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廣東省湛江一中下學(xué)期2025屆高考全國統(tǒng)考預(yù)測(cè)密卷生物試卷注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)、考場(chǎng)號(hào)和座位號(hào)填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目選項(xiàng)的答案信息點(diǎn)涂黑;如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動(dòng),先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y(jié)束后,請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下列有關(guān)酶和ATP的敘述,正確的是()A.酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的并能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)的物質(zhì)B.長時(shí)間的高溫、強(qiáng)堿等條件會(huì)導(dǎo)致蛋白酶的肽鍵斷裂使其失活C.線粒體合成的ATP可在細(xì)胞核中發(fā)揮作用D.細(xì)胞質(zhì)中含有DNA聚合酶,該酶是一種調(diào)節(jié)DNA生理活動(dòng)的信息分子2.關(guān)于體液免疫的下列敘述正確的是()A.成熟B淋巴細(xì)胞不能合成特定的抗體分子B.體液免疫不需要輔助性T淋巴細(xì)胞的參與C.并非所有抗體分子都是蛋白質(zhì)D.一種抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)只能與一種抗原匹配3.如圖是一對(duì)青年夫婦關(guān)于苯丙酮尿癥(致病基因?yàn)閍)和色盲(致病基因?yàn)閎)的遺傳分析圖譜,甲~庚表示不同的細(xì)胞,已細(xì)胞發(fā)育形成的個(gè)體患兩種病。下列分析正確的是A.在正常細(xì)胞分裂過程中,乙和戊的基因組成分別是AXB和aYB.該對(duì)夫婦若再生一個(gè)孩子,只患一種病的概率為3/8C.圖示過程中不會(huì)出現(xiàn)DNA和染色體同時(shí)加倍的情況D.正常情況下,庚形成的個(gè)體患兩種病的概率為1/164.科學(xué)家發(fā)現(xiàn)生物體中的多種物質(zhì)在實(shí)施其功能時(shí),總是具有與其功能相適應(yīng)的結(jié)構(gòu)下列有關(guān)敘述正確的是()A.真核細(xì)胞中具有維持細(xì)胞形態(tài),保持細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性的細(xì)胞骨架,該骨架由蛋白質(zhì)和纖維素組成B.沃森和克里克通過觀察威爾金斯等科學(xué)家提供的DNA衍射圖譜,推算出了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)C.DNA分子結(jié)構(gòu)的基本骨架是DNA分子外側(cè)交替排列的核糖和磷酸D.細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性,膜上的磷脂雙分子層和貫穿于其中的蛋白質(zhì)構(gòu)成了細(xì)胞膜的基本骨架5.關(guān)于哺乳動(dòng)物體內(nèi)脂質(zhì)與糖類的敘述,錯(cuò)誤的是A.膽固醇在動(dòng)物體內(nèi)可轉(zhuǎn)化成性激素B.脂質(zhì)和糖原都是由C、H、O構(gòu)成的C.脂肪與糖原都是細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存能量的物質(zhì)D.膽固醇是細(xì)胞膜的組分,也參與血脂運(yùn)輸6.下列關(guān)于遺傳信息表達(dá)的敘述,錯(cuò)誤的是()A.核糖核酸和蛋白質(zhì)都屬于基因表達(dá)產(chǎn)物B.翻譯過程中能與mRNA發(fā)生堿基配對(duì)的分子不含氫鍵C.當(dāng)核糖體到達(dá)mRNA的終止密碼子時(shí),多肽合成就結(jié)束D.RNA聚合酶發(fā)揮作用時(shí),首先與DNA的某一啟動(dòng)部位結(jié)合7.下列實(shí)驗(yàn)操作能達(dá)到預(yù)期結(jié)果的是()A.在單側(cè)光照射下,金絲雀虉草胚芽鞘向光彎曲生長,去尖端的胚芽鞘不生長也不彎曲,說明生長素在尖端發(fā)生了橫向運(yùn)輸B.在鑒定還原糖時(shí),為了避免樣液本身顏色對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾,應(yīng)選取接近白色或無色的甘蔗提取液C.調(diào)查土壤小動(dòng)物類群的豐富度,用取樣器取樣后,個(gè)體較大的可用記名計(jì)算法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)D.使用光學(xué)顯微鏡的高倍鏡可以觀察到新鮮菠菜葉肉細(xì)胞中葉綠體的內(nèi)部結(jié)構(gòu)8.(10分)某生物興趣小組探究秸稈焚燒對(duì)土壤小動(dòng)物種群數(shù)量的影響,選擇山東濟(jì)寧玉米樣地和大豆樣地進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果如下表所示(表中數(shù)據(jù)為某種土壤小動(dòng)物的數(shù)量)。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()月份火燒后的玉米樣地未火燒后的玉米樣地火燒后的大豆樣地未火燒后的大豆樣地0518918118018606162180221231071522371832730828947226345009263378310396103004113914001126130428730912127285228340A.7~8月份土壤小動(dòng)物的年齡組成為增長型B.秸稈焚燒對(duì)玉米樣地的影響高于大豆樣地C.秸稈焚燒會(huì)提前土壤小動(dòng)物數(shù)量的高峰期D.焚燒秸稈會(huì)改變農(nóng)田群落演替的速度和方向二、非選擇題9.(10分)某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本,進(jìn)行分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下:(1)分解尿素的微生物含有_____,因此,配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源,尿素會(huì)被分解成________使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。(2)配制培養(yǎng)基時(shí),需添加瓊脂,瓊脂起_____作用;培養(yǎng)基中添加_____作為指示劑,可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。(3)該小組在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是__________;然后將1mL瘤胃樣液稀釋1111倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入1.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為49、47和45。據(jù)此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為_____,理論上,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往_______________(低、等、高)于接種的實(shí)際活菌數(shù)目。10.(14分)納豆和腐乳都是豆類發(fā)酵品,用納豆桿菌發(fā)酵大豆制作納豆的流程原理與腐乳的制作相似。納豆桿菌能分泌納豆激酶等。回答下列問題(1)納豆制作的原理是___________________________。(2)納豆激酶能夠水解血栓中水不溶性的纖維蛋白,所以具有溶解血栓的作用。納豆桿菌的篩選和分離常用到由磷酸鹽緩沖液、纖維蛋白和瓊脂配制而成的乳白色的纖維蛋白培養(yǎng)基。從培養(yǎng)基營養(yǎng)組成的角度來看,其中的纖維蛋白的作用是__________________________。若培養(yǎng)基上出現(xiàn)_________________________,說明含有納豆桿菌。(3)提純納豆激酶可用于制備藥物。為提取純化納豆激酶,可進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn):①接種具有高纖溶活性的菌落到液體發(fā)酵培養(yǎng)基。37℃,搖床振蕩,發(fā)酵3天。②收集發(fā)酵液,離心,分層,取_____________作為提取納豆激酶的材料。③透析法分離:將上述離心所得樣品裝人透析袋,置于25mmo/L磷酸鹽緩沖液中透析,以便達(dá)到__________________________的目的。④凝膠色譜純化:將透析液進(jìn)行柱層析,用____________進(jìn)行洗脫,試管連續(xù)收集。⑤為了確認(rèn)試管收集液中是否含有納豆激酶,還要__________________________。11.(14分)患者男,48歲,發(fā)熱伴寒戰(zhàn),入院進(jìn)行血液B超及CT檢查,疑似肝膿腫。其中細(xì)菌性肝膿腫的主要病原菌是:大腸埃希菌、克雷伯菌、鏈球菌、金黃色葡菊球菌、厭氧菌等。近年來,克雷伯桿菌感染導(dǎo)致的細(xì)菌性肝膿腫患者比例有增高的趨勢(shì),為確定致病原因需要進(jìn)行細(xì)菌的培養(yǎng)及藥敏實(shí)驗(yàn)檢查病原體種類。請(qǐng)回答下列問題:(1)細(xì)菌培養(yǎng)一般在30~37℃,pH調(diào)至____________,進(jìn)行無菌操作。對(duì)接種環(huán)等金屬用具,直接在灑精燈火焰的____________灼燒,可以迅速徹底地滅菌。(2)微生物接種的方法很多,最常用的方法有____________法。雖然這些技術(shù)的操作方法各不相同,但是,其核心都是防止雜菌的污染,保證____________________________________。(3)區(qū)分細(xì)菌種類可以通過多種途徑,如生化試驗(yàn)IMVC試驗(yàn)可用于腸道桿菌鑒定,其中大腸埃希菌、克雷伯菌鑒定結(jié)果分別是++--.--++;還可以通過菌落特征,如菌落的____________等的不同來區(qū)別。常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是_____________,測(cè)定細(xì)菌數(shù)量的方法還有____________法,無論哪種方法得到的細(xì)菌數(shù)量都是____________值。12.晝夜溫差是由白天溫度的最高值和夜間溫度的最低值之差決定的。為研究正、負(fù)晝夜溫差對(duì)果實(shí)膨大期番茄光合作用的影響,在人工氣候室內(nèi)設(shè)置5個(gè)晝夜溫差水平,即-78℃(77℃/34℃)、-5℃、73℃/37℃)、6℃(85℃/85)、+5(37℃/73℃)、+78℃(34℃/77℃),結(jié)果如下表所示(氣孔導(dǎo)度表示氣孔張開的程度,各數(shù)據(jù)的單位不作要求)。請(qǐng)回答下列問題:項(xiàng)目晝夜溫差處理(℃)-78-56+5+78凈光合速率7.868.383.454.345.77葉片氣孔導(dǎo)度6.756.776.866.846.88葉綠素a含量7.737.887.878.868.67葉綠素b含量6.486.546.736.876.88(7)溫度主要通過影響________來影響植物代謝活動(dòng)。葉片氣孔導(dǎo)度的大小、葉綠素含量分別通過直接影響________、________來影響番茄的光合速率。(8)實(shí)驗(yàn)以零晝夜溫差為對(duì)照,在日平均溫度________(填“相等”或“不等”)的情況下設(shè)置晝夜溫差。由上表分析,若要進(jìn)一步確定最有利于有機(jī)物積累的晝夜溫差,接下來的操作應(yīng)該是________。(3)與晝夜溫差為+5℃條件下的凈光合速率相比,晝夜溫差為+78℃條件下的凈光合速率較低,原因是____________________________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】
1、ATP是生物體的直接能源物質(zhì),ATP在細(xì)胞內(nèi)數(shù)量并不很多,可以和ADP迅速轉(zhuǎn)化,ATP中的能量可用于各種生命活動(dòng),可以轉(zhuǎn)變?yōu)楣饽堋⒒瘜W(xué)能等。2、酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化作用的有機(jī)物,絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),極少數(shù)酶是RNA。酶的特性:高效性、專一性和作用條件溫和的特性。酶促反應(yīng)的原理:酶能降低化學(xué)反應(yīng)的活化能。【詳解】A、大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng),少數(shù)酶是RNA,不能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng),A錯(cuò)誤;B、長時(shí)間的高溫、強(qiáng)堿等條件會(huì)導(dǎo)致蛋白酶的空間結(jié)構(gòu)改變而失活,B錯(cuò)誤;C、線粒體合成的ATP可用于多種生命活動(dòng),包括在細(xì)胞核中發(fā)揮作用,C正確;D、DNA聚合酶具有催化作用而不是調(diào)節(jié)作用,D錯(cuò)誤。故選C?!军c(diǎn)睛】解答本題需掌握住酶的本質(zhì)和作用及特性、ATP的利用等相關(guān)知識(shí)。2、D【解析】
免疫是指身體對(duì)抗病原體引起的疾病的能力,特異性免疫包含細(xì)胞免疫和體液免疫。細(xì)胞免疫對(duì)抗被病原體感染的細(xì)胞和癌細(xì)胞,此外也對(duì)抗移植器官的異體細(xì)胞。活化的細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞識(shí)別嵌有抗原-MHC復(fù)合體的細(xì)胞,并消滅之。體液免疫為效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生和分泌大量的抗體分子分布到血液和體液中,體液免疫的主要目標(biāo)是細(xì)胞外的病原體和毒素。這些病原體和毒素在組織和體液中自由的循環(huán)流動(dòng)時(shí),抗體與這類細(xì)胞外的病原體和毒素結(jié)合,致使病毒一類的抗原失去進(jìn)入寄主細(xì)胞的能力,使一些細(xì)菌產(chǎn)生的毒素被中和而失效,還可使一些抗原(如可溶的蛋白質(zhì))凝聚而被巨噬細(xì)胞吞噬?!驹斀狻緼、成熟B淋巴細(xì)胞合成能與特定抗原特異性結(jié)合的受體分子,也就是相對(duì)應(yīng)的抗體分子,A錯(cuò)誤;B、體液免疫需要輔助性T淋巴細(xì)胞的參與,分泌白細(xì)胞介素-2促進(jìn)致敏B淋巴細(xì)胞的增殖,B錯(cuò)誤;C、所有抗體分子都是蛋白質(zhì)(免疫球蛋白),C錯(cuò)誤;D、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性,一種抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)(受體)只能與一種抗原特異性結(jié)合,D正確。故選D。3、B【解析】
苯丙酮尿癥是常染色體顯性遺傳病,色盲是伴X隱性遺傳病,右圖是女性,其基因型為AaXBXb,左圖是男性,基因型為AaXBY,甲細(xì)胞室極體,丙是卵細(xì)胞,已細(xì)胞發(fā)育形成的個(gè)體患兩種病,說明己是個(gè)男孩,基因型為aaXbY,庚是表現(xiàn)型正常的后代。【詳解】A、在正常細(xì)胞分裂過程中,乙基因組成分別是AXB,戊不含有Y染色體,含有AXB,A錯(cuò)誤;B、該對(duì)夫婦的基因型為為AaXBXb、AaXBY,若再生一個(gè)孩子,只患一種病的概率為苯丙酮尿癥的患病概率為1/4,色盲的患病率為1/4,只患一種病的概率=苯丙酮尿癥率1/4×不患色盲的概率(1-1/4)+不患苯丙酮尿癥(1-1/4)×色盲概率1/4=3/8,B正確;C、圖示過程中存在受精作用,受精過程中精卵識(shí)別以及精子和卵細(xì)胞的融合過程中出現(xiàn)DNA和染色體同時(shí)加倍的情況,C錯(cuò)誤;D、正常情況下,庚形成的個(gè)體患病的概率為0,D錯(cuò)誤;故選B。4、B【解析】
細(xì)胞膜的基本骨架是磷脂雙分子層,氨基酸、核苷酸、葡萄糖等是以碳鏈骨架組成的小分子,因此蛋白質(zhì)、核酸、多糖是以碳鏈為骨架;細(xì)胞骨架是由蛋白纖維組成網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu),具有維持細(xì)胞形態(tài)、保持細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的有序性,進(jìn)行物質(zhì)和能量交換及信息傳遞具有重要功能?!驹斀狻緼、真核細(xì)胞內(nèi)部的蛋白纖維構(gòu)成細(xì)胞骨架,具有維持細(xì)胞形態(tài)、保持內(nèi)部結(jié)構(gòu)的有序性的功能,A錯(cuò)誤;B、沃森和克里克依據(jù)威爾金斯和富蘭克林提供的DNA衍射圖譜及有關(guān)數(shù)據(jù),推算出DNA分子呈螺旋結(jié)構(gòu),B正確;C、DNA分子結(jié)構(gòu)的基本骨架是DNA分子外側(cè)交替排列的脫氧核糖和磷酸,C錯(cuò)誤;D、細(xì)胞膜的基本骨架是磷脂雙分子層,D錯(cuò)誤。故選B?!军c(diǎn)睛】本題考查細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和DNA分子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),意在考查學(xué)生的記憶和理解能力,難度不大。5、B【解析】
糖原是動(dòng)物體的多糖,主要存在于肝臟和肌肉中,脂質(zhì)包括脂肪、磷脂和固醇。【詳解】膽固醇和性激素都是固醇的一種,在動(dòng)物體內(nèi),膽固醇是可以轉(zhuǎn)化成性激素的,A正確。脂質(zhì)的組成元素是C、H、O,有的還含有N和P,糖原只由C、H、O組成,B錯(cuò)誤。脂肪是生物體主要的儲(chǔ)能物質(zhì),糖原是動(dòng)物體的特有儲(chǔ)能物質(zhì),C正確。膽固醇是構(gòu)成動(dòng)物細(xì)胞膜的重要成分,在人體內(nèi)還參與血液中脂質(zhì)的運(yùn)輸,D正確。6、B【解析】
遺傳信息的表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過程,結(jié)合轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程分析作答?!驹斀狻緼、核糖核酸(RNA)是轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物,蛋白質(zhì)是翻譯的產(chǎn)物,兩者都屬于基因表達(dá)產(chǎn)物,A正確;
B、翻譯過程中,tRNA上的反密碼子與mRNA上的密碼子發(fā)生堿基配對(duì),tRNA上存在部分雙鏈結(jié)構(gòu),含有氫鍵,B錯(cuò)誤;
C、密碼子是mRNA上的三個(gè)相鄰堿基,當(dāng)核糖體到達(dá)mRNA的終止密碼子時(shí),多肽合成就結(jié)束,C正確;
D、RNA聚合酶發(fā)揮作用時(shí),首先與基因的啟動(dòng)子結(jié)合,D正確。
故選B?!军c(diǎn)睛】要求考生識(shí)記遺傳信息轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程、場(chǎng)所、條件及產(chǎn)物等基礎(chǔ)知識(shí),能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。7、C【解析】
閱讀題干可知本題是考查有關(guān)實(shí)驗(yàn)方法或試劑使用的相關(guān)知識(shí),先閱讀題干找出實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,根?jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?duì)相關(guān)知識(shí)進(jìn)行梳理,并根據(jù)問題提示結(jié)合基礎(chǔ)知識(shí)進(jìn)行回答?!驹斀狻緼、在單側(cè)光照射下,金絲雀藕草胚芽鞘向光彎曲生長,去尖端的胚芽鞘不生長也不彎曲,只能說明胚芽鞘的向光性與尖端有關(guān),A錯(cuò)誤;B、甘蔗含有豐富的蔗糖,蔗糖為非還原糖,不能用于還原糖的鑒定,B錯(cuò)誤;C、調(diào)查土壤小動(dòng)物的豐富度,用取樣器取樣后,對(duì)于個(gè)體較大的小動(dòng)物可用記名計(jì)算法進(jìn)行統(tǒng)計(jì),C正確;D、使用光學(xué)顯效鏡的高倍鏡不能觀察到新鮮菠菜葉肉細(xì)胞中葉綠體的內(nèi)部結(jié)構(gòu),需要用電子顯微鏡才能觀察到新鮮菠菜葉肉細(xì)胞中葉綠體的內(nèi)部結(jié)構(gòu),D錯(cuò)誤。故選C。8、C【解析】
本題結(jié)合表格數(shù)據(jù),考查土壤小動(dòng)物類群豐富度的研究。分析表格數(shù)據(jù):未火燒后的玉米樣地中,該種土壤小動(dòng)物的種群數(shù)量在8月份達(dá)到最大值,而火燒后的玉米樣地中,該種土壤小動(dòng)物的種群數(shù)量在10月份才達(dá)到最大值;同樣,未火燒后的大豆樣地中,該種土壤小動(dòng)物的種群數(shù)量在8月份達(dá)到最大值,而火燒后的大豆樣地中,該種土壤小動(dòng)物的種群數(shù)量在10月份才達(dá)到最大值。這說明秸稈焚燒會(huì)推遲土壤小動(dòng)物數(shù)量的高峰期?!驹斀狻緼、7~8月份土壤小動(dòng)物的數(shù)量急劇增加,則7~8月份年齡組成為增長型,A正確;B、火燒后玉米樣地的土壤小動(dòng)物減少率高于火燒后大豆樣地,則秸稈焚燒對(duì)玉米樣地的影響高于大豆樣地,B正確;C、由表格數(shù)據(jù)可知,秸稈焚燒會(huì)延遲土壤小動(dòng)物數(shù)量的高峰期,C錯(cuò)誤;D、焚燒秸稈屬于人類活動(dòng),會(huì)改變農(nóng)田群落演替的速度和方向,D正確。故選C。二、非選擇題9、脲酶(分解尿素的酶)氨(NH3)凝固劑酚紅檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格2.7×118低【解析】
本題主要考查微生物的培養(yǎng)、分解尿素的細(xì)菌的鑒定等知識(shí)點(diǎn)。由于細(xì)菌分解在尿素的過程中合成脲酶,脲酶將尿素分解成氨,會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng),PH升高,所以可以用檢測(cè)pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解,可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,尿素被分解后產(chǎn)生氨,PH升高,指示劑變紅。【詳解】(1)分解尿素的微生物含有脲酶(分解尿素的酶),因此,配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源,尿素會(huì)被分解成氨(NH3)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。
(2)配制培養(yǎng)基時(shí),需添加瓊脂,瓊脂起凝固劑作用;培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑,可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。(3)該小組在接種前,隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間,這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格;然后將1mL瘤胃樣液稀釋1111倍,在3個(gè)平板上用涂布法分別接入1.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為29、27和25,因此據(jù)此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的(1L=1111mL)中的活菌數(shù)=(29+27+25)/3×1111×11×1111=2.7×118。由于每個(gè)菌落可能是一個(gè)或多個(gè)活菌增殖而來,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往低于接種的實(shí)際活菌數(shù)目?!军c(diǎn)睛】接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有5類,分別是水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及生長因子。10、納豆桿菌等微生物分泌的蛋白酶能將豆類中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸充當(dāng)碳源和氮源,提供能源物質(zhì)(較大)溶解圈上清液去除/置換樣品中分子量較小的雜質(zhì)(25mmol/L)磷酸(鹽)緩沖液添加適量收集液到纖維蛋白培養(yǎng)基上(或添加適量收集液到含有血栓的溶液里)【解析】
1、腐乳的制作原理:以豆腐為原料利用毛霉等微生物分泌出各種酶,促使豆腐坯中的蛋白質(zhì)分解成營養(yǎng)價(jià)值高的氨基酸和一些風(fēng)味物質(zhì)。有些氨基酸本身就有一定的鮮味,腐乳在發(fā)酵過程中也促使豆腐坯中的淀粉轉(zhuǎn)化成酒精和有機(jī)酸,同時(shí)還有輔料中的酒及香料也參與作用,共同生成了帶有香味的酯類及其他一些風(fēng)味成分,從而構(gòu)成了腐乳所特有的風(fēng)味。腐乳在制作過程中發(fā)酵,蛋白酶和附著在菌皮上的細(xì)菌慢慢地滲入到豆腐坯的內(nèi)部,逐漸將蛋白質(zhì)分解,大約經(jīng)過三個(gè)月至半年的時(shí)間,松酥細(xì)膩的腐乳就做好了,滋味也變得質(zhì)地細(xì)膩、鮮美適口。2、培養(yǎng)基的成分包括:碳源、氮源、無機(jī)鹽和水,有的需要生長因子等。碳源分為無機(jī)碳源和有機(jī)碳源,無機(jī)碳源如二氧化碳,有機(jī)碳源如葡萄糖,碳源是構(gòu)成生物體細(xì)胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物,有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì);氮源分為無機(jī)氮源(銨鹽、硝酸鹽等)和有機(jī)氮源(尿素、牛肉膏等),合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物。3、血紅蛋白的提取和分離:(1)樣品處理:洗滌,用生理鹽水洗滌,低速離心,直至上清液中沒有黃色;(2)血紅蛋白釋放:加入蒸餾水和甲苯,細(xì)胞破碎釋放血紅蛋白;(3)分離:低速離心,分成4層,第三層紅色透明液體為血紅蛋白水溶液層,分出該層;(4)透析:放入透析袋,出去分子量較小的雜質(zhì);(5)過凝膠色譜柱收集純蛋白?!驹斀狻浚?)根據(jù)題意可知,用納豆桿菌發(fā)酵大豆制作納豆的流程原理與腐乳的制作相似,因此納豆制作的原理是:利用納豆桿菌等微生物分泌的蛋白酶能將豆類中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。(2)根據(jù)培養(yǎng)基的成分可知,纖維蛋白既含有碳元素也含有氮元素,因此可以作為碳源和氮源使用,提供能源物質(zhì),由于納豆桿菌能分泌納豆激酶,納豆激酶能夠水解水不溶性的纖維蛋白,在乳白色的固體培養(yǎng)基上如果存在納豆桿菌,則可以在培養(yǎng)基上形成較大的溶解圈。(3)納豆激酶的化學(xué)本質(zhì)屬于蛋白質(zhì),因此提純納豆激酶的方法即提純蛋白質(zhì)的方法。實(shí)驗(yàn)步驟:①接種具有高纖溶活性的菌落到液體發(fā)酵培養(yǎng)基。37℃,搖床振蕩,發(fā)酵3天。②收集發(fā)酵液,離心,分層,取上清液作為提取納豆激酶的材料。③透析法分離:將上述離心所得樣品裝人透析袋,置于25mmo/L磷酸鹽緩沖液中透析,透析的目的是去除/置換樣品中分子量較小的雜質(zhì)。④凝膠色譜純化:將透析液進(jìn)行柱層析,用25mmo/L磷酸鹽緩沖液進(jìn)行洗脫,試管連續(xù)收集。⑤為了確認(rèn)試管收集液中是否含有納豆激酶,還要添加適量收集液到纖維蛋白培養(yǎng)基上,觀察是否出現(xiàn)溶解圈?!军c(diǎn)睛】本題考查微生物的培養(yǎng)和發(fā)酵以及蛋白質(zhì)的提純的知識(shí)點(diǎn),要求學(xué)生掌握培養(yǎng)基的成分及功能,理解分離微生物的原則和方法,把握腐乳的制作原理,利用該原理解釋納豆的制作依據(jù)的原理,掌握蛋白質(zhì)的提取和分離的操作方法和過程,這是突破第(3)問的關(guān)鍵。11、中性或微堿性充分燃燒層平板劃線法和稀釋涂布平板培養(yǎng)物的純度大小、形狀、顏色稀釋涂布平板法顯微鏡直接計(jì)數(shù)估計(jì)【解析】
統(tǒng)計(jì)細(xì)菌數(shù)量的方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計(jì)數(shù),在統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí),采用稀釋涂布平板法來培養(yǎng)細(xì)菌。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的一個(gè)細(xì)菌,但菌落數(shù)往往比活菌的試劑數(shù)目低,為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。另一種方法是直接計(jì)數(shù)法,這種方法要借助顯微鏡,且統(tǒng)計(jì)的數(shù)目也包括死亡的細(xì)菌?!驹斀狻浚?)微生物生命活動(dòng)需要一定的條件,不同的微生物需要不同的培養(yǎng)溫度和pH,細(xì)菌生活的溫度一般在30~37℃,pH調(diào)至中性或微堿性,霉菌一般在25~28℃,pH調(diào)至酸性培養(yǎng)。接種時(shí),對(duì)接種環(huán)等金屬用具通常用灼燒滅菌法,具體做法是:直接在灑精燈火焰的充分燃燒層灼燒。(2)微生物接種方法很多,最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法,還包括斜面接種和穿刺接種等方法。雖然這些技術(shù)的操作方法各不相同,但是其核心都是要防止雜菌污染,保證培養(yǎng)物的純度。(3)區(qū)分細(xì)菌種類可以通過多種途徑,如通過鑒別菌落的特征或通過生化試驗(yàn)
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