《血液科實(shí)驗(yàn)室檢查》課件

血液科實(shí)驗(yàn)室檢查血液科實(shí)驗(yàn)室檢查是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)診斷體系中不可或缺的重要組成部分，通過(guò)對(duì)血液樣本的綜合分析，可以為臨床醫(yī)生提供疾病診斷、治療效果評(píng)估及預(yù)后判斷的關(guān)鍵依據(jù)。課程介紹檢驗(yàn)項(xiàng)目覆蓋全面從基礎(chǔ)血常規(guī)到高級(jí)分子檢測(cè)，全方位介紹血液科檢驗(yàn)內(nèi)容，滿足臨床診斷需求理論與實(shí)踐結(jié)合詳解檢驗(yàn)原理與操作流程，指導(dǎo)學(xué)員掌握標(biāo)本采集、處理與結(jié)果分析技能臨床應(yīng)用導(dǎo)向重點(diǎn)突出檢驗(yàn)結(jié)果與疾病診斷的關(guān)聯(lián)，增強(qiáng)臨床思維與判斷能力新技術(shù)與標(biāo)準(zhǔn)更新血液科基本概念血液組成血液主要由血漿和血細(xì)胞兩部分組成。血漿約占血液總量的55%，是血液的液體部分，含有蛋白質(zhì)、電解質(zhì)等；血細(xì)胞約占45%，包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板。紅細(xì)胞主要負(fù)責(zé)氧氣運(yùn)輸，白細(xì)胞負(fù)責(zé)免疫防御，血小板參與凝血過(guò)程。這些細(xì)胞均源于骨髓中的造血干細(xì)胞，通過(guò)分化發(fā)育成為不同類型的成熟血細(xì)胞。常見(jiàn)血液系統(tǒng)疾病血液系統(tǒng)疾病主要包括貧血、白血病、淋巴瘤、骨髓增生異常綜合征、出血性疾病和血栓性疾病等。這些疾病可能影響一種或多種血細(xì)胞系列。血液病的診斷依賴于詳細(xì)的臨床資料、實(shí)驗(yàn)室檢查和特殊檢查，如染色體和分子生物學(xué)檢查等。準(zhǔn)確的診斷是制定合理治療方案的基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)室檢查概述特殊檢查骨髓檢查、流式細(xì)胞術(shù)、分子生物學(xué)、染色體分析生化與免疫檢測(cè)血清蛋白、鐵代謝、維生素、免疫球蛋白凝血與溶血相關(guān)檢查PT、APTT、纖維蛋白原、D-二聚體基礎(chǔ)血液檢查血常規(guī)、外周血涂片、ESR、CRP血液實(shí)驗(yàn)室檢查是血液科疾病診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，為臨床提供客觀、精確的數(shù)據(jù)支持。從常規(guī)的血細(xì)胞計(jì)數(shù)到高級(jí)的分子診斷，不同層次的檢查相互補(bǔ)充，形成完整的診斷鏈條。檢驗(yàn)前準(zhǔn)備患者準(zhǔn)備檢查前需要向患者詳細(xì)解釋檢查目的、過(guò)程和注意事項(xiàng)。大多數(shù)血液檢查要求患者空腹8-12小時(shí)，避免劇烈運(yùn)動(dòng)，有些特殊檢查還需停用某些藥物。檢查當(dāng)天應(yīng)保持情緒穩(wěn)定，檢查前半小時(shí)適當(dāng)休息。材料準(zhǔn)備準(zhǔn)備好相應(yīng)的采血管及標(biāo)簽，核對(duì)患者信息。根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目選擇適當(dāng)?shù)目鼓齽?。使用一次性采血針，確保所有采血設(shè)備無(wú)菌。穿戴好個(gè)人防護(hù)裝備，包括手套、口罩等。現(xiàn)場(chǎng)操作選擇合適的靜脈（通常為肘前靜脈）。正確使用止血帶，時(shí)間不超過(guò)1分鐘。采血部位用75%酒精消毒并待干。采血速度適中，避免溶血。采血后按壓穿刺點(diǎn)3-5分鐘，防止血腫形成。標(biāo)本采集與保存采血方式適用檢查優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)靜脈采血大多數(shù)血液檢查標(biāo)本量大，結(jié)果穩(wěn)定有創(chuàng)，可能痛感明顯動(dòng)脈采血血?dú)夥治鰷?zhǔn)確反映氧合狀態(tài)操作難度大，并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)高毛細(xì)血管采血血糖，部分急查微創(chuàng)，適合兒童血量少，易受環(huán)境影響血液標(biāo)本采集后應(yīng)當(dāng)立即輕柔混勻，避免強(qiáng)烈震蕩導(dǎo)致溶血。常規(guī)檢查應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)完成，如無(wú)法及時(shí)檢測(cè)，需按不同檢測(cè)項(xiàng)目要求適當(dāng)保存。全血樣本通常在2-8℃保存，但不應(yīng)冷凍；血清或血漿分離后可在-20℃冷凍保存。標(biāo)本運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)避免劇烈震動(dòng)和極端溫度，長(zhǎng)途運(yùn)輸需使用專用冷鏈箱并記錄溫度變化。對(duì)于特殊檢查，如血?dú)夥治?，需要全程冰浴保存并?5分鐘內(nèi)檢測(cè)。常見(jiàn)標(biāo)本類型全血保留所有血液成分，適用于血常規(guī)、HbA1c等檢測(cè)血清無(wú)抗凝，血液凝固后分離的淡黃色液體，適用于多數(shù)生化和免疫檢測(cè)血漿含抗凝劑，去除細(xì)胞后的液體部分，凝血功能檢查首選特殊處理標(biāo)本如去白細(xì)胞全血、富血小板血漿等，用于特定檢查抗凝管選擇直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。EDTA抗凝管（紫色）主要用于血常規(guī)檢測(cè)；肝素抗凝管（綠色）適用于部分生化檢測(cè)；枸櫞酸鈉抗凝管（藍(lán)色）專用于凝血功能檢查；而不含抗凝劑的促凝管（紅色）則用于獲取血清。實(shí)驗(yàn)室安全須知生物安全等級(jí)血液實(shí)驗(yàn)室通常屬于BSL-2級(jí)別感染性病原體需在生物安全柜內(nèi)操作嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室分區(qū)管理規(guī)范定期開(kāi)展安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估個(gè)人防護(hù)措施工作服、手套、口罩基本配置處理傳染性樣本時(shí)加戴護(hù)目鏡操作結(jié)束后正確脫除防護(hù)裝備勤洗手，避免交叉污染意外處理標(biāo)本潑濺立即用消毒液處理皮膚刺傷立即擠出血液并消毒嚴(yán)格執(zhí)行意外報(bào)告制度必要時(shí)進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察或預(yù)防用藥血液標(biāo)本應(yīng)視為潛在感染源，操作過(guò)程需遵守標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)原則。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備洗眼器、緊急噴淋等安全設(shè)施，定期進(jìn)行安全培訓(xùn)和演練。所有廢棄物必須按醫(yī)療廢物處理，銳器需放入專用利器盒。血常規(guī)檢查（CBC）簡(jiǎn)介樣本采集EDTA抗凝全血，室溫保存混勻與準(zhǔn)備充分混勻避免血細(xì)胞聚集儀器分析電阻抗或激光散射法計(jì)數(shù)報(bào)告生成數(shù)據(jù)審核后出具報(bào)告血常規(guī)檢查（CompleteBloodCount,CBC）是最基礎(chǔ)也是最常用的血液學(xué)檢查，通過(guò)對(duì)血細(xì)胞數(shù)量和性質(zhì)的測(cè)定，可以初步判斷是否存在貧血、感染、血液系統(tǒng)疾病或出血性疾病等?，F(xiàn)代血液分析儀可以同時(shí)測(cè)定20余項(xiàng)參數(shù)，包括三大系列血細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞指數(shù)、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和血小板參數(shù)等。部分高端儀器還能提供網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和未成熟細(xì)胞比例等特殊參數(shù)，為臨床診療提供更全面的信息。白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類4-10×10?/L正常白細(xì)胞計(jì)數(shù)范圍成人參考值，兒童可略高50-70%中性粒細(xì)胞比例細(xì)菌感染時(shí)明顯升高20-40%淋巴細(xì)胞比例病毒感染相對(duì)增高3-8%單核細(xì)胞比例慢性感染和某些腫瘤升高白細(xì)胞計(jì)數(shù)異常是機(jī)體對(duì)疾病反應(yīng)的重要指標(biāo)。白細(xì)胞增高常見(jiàn)于感染、炎癥、創(chuàng)傷和某些血液系統(tǒng)腫瘤；白細(xì)胞減少則可能提示骨髓抑制、自身免疫性疾病或某些病毒感染。白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)能夠提供更精確的診斷信息。例如，中性粒細(xì)胞增高常提示細(xì)菌感染；嗜酸性粒細(xì)胞增高常見(jiàn)于過(guò)敏反應(yīng)和寄生蟲感染；而淋巴細(xì)胞增高則多提示病毒感染。無(wú)論是絕對(duì)值還是相對(duì)比例的變化，都具有重要的臨床意義。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與指標(biāo)基本計(jì)數(shù)指標(biāo)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(RBC):男性4.5-5.5×1012/L，女性4.0-5.0×1012/L血紅蛋白(Hb):男性130-175g/L，女性115-150g/L紅細(xì)胞壓積(Hct):男性40-50%，女性37-45%這些指標(biāo)共同反映血液攜氧能力，是診斷貧血的基礎(chǔ)參數(shù)。紅細(xì)胞指數(shù)平均紅細(xì)胞體積(MCV):80-100fl平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH):27-34pg平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC):320-360g/L紅細(xì)胞分布寬度(RDW):11.5-14.5%這組參數(shù)幫助分類貧血類型，如小細(xì)胞低色素、大細(xì)胞高色素等。紅細(xì)胞指數(shù)對(duì)貧血的分類和病因診斷具有重要價(jià)值。例如，MCV降低、MCH降低、MCHC降低常見(jiàn)于缺鐵性貧血；MCV增高、MCH增高常見(jiàn)于巨幼細(xì)胞性貧血；而RDW增高則提示存在不同大小的紅細(xì)胞，見(jiàn)于多種貧血恢復(fù)期或混合性貧血。血小板計(jì)數(shù)血小板增多＞450×10?/L，見(jiàn)于慢性炎癥、出血后、惡性腫瘤等正常范圍100-300×10?/L，滿足止血需求血小板減少＜100×10?/L，可能導(dǎo)致出血傾向嚴(yán)重減少＜20×10?/L，高風(fēng)險(xiǎn)出血，需緊急干預(yù)血小板是體內(nèi)最小的血細(xì)胞，主要參與止血和凝血過(guò)程。正常情況下，血小板數(shù)量足以維持血管完整性；當(dāng)血小板數(shù)量減少或功能異常時(shí)，可能出現(xiàn)皮膚黏膜出血、瘀斑或嚴(yán)重出血。血小板計(jì)數(shù)需結(jié)合平均血小板體積(MPV)和血小板分布寬度(PDW)綜合判斷。MPV增大常見(jiàn)于血小板破壞增加的疾病，如特發(fā)性血小板減少性紫癜；而小血小板則可能提示骨髓造血功能不良?，F(xiàn)代血液分析儀還能提供未成熟血小板比例(IPF)，有助于判斷骨髓造血功能。外周血涂片檢查滴血在干凈載玻片一端約1cm處滴一小滴混勻的全血推片使用推片，以30-45°角推拉，形成均勻薄層干燥自然晾干或使用電風(fēng)扇快速吹干染色瑞氏染色或Wright-Giemsa染色鏡檢低倍找視野，高倍觀察細(xì)胞形態(tài)外周血涂片檢查是血液學(xué)檢查的重要組成部分，能夠直觀顯示血細(xì)胞的形態(tài)變化。優(yōu)質(zhì)的涂片應(yīng)呈舌形，厚薄適中，有"拖尾"現(xiàn)象，細(xì)胞分布均勻且無(wú)重疊。瑞氏染色是最常用的血涂片染色方法，可將不同細(xì)胞結(jié)構(gòu)染成不同顏色：細(xì)胞核呈紫藍(lán)色，細(xì)胞質(zhì)呈淡藍(lán)或粉紅色，嗜酸性顆粒呈橙紅色，嗜堿性顆粒呈深藍(lán)色。通過(guò)這些顏色差異，可以識(shí)別并區(qū)分各類血細(xì)胞。血液細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化紅細(xì)胞形態(tài)異常是多種血液疾病的重要線索。靶形紅細(xì)胞（中央著色、周圍環(huán)狀淡染、邊緣著色）常見(jiàn)于肝病、地中海貧血；鐮狀紅細(xì)胞特征性出現(xiàn)在鐮狀細(xì)胞貧血；球形紅細(xì)胞常見(jiàn)于遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥；而有棘紅細(xì)胞則提示肝臟疾病或脾切除后。白細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變也具有重要診斷意義，如中性粒細(xì)胞中毒性顆粒、D?hle小體提示嚴(yán)重感染；淋巴細(xì)胞的異型性變化見(jiàn)于病毒感染；巨大顆粒性淋巴細(xì)胞增多則提示某些病毒感染或淋巴增殖性疾病。血小板形態(tài)異常如大血小板，常見(jiàn)于血小板產(chǎn)生異常的疾病。青少年和幼稚細(xì)胞識(shí)別原始細(xì)胞細(xì)胞體積大，N/C比例大，核染色質(zhì)細(xì)致，可見(jiàn)核仁，無(wú)特殊顆粒，急性白血病的特征性細(xì)胞早幼粒細(xì)胞核形不規(guī)則，染色質(zhì)稍粗，胞質(zhì)中出現(xiàn)特異性顆粒，常見(jiàn)于急性早幼粒細(xì)胞白血病原紅細(xì)胞/幼紅細(xì)胞胞質(zhì)呈藍(lán)色至灰藍(lán)色，有核紅細(xì)胞，反映紅系造血紊亂或骨髓造血外溢幼粒細(xì)胞成熟度介于早幼粒細(xì)胞和桿狀核粒細(xì)胞之間，核形長(zhǎng)橢圓，顆粒增多骨髓釋放未成熟細(xì)胞進(jìn)入外周血通常提示嚴(yán)重的血液系統(tǒng)疾病。在急性白血病中，外周血中可見(jiàn)大量原始細(xì)胞；而在急性感染或骨髓刺激狀態(tài)下，可見(jiàn)少量桿狀核粒細(xì)胞和中幼粒細(xì)胞，稱為"核左移"。準(zhǔn)確識(shí)別幼稚細(xì)胞類型對(duì)白血病分類至關(guān)重要。急性髓系白血病可見(jiàn)Auer小體、原始粒細(xì)胞；急性淋巴細(xì)胞白血病則細(xì)胞形態(tài)較為單一，細(xì)胞質(zhì)少，無(wú)特殊顆粒。某些情況下需結(jié)合特殊染色、免疫表型和分子生物學(xué)檢查明確診斷。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)手工法使用亮藍(lán)O或新美藍(lán)等超生體染色劑，將殘留的核糖核酸染成藍(lán)色網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，在1000個(gè)紅細(xì)胞中計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)量，得出百分比。正常值為0.5-1.5%。這種方法操作相對(duì)繁瑣，主觀誤差大，但在基層醫(yī)院仍有廣泛應(yīng)用。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)注意區(qū)分網(wǎng)織紅細(xì)胞與其他含有嗜堿性顆粒的紅細(xì)胞。流式法使用熒光染料特異性標(biāo)記網(wǎng)織紅細(xì)胞中的RNA，通過(guò)流式細(xì)胞儀自動(dòng)計(jì)數(shù)。除了百分比，還可提供網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度指數(shù)等參數(shù)，對(duì)評(píng)估骨髓造血功能更有價(jià)值。該方法具有速度快、準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好的優(yōu)點(diǎn)，已成為大型醫(yī)院的常規(guī)方法。某些血液分析儀可直接在血常規(guī)同時(shí)完成網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。網(wǎng)織紅細(xì)胞是一種未完全成熟的紅細(xì)胞，含有殘留的RNA。其數(shù)量反映骨髓紅系造血功能，在貧血診斷和分類中具有重要價(jià)值。網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)升高提示骨髓代償性增加紅細(xì)胞生成，如溶血性貧血和急性失血；而計(jì)數(shù)降低則提示骨髓造血功能不全，如再生障礙性貧血。紅細(xì)胞沉降率（ESR）標(biāo)本準(zhǔn)備枸櫞酸鈉抗凝全血，正確比例為1:4方法選擇Westergren法（國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)）或Wintrobe法測(cè)定過(guò)程垂直放置專用管，1小時(shí)后讀取紅細(xì)胞下沉距離結(jié)果校正非標(biāo)準(zhǔn)溫度下需進(jìn)行溫度校正紅細(xì)胞沉降率是評(píng)估炎癥活動(dòng)度的簡(jiǎn)單而敏感的指標(biāo)。正常值男性0-15mm/h，女性0-20mm/h，50歲以上可適當(dāng)增加。ESR增快主要由于血漿蛋白變化導(dǎo)致紅細(xì)胞聚集性增強(qiáng)。ESR在多種炎癥性疾病診斷和隨訪中具有重要價(jià)值，如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、結(jié)核病、多發(fā)性骨髓瘤和巨細(xì)胞動(dòng)脈炎等。值得注意的是，ESR是非特異性指標(biāo)，結(jié)果受多種因素影響，包括年齡、性別、貧血程度、蛋白質(zhì)變化等，解讀時(shí)需結(jié)合臨床情況。C反應(yīng)蛋白（CRP）檢測(cè)急性期反應(yīng)蛋白CRP是由肝臟合成的急性期反應(yīng)蛋白，正常值＜10mg/L，在炎癥、感染和組織損傷時(shí)迅速升高，可達(dá)正常值的100-1000倍快速響應(yīng)指標(biāo)CRP在炎癥發(fā)生后6-8小時(shí)開(kāi)始升高，24-48小時(shí)達(dá)峰值，炎癥控制后3-7天恢復(fù)正常，反應(yīng)更迅速敏感，不受年齡、性別等因素影響檢測(cè)方法常用方法包括免疫比濁法、免疫散射比濁法和化學(xué)發(fā)光法等，其中高敏CRP(hs-CRP)可檢測(cè)＜1mg/L的低濃度CRP，用于心血管風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與ESR相比，CRP在炎癥早期升高更快，對(duì)炎癥變化反應(yīng)更靈敏，且不受貧血、球蛋白異常等因素影響，特異性更高。但ESR在某些慢性炎癥如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的評(píng)估中仍有獨(dú)特價(jià)值。兩者聯(lián)合檢測(cè)可提高診斷價(jià)值。CRP廣泛應(yīng)用于細(xì)菌感染的早期診斷，手術(shù)后感染并發(fā)癥的監(jiān)測(cè)，抗生素治療效果評(píng)估，以及自身免疫性疾病活動(dòng)度判斷。需注意輕度升高可見(jiàn)于妊娠晚期和口服避孕藥等非病理狀態(tài)。血漿蛋白電泳血漿蛋白電泳是根據(jù)蛋白質(zhì)分子在電場(chǎng)中遷移速度不同而將血漿蛋白質(zhì)分離的技術(shù)。檢查流程包括樣本準(zhǔn)備、電泳分離、染色顯色和掃描分析四個(gè)步驟。常用方法有瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳和毛細(xì)管區(qū)帶電泳等。不同疾病會(huì)產(chǎn)生特征性的電泳圖譜改變。急性炎癥時(shí)，α1和α2球蛋白增高，白蛋白降低；慢性肝病時(shí)，白蛋白降低，γ球蛋白增高，甚至出現(xiàn)γ-β橋；而多發(fā)性骨髓瘤則表現(xiàn)為M蛋白峰，即單克隆γ球蛋白異常增高。血漿蛋白電泳結(jié)合免疫固定電泳，是血液病診斷的重要工具。免疫球蛋白及輕鏈測(cè)定免疫球蛋白類型正常范圍臨床意義IgG7-16g/L多發(fā)性骨髓瘤最常見(jiàn)類型IgA0.7-4g/L分泌型，黏膜免疫重要IgM0.4-2.3g/L華氏巨球蛋白血癥特征κ輕鏈1.7-3.7g/Lκ/λ比值正常為1.4-2.0λ輕鏈0.9-2.1g/L異常比值提示克隆性增生免疫球蛋白定量測(cè)定是診斷漿細(xì)胞病的關(guān)鍵檢查。漿細(xì)胞瘤常產(chǎn)生單克隆免疫球蛋白（M蛋白），可通過(guò)免疫比濁法、免疫散射比濁法或免疫固定電泳法檢測(cè)。免疫固定電泳不僅可確定是否存在單克隆免疫球蛋白，還能確定其重鏈和輕鏈類型。血清游離輕鏈（FLC）測(cè)定對(duì)于診斷輕鏈型和非分泌型多發(fā)性骨髓瘤具有重要價(jià)值。正常情況下κ/λ比值保持相對(duì)穩(wěn)定，當(dāng)比值異常時(shí)提示可能存在克隆性漿細(xì)胞病。FLC還可用于評(píng)估治療反應(yīng)和預(yù)后，對(duì)微小殘留病灶監(jiān)測(cè)具有重要意義。血漿黏度檢測(cè)正常血漿黏度相對(duì)于水為1.4-1.8，維持正常血流動(dòng)力學(xué)輕度高黏血癥黏度2-3，可能出現(xiàn)頭痛、視物模糊等癥狀中度高黏血癥黏度3-4，常伴有神經(jīng)系統(tǒng)癥狀重度高黏血癥黏度＞4，可能發(fā)生血栓、出血等嚴(yán)重并發(fā)癥血漿黏度測(cè)定是評(píng)估血液流變學(xué)特性的重要方法，通常使用毛細(xì)管黏度計(jì)或旋轉(zhuǎn)黏度計(jì)測(cè)定。高黏度血癥是多種血液病的并發(fā)癥，特別是華氏巨球蛋白血癥和IgA型多發(fā)性骨髓瘤。血漿黏度升高主要與異常蛋白增多有關(guān)，如單克隆免疫球蛋白或纖維蛋白原。高黏度綜合征臨床表現(xiàn)多樣，包括頭痛、視力障礙、神經(jīng)系統(tǒng)癥狀、出血傾向和心功能不全等。當(dāng)出現(xiàn)癥狀時(shí)，無(wú)論血漿黏度值如何，都應(yīng)考慮進(jìn)行血漿置換治療。定期監(jiān)測(cè)血漿黏度對(duì)高風(fēng)險(xiǎn)患者的管理至關(guān)重要，尤其是在化療過(guò)程中可能出現(xiàn)快速溶瘤反應(yīng)的情況。血型與配血ABO血型系統(tǒng)基于紅細(xì)胞表面A抗原和B抗原的存在，分為A型、B型、AB型和O型檢測(cè)包括正定型（檢測(cè)紅細(xì)胞抗原）和反定型（檢測(cè)血清抗體）Rh血型系統(tǒng)主要關(guān)注D抗原，分為Rh陽(yáng)性和Rh陰性Rh陰性人群輸入Rh陽(yáng)性血液可能產(chǎn)生抗體，導(dǎo)致輸血反應(yīng)或新生兒溶血交叉配血試驗(yàn)包括主側(cè)配血（受者血清+供者紅細(xì)胞）和次側(cè)配血（供者血清+受者紅細(xì)胞）確保供受者間無(wú)不相容性，是輸血前的必要步驟抗體篩查與鑒定檢測(cè)血清中是否存在非ABO系統(tǒng)的不規(guī)則抗體對(duì)既往輸血、妊娠或某些疾病患者尤為重要準(zhǔn)確的血型鑒定和配血是安全輸血的基礎(chǔ)。ABO和Rh是臨床上最重要的兩個(gè)血型系統(tǒng)，但人類紅細(xì)胞上實(shí)際存在數(shù)百種抗原。對(duì)于多次輸血患者，應(yīng)進(jìn)行完整的血型分型和抗體篩查，避免同種免疫反應(yīng)。骨髓穿刺與活檢穿刺適應(yīng)癥不明原因的血細(xì)胞減少或增多疑似白血病、骨髓增生異常綜合征不明原因的發(fā)熱、貧血、出血疑似感染性疾病骨髓受累腫瘤分期和評(píng)估治療效果常用穿刺部位后上髂棘（首選，適用于成人）胸骨（便于操作，但有并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)）前上髂棘（適用于體重過(guò)重患者）脛骨上端（適用于嬰幼兒）肱骨大結(jié)節(jié)（特殊情況下）禁忌癥重度血小板減少或凝血功能障礙穿刺部位感染或皮膚病變患者不能配合或精神狀態(tài)不穩(wěn)定嚴(yán)重的骨質(zhì)疏松或骨硬化穿刺部位有骨折或腫瘤浸潤(rùn)骨髓穿刺是獲取骨髓標(biāo)本的常用方法，操作相對(duì)簡(jiǎn)便，主要用于細(xì)胞學(xué)檢查；而骨髓活檢則獲取骨髓組織塊，可評(píng)估骨髓結(jié)構(gòu)和纖維化程度。兩者各有優(yōu)勢(shì)，聯(lián)合應(yīng)用可提高診斷準(zhǔn)確率。標(biāo)本處理流程包括：制作骨髓涂片（直接涂片和壓片）、制作骨髓粒片、進(jìn)行特殊染色（如鐵染色）、留取標(biāo)本用于流式細(xì)胞學(xué)、分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)檢查等。骨髓活檢組織需進(jìn)行脫鈣處理后再制作石蠟切片。骨髓涂片染色與判讀粒系細(xì)胞紅系細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞其他細(xì)胞骨髓涂片通常采用瑞氏染色或Wright-Giemsa染色，這些染色方法可以清晰顯示細(xì)胞核染色質(zhì)、胞質(zhì)顆粒和包涵體等結(jié)構(gòu)。理想的骨髓涂片應(yīng)包括骨髓小粒（反映骨髓結(jié)構(gòu)）和分散區(qū)（便于觀察單個(gè)細(xì)胞形態(tài)）。骨髓判讀需系統(tǒng)觀察：首先在低倍鏡下評(píng)估骨髓增生程度和脂肪比例，然后在高倍鏡下識(shí)別各系細(xì)胞比例和形態(tài)特點(diǎn)。紅系觀察關(guān)注核質(zhì)比、胞質(zhì)顏色和核染色質(zhì)；粒系關(guān)注各發(fā)育階段細(xì)胞比例和顆粒形態(tài)；巨核系關(guān)注數(shù)量和形態(tài)；同時(shí)注意有無(wú)異常細(xì)胞和寄生蟲。準(zhǔn)確判讀需具備扎實(shí)的細(xì)胞形態(tài)學(xué)知識(shí)和豐富的經(jīng)驗(yàn)。骨髓細(xì)胞計(jì)數(shù)骨髓增生程度根據(jù)骨髓腔內(nèi)造血細(xì)胞與脂肪細(xì)胞比例評(píng)估，正常為30-70%，與年齡相關(guān)。增生低下、正常、活躍或明顯活躍反映骨髓功能狀態(tài)粒紅比值正常為2-4:1，反映粒系與紅系的相對(duì)比例。比值增高見(jiàn)于粒系增生性疾病或紅系發(fā)育抑制；比值降低見(jiàn)于紅系增生或粒系發(fā)育抑制異常細(xì)胞比例正常骨髓原始細(xì)胞＜5%；≥20%提示急性白血??；5-19%需結(jié)合其他檢查判斷是否為骨髓增生異常綜合征或其他疾病骨髓有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)是骨髓檢查的重要內(nèi)容，通常計(jì)數(shù)500個(gè)有核細(xì)胞，分析各系細(xì)胞的百分比。正常骨髓中，粒系約占50-60%，紅系約占20-30%，淋巴細(xì)胞約占10-20%，單核細(xì)胞約占1-3%，巨核細(xì)胞＜1%。細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果需與骨髓增生程度一起評(píng)估。例如，相同百分比的紅系細(xì)胞，在增生低下的骨髓中代表絕對(duì)數(shù)量減少，而在增生活躍的骨髓中則可能正?；蛟龆?。此外，還需評(píng)估各系細(xì)胞的成熟度分布，如粒系成熟障礙可見(jiàn)核左移或核右移，反映疾病特征。流式細(xì)胞術(shù)在血液病中的應(yīng)用樣本準(zhǔn)備外周血、骨髓、淋巴結(jié)等組織細(xì)胞懸液制備與抗體標(biāo)記流式檢測(cè)利用激光檢測(cè)細(xì)胞體積、復(fù)雜性及多色熒光信號(hào)數(shù)據(jù)分析通過(guò)散點(diǎn)圖、直方圖等分析細(xì)胞抗原表達(dá)特征結(jié)果判讀結(jié)合抗原表達(dá)譜型進(jìn)行免疫分型與診斷流式細(xì)胞術(shù)是一種高通量單細(xì)胞分析技術(shù)，能同時(shí)檢測(cè)多個(gè)細(xì)胞表面或胞內(nèi)抗原表達(dá)。CD（ClusterofDifferentiation，分化抗原）是識(shí)別細(xì)胞種類和分化階段的標(biāo)志，目前已鑒定400多種CD抗原。流式細(xì)胞術(shù)可分析細(xì)胞表型、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡和功能狀態(tài)等。在白血病診斷中，流式細(xì)胞術(shù)可確定原始細(xì)胞的譜系來(lái)源（髓系、B淋巴系、T淋巴系等），協(xié)助分型分類；在淋巴瘤診斷中，可區(qū)分良惡性增生，幫助確定NHL亞型；此外，還用于PNH診斷、MRD監(jiān)測(cè)和干細(xì)胞計(jì)數(shù)等。多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)已成為血液病診斷不可或缺的工具。染色體檢查（核型分析）費(fèi)城染色體t(9;22)(q34;q11)，是慢性髓性白血病的特征性染色體異常，形成BCR-ABL融合基因。也見(jiàn)于部分急性淋巴細(xì)胞白血病，是重要的預(yù)后因素。t(15;17)易位急性早幼粒細(xì)胞白血病的特征性染色體改變，形成PML-RARA融合基因。該亞型對(duì)全反式維甲酸治療敏感，預(yù)后相對(duì)較好。復(fù)雜核型指存在3個(gè)或以上染色體異常，常見(jiàn)于骨髓增生異常綜合征和急性髓系白血病，提示疾病進(jìn)展和預(yù)后不良。染色體核型分析是細(xì)胞遺傳學(xué)的基本方法，通過(guò)顯微鏡下觀察分裂中期細(xì)胞的染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)染色體異常。標(biāo)本通常采用骨髓或外周血，經(jīng)培養(yǎng)、收獲、制片和顯帶等步驟處理。常用顯帶技術(shù)包括G顯帶、Q顯帶、C顯帶和R顯帶等。染色體異常包括數(shù)目異常（如+8，-7）和結(jié)構(gòu)異常（如易位、缺失、倒位等）。某些特定染色體異常與特定血液病高度相關(guān)，具有診斷和預(yù)后價(jià)值。但染色體分析受分辨率限制，只能發(fā)現(xiàn)較大的遺傳物質(zhì)改變（＞5-10Mb），且需要細(xì)胞分裂才能檢出。分子生物學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目PCR技術(shù)擴(kuò)增特定DNA/RNA序列，檢測(cè)融合基因和基因突變FISH技術(shù)熒光探針定位染色體特定區(qū)域，檢測(cè)微小異常RT-qPCR實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)，精確測(cè)量融合基因轉(zhuǎn)錄本水平NGS技術(shù)新一代測(cè)序，全面檢測(cè)基因組變異分子生物學(xué)技術(shù)在血液病診斷中的應(yīng)用日益廣泛。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及其衍生技術(shù)能檢測(cè)特定融合基因和基因突變，如BCR-ABL、PML-RARA、RUNX1-RUNX1T1等。熒光原位雜交（FISH）技術(shù)彌補(bǔ)了傳統(tǒng)染色體分析的不足，可檢測(cè)間期細(xì)胞的染色體異常。實(shí)時(shí)定量PCR（RT-qPCR）是微小殘留病變（MRD）監(jiān)測(cè)的重要工具，可檢測(cè)極低水平的殘留腫瘤細(xì)胞，指導(dǎo)治療方案調(diào)整。基因芯片可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因表達(dá)或變異。新一代測(cè)序技術(shù)（NGS）可全面篩查基因突變，如FLT3、NPM1、CEBPA、IDH1/2等，為精準(zhǔn)醫(yī)療提供基礎(chǔ)。這些技術(shù)極大提高了血液病診斷的精確性和個(gè)體化治療的可能性。白血病分子分型白血病類型特征性分子標(biāo)志物臨床意義慢性髓性白血病BCR-ABL1p210診斷確認(rèn)，MRD監(jiān)測(cè)急性早幼粒細(xì)胞白血病PML-RARAATRA治療敏感，預(yù)后好急性髓系白血病RUNX1-RUNX1T1,CBFB-MYH11預(yù)后相對(duì)良好急性髓系白血病FLT3-ITD,NPM1,CEBPA影響預(yù)后，指導(dǎo)治療急性淋巴細(xì)胞白血病BCR-ABL1,MLL重排預(yù)后不良，需強(qiáng)化治療分子標(biāo)志物是白血病診斷、分型和預(yù)后評(píng)估的重要依據(jù)。2016年修訂的WHO血液腫瘤分類，進(jìn)一步突出分子遺傳學(xué)變異的重要性。不同分子亞型的白血病表現(xiàn)出不同的臨床特征、對(duì)治療的反應(yīng)及預(yù)后，如攜帶NPM1突變但無(wú)FLT3-ITD的AML患者預(yù)后較好。微小殘留病變（MRD）監(jiān)測(cè)是評(píng)估治療反應(yīng)和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)的重要手段。常用的MRD檢測(cè)方法包括多色流式細(xì)胞術(shù)和高靈敏度分子技術(shù)（如RT-qPCR和NGS）。BCR-ABL1轉(zhuǎn)錄本水平是CML治療反應(yīng)的關(guān)鍵指標(biāo)，國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值（IS）的應(yīng)用使不同實(shí)驗(yàn)室結(jié)果具有可比性。對(duì)于AML和ALL，MRD陰性與更好的無(wú)復(fù)發(fā)生存期相關(guān)。血小板功能檢測(cè)出血時(shí)間最傳統(tǒng)的血小板功能篩查，測(cè)量皮膚小切口止血所需時(shí)間血小板聚集試驗(yàn)評(píng)估血小板對(duì)多種誘導(dǎo)劑的聚集反應(yīng)，檢測(cè)多種血小板功能障礙血栓彈力圖評(píng)估血塊形成和溶解的整體動(dòng)力學(xué)過(guò)程，反映血小板功能流式血小板分析檢測(cè)血小板表面糖蛋白和活化標(biāo)志物表達(dá)4血小板功能檢測(cè)對(duì)出血性疾病的診斷至關(guān)重要。傳統(tǒng)的出血時(shí)間測(cè)定（Duke法、Ivy法）雖然簡(jiǎn)便，但受多種因素影響，重復(fù)性差，現(xiàn)已較少使用。而血小板聚集試驗(yàn)是目前評(píng)估血小板功能的金標(biāo)準(zhǔn)，可使用多種誘導(dǎo)劑（如ADP、膠原、花生四烯酸、瑞斯托霉素等），分析血小板對(duì)不同通路刺激的反應(yīng)。PFA-100和VerifyNow等床旁檢測(cè)系統(tǒng)提供了更快速便捷的血小板功能評(píng)估方法，特別適用于抗血小板藥物療效監(jiān)測(cè)。流式細(xì)胞術(shù)可檢測(cè)血小板表面糖蛋白缺陷和活化標(biāo)志物，有助于診斷先天性血小板功能障礙如格蘭茲曼血小板無(wú)力癥。血栓彈力圖則提供了全血凝血過(guò)程的整體評(píng)估，在圍手術(shù)期凝血管理中應(yīng)用廣泛。凝血功能檢查概述高級(jí)檢測(cè)血栓彈力圖、凝血因子活性測(cè)定、抗凝物質(zhì)檢測(cè)2特殊檢測(cè)FDP、D-二聚體、狼瘡抗凝物、凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物篩查檢測(cè)PT、APTT、TT、Fbg、血小板計(jì)數(shù)臨床評(píng)估出血史、藥物史、家族史、體格檢查凝血系統(tǒng)由三個(gè)相互關(guān)聯(lián)的部分組成：血管壁、血小板和凝血因子系統(tǒng)。凝血過(guò)程包括內(nèi)源性和外源性兩條途徑，最終匯合形成凝血酶，將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。同時(shí)，體內(nèi)存在多種抗凝和纖溶機(jī)制，維持凝血與抗凝的平衡。凝血功能檢查的常見(jiàn)適應(yīng)癥包括：出血傾向的診斷與鑒別診斷，手術(shù)前凝血功能評(píng)估，抗凝治療監(jiān)測(cè)，血栓傾向的診斷，DIC的診斷與監(jiān)測(cè)等?；A(chǔ)凝血檢查（PT、APTT、纖維蛋白原、TT和血小板計(jì)數(shù)）是評(píng)估凝血功能的首選方法，可初步定位凝血障礙的環(huán)節(jié)，為進(jìn)一步檢查提供方向。凝血酶原時(shí)間（PT）11-14秒正常參考范圍各實(shí)驗(yàn)室可能略有差異7個(gè)相關(guān)凝血因子因子I,II,V,VII,X及維生素K依賴因子2-3倍華法林治療目標(biāo)INR值通常維持在此范圍凝血酶原時(shí)間（PT）檢測(cè)的是外源性凝血途徑和共同途徑的功能。檢測(cè)原理是向枸櫞酸鈉抗凝的血漿中加入組織因子（也稱組織凝血活酶）和鈣離子，測(cè)定從加入試劑到形成凝塊所需的時(shí)間。PT延長(zhǎng)可見(jiàn)于維生素K缺乏、肝病、DIC、抗維生素K藥物治療等情況。為解決不同實(shí)驗(yàn)室PT結(jié)果不一致的問(wèn)題，引入了國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）概念。INR=(患者PT/正常對(duì)照PT)^ISI，其中ISI是國(guó)際敏感度指數(shù)。INR主要用于監(jiān)測(cè)口服抗凝藥華法林的治療效果，不同適應(yīng)癥有不同的目標(biāo)INR范圍。需注意，INR僅適用于維生素K拮抗劑監(jiān)測(cè)，不適用于評(píng)估肝病患者或其他抗凝藥物?；罨糠帜蠲笗r(shí)間（APTT）活化部分凝血活酶時(shí)間（APTT）是評(píng)估內(nèi)源性和共同凝血途徑功能的重要指標(biāo)。檢測(cè)原理是向血漿中加入接觸活化劑（如高嶺土、硅酸鹽）和磷脂，測(cè)定形成凝塊所需的時(shí)間。正常APTT范圍為25-37秒，但各實(shí)驗(yàn)室可能有所不同。APTT主要反映XII、XI、IX、VIII、X、V、II和I因子的功能。APTT延長(zhǎng)見(jiàn)于血友病A（VIII因子缺乏）、血友病B（IX因子缺乏）、肝病、DIC、抗凝治療（肝素、直接凝血酶抑制劑）和狼瘡抗凝物等情況。APTT是肝素治療監(jiān)測(cè)的主要指標(biāo)，治療劑量肝素通常使APTT延長(zhǎng)至正常值的1.5-2.5倍。對(duì)于APTT延長(zhǎng)的患者，應(yīng)進(jìn)行混合試驗(yàn)幫助鑒別是凝血因子缺乏（混合后可糾正）還是存在抑制物（混合后不能完全糾正）。纖維蛋白原檢測(cè)纖維蛋白原生理功能纖維蛋白原（Fibrinogen，F(xiàn)bg）是肝臟合成的一種可溶性血漿蛋白，是凝血過(guò)程的關(guān)鍵底物。在凝血酶作用下，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄岳w維蛋白，構(gòu)成血栓的主要成分。此外，纖維蛋白原還是急性期反應(yīng)蛋白，參與炎癥反應(yīng)；是血小板聚集的橋梁分子，介導(dǎo)血小板之間的相互連接；同時(shí)參與組織修復(fù)和傷口愈合過(guò)程。檢測(cè)方法與臨床意義纖維蛋白原檢測(cè)的常用方法是Clauss法，測(cè)定凝血酶存在下血漿凝固所需的時(shí)間，并與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較計(jì)算濃度。免疫比濁法可測(cè)定抗原水平，但不反映功能。正常參考范圍為2.0-4.0g/L。纖維蛋白原增高見(jiàn)于炎癥、妊娠、口服避孕藥等；減低見(jiàn)于肝功能不全、DIC、纖溶亢進(jìn)和先天性缺乏等。纖維蛋白原降至＜1.0g/L時(shí)可能出現(xiàn)出血傾向，是DIC診斷和監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)。先天性纖維蛋白原異常包括缺乏癥和異常癥。缺乏癥可表現(xiàn)為無(wú)纖維蛋白原血癥或低纖維蛋白原血癥；異常癥則是纖維蛋白原分子結(jié)構(gòu)異常，導(dǎo)致功能障礙。這些患者可出現(xiàn)輕度至嚴(yán)重出血，部分還可能出現(xiàn)血栓形成。診斷需結(jié)合家族史、凝血功能和纖維蛋白原活性與抗原水平的關(guān)系。D-二聚體檢測(cè)D-二聚體產(chǎn)生過(guò)程當(dāng)血液發(fā)生凝固時(shí)，凝血酶將纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白單體，后者在XIII因子作用下交聯(lián)形成穩(wěn)定的纖維蛋白網(wǎng)。纖溶系統(tǒng)激活后，纖溶酶降解交聯(lián)纖維蛋白，產(chǎn)生含有D-二聚體結(jié)構(gòu)的降解產(chǎn)物。因此，D-二聚體是體內(nèi)凝血活化和繼發(fā)性纖溶的特異性標(biāo)志物。檢測(cè)方法與臨床應(yīng)用D-二聚體檢測(cè)方法包括乳膠凝集法、免疫比濁法和酶聯(lián)免疫法等。正常人D-二聚體＜0.5mg/LFEU（纖維蛋白原當(dāng)量單位）。D-二聚體主要用于排除深靜脈血栓（DVT）和肺栓塞（PE），陰性結(jié)果（＜0.5mg/L）具有很高的陰性預(yù)測(cè)值，能可靠排除這些疾病。結(jié)果解讀與局限性D-二聚體升高不僅見(jiàn)于VTE，也見(jiàn)于DIC、動(dòng)脈血栓、感染、創(chuàng)傷、手術(shù)、妊娠、惡性腫瘤和老年人等情況。因此，D-二聚體升高的特異性較低，陽(yáng)性結(jié)果需進(jìn)一步檢查確認(rèn)。臨床解讀時(shí)應(yīng)結(jié)合患者年齡、妊娠狀態(tài)和并存疾病等因素，老年人可考慮使用年齡調(diào)整的界值?？鼓镔|(zhì)檢測(cè)抗凝血酶III（AT-III）主要的生理性抗凝物質(zhì)，抑制凝血酶和Xa等多種凝血因子正常活性70-130%，先天性或獲得性缺乏導(dǎo)致血栓傾向是肝素抗凝作用的關(guān)鍵輔因子，AT-III缺乏患者對(duì)肝素反應(yīng)差檢測(cè)方法包括功能學(xué)檢測(cè)和免疫學(xué)檢測(cè)蛋白C系統(tǒng)蛋白C由肝臟合成，依賴維生素K，被凝血酶-血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物激活活化蛋白C（APC）在蛋白S輔助下滅活Va和VIIIa因子蛋白C/S缺乏與靜脈血栓栓塞密切相關(guān)檢測(cè)蛋白C活性是一線篩查方法，異常時(shí)再檢測(cè)抗原水平蛋白S蛋白S存在游離型（40%）和結(jié)合型（60%），僅游離型具有輔因子活性先天性缺乏分為I型（活性和抗原均減少）和II型（僅活性減少）妊娠、口服避孕藥、炎癥可導(dǎo)致獲得性蛋白S活性降低應(yīng)檢測(cè)總蛋白S、游離蛋白S和功能活性全面評(píng)估天然抗凝物質(zhì)檢測(cè)是遺傳性血栓傾向篩查的重要內(nèi)容。AT-III、蛋白C和蛋白S缺乏是常見(jiàn)的遺傳性血栓形成風(fēng)險(xiǎn)因素，占遺傳性血栓癥的10-15%?？鼓镔|(zhì)檢測(cè)適用于：年輕患者（＜50歲）不明原因血栓，有反復(fù)血栓病史，有血栓家族史，以及特殊部位血栓如腦靜脈竇血栓等。免疫學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目簡(jiǎn)介自身免疫抗體檢測(cè)血液系統(tǒng)自身免疫性疾病相關(guān)抗體，如抗血小板抗體、抗中性粒細(xì)胞抗體等免疫表型分析流式細(xì)胞術(shù)分析免疫細(xì)胞比例與功能，評(píng)估免疫狀態(tài)補(bǔ)體系統(tǒng)評(píng)估補(bǔ)體成分（C3、C4等）水平，反映免疫復(fù)合物相關(guān)疾病活動(dòng)度細(xì)胞因子檢測(cè)測(cè)定IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子水平，反映炎癥狀態(tài)免疫學(xué)檢測(cè)在血液病診斷中具有重要地位。自身免疫性溶血性貧血需檢測(cè)直接/間接抗人球蛋白試驗(yàn)（Coombs試驗(yàn)）和特異性自身抗體；血小板減少性紫癜可檢測(cè)抗血小板抗體；自身免疫性中性粒細(xì)胞減少癥則檢測(cè)抗中性粒細(xì)胞抗體。這些抗體的檢測(cè)方法包括ELISA、流式細(xì)胞術(shù)和免疫熒光技術(shù)等。免疫缺陷篩查對(duì)原發(fā)性或繼發(fā)性免疫功能低下的評(píng)估至關(guān)重要。常規(guī)檢查包括免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）定量、T細(xì)胞亞群分析（CD4+/CD8+比值）、B細(xì)胞計(jì)數(shù)、NK細(xì)胞活性和補(bǔ)體水平等。重癥感染患者或疑似免疫缺陷者應(yīng)進(jìn)行全面免疫功能評(píng)估，以明確病因并指導(dǎo)治療。血清鐵/鐵蛋白缺鐵性貧血正常值鐵過(guò)載鐵代謝檢查是貧血診斷和鐵過(guò)載評(píng)估的關(guān)鍵。常用指標(biāo)包括血清鐵（反映循環(huán)鐵）、總鐵結(jié)合力TIBC（反映轉(zhuǎn)鐵蛋白水平）、轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度（血清鐵/TIBC×100%）和鐵蛋白（反映鐵儲(chǔ)存）。這些指標(biāo)幫助鑒別缺鐵性貧血、慢性病貧血和鐵過(guò)載性疾病。缺鐵性貧血特征是血清鐵和鐵蛋白降低，TIBC增高，轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度＜16%；慢性病貧血表現(xiàn)為血清鐵和TIBC均降低，鐵蛋白正?；蛟龈?；原發(fā)性血色病則是鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度顯著增高。需注意，鐵蛋白是急性期反應(yīng)蛋白，感染和炎癥狀態(tài)下會(huì)升高，影響對(duì)鐵狀態(tài)的判斷?？扇苄赞D(zhuǎn)鐵蛋白受體（sTfR）不受炎癥影響，是區(qū)分缺鐵性貧血和慢性病貧血的有用指標(biāo)。維生素B12與葉酸維生素B12正常范圍200-900pg/mL，參與DNA合成和神經(jīng)系統(tǒng)功能維持。缺乏可導(dǎo)致巨幼紅細(xì)胞性貧血和神經(jīng)系統(tǒng)損害葉酸正常范圍3-15ng/mL，是DNA和RNA合成必需物質(zhì)。缺乏可導(dǎo)致巨幼紅細(xì)胞性貧血，但不伴神經(jīng)系統(tǒng)癥狀甲基丙二酸維生素B12功能缺乏的敏感指標(biāo)，可在血清B12尚正常時(shí)就有異常，有助于早期診斷同型半胱氨酸B12和葉酸缺乏均可導(dǎo)致升高，輔助評(píng)估功能性缺乏維生素B12和葉酸缺乏是巨幼細(xì)胞性貧血的主要原因。臨床表現(xiàn)為大細(xì)胞性貧血（MCV＞100fl），外周血中可見(jiàn)巨大型紅細(xì)胞和過(guò)分葉中性粒細(xì)胞。維生素B12缺乏還可引起亞急性聯(lián)合變性等神經(jīng)系統(tǒng)損害，而單純?nèi)~酸缺乏不會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)癥狀。維生素B12和葉酸檢測(cè)主要采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法，具有高靈敏度和特異性。對(duì)于診斷界值附近的結(jié)果，可進(jìn)一步檢測(cè)甲基丙二酸和同型半胱氨酸，評(píng)估功能性缺乏。維生素B12缺乏的常見(jiàn)原因包括惡性貧血（自身免疫性胃壁細(xì)胞抗體）、胃切除術(shù)后吸收不良和嚴(yán)格素食；葉酸缺乏則多由飲食攝入不足、吸收障礙或藥物干擾所致。溶血相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查直接抗人球蛋白試驗(yàn)（DAT）又稱直接Coombs試驗(yàn)，檢測(cè)紅細(xì)胞表面是否有自身抗體或補(bǔ)體成分結(jié)合。陽(yáng)性提示自身免疫性溶血性貧血（AIHA）。溫暖型AIHA主要是IgG型抗體，僅DAT陽(yáng)性；冷凝集素病則是IgM型抗體，通常DAT和IAT均陽(yáng)性。單特異性試劑可區(qū)分是IgG還是補(bǔ)體介導(dǎo)。溶血標(biāo)志物血紅蛋白尿：游離血紅蛋白從腎臟排出血紅蛋白血癥：游離血紅蛋白超過(guò)結(jié)合能力高膽紅素血癥：間接膽紅素升高為主乳酸脫氫酶（LDH）升高：反映紅細(xì)胞破壞網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)增加：骨髓代償性增生結(jié)合珠蛋白減少：與游離血紅蛋白結(jié)合溶血性疾病實(shí)驗(yàn)室檢查的重點(diǎn)是確認(rèn)溶血發(fā)生并明確病因。除上述標(biāo)志物外，應(yīng)檢查紅細(xì)胞形態(tài)、血紅蛋白電泳（篩查血紅蛋白?。?、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶活性（G6PD缺乏）等。紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)如糖水試驗(yàn)、酸溶血試驗(yàn)有助于診斷陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）和遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。PNH診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD55和CD59表達(dá)。這些蛋白通過(guò)糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定于細(xì)胞膜，PNH患者因PIGA基因突變導(dǎo)致GPI錨定蛋白缺失。此外，PNH克隆大小和分布對(duì)疾病分型和治療選擇具有重要意義。感染相關(guān)實(shí)驗(yàn)室篩查病原體篩查方法高危人群篩查頻率乙型肝炎病毒(HBV)HBsAg,HBsAb,HBcAb血液透析,多次輸血初診和治療前丙型肝炎病毒(HCV)抗HCV抗體,HCVRNA多次輸血,注射吸毒初診和治療前人類免疫缺陷病毒(HIV)抗HIV抗體,p24抗原高危性行為,輸血史初診和治療前梅毒螺旋體RPR/VDRL,TPPA/FTA-ABS多性伴,HIV感染者初診和治療前巨細(xì)胞病毒(CMV)抗CMV抗體(IgM,IgG)移植受者,免疫抑制移植前和隨訪血源性感染篩查對(duì)血液病患者至關(guān)重要，尤其是需要化療、輸血或移植的患者。乙肝篩查應(yīng)包括HBsAg、抗HBs抗體和抗HBc抗體；丙肝篩查包括抗HCV抗體，陽(yáng)性者需進(jìn)一步檢測(cè)HCVRNA；HIV篩查采用第四代抗原-抗體聯(lián)合檢測(cè)，陽(yáng)性需進(jìn)行確證試驗(yàn)。對(duì)于接受免疫抑制治療的患者，HBV再激活是嚴(yán)重威脅，乙肝表面抗原陽(yáng)性或核心抗體陽(yáng)性患者均需預(yù)防性抗病毒治療。此外，定期CMV病毒載量監(jiān)測(cè)對(duì)造血干細(xì)胞移植和強(qiáng)烈免疫抑制患者也很重要。血液科患者感染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)作為常規(guī)醫(yī)療的組成部分，并根據(jù)患者風(fēng)險(xiǎn)因素制定個(gè)體化篩查方案。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理內(nèi)部質(zhì)量控制通過(guò)分析已知值的質(zhì)控品監(jiān)控檢測(cè)過(guò)程精密度外部質(zhì)量評(píng)價(jià)參與區(qū)域或國(guó)家質(zhì)評(píng)計(jì)劃，評(píng)估檢測(cè)準(zhǔn)確度室內(nèi)質(zhì)量評(píng)估定期復(fù)查和重復(fù)分析確保結(jié)果可靠性3持續(xù)改進(jìn)分析質(zhì)量指標(biāo)，實(shí)施改進(jìn)措施內(nèi)部質(zhì)量控制（IQC）是日常實(shí)驗(yàn)室工作的核心，包括每批檢測(cè)同時(shí)分析質(zhì)控品，繪制質(zhì)控圖并應(yīng)用Westgard多規(guī)則判斷檢測(cè)過(guò)程是否穩(wěn)定。當(dāng)質(zhì)控超出可接受范圍時(shí)，應(yīng)分析原因并采取糾正措施。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立完整的質(zhì)控記錄，保證檢測(cè)結(jié)果的可追溯性。外部質(zhì)量評(píng)價(jià)（EQA）通過(guò)參與第三方組織的質(zhì)評(píng)計(jì)劃，評(píng)估實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果與同行的一致性。中國(guó)臨床檢驗(yàn)中心和衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心都提供全國(guó)性EQA項(xiàng)目。積極參與EQA是實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)認(rèn)證的必要條件，也是發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)性偏差的重要手段。此外，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采用室內(nèi)質(zhì)量評(píng)估手段，如平行檢測(cè)、樣本復(fù)檢和專家復(fù)核等，進(jìn)一步保證結(jié)果準(zhǔn)確性。設(shè)備校準(zhǔn)與維護(hù)日常維護(hù)開(kāi)機(jī)前后清洗程序、試劑更換、廢液處理、表面清潔周維護(hù)深度清洗程序、探針清潔、廢液系統(tǒng)消毒月維護(hù)光路系統(tǒng)檢查、氣壓系統(tǒng)檢查、背景計(jì)數(shù)檢測(cè)季度維護(hù)定期校準(zhǔn)、更換關(guān)鍵部件、全面功能檢測(cè)年度維護(hù)工程師全面檢修、主要部件更換、性能驗(yàn)證血液分析儀是血液科實(shí)驗(yàn)室的核心設(shè)備，主流品牌包括希森美康、貝克曼庫(kù)爾特、西門子和雅培等。校準(zhǔn)是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的基礎(chǔ)，通常使用多水平校準(zhǔn)品進(jìn)行，覆蓋臨床相關(guān)范圍。校準(zhǔn)頻率依據(jù)廠家建議和實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控情況確定，一般在試劑批號(hào)變更、重要部件更換和質(zhì)控偏移時(shí)進(jìn)行。完善的設(shè)備維護(hù)計(jì)劃對(duì)保證儀器性能和延長(zhǎng)使用壽命至關(guān)重要。日常維護(hù)主要由操作人員執(zhí)行，包括常規(guī)清洗、試劑更換和基本功能檢查；定期維護(hù)則需技術(shù)人員或工程師參與，包括深度清洗、部件檢查和更換等。所有維護(hù)活動(dòng)應(yīng)有詳細(xì)記錄，建立設(shè)備檔案，確保維護(hù)及時(shí)到位。設(shè)備故障處理應(yīng)有明確流程，包括應(yīng)急預(yù)案和替代方案，確保檢驗(yàn)工作不受影響。檢測(cè)結(jié)果解釋要點(diǎn)結(jié)果與參考區(qū)間比較參考區(qū)間反映健康人群95%的分布范圍，并非診斷界值。臨床意義需結(jié)合變化幅度、變化趨勢(shì)和患者具體情況綜合判斷。輕微超出參考區(qū)間可能仍屬于生理變異。干擾因素識(shí)別溶血、黃疸和脂血是常見(jiàn)干擾因素，分別影響紅細(xì)胞相關(guān)、膽紅素相關(guān)和光散射測(cè)定項(xiàng)目。此外，藥物干擾、標(biāo)本采集和處理不當(dāng)也可導(dǎo)致假性結(jié)果。識(shí)別這些因素有助于避免誤判。特殊人群參考值應(yīng)用兒童、孕婦和老年人應(yīng)使用相應(yīng)的特殊參考區(qū)間。例如，兒童白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞比例高于成人，新生兒血紅蛋白和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)高于成人，老年人ESR通常高于年輕人。檢測(cè)結(jié)果解釋是連接實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)與臨床決策的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。單一異常結(jié)果應(yīng)謹(jǐn)慎解讀，必要時(shí)重復(fù)檢測(cè)確認(rèn)。多指標(biāo)聯(lián)合分析通常比單一指標(biāo)更有診斷價(jià)值，如貧血診斷需結(jié)合血紅蛋白、紅細(xì)胞指數(shù)和網(wǎng)織紅細(xì)胞等多項(xiàng)指標(biāo)。臨床信息在結(jié)果解釋中不可或缺，包括患者癥狀、體征、用藥情況和既往史等。例如，相同程度的貧血，在慢性腎病患者、活動(dòng)性出血患者和妊娠期女性中的臨床意義完全不同。因此，實(shí)驗(yàn)室醫(yī)師和臨床醫(yī)師的有效溝通對(duì)準(zhǔn)確診斷至關(guān)重要。對(duì)于復(fù)雜或不典型的結(jié)果，多學(xué)科討論往往能提供更全面的解釋和建議。特殊人群血液學(xué)檢查考慮兒童特點(diǎn)新生兒紅細(xì)胞數(shù)量高，但生后逐漸下降生理性貧血在出生后2-3個(gè)月達(dá)峰值白細(xì)胞總數(shù)和淋巴細(xì)胞比例高于成人凝血功能在嬰兒期相對(duì)不成熟標(biāo)本量要求應(yīng)盡可能減少，微量技術(shù)優(yōu)先孕婦特點(diǎn)生理性血容量增加導(dǎo)致血紅蛋白相對(duì)降低白細(xì)胞計(jì)數(shù)生理性升高，可達(dá)12×10?/L血小板在晚期妊娠可略有下降凝血因子如纖維蛋白原升高，存在高凝狀態(tài)鐵需求增加，易出現(xiàn)缺鐵性貧血老年人特點(diǎn)造血干細(xì)胞儲(chǔ)備減少，對(duì)應(yīng)激反應(yīng)減弱貧血發(fā)生率增高，多為多因素所致ESR隨年齡增加而升高免疫功能減退，感染時(shí)反應(yīng)可不典型慢性病和藥物因素對(duì)血液學(xué)影響增加特殊人群血液學(xué)參考區(qū)間應(yīng)有針對(duì)性。兒童參考值應(yīng)按年齡分層，尤其是新生兒期變化最為明顯。孕婦各孕期有不同的參考區(qū)間，孕晚期血紅蛋白＜110g/L才考慮貧血。老年人則需考慮生理老化和共病影響，輕度貧血或炎癥指標(biāo)升高可能不需要過(guò)度干預(yù)。特殊人群的預(yù)后判斷也需調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)。兒童白血病總體預(yù)后優(yōu)于成人；妊娠期血液病需平衡母胎風(fēng)險(xiǎn)，治療選擇更為謹(jǐn)慎；老年血液病患者則需綜合考慮功能狀態(tài)、共病和預(yù)期壽命，治療目標(biāo)可能更注重生活質(zhì)量而非完全緩解。個(gè)體化的檢測(cè)方案和結(jié)果解讀對(duì)這些特殊人群尤為重要。血液實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)差錯(cuò)分析采集前差錯(cuò)分析中差錯(cuò)分析后差錯(cuò)血液實(shí)驗(yàn)室差錯(cuò)主要發(fā)生在檢驗(yàn)前階段，包括患者準(zhǔn)備不足、標(biāo)本標(biāo)識(shí)錯(cuò)誤、采集管選擇不當(dāng)、采集技術(shù)不規(guī)范和標(biāo)本保存運(yùn)輸不當(dāng)?shù)?。常?jiàn)問(wèn)題如溶血（劇烈搖動(dòng)、抽吸過(guò)快或針頭過(guò)細(xì)）、凝血（混勻不足或抗凝劑比例不當(dāng)）和稀釋（靜脈注射部位附近采血）等直接影響結(jié)果準(zhǔn)確性。分析階段差錯(cuò)包括儀器故障、試劑問(wèn)題和操作失誤等。分析后差錯(cuò)則與結(jié)果錄入、報(bào)告發(fā)放和解讀有關(guān)。為減少差錯(cuò)，應(yīng)建立全過(guò)程質(zhì)量管理系統(tǒng)，包括標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP）、人員培訓(xùn)、定期考核和持續(xù)改進(jìn)機(jī)制。特別是對(duì)于危急值管理，應(yīng)建立快速報(bào)告和處理流程，確保臨床及時(shí)獲得重要信息。不良事件發(fā)生后應(yīng)及時(shí)分析原因，進(jìn)行系統(tǒng)性改進(jìn)，避免類似問(wèn)題再次發(fā)生。新技術(shù)進(jìn)展新一代測(cè)序技術(shù)（NGS）已成為血液病診斷的重要工具，能夠同時(shí)檢測(cè)數(shù)百個(gè)與血液病相關(guān)的基因變異。全外顯子組測(cè)序和靶向基因panel在白血病、淋巴瘤和骨髓增生性疾病的精準(zhǔn)分型中發(fā)揮關(guān)鍵作用。單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)進(jìn)一步揭示了腫瘤異質(zhì)性和克隆演化過(guò)程，為個(gè)體化治療提供依據(jù)。液體活檢技術(shù)可通過(guò)檢測(cè)循環(huán)腫瘤DNA實(shí)現(xiàn)無(wú)創(chuàng)監(jiān)測(cè)。人工智能在血液學(xué)形態(tài)學(xué)中的應(yīng)用已從研究階段走向臨床實(shí)踐?；谏疃葘W(xué)習(xí)的圖像識(shí)別系統(tǒng)能夠自動(dòng)分析外周血和骨髓涂片，識(shí)別各類血細(xì)胞并標(biāo)記異常