第37講細胞工程-高考生物一輪復習精講課件

高考生物一輪復習精講課件2023年選修3

現(xiàn)代生物科技專題第37講

細胞工程考點一

植物的組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交考點二

動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)考點三

動物細胞融合和單克隆抗體真題再現(xiàn)教材基礎(chǔ)診斷1.

脫分化就是讓已經(jīng)分化的細胞，經(jīng)過誘導后，失去一些遺傳物質(zhì)而變成未分化細胞的過程。(

)×考點一

植物的組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交2.

每個生物細胞都具有全能性的特點，都能發(fā)育成完整生物體。(

)3.

在進行植物體細胞雜交之前，必須先利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)層。(

)4.

用脫毒苗進行繁殖，種植的作物就具備了抗病毒的能力。(

)√××5.

人工種子就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。(

)6.

單倍體育種中,染色體加倍后當年便可得到穩(wěn)定遺傳的優(yōu)良品種,這樣就極大地縮短了育種的年限。(

)√√知識梳理整合1.細胞工程的概念2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)無菌條件(1)理論基礎(chǔ)：植物細胞的全能性遺傳信息完整生物體全部遺傳信息離體營養(yǎng)、激素(2)操作流程(以胡蘿卜的組織培養(yǎng)為例)提醒：植物組織培養(yǎng)的操作要點1）植物組織培養(yǎng)的條件:離體、一定營養(yǎng)物質(zhì)、激素等。2）愈傷組織形成后,需轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)形成幼苗。3）切取胡蘿卜塊時強調(diào)切取有形成層部分,原因是這部分容易誘導形成愈傷組織;選擇離體植物器官、組織或細胞時,應(yīng)選分化程度低、全能性高的部分。4）植物組織培養(yǎng)中不同培養(yǎng)階段培養(yǎng)基含有的激素不同,因為培養(yǎng)的目的不同（生根或生芽）。5）不同細胞的全能性不同,全能性由大到小為:受精卵＞生殖細胞＞體細胞,離體細胞的全能性表達與分化程度呈負相關(guān),但生殖細胞特殊。6）脫分化過程為避光培養(yǎng);再分化需要光照，以利于葉綠素的形成。7）培養(yǎng)基的有機碳源一般是蔗糖,其作用是提供能源、調(diào)節(jié)滲透壓。(3)植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用生長素/細胞分裂素的比值作用效果比值高時促進根分化、抑制芽形成比值低時促進芽分化、抑制根形成比值適中促進愈傷組織形成提醒

①條件：離體，一定營養(yǎng)物質(zhì)，激素(生長素、細胞分裂素)等。②培養(yǎng)基狀態(tài)：固體培養(yǎng)基(需再分化生根培養(yǎng)基及生芽培養(yǎng)基)。③體內(nèi)細胞未表現(xiàn)全能性的原因：基因的表達具有選擇性。④一般先誘導生芽，再誘導生根。3.植物體細胞雜交技術(shù) (1)概念：將________的植物體細胞，在一定條件下融合成__________，并把雜種細胞培育成____________的技術(shù)。 (2)原理：體細胞雜交利用了細胞膜的________，雜種細胞培育成雜種植株利用了植物細胞的________。不同種雜種細胞新的植物體流動性全能性(3)過程(以“番茄—馬鈴薯的培育為例)(4)意義：克服不同種生物遠緣雜交__________性。的不親和提醒

①植物體細胞雜交的終點是培育出雜種植株，而不是形成雜種細胞；②原生質(zhì)體是除去細胞壁的植物細胞，原生質(zhì)層為植物細胞的細胞膜、液泡膜以及兩層膜之間的細胞質(zhì)。提醒

有關(guān)植物細胞雜交的三個易錯點①兩個不同品種的植物細胞，A、B進行雜交，錯認為兩兩融合的原生質(zhì)體只有AB類型。其實還可能有AA融合的和BB融合的，需要經(jīng)過篩選，選出AB融合的原生質(zhì)體。②錯認為植物體細胞雜交屬于有性生殖。植物體細胞雜交過程中沒有有性生殖細胞的結(jié)合，因此不屬于有性生殖，應(yīng)為無性生殖。③錯認為雜種植株的變異類型屬于基因重組。雜種植株的變異類型屬于染色體變異，其染色體數(shù)通常是兩親本細胞染色體數(shù)目之和，雜種植株屬于異源多倍體。4.植物細胞工程的實際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑無毒組織胚狀體(2)作物新品種的培育：單倍體育種、________的利用。突變體采用液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)到愈傷組織階段，得到的是愈傷組織細胞的代謝產(chǎn)物。(3)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：即利用______________技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料和生物堿等。植物組織培養(yǎng)教材深挖拓展1.

如圖是番茄馬鈴薯體細胞雜交過程示意圖,據(jù)圖分析回答相關(guān)問題:1）

①過程用到的方法是_________,去除細胞壁的原因是_______________________,②過程依據(jù)的原理是___________________。植物體細胞融合成功的標志是_________________,其與細胞內(nèi)___________（細胞器）有關(guān)。酶解法細胞壁會影響細胞融合細胞膜具有流動性形成新的細胞壁高爾基體2）

③和④過程分別是_________________的過程。該雜種植物有_____個染色體組。該雜種植株理論上_______（填“可育”或“不可育”）。③過程培養(yǎng)基用到的有機碳源一般為_______。脫分化和再分化四可育蔗糖3）

②③步驟之間還要進行雜種細胞的篩選,原因是___________________________________________。4）

雜種植株一定能表現(xiàn)出雙親的遺傳特性嗎?為什么?__________________________________________________________。5）

③過程_________（填“需要”或“不需要”）光,原因是植物細胞利用的是培養(yǎng)基中有機營養(yǎng);④過程_______（填“需要”或“不需要”）光,原因是____________________________________,③④過程培養(yǎng)基含有的激素_______（填“相同”或“不同”）。融合過程可能有同種細胞融合或不融合的情況不一定。因為基因的表達不是孤立的,是相互調(diào)控、相互影響的不需要需要有利于葉綠素的形成及進行光合作用不同2.

）為什么“番茄—馬鈴薯”超級雜種植株沒有如科學家所想象的那樣，地上長番茄，地下結(jié)馬鈴薯？提示：生物基因的表達不是孤立的，是相互調(diào)控、相互影響的，番茄—馬鈴薯雜交植株雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達相互干擾，不能有序地表達。3.

微型繁殖技術(shù)：①概念：用于快速繁殖優(yōu)良品種的___________________。②特點：繁殖速度快，高保真（因為是無性繁殖），不受自然生長季節(jié)的限制。植物組織培養(yǎng)技術(shù)4.

作物脫毒的由來：_____________________________________________________________________________________________________。5.

人工種子的由來：__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。不少樹木生長周期長，一些作物優(yōu)良雜種的后代會因發(fā)生性狀分離而喪失其優(yōu)良特性，常規(guī)種子的生產(chǎn)還會受到季節(jié)、氣候、地域的限制并需要占用大量的土地來實現(xiàn)制種無性繁殖的作物，它們感染的病毒很容易傳給后代，病毒在作物體內(nèi)逐年積累就會導致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差6.植物組織培養(yǎng)過程控制無菌的原因是__________________。7.植物組織培養(yǎng)離體的細胞能表達全能性的原因是_________________________ ____________，若不離體這些細胞在母體上發(fā)生基因選擇性表達而分化。避免微生物的污染離體細胞含有本物種全部的遺傳信息8.人工種皮是保證包裹在其中的胚狀體順利生長成

小植株的關(guān)鍵部分。請?zhí)接懀喝斯しN皮中應(yīng)該具

有的有效成分是什么？為了促進胚狀體的生長發(fā)育，我們還可以向人工種皮中加入哪些物質(zhì)？

提示

針對植物種類和土壤等條件，在人工種子的包裹劑中還可以加入適量的養(yǎng)分、無機鹽、有機碳源以及農(nóng)藥、抗生素、有益菌等。為了促進胚狀體的生長發(fā)育，還可以向人工種皮中加入一些植物生長調(diào)節(jié)劑。素養(yǎng)能力提升考向

植物細胞工程

1）

用于離體培養(yǎng)的藍莓組織叫做_________，該技術(shù)的原理是_____________________。外植體植物細胞具有全能性2）

配制MS培養(yǎng)基時，應(yīng)加入一定量的瓊脂、蔗糖、無機鹽、維生素、有機物等營養(yǎng)物質(zhì)，蔗糖除作為碳源外，還具有_______________________的功能。常用的培養(yǎng)基有脫分化培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，這三種培養(yǎng)基的主要差異是_____________________________________。3）

圖中藍莓組織要經(jīng)過消毒處理后才能進行培養(yǎng)。其①過程中，細胞的分化程度會_______（填“升高”“降低”或“不變”）。4）

愈傷組織經(jīng)過②③過程重新分化成根或叢芽的過程叫_________。提供能量和維持滲透壓生長素和細胞分裂素的用量及比例不同降低再分化2.

利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株，已知野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技術(shù)人員用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下：據(jù)圖回答下列問題：1）

該過程用到的工程技術(shù)有_________________和_______________。植物體細胞雜交植物組織培養(yǎng)[解析]

從流程圖可知，該過程用的工程技術(shù)有植物組織培養(yǎng)和植物體細胞雜交技術(shù)。2）

過程①所需的酶是___________________,過程②PEG的作用是_____________________，經(jīng)過②操作后，需篩選出融合的雜種細胞，顯微鏡下觀察融合的活細胞中有供體的_________存在可作為初步篩選雜種細胞的標志。纖維素酶和果膠酶促進原生質(zhì)體的融合葉綠體[解析]

因為植物細胞有細胞壁，細胞壁阻礙細胞間的雜交，因此在進行體細胞雜交之前，應(yīng)利用纖維素酶和果膠酶去除植物的細胞壁，PEG的作用是誘導原生質(zhì)體的融合。3）

原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是_____________________。原生質(zhì)體經(jīng)過細胞壁再生，進而分裂和脫分化形成____________。保持原生質(zhì)體完整性愈傷組織[解析]

原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是保持原生質(zhì)體的完整性，經(jīng)過脫分化后形成的是愈傷組織。4）

若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和雙親植株的根尖，制成裝片，然后在顯微鏡下觀察比較染色體的_____________；對雜種植株進行____________接種實驗，可篩選出具有高抗性的雜種植株。形態(tài)和數(shù)目黑腐病菌[解析]

觀察再生植株的染色體變異類型，需要進行對比觀察染色體的形態(tài)和數(shù)目有沒有變化，對雜種植株進行黑腐病菌接種，可篩選出具有高抗性的雜種植株。3.

動物細胞培養(yǎng)過程中，通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細胞呼吸。(

)4.

由于動物胚胎細胞分化程度低，恢復其全能性相對容易，而動物體細胞分化程度高，恢復其全能性困難，因此，動物體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植。(

)×√教材基礎(chǔ)診斷1.

動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。(

)√2.

細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如，碳源、氮源、水、無機鹽、血清等。(

)×考點二

動物細胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)知識梳理整合1.動物細胞培養(yǎng)

原理：細胞增殖(1)地位：動物細胞工程常用的技術(shù)手段有動物細胞培養(yǎng)、動物細胞核移植、______________、生產(chǎn)單克隆抗體等。其中______________技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。動物細胞融合動物細胞培養(yǎng)(2)培養(yǎng)過程提醒

動物細胞培養(yǎng)的要點理解1）原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的分界點:分瓶培養(yǎng)前為原代培養(yǎng),分瓶培養(yǎng)后為傳代培養(yǎng);2）培養(yǎng)至10~50代時,部分細胞的核型可能會變化,繼續(xù)傳代培養(yǎng),部分細胞獲得不死性,已經(jīng)發(fā)生突變,會朝著等同于癌細胞的方向發(fā)展。目前保存的細胞多為10代以內(nèi),以保持細胞正常的二倍體核型。(3)培養(yǎng)條件抗生素培養(yǎng)液血清、血漿細胞代謝（4）應(yīng)用：生物制品的生產(chǎn)、檢測有毒物質(zhì)、醫(yī)學研究。(5).植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)的比較項目植物組織培養(yǎng)動物細胞培養(yǎng)原理細胞全能性細胞增殖取材幼嫩的細胞、組織或器官胚胎或出生不久的幼齡動物器官或組織培養(yǎng)基成分無機鹽、蔗糖、維生素、植物激素、瓊脂等葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、抗生素、動物血清、血漿等結(jié)果植株或大量細胞只能獲得大量細胞,不能得到生物個體相同點都需人工條件下的無菌操作;都需適宜的溫度、pH等條件2.動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物1）原理：動物體細胞核的全能性。2）類型：胚胎細胞核移植和體細胞核移植。3）過程：提醒

(1)核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同的原因：①克隆動物線粒體中的DNA來自去核卵母細胞；②性狀受環(huán)境的影響；③在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變。(2)動物體細胞核移植技術(shù)選用去核卵母細胞的原因：①卵母細胞體積大，易操作；②卵黃多，含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，能提供早期胚胎發(fā)育所需的營養(yǎng)；③含有能夠激發(fā)細胞核全能性表達的物質(zhì)。（3）動物體細胞核移植技術(shù)（克隆）從生殖方式的角度看屬無性生殖,重組細胞相當于受精卵,需要動物細胞培養(yǎng)和胚胎工程技術(shù)的支持。②保護___________。③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。④作為異種移植的供體。⑤用于組織器官的移植。5）存在問題:___________、克隆動物存在健康問題、動物食品的安全性問題等。瀕危物種成功率低4）應(yīng)用①加速家畜___________進程,促進優(yōu)良畜群繁育。遺傳改良教材深挖拓展根據(jù)動物細胞培養(yǎng)過程示意圖和體細胞核移植過程流程圖，回答相關(guān)問題：1）

動物細胞培養(yǎng)時選用幼齡動物組織或胚胎進行培養(yǎng)的原因是什么？提示：幼齡動物組織或胚胎分化程度低,增殖能力強,更易于培養(yǎng)。2）

用于核移植的供體細胞,一般都選用傳代10代以內(nèi)的細胞,原因是什么？提示：傳代10代以內(nèi)的細胞的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。3）

培養(yǎng)過程中兩次用到胰蛋白酶,作用分別是什么？提示：第一次使剪碎的組織分散成單個細胞;第二次使貼壁細胞從瓶壁上脫落下來。4）

將進行培養(yǎng)的供體細胞注入去核的卵母細胞中,去除卵母細胞細胞核的目的是什么？提示：使克隆出的動物個體的遺傳物質(zhì)幾乎全部來自供體細胞。5）

題述動物細胞工程中涉及的技術(shù)有哪些？提示：核移植、細胞培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù)。能力素養(yǎng)提升考向

考查動物細胞工程1.

美國科學家已經(jīng)在實驗室中成功培育出膀胱，并順利移植到7名患者體內(nèi)。這種技術(shù)為那些急需器官移植的患者帶來福音?；卮鹣铝袉栴}：1）

科學家從患者的膀胱上取下一小塊活細胞樣本，將其中的肌肉細胞和膀胱上皮細胞分別置于不同的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。在培養(yǎng)之前，需用_______________________處理以分散細胞，細胞在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)過程屬于_____代培養(yǎng)。與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比，其培養(yǎng)基的主要不同點是含有___________。胰蛋白酶或膠原蛋白酶原動物血清2）

約一周后將培養(yǎng)皿中培養(yǎng)的細胞放在由膠原質(zhì)制成的“支架”上繼續(xù)培養(yǎng)，再過7周左右，原先的數(shù)萬個細胞已經(jīng)繁殖到15億個左右，布滿“支架”，膀胱上皮在內(nèi)，肌肉在外，形成“新膀胱”。細胞數(shù)目大量增加，其增殖方式是___________；由這些細胞再形成肌肉和膀胱上皮的過程中要經(jīng)過___________。3）

醫(yī)生將“新膀胱”移植到患者膀胱的上面，這樣新器官會繼續(xù)生長并與老器官“重組”取代老器官中喪失功能的部分。新器官與老器官的“重組”_______（填“是”或“不是”）基因重組；“新膀胱”移植后，_______（填“會”或“不會”）引起免疫排斥反應(yīng)。4）

除上述方法外，還可將患者的體細胞核移入去核的___________中，利用體細胞_________技術(shù)，形成相應(yīng)組織、器官，用于疾病的治療。有絲分裂細胞分化不是不會卵母細胞核移植2.

我國科學家突破了體細胞克隆猴的世界難題,成功培育出世界上首例體細胞克隆猴——“中中”和“華華”。這標志著我國將率先開啟以獼猴作為實驗動物模型的時代。如圖為克隆猴的流程示意圖。請回答下列問題:1）

我國克隆猴利用的是猴胎兒成纖維細胞，該細胞是已分化的體細胞，從理論上分析，它具有細胞的全能性，這是因為__________________________________________。成纖維細胞的細胞核中含有猴的全部核基因2）

克隆猴時需要進行“去核”操作，即去掉卵母細胞的細胞核。先在體外培養(yǎng)卵母細胞讓其分裂，一般選擇___________________________________的細胞進行去核操作；然后進行“核移植”，即將體細胞的細胞核移到去核卵母細胞中形成重組細胞，此時采用的技術(shù)是_______________；得到的重組細胞再進行人工激活使其分裂形成胚胎。3）

科學家將79枚克隆胚胎移植入21只代孕母猴中，最終只有兩只母猴正常懷孕產(chǎn)下“中中”和“華華”，它們的性別是否一致？_____；原因是___________________________________________________。減數(shù)第二次分裂中期（或MⅡ中期）顯微注射技術(shù)是“中中”和“華華”的細胞核中遺傳物質(zhì)一樣4）

克隆動物有很多優(yōu)點：①可以加速家畜遺傳改良進程，促進優(yōu)良畜群繁育；②___________________________________________________________________。5）

靈長類生物克隆成功是克隆技術(shù)的重大突破，在該技術(shù)應(yīng)用方面，應(yīng)注意哪些潛在的風險？_______________________________________________?？梢栽黾訛l危物種的存活數(shù)量（或可以建立實驗動物模型研究人類疾?。┍苊膺M一步擴大到人的體細胞克隆，引發(fā)倫理問題教材基礎(chǔ)診斷1.

誘導動物細胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法相同。(

)×考點三

動物細胞融合和單克隆抗體2.

細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。(

)3.

植物原生質(zhì)體融合與動物細胞融合原理是相同的。(

)4.

在進行篩選的選擇性培養(yǎng)基上，只有未融合的B淋巴細胞因為不能無限繁殖而不能生長。(

)5.

對經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞，只需進行克隆化培養(yǎng)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。(

)√√××6.

生物導彈就是把抗癌細胞的單克隆抗體跟放射性同位素、化學藥物或細胞毒素相結(jié)合制備而成的。（選修3

P54正文）(

)√7.

動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。（選修3

P57專題小結(jié)）(

)8.

一個已分化的動物體細胞通過核移植技術(shù)，也可以發(fā)育成一個動物個體。（選修3

P57專題小結(jié)）(

)√√知識梳理整合1.動物細胞融合項目內(nèi)容概念兩個或多個動物細胞結(jié)合形成_____個細胞的過程,也稱細胞雜交原理_________________一細胞膜的流動性項目內(nèi)容誘導方法需要用聚乙二醇（PEG）、_____________或電激等誘導因素；滅活的病毒誘導動物細胞融合的原理是：_______________________________________________________________________________________________________________________________________________結(jié)果形成具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞,稱為___________意義突破了_______________的局限,使___________成為可能。成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段,為制造_____________開辟了新途徑續(xù)表滅活的病毒病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細胞互相凝聚，細胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細胞膜打開，發(fā)生細胞融合雜交細胞有性雜交方法遠緣雜交單克隆抗體2.單克隆抗體制備①制備原理：一種漿細胞只能產(chǎn)生一種抗體，漿細胞在體外______

(填“能”或“不能”)無限增殖；骨髓瘤細胞能__________；漿細胞與骨髓瘤細胞融合得到的________細胞，既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。不能無限增殖雜交瘤②制備過程③優(yōu)點：特異性強、__________，并可大量制備。④用途：作為__________；用于治療疾病和__________。靈敏度高診斷試劑運載藥物教材深挖拓展據(jù)教材圖回答關(guān)于單克隆抗體的相關(guān)問題：1）

進行融合操作后，培養(yǎng)基中共有哪些種類的細胞？提示：未融合的B淋巴細胞、骨髓瘤細胞、兩種同種細胞形成的融合細胞、雜種細胞以及多細胞融合細胞。2）

如何進行雜交瘤細胞的抗體檢測及克隆化培養(yǎng)?提示：抗體檢測通常用“有限稀釋法”來進行。將雜交瘤細胞稀釋，用多孔細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)，使每孔細胞不超過一個，通過培養(yǎng)讓其增殖，然后檢測各孔上清液可與特定抗原結(jié)合的培養(yǎng)孔為陽性孔。陽性孔中的細胞還不能保證是來自單個細胞，挑選陽性孔的細胞繼續(xù)稀釋，一般3~4次，直至確信每個孔中增殖的細胞為單克隆細胞，該過程即為雜交瘤細胞的克隆化培養(yǎng)。重難突破1.單克隆抗體制備過程中兩次篩選的方法及目的項目第一次篩選第二次篩選篩選原因誘導融合后得到多種雜交細胞,另外還有未融合的細胞由于小鼠還受到其他抗原的刺激,所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細胞篩選方法用特定的選擇培養(yǎng)基篩選:未融合細胞和同種細胞融合的細胞都會死亡,只有雜交瘤細胞才能生長用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng),在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群篩選目的得到雜交瘤細胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞2.植物體細胞雜交與動物細胞融合的比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理細胞膜的流動性、植物細胞的全能性細胞膜的流動性相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方法物理法：離心、電激、振動化學法：聚乙二醇等試劑誘導除物理法和化學法外，還可以用滅活的病毒誘導結(jié)果雜種植株雜種細胞意義克服了遠緣雜交的不親和性，獲得雜種植株突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能能力素養(yǎng)提升1.

如圖表示單克隆抗體的制備過程，據(jù)圖回答下列問題：1）

制備單克隆抗體的步驟：a.

將_______注入小鼠體內(nèi)，從小鼠脾臟中獲得B淋巴細胞，若要生產(chǎn)預(yù)防SARS的疫苗，則應(yīng)用____________感染小鼠。b.

通過圖中②過程獲得的細胞為_____________，它除了具有無限增殖的特點外，還有哪些特征？_________________________________________________。c.

將誘導融合后的細胞，放在_______培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)、篩選，篩選得到的細胞中的染色體數(shù)正好是小鼠體細胞中的二倍嗎？_____，原因是_________________________________________。2）

單克隆抗體與一般的血清抗體相比，優(yōu)點是_______________________________；將該抗體制成生物導彈，則生物導彈的組成是___________________；為了便于了解生物導彈的作用部位，常要對生物導彈中的成分進行_____________?？乖璖ARS病毒骨髓瘤細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著變化、細胞膜上糖蛋白等物質(zhì)減少選擇是B淋巴細胞和骨髓瘤細胞都來自同一種小鼠靈敏度高、特異性強（純度高）單克隆抗體＋藥物同位素標記3）

單克隆抗體的制備過程中需要兩次篩選，請寫出圖中的編號和篩選目的。第一次篩選：[

]____________________________________________________；第二次篩選：[

]____________________________________________________。④篩選出雜交瘤細胞⑥篩選出能產(chǎn)生特定抗體并能大量增殖的細胞群1.

[2020課標全國Ⅰ，38，15分]為研制抗病毒A的單克隆抗體，某同學以小鼠甲為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程?；卮鹣铝袉栴}：1）

上述實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是________________________________________________。誘導小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞[解析]

結(jié)合題干信息分析題圖可推斷，給小鼠甲注射病毒A的目的是讓小鼠甲產(chǎn)生免疫反應(yīng)，以獲得能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞。真題再現(xiàn)2）

寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：_______________________________________________________________________________。取小鼠甲脾臟剪碎，用胰蛋白酶處理使其分散成單個細胞，加入培養(yǎng)液制成單細胞懸液[解析]

以小鼠甲的脾臟為材料制備單細胞懸液的主要實驗步驟：取小鼠甲脾臟，用剪刀剪碎，加入胰蛋白酶處理，使其分散成單個細胞，加入培養(yǎng)液制成單細胞懸液。3）

為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于_____________，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結(jié)果是__________________________。圖中篩選2含多次篩選，篩選所依據(jù)的基本原理是_____________________________________。選擇培養(yǎng)基只有雜交瘤細胞能夠生存抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性[解析]

分析題圖可知，圖中篩選1所采用的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，使用該培養(yǎng)基進行細胞培養(yǎng)的結(jié)果是未融合的親本細胞和融合的具有同種細胞核的細胞都會死亡，只有融合的雜種細胞才能生存，即由B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞才能生存。圖中篩選2所依據(jù)的基本原理是抗原與抗體的反應(yīng)具有特異性。4）

若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有___________________________________________________________（答出2點即可）。將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)[解析]

若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可將雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，也可以將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)。2.

[2021湖南，22，15分]M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細胞中特異性表達?，F(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：1）

在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是______________________________________________________________，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的_____________斷開。限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）[限制酶（限制性內(nèi)切核酸酶）]磷酸二酯鍵[解析]

限制酶識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸間的磷酸二酯鍵斷開。2）

在無菌、無毒等適宜環(huán)境中進行動物A成纖維細胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要定期更換培養(yǎng)液，目的是________________________________________________________________。清除代謝（產(chǎn)）物，防止細胞代謝（產(chǎn)）物積累對細胞自身造成危害[解析]

動物細胞體外培養(yǎng)需要無菌、無毒等適宜環(huán)境，因此動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液及所有培養(yǎng)用具使用前應(yīng)進行無菌處理，還應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝（產(chǎn)）物，防止代謝（產(chǎn)）物積累對細胞自身造成危害。3）

與胚胎細胞核移植技術(shù)相比，體細胞核移植技術(shù)的成功率更低，原因是_______________________________________________________。從早期胚胎中分離獲得的胚胎干細胞，在形態(tài)上表現(xiàn)為_________________________________（答出兩點即可），功能上具有___________。體細胞分化程