1.2.1微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用課件-高二下學期生物人教版選擇性必修3

第1章發(fā)酵工程第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)(第一課時)1.什么是培養(yǎng)基?如何配制?2.什么是無菌技術(shù)?3.怎樣進行酵母菌的純培養(yǎng)?

從社會中來向經(jīng)過殺菌處理的牛奶中添加對人體有益的乳酸菌，再經(jīng)過發(fā)酵就可以制成酸奶，

在家里自制酸奶雖然方便，但是食用自制

酸奶導致腸胃不適的事件屢見不鮮，主要

原因是在制作過程中有雜菌混入。討

論

：什么是微生物?實驗室培養(yǎng)微生物有什么要求呢?怎樣才能保證無處不在的雜菌不混入發(fā)酵物中呢?

從社會中來實驗室培養(yǎng)微生物關(guān)鍵：(1)提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件(3)并將需要的微生物分離出來(2)確保其他微生

物無法混入微生物的

純培養(yǎng)一

.培養(yǎng)基的配制2.培養(yǎng)基(

1

)

概

念

：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)

的不同需求，配制出供其

生長繁殖

的營養(yǎng)基質(zhì)。(

2

)

作

用

：注意：用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或_

積累其代謝物

__o病毒為非細胞結(jié)構(gòu)生物只能在活細胞中營寄生生

活，目前不能利用人

工培養(yǎng)基來培養(yǎng)。培養(yǎng)皿

培養(yǎng)基不含凝固劑、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基

常用于工業(yè)生產(chǎn)(加凝固劑，如_

瓊脂)

瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固固體培養(yǎng)基

微生物的分離與鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種含有凝固劑、呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基注意：①凝固劑(

如

瓊

脂

),

不能為微生物提供能量和碳源。②微生物在固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)

部生

長

,可以形成肉眼可見的菌落。固體培養(yǎng)基

菌落：肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體2.培養(yǎng)基(

3

)

種

類

：①物理性質(zhì)X38Y9液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基

含一般微生物生長繁殖所需要的基本營養(yǎng)物質(zhì)選擇培養(yǎng)基

用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出

來。

(主要考慮某些微生物的特殊營養(yǎng)需求或它們對某

些化學物質(zhì)具有抗性)鑒別培養(yǎng)基

用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基。

(在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中

加入某種特殊的化學物質(zhì)，這種物質(zhì)會與某種微生物的

代謝物發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征性變化)2.培養(yǎng)基②功能(4)培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基的配方不同，但一般都含有水、無機鹽、碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)。(1)碳源①概念：提供碳元素的物質(zhì)無機碳源

CO?

等

自養(yǎng)型微生物②種類：有機碳源

糖類、脂肪酸、石油等

異養(yǎng)型微生物③功能：構(gòu)成生物體細胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物；有機碳源也是異養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)。一般情況下，不添加氮源培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)固氮微生物③功能：合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝物等

P10

旁欄思考題注意：含有C、H、O、N

的有機物可作為異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、

能

源。①概念：提供氮元素的物質(zhì)無機氮源

N?

、

NH?

、

銨鹽、硝酸鹽等

②種類有機氮源

牛肉膏、蛋白胨、尿素等牛肉膏和蛋白胨來源于動物

含有糖、維生素和有機氮等

營養(yǎng)物質(zhì)。(2)氮源例

如

：1.培養(yǎng)乳酸桿菌需要添加維生素

；2.培養(yǎng)霉菌時需將PH

調(diào)

至酸性

，培養(yǎng)細菌時

將PH

調(diào)至中性或弱堿性；3.培養(yǎng)厭氧微生物時需要提供無

氧條件。除上述幾種主要營養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)

以及O?的需求。生長因子、氨基酸、維生素、堿基等微生物碳源氮源能源藍細菌CO?NH?+、NO?等光能硝化細菌CO?NH?NH?

的氧化根瘤菌糖類等有機物N?有機物大腸桿菌，糖類蛋白質(zhì)等有機物

養(yǎng)型微住物所需的碳源來首尤機碳源蛋白質(zhì)等有機物異養(yǎng)型微生物所需的碳源來自有

機

碳源無機氮源不但能給自養(yǎng)型微生物提供氮源

，也能作為

能源物質(zhì)

I幾種微生物的營養(yǎng)和能量來源(1)說出該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型，及判斷依據(jù)。異養(yǎng)型微生物，該微生物的碳源和氮源是有機物，不能自己合成有機物。(2)

培養(yǎng)微生物時，培養(yǎng)基中是否必須有碳源和氮源?不一定，例如培養(yǎng)自養(yǎng)微生物時，

一般不需要添加碳源，微生物可以利

用空氣中的二氧化碳；培養(yǎng)固氮微生物時，

一般不需要添加氮源，微生

物可以利用空氣中的氮氣。材料牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水用量5g10g5g20g定容至1000

mL此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物。圓褐固氮菌雖可以固氮，但其同化作用類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中必須提供有機碳源，所以該培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)圓褐固氮菌。編號①②③④⑤成分(NH?)?SO?KH?PO?FeSO?CaCl?H?O含量/g0.44.00.50.5100

mL下表是某微生物培養(yǎng)基的成分，請分析該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)哪種微生物?若除去①,此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)圓褐固氮菌嗎?A.

該培養(yǎng)基中含有碳源、氮源、水和無機鹽四類物質(zhì)B.

該培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)硝化細菌，不能用來培養(yǎng)酵母菌C.

該培養(yǎng)基在培養(yǎng)硝化細菌時，需要密封D.

要用該培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母菌，需要加入葡萄糖作為氮源成分NH?NO?KH?PO?CaCl?FeSO?維生素蒸餾水含量0.5g3.0g0.5g0.5g少許定容至1000mL應(yīng)用1.

(2024

·云南昆明高二期末)下表是培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，下列說法正確的是應(yīng)用2.

(2024

·

陜西西安高二期末)下列有關(guān)微生物培養(yǎng)基的配制表述錯誤的是A.培養(yǎng)硝化細菌的培養(yǎng)基中添加的銨鹽可作為能量來源B.尿素固體培養(yǎng)基中的K?HPO?能用于維持培養(yǎng)基的pHC.

培養(yǎng)光能自養(yǎng)型藍細菌的培養(yǎng)基中不需提供有機碳源D.馬鈴薯瓊脂固體培養(yǎng)基中的瓊脂能作為酵母菌的碳源二

.無菌技術(shù)1.無菌技術(shù)：獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染圍繞著如何

避免雜菌污染展開。對操作的空間、操作者的衣著和手用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基無菌技術(shù)除用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其

他外來微生物污染外，還有什么作用?無菌技術(shù)能有效避免操作者被微生物感染。消毒滅菌類型煮沸消毒操作方法適用范圍100

℃煮沸5~6

min家庭餐具等生活用品巴氏消毒62~65℃消毒30

min或72~76℃處理15s或80~85℃處理10~15s不耐高溫的液體，如牛奶化學藥物用體積分數(shù)為70%-75%的酒精、氯

氣、苯酚或煤酚皂溶液等處理皮膚、傷口消毒和空氣、

水消毒等紫外線紫外線照射30

min接種室、接種箱、超凈工作臺二

.無菌技術(shù)

①

消毒1.概

念

：使

用較為溫和的物理、化學或生物等方法

殺死物體表

面或內(nèi)

部一

部分微生物。2.常用方法：殺死牛奶中絕大多數(shù)微生物，

并基本不破壞牛奶營養(yǎng)成分。②

滅菌1.概念

：是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

芽孢和孢子的區(qū)別：①

芽

孢

是抗逆性強的休眠體。②孢子是繁殖體(生殖細胞)。①濕熱滅菌

利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進行滅菌的方法。實驗室常用高壓蒸汽滅菌鍋，在壓力100kPa

、溫度121℃條件下，維持15-30

min對象：培養(yǎng)基●

高壓蒸汽滅菌：(效果最好)目的對

象

：耐高溫，需保持干燥的物品玻璃器皿(

如培養(yǎng)皿、吸管)金屬器具③灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具，

直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌(見下

圖

)

。此外在接種過程

中

，試管口、瓶口等容易被污染的部位，也可以

通過火焰灼燒來

滅

菌

。②干熱滅菌：干熱滅菌箱內(nèi)，在160-170℃

的熱空氣中維持下1-2

h達到滅菌3.將試管口通過二

.無

菌

技

術(shù)常用酒精擦拭雙手是日常防護致病菌感染的措施之一，這是消毒還是滅菌?體積分數(shù)為70%和95%的酒精，哪種效果更好?為什么?酒精擦拭屬于消毒，酒精消毒時，70%的酒精殺菌效果最好。濃度過高，使菌體表面

蛋白質(zhì)凝固成一層保護膜，酒精分子不能滲入其中；濃度過低，殺菌能力減弱。做好消毒和滅菌工作后，要注意避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品接