1.2.1微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用課件-高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

發(fā)酵工程利用微生物的特定功能，規(guī)?；a(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品的綜合性生物工程。微生物難以用肉眼觀察的微小生物的統(tǒng)稱無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu)原核細(xì)胞真核細(xì)胞真菌：酵母菌、毛霉等；原生生物：草履蟲、變形蟲等病毒：SARS病毒、新冠病毒等RAN病毒；噬菌體等DNA病毒細(xì)菌：藍(lán)細(xì)菌、大腸桿菌、乳酸菌等；放線菌：鏈霉菌等本章提及的微生物主要指用于發(fā)酵的細(xì)菌和真菌。細(xì)菌的形態(tài)桿菌球菌霍亂弧菌葡萄球菌螺旋菌回顧舊知微生物從社會(huì)中來(lái)那么怎么才能保證無(wú)處不在的雜菌不混入發(fā)酵物中呢？制作用具和原料進(jìn)行滅菌處理接種純的菌種控制發(fā)酵條件，避免雜菌進(jìn)入。第2節(jié)微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

第1章發(fā)酵工程選擇性必修三一微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)一

微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物關(guān)鍵:(1）提供微生物生長(zhǎng)繁殖所需營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件(2）確保其它微生物無(wú)法混入(3)并將需要的微生物分離出來(lái)純化培養(yǎng)無(wú)菌技術(shù)發(fā)酵工程的基礎(chǔ)：(1)培養(yǎng)基概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)?！救蝿?wù)1】概述培養(yǎng)基概念、作用、種類【自主探究】請(qǐng)結(jié)合教材P9-10頁(yè)，思考下列問題的：1.培養(yǎng)基的用途有哪些？2.培養(yǎng)基的種類有哪些？(1)培養(yǎng)基概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)作用：無(wú)有凝固劑瓊脂液體培養(yǎng)基(3)種類：固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)、工業(yè)生產(chǎn)微生物的分離與鑒定，活菌計(jì)數(shù)，保藏菌種觀察微生物的運(yùn)動(dòng)、分類鑒定概述培養(yǎng)基概念、作用、種類用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物?！救蝿?wù)1】微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的菌落。(1)培養(yǎng)基概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)作用：(3)種類：概述培養(yǎng)基概念、作用、種類用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。【任務(wù)1】按用途分按用途選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基如含抗生素的培養(yǎng)基如不加氮源的培養(yǎng)基加高濃度NaCl的培養(yǎng)基伊紅美藍(lán)（大腸桿菌）酚紅（分解尿素菌）剛果紅（分解纖維素菌）(1)培養(yǎng)基概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)作用：(3)種類：概述培養(yǎng)基概念、作用、種類用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物?！救蝿?wù)1】按成分分按化學(xué)成分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基用化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)配成，如加入血清血漿等根據(jù)細(xì)胞生存所需要的種類和數(shù)量（已知的）用人工方法模擬合成一般用于工業(yè)生產(chǎn)分類、鑒定劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類特點(diǎn)用途物理性質(zhì)化學(xué)成分用途不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定允許特定種類的微生物生長(zhǎng),同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基培養(yǎng)、分離出特定微生物在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類的微生物鑒別不同種類微生物天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基類型：（歸納）【任務(wù)1】概述培養(yǎng)基概念、作用、種類【任務(wù)2】闡明培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成請(qǐng)觀察以下培養(yǎng)基配方，歸納培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成。（1）基本成分：一般都含有碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)碳源：CO2、CO32-、HCO3-有機(jī)碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等含碳有機(jī)物，最常用的是糖類，尤其是葡萄糖自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物無(wú)機(jī)氮源：NH4＋、NO3-、NH3等有機(jī)氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等注：一般含C、H、O、N的有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源Ca、K、Mg為大量元素Zn、Cu、Mn、Co、Mo等微量元素碳源氮源水無(wú)機(jī)鹽良好溶劑，參與細(xì)胞多種生化反應(yīng)等。為微生物生長(zhǎng)提供所需的碳元素合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物組成成分、調(diào)節(jié)物質(zhì)、酶的激活劑、(能源)等【任務(wù)2】闡明培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成試從碳源和氮源的角度分析不同類型微生物所需的培養(yǎng)基成分的特點(diǎn)：微生物代謝類型碳源氮源能源藍(lán)細(xì)菌硝化細(xì)菌根瘤菌大腸桿菌NH4+、NO3-等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物CO2CO2糖類等有機(jī)物糖類、蛋白質(zhì)等有機(jī)物NH3N2蛋白質(zhì)等光能NH3的氧化有機(jī)物有機(jī)物【任務(wù)2】闡明培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成闡明培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成表1-11000ml牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成組分含量提供的主要營(yíng)養(yǎng)牛肉膏5g碳源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g碳源，氮源和維生素等NaCl5g無(wú)機(jī)鹽H2O定容至1000ml水（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）(2)還需滿足微生物對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、氧氣的需求舉例說明：培養(yǎng)乳酸菌需要添加維生素培養(yǎng)霉菌時(shí)需將PH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)將PH調(diào)至中性或微堿性培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧條件牛肉膏蛋白胨維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等培養(yǎng)微生物時(shí)需要補(bǔ)充某些特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是由于這些微生物缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。【任務(wù)2】闡明培養(yǎng)基的配置原則目的要明確1營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)2滿足PH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和O2的需求3【任務(wù)3】課堂練習(xí)1.關(guān)于微生物的營(yíng)養(yǎng)，下列說法正確的是A.同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源B.凡是碳源都能提供能量C.除水以外的無(wú)機(jī)物僅提供無(wú)機(jī)鹽

D.無(wú)機(jī)氮源也可能提供能量√2.下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述，正確的是A.微生物的培養(yǎng)都需要提供水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，缺一不可B.微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌C.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性D.培養(yǎng)基只能培養(yǎng)細(xì)菌，不能培養(yǎng)真菌√比較消毒和滅菌對(duì)微生物作用效果的差異比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒滅菌

較為溫和強(qiáng)烈部分微生物全部微生物一般不能能【任務(wù)4】芽孢有些細(xì)菌在一定的條件下，細(xì)胞里面形成一個(gè)橢圓形的休眠體，叫作芽孢。孢子細(xì)菌、原生動(dòng)物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖或休眠作用的生殖細(xì)胞。能直接長(zhǎng)成新個(gè)體。無(wú)菌操作的對(duì)象是什么？培養(yǎng)皿接種環(huán)培養(yǎng)基操作的空間、操作者的衣著和手等【任務(wù)5】【任務(wù)6】請(qǐng)結(jié)合教材11頁(yè)“常用的消毒和滅菌方法”完成表格項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍消毒

巴氏消毒法

℃消毒30min或

℃處理15s或

℃處理10～15s

、啤酒、果酒和醬油等不耐高溫的液體煮沸消毒法100℃煮沸

min家庭餐具等生活用品紫外線消毒30W紫外燈照射

min(損傷細(xì)菌的DNA)化學(xué)藥物消毒

擦拭實(shí)驗(yàn)者雙手水源牛奶63～6572～765～630體積分?jǐn)?shù)為70%～75%的酒精氯氣接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)80～85比較分析無(wú)菌技術(shù)【任務(wù)7】項(xiàng)目主要方法應(yīng)用范圍滅菌灼燒滅菌直接在酒精燈火焰的

層灼燒干熱滅菌干熱滅菌箱中,

℃的熱空氣中持

。高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)充分燃燒接種工具，如涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具、試管口或瓶口等160-1701～2h100kPa、121℃的條件下，維持15～30min培養(yǎng)基等耐高溫的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿、金屬用具等比較分析無(wú)菌技術(shù)【任務(wù)7】實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸注意：為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)并在酒精燈火焰附近進(jìn)行。該研究成功的關(guān)鍵是要進(jìn)行無(wú)菌操作，其作用是

(答出兩點(diǎn))在上圖中的涂布平板階段，正確的無(wú)菌操作流程是:培養(yǎng)基

滅菌→置于超凈工作臺(tái)操作→在

倒平板→

涂布器一在酒精燈火焰旁涂布。無(wú)菌操作技術(shù)是微生物實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù)，是保證微生物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確和順利完成的重要環(huán)節(jié)。下列敘述錯(cuò)誤的是A.紫外線照射、甲醛熏蒸、酒精擦拭超凈臺(tái)都屬于消毒B.接種所用的吸管、培養(yǎng)皿及接種針等必須經(jīng)嚴(yán)格滅菌C.對(duì)培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌時(shí)間不足1小時(shí)會(huì)嚴(yán)重影響效果D.干熱滅菌和將試管口通過火焰灼燒都能殺滅芽孢和孢子防止雜菌污染、避免操作者被微生物感染、避免污染環(huán)境高壓蒸汽酒精燈火焰附近灼燒①培養(yǎng)物：②純培養(yǎng)物：由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體③純培養(yǎng)：獲得純培養(yǎng)物的過程在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。(2)純培養(yǎng)步驟：(1)相關(guān)概念配制培養(yǎng)基滅菌接種分離培養(yǎng)闡明以下概念及純培養(yǎng)流程【任務(wù)1】微生物在固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng),可以形成肉眼可見的菌落菌落：是指由單個(gè)微生物細(xì)胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖到一定程度，形成肉眼可見的、有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)。念珠菌霉菌酵母菌放線菌形狀、大小、光澤度、顏色、透明度等。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)菌落的概念闡明以下概念及純培養(yǎng)流程【任務(wù)1】(1)原理：(2)獲得單菌落的方法：②稀釋涂布平板法:①平板劃線法:微生物群分散或稀釋單個(gè)細(xì)胞單個(gè)菌落繁殖1.酵母菌純培養(yǎng)的原理和接種方法探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】閱讀教材12頁(yè)，了解以上酵母菌純培養(yǎng)過程的具體操作細(xì)節(jié)分別是什么？酵母菌純培養(yǎng)過程(1)制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基(2)接種和分離酵母菌滅菌倒平板接種方法：②稀釋涂布平板法:①平板劃線法:培養(yǎng)酵母菌：2.純培養(yǎng)的過程：探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】閱讀教材12頁(yè)，歸納酵母菌純培養(yǎng)過程的是什么？稱取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml，加熱煮沸至馬鈴薯軟爛用紗布過濾用蒸餾水定容至1000ml加入20g葡萄糖15-20g瓊脂獲取濾液2.純培養(yǎng)的過程：(1)制備培養(yǎng)基：配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】5-8套培養(yǎng)皿，用幾層牛皮紙包緊，放入干熱滅菌箱內(nèi)，160-170℃滅菌2h.配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶加棉塞，包上牛皮紙，用皮筋勒緊，放入高壓蒸汽滅菌鍋中，在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下，滅菌15-30min.配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。(1)制備培養(yǎng)基：探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)5】配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基①拔出錐形瓶的棉塞②將瓶口迅速通過火焰③用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，將培基(10-20mL)倒入培養(yǎng)皿，立即蓋上皿蓋。④等待培養(yǎng)基冷卻凝固后，將培養(yǎng)皿倒過來(lái)放置。溫度過高容易燙傷，低于50℃瓊脂會(huì)凝固。(1)制備培養(yǎng)基：倒平板注意事項(xiàng)：①溫度：50℃左右②操作：在酒精燈火焰附近③冷凝后平板倒置探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】配制培養(yǎng)基→滅菌→倒平板。平板冷凝后，為什么要將平板倒置？將平板倒置，既可以避免培養(yǎng)基中的水分過快蒸發(fā)又可防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。怎么檢測(cè)培養(yǎng)基的制作是否合格？如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1～2d后無(wú)菌落生長(zhǎng)，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。(1)制備培養(yǎng)基：探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】請(qǐng)用一個(gè)字來(lái)總結(jié)接種環(huán)操作的關(guān)鍵步驟(2)接種和分離酵母菌①③②④⑤⑥⑦⑥⑤③①②④⑦答案：平板劃線法探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)5】為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？請(qǐng)完善表格。灼燒時(shí)期目的取菌種前殺死接種環(huán)上_____________每次劃線前殺死上次劃線時(shí)殘留的菌種，使下一次劃線的菌種直接來(lái)源于

，從而使_______________________

，直至得到_________接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者原有的微生物上次劃線的末端每次劃線時(shí)菌種數(shù)目逐漸減少單個(gè)細(xì)胞平板劃線法(2)接種和分離酵母菌探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】若要按照如圖進(jìn)行劃線，那么在接種劃線的操作過程中，共灼燒了幾次接種環(huán)？圖中共劃了5個(gè)區(qū)域，在每次劃線前后均需要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌，因此共需要灼燒接種環(huán)6次。平板劃線法在第二次以及其后的劃線操作時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的原因：劃線后，線條末端酵母菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使酵母菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落(2)接種和分離酵母菌探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】45123為什么最后一次的劃線與第一次的劃線不能相連？最后一次的劃線已經(jīng)將細(xì)菌稀釋成單個(gè)的細(xì)胞，如果與第一次的劃線相連則增加了細(xì)菌的數(shù)目，達(dá)不到純培養(yǎng)的目的。平板劃線法(2)接種和分離酵母菌探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)5】完成平板劃線后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板和一個(gè)未接種的平板倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48h。將接種后的平板未接種的平板(3)培養(yǎng)酵母菌探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】在未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長(zhǎng)？如果有，說明了什么？在未接種的培養(yǎng)基表面應(yīng)該沒有菌落生長(zhǎng)，如果有，說明培養(yǎng)基被雜菌污染或滅菌不徹底。3.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】3.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)在接種酵母菌的培養(yǎng)基上，你是否觀察到了單菌落？這些菌落的顏色、形狀和大小是否一致？如果你觀察到了不同形態(tài)的菌落，你能分析出可能是由哪些原因引起的嗎？在接種酵母菌的培養(yǎng)基上可觀察到單菌落。如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特點(diǎn)，則說明純化酵母菌的操作成功；如果觀察到了不同形態(tài)的菌落，可能是接種的菌種不純或者無(wú)菌操作不規(guī)范等原因引起的。你是如何記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果的？可以在培養(yǎng)12h和24h后，觀察菌落的大小、形狀、顏色。培養(yǎng)24h后，菌落的大小、形狀是否發(fā)生變化，菌落顏色是否加深，光澤度是否增加，等等。探究酵母菌的純培養(yǎng)【任務(wù)2】評(píng)估論點(diǎn)的可信程度有一段時(shí)間，水果“酵素”風(fēng)靡各地。水果“酵素”制作的大致過程是：將洗凈、切成塊狀的水果放入潔凈的容器，再加入糖和水,密封，置于陰涼處發(fā)酵一至兩周。有人說，吃水果“酵素”可以美容、減肥、促進(jìn)消化和提高免疫力。請(qǐng)?jiān)u估這一論點(diǎn)是否可信。追問以下問題可以幫助你分析。水果“酵素”是什么？其制作原理是什么？其中可能含有哪些成分？其是否含有人們無(wú)法從其他食品中獲取但又是維護(hù)健康所必需的成分？其中的所有成分都有益于人體健康嗎？“酵素”就是“酶”的另一種說法。其制作是利用微生物進(jìn)行無(wú)氧呼吸的原理，進(jìn)行像制作泡菜一樣的發(fā)酵。其中可能有糖類(包括一些簡(jiǎn)單的糖和膳食纖維等)、蛋白質(zhì)(包括多種酶)、有機(jī)酸等成分。不存在它獨(dú)有的、特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。其中甚至可能含有微生物發(fā)酵產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，食用后可能會(huì)危害人體健康。思維訓(xùn)練《3年高考2年模擬》酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來(lái)源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請(qǐng)回答下列問題：（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的________，及時(shí)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行

滅菌。（2）取步驟②中不同濃度的稀釋液加入標(biāo)記好的無(wú)菌培養(yǎng)皿中。在步驟③中將溫度約______（在“25℃”“50℃”或“80℃”中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，冷凝后倒置。課堂練習(xí)PH高壓蒸汽50℃《3年高考2年模擬》酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來(lái)源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程，請(qǐng)回答下列問題：（3）挑取分離平板中長(zhǎng)出的單菌落，按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有______________（多選）。a.為保證無(wú)菌操作，接種針使用前都必須滅菌b.劃線時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落c.最后一次劃線要和第一次劃線首尾相連d.在后面的劃線處容易獲得單菌落課堂練習(xí)a、b、d

1.微生物的純培養(yǎng)既需要適宜的培養(yǎng)基，又要防止雜菌污染。判斷下列相關(guān)表述是否正確。（1）培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)微生物的