細(xì)胞浸潤(rùn)為特征的壞死性肝炎、化膿性胰腺炎、肉芽腫性肺炎、腎盂腎炎、皮炎及眼部病變。Lesions–牛小腦發(fā)育不全、腦膜腦炎、脊髓炎、脊髓中灰質(zhì)少，形成灶性空洞，病變中可以查到新孢子蟲的組織包囊。心肌炎–心肌的單核細(xì)胞中寄生有大量的速殖子胎盤絨毛層絨毛壞死，并有蟲體病灶。

Diagnosis犬新孢子蟲流產(chǎn)：胎兒有病變–腦炎；病變中發(fā)現(xiàn)犬新孢子蟲；犬新孢子蟲和剛地弓形蟲形態(tài)相似。流產(chǎn)奶牛的血清學(xué)檢查：ELISA、間接熒光抗體試驗(yàn)；親和ELISA區(qū)別近期和慢性感染。確診-胎兒組織學(xué)檢查：腦、心、肝、胎盤

局灶性腦炎–壞死和非化膿性炎癥PCRTreatment&Prevention本病治療尚處于探索階段。早期可試用甲氧芐胺嘧啶，磺胺嘧啶和乙胺嘧啶等抗弓形蟲藥物治療。淘汰病牛和血清抗體陽(yáng)性牛防止犬與牛等中間宿主接觸禁止犬進(jìn)入牛欄禁止犬接觸動(dòng)物飼草、飼料和飲水不讓犬吃到流產(chǎn)的胎兒、胎膜或死犢牛小袋纖毛蟲小袋纖毛蟲病是由毛口目小袋科小袋蟲屬的結(jié)腸小袋纖毛蟲(Balantidiumcoli)寄生于豬和人的大腸（主要是結(jié)腸）所引起的一種人畜共患病。輕度感染：無(wú)異常表現(xiàn)嚴(yán)重感染：腸炎、死亡結(jié)腸小袋纖毛蟲Etiology有滋養(yǎng)體(trophozoites)和包囊(cyst)兩個(gè)發(fā)育階段

滋養(yǎng)體能運(yùn)動(dòng)，一般呈橢圓形或卵圓形，無(wú)色透明或淡灰略帶綠色，大小為30～180×25～120μm。包囊圓形或卵圓形，直徑為40～60μm，淡黃或淡綠色，囊壁厚而透明。胞口胞咽小核大核食物泡伸縮泡胞肛纖毛12結(jié)腸小袋蟲1.滋養(yǎng)體2.包囊生活史1～5.無(wú)性生殖二分體6.包囊期7～9.有性生殖？.為部分生活

史不祥123467589無(wú)性生殖：橫二分裂法有性生殖：接合生殖Epidemiology世界性分布，主要流行于熱帶和亞熱帶。人群感染率低0.04%~8.1%；豬感染率33.8%~80%。滋養(yǎng)體抵抗力弱，厭氧和室溫條件下存活10天。包囊抵抗力強(qiáng)，室溫存活2w~2m,10%Formalin存活4h。Pathogenesis滋養(yǎng)體在寄生部位的大量增殖，引起宿主消化功能紊亂；蟲體分泌透明質(zhì)酸酶并借助機(jī)械運(yùn)動(dòng)侵犯結(jié)腸粘膜甚至粘膜下層,引起潰瘍；嚴(yán)重病例可出現(xiàn)大面積結(jié)腸粘膜的破壞和脫落。Clinicalsigns潛在型無(wú)癥狀，帶蟲者。急性型水樣腹瀉，混有血液。糞便中有滋養(yǎng)體和包囊兩種蟲體存在。表現(xiàn)為食欲不振，渴欲增加，喜歡飲水，消瘦，糞稀如水，惡臭。被毛粗亂無(wú)光，嚴(yán)重者2～3日死亡。慢性型消化機(jī)能障礙、貧血、消瘦、脫水等癥狀，發(fā)育障礙，陷于惡病質(zhì)，常常死亡。Diagnosis

直接涂片檢查糞便

新鮮糞便

反復(fù)送檢尸體剖檢

潰瘍性腸炎

刮取腸粘膜涂片Treatment呋喃唑酮，以0.02％～0.04％的濃度混入豬的飼料中喂服。甲硝噠唑(滅滴靈)每頭按0.25g口服，一天兩次，連用3d有效。0.1％福爾馬林(Formalin)