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PAGEPAGE22細(xì)胞工程考點(diǎn)一植物細(xì)胞工程1.細(xì)胞工程的概念(1)原理和方法:細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)。(2)操作水平:細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平。(3)目的:依據(jù)人的意愿來(lái)變更細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。2.植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)(1)植物組織培育技術(shù)①理論基礎(chǔ):植物細(xì)胞具有全能性。②基本過(guò)程eq\x(外植體)eq\o(→,\s\up7(脫分化),\s\do5())eq\x(愈傷組織)eq\o(→,\s\up7(再分化),\s\do5())eq\x(胚狀體或叢芽)eq\o(→,\s\up7(發(fā)育),\s\do5())eq\x(植株)(2)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)①理論基礎(chǔ):植物體細(xì)胞融合利用了細(xì)胞膜的流淌性,雜種細(xì)胞培育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。②基本過(guò)程eq\x(制備原生質(zhì)體)→eq\x(\a\al(原生質(zhì),體融合))→eq\x(\a\al(雜種,細(xì)胞))→eq\x(\a\al(愈傷,組織))→eq\x(\a\al(雜種,植株))③意義:克服了不同種生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。3.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用(1)植物繁殖的新途徑:微型繁殖、作物脫毒、制備人工種子。(2)作物新品種的培育:?jiǎn)伪扼w育種、突變體的利用。(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。[基礎(chǔ)自測(cè)]1.推斷下列敘述的正誤(1)高度分化的成熟葉肉細(xì)胞不具備發(fā)育成完整植株的潛能(×)(2)胚狀體是外植體在培育基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織(×)(3)棉花根尖細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)形成幼苗能體現(xiàn)細(xì)胞全能性(√)(4)植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性(×)(5)愈傷組織是外植體經(jīng)脫分化和再分化后形成的(×)(6)在愈傷組織培育中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑,可獲得染色體加倍的細(xì)胞(×)(7)培育草莓脫毒苗所采納的主要技術(shù)是細(xì)胞雜交(×)(8)再生出細(xì)胞壁是植物體細(xì)胞原生質(zhì)體融合勝利的標(biāo)記(√)(9)經(jīng)植物組織培育得到的胚狀體用人工薄膜包裝后可得到人工種子(√)(10)同一株綠色開(kāi)花植物不同部位的細(xì)胞經(jīng)組織培育獲得的植株基因都是相同的(×)2.補(bǔ)充植物組織培育操作流程圖并填空(1)植物組織培育技術(shù)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性。(2)離體的植物器官、組織或細(xì)胞通常稱(chēng)為外植體。(3)在植物組織培育過(guò)程中,啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。(4)利用植物組織培育技術(shù)生產(chǎn)細(xì)胞產(chǎn)物時(shí),只需培育到愈傷組織階段即可。3.學(xué)透教材、理清緣由、規(guī)范答題用語(yǔ)專(zhuān)練(1)過(guò)程①為去除________獲得具有活力的原生質(zhì)體,所用到的酶是________________________。(2)過(guò)程②是原生質(zhì)體的融合,其原理是細(xì)胞膜的________,人工誘導(dǎo)的物理法包括____________________等;化學(xué)法一般是用____________作誘導(dǎo)劑。(3)過(guò)程③是原生質(zhì)體融合后再生出________,這是原生質(zhì)體融合勝利的標(biāo)記。(4)過(guò)程④是____________技術(shù),其原理是植物細(xì)胞的______。答案:(1)細(xì)胞壁纖維素酶和果膠酶(2)流淌性離心、振動(dòng)、電激聚乙二醇(3)細(xì)胞壁(4)植物組織培育全能性1.細(xì)胞的全能性(1)含義:具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。(2)物質(zhì)基礎(chǔ):細(xì)胞內(nèi)含有本物種全部的遺傳信息。(3)植物細(xì)胞全能性表達(dá)的條件:具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu);處于離體狀態(tài);供應(yīng)肯定的養(yǎng)分、激素和其他相宜外界條件。2.植物激素對(duì)植物組織培育的影響(1)依據(jù)不同的依次運(yùn)用這兩類(lèi)激素,會(huì)得到不同的試驗(yàn)結(jié)果。運(yùn)用依次試驗(yàn)結(jié)果先運(yùn)用生長(zhǎng)素,后運(yùn)用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先運(yùn)用細(xì)胞分裂素,后運(yùn)用生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)運(yùn)用分化頻率提高簡(jiǎn)記為:先“生”分裂不分化,后“生”分裂又分化,同“使”分化頻率高(2)當(dāng)同時(shí)運(yùn)用這兩類(lèi)激素時(shí),兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向。生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素植物細(xì)胞的發(fā)育方向高有利于根的分化、抑制芽的形成低有利于芽的分化、抑制根的形成適中促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)簡(jiǎn)記為:“高”根,“低”芽,“中”愈傷3.植物體細(xì)胞雜交與植物有性雜交中遺傳物質(zhì)的變更若一植物細(xì)胞(甲)含有2x條染色體,2個(gè)染色體組,基因型為Aabb,另一植物細(xì)胞(乙)含有2y條染色體,2個(gè)染色體組,基因型為ccDd。(1)植物體細(xì)胞雜交①染色體組數(shù)=兩種植物體細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。②植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株,有幾個(gè)染色體組就稱(chēng)為幾倍體。③甲、乙經(jīng)體細(xì)胞雜交形成的新植株為異源四倍體,其體細(xì)胞中染色體為(2x+2y)條,4個(gè)染色體組,基因型為AabbccDd。由此得出:兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞,染色體數(shù)、基因型和染色體組都采納干脆相加的方法。(2)植物有性雜交有性雜交的子代細(xì)胞中,染色體數(shù)為x+y、基因型為AbcD或abcD或Abcd或abcd,即先減半再相加。[對(duì)點(diǎn)落實(shí)]1.1971年,美國(guó)化學(xué)家從紅豆杉樹(shù)皮中分別出高抗癌活性的紫杉醇,從今,國(guó)家重點(diǎn)愛(ài)護(hù)珍稀植物——紅豆杉遭遇了掠奪式的砍伐。為挽救紅豆杉,同時(shí)獲得紫杉醇,科研小組設(shè)計(jì)了如圖所示的試驗(yàn)流程:請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)選用莖尖分生組織進(jìn)行組織培育的目的是__________,誘導(dǎo)莖尖分生組織形成愈傷組織的過(guò)程叫____________。利用愈傷組織誘導(dǎo)形成的胚狀體經(jīng)人工薄膜包裝后就可得到________。(2)莖尖分生組織細(xì)胞具有全能性的緣由是________________________________。在生物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞并不會(huì)表現(xiàn)出全能性,緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)已知植物甲中提取的物質(zhì)X,能提高紫杉醇的抗癌效果??蒲行〗M欲獲得既能產(chǎn)生紫杉醇又能產(chǎn)生物質(zhì)X的植株,可利用________________技術(shù)獲得雜種植株。該方法首先要利用__________________除去細(xì)胞壁獲得具有活力的原生質(zhì)體,再經(jīng)________________(試劑)誘導(dǎo)融合形成雜種細(xì)胞。解析:(1)莖尖分生組織含有較少的病菌,進(jìn)行組織培育可以獲得脫毒苗;分生組織經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程可以形成愈傷組織;利用愈傷組織誘導(dǎo)形成的胚狀體經(jīng)人工薄膜包裝后可得到人工種子。(2)莖尖分生組織細(xì)胞含有該種生物的全部遺傳信息,因此具有發(fā)育的全能性。在特定的時(shí)間和空間條件下,細(xì)胞中的基因會(huì)有選擇性地表達(dá)出各種蛋白質(zhì),從而構(gòu)成生物體的不同組織和器官,所以在生物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞并不會(huì)表現(xiàn)出全能性。(3)植物甲可以產(chǎn)生物質(zhì)X,紅豆杉可以產(chǎn)生紫杉醇,因此利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將兩種植物細(xì)胞融合,獲得的雜種植株的細(xì)胞既能產(chǎn)生紫杉醇又能產(chǎn)生物質(zhì)X。植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,首先要利用纖維素酶和果膠酶除去細(xì)胞壁獲得具有活力的原生質(zhì)體,再經(jīng)聚乙二醇誘導(dǎo)融合形成雜種細(xì)胞。答案:(1)獲得脫毒苗脫分化人工種子(2)莖尖分生組織細(xì)胞含有該種生物的全部遺傳信息在特定的時(shí)間和空間條件下,細(xì)胞中的基因會(huì)有選擇性地表達(dá)出各種蛋白質(zhì),從而構(gòu)成生物體的不同組織和器官(3)植物體細(xì)胞雜交纖維素酶和果膠酶聚乙二醇(PEG)2.依據(jù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)流程圖,回答相關(guān)問(wèn)題:(1)運(yùn)用傳統(tǒng)有性雜交(即用番茄、馬鈴薯雜交),自然狀態(tài)下不能得到雜種植株,緣由是________________________________________。(2)在利用雜種細(xì)胞培育雜種植株的過(guò)程中,依據(jù)的原理是____________________,其中過(guò)程②稱(chēng)為_(kāi)_____________,植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)記是______________________。(3)已知番茄、馬鈴薯分別為四倍體、二倍體,則“番茄—馬鈴薯”屬于________倍體植株。(4)已知柴油樹(shù)種子含有的柴油是植物細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,可用植物組織培育來(lái)實(shí)現(xiàn)柴油的工業(yè)化生產(chǎn)。若利用此技術(shù),將柴油樹(shù)細(xì)胞培育到________階段即可(填圖中字母編號(hào))。(5)若培育抗蟲(chóng)棉,將抗蟲(chóng)基因通過(guò)適當(dāng)?shù)耐緩綄?dǎo)入棉花受精卵,然后進(jìn)行組織培育,該過(guò)程相當(dāng)于____________過(guò)程(填圖中標(biāo)號(hào))。(6)人工種子是由發(fā)育到________(填圖中字母編號(hào))過(guò)程的結(jié)構(gòu)包袱上人工種皮制備的。解析:(1)番茄和馬鈴薯屬于兩個(gè)物種,存在生殖隔離,不能通過(guò)有性雜交產(chǎn)生后代。(2)在利用雜種細(xì)胞培育雜種植株的過(guò)程中,依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性,其中過(guò)程②稱(chēng)為原生質(zhì)體融合,植物體細(xì)胞融合完成的標(biāo)記是產(chǎn)生新的細(xì)胞壁。(3)由于番茄、馬鈴薯分別為四倍體、二倍體,因此“番茄—馬鈴薯”屬于異源六倍體。(4)柴油是植物細(xì)胞的代謝產(chǎn)物,將柴油樹(shù)細(xì)胞培育到愈傷組織階段即可提取,愈傷組織階段為圖中的e階段。(5)若培育抗蟲(chóng)棉,將抗蟲(chóng)基因通過(guò)適當(dāng)?shù)耐緩綄?dǎo)入棉花受精卵,然后進(jìn)行組織培育,包括脫分化和再分化兩個(gè)階段,即圖中的④⑤。(6)人工種子是用胚狀體包上人工種皮制成的。答案:(1)不同種的植物存在生殖隔離(2)細(xì)胞的全能性原生質(zhì)體融合產(chǎn)生新的細(xì)胞壁(3)六(4)e(5)④⑤(6)f——————————————————————————[易錯(cuò)提示]有關(guān)植物體細(xì)胞雜交的三個(gè)易誤點(diǎn)誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果只是形成雜種細(xì)胞指正植物體細(xì)胞雜交的結(jié)果最終要經(jīng)過(guò)組織培育形成雜種植株誤認(rèn)為植物體細(xì)胞雜交屬于有性生殖指正植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中沒(méi)有有性生殖細(xì)胞的結(jié)合,因此不屬于有性生殖,應(yīng)為無(wú)性生殖誤認(rèn)為雜種植株的變異類(lèi)型屬于基因重組指正雜種植株的變異類(lèi)型屬于染色體變異,雜種植株的染色體數(shù)通常是兩親本細(xì)胞染色體數(shù)目之和,雜種植株屬于異源多倍體考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞工程一、動(dòng)物細(xì)胞培育與核移植技術(shù)1.動(dòng)物細(xì)胞培育(1)基本過(guò)程(2)培育條件①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境:對(duì)培育液和全部培育用具進(jìn)行無(wú)菌處理,添加抗生素,定期更換培育液以清除代謝產(chǎn)物。②養(yǎng)分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等一些自然成分。③相宜的溫度和pH:溫度為36.5±0.5_℃(哺乳動(dòng)物),pH為7.2~7.4。④氣體環(huán)境:含95%空氣加5%CO2的混合氣體。2.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)(1)理論基礎(chǔ):動(dòng)物體細(xì)胞核具有全能性。(2)分類(lèi):胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。(3)基本過(guò)程二、動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體1.動(dòng)物細(xì)胞融合(1)原理:細(xì)胞膜的流淌性。(2)方法:須要用聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等誘導(dǎo)因素。(3)意義:突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。2.單克隆抗體(1)制備過(guò)程(2)突出優(yōu)點(diǎn):特異性eq\a\vs4\al(強(qiáng))、靈敏度eq\a\vs4\al(高),可大量制備。(3)實(shí)際應(yīng)用:作為診斷試劑;用于治療疾病和運(yùn)載藥物。[基礎(chǔ)自測(cè)]1.推斷下列敘述的正誤(1)在25℃的試驗(yàn)條件下可順當(dāng)完成大鼠神經(jīng)細(xì)胞的培育(×)(2)連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型(×)(3)動(dòng)物細(xì)胞培育與植物組織培育依據(jù)的原理都是細(xì)胞的全能性(×)(4)動(dòng)物細(xì)胞培育和植物組織培育過(guò)程中都要用到胰蛋白酶(×)(5)肝細(xì)胞培育過(guò)程中通常在培育液中通入5%的CO2以刺激細(xì)胞呼吸(×)(6)培育保留接觸抑制的細(xì)胞在培育瓶壁上可形成多層細(xì)胞(×)(7)二倍體細(xì)胞的傳代培育次數(shù)通常是無(wú)限的(×)(8)滅活的病毒能促進(jìn)動(dòng)物細(xì)胞融合,但不能促進(jìn)植物細(xì)胞融合(√)(9)將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo)融合,培育液中融合后的細(xì)胞即為雜交瘤細(xì)胞(×)(10)體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于克隆動(dòng)物和制備單克隆抗體(×)(11)動(dòng)物細(xì)胞核移植的受體細(xì)胞必需是卵細(xì)胞(×)(12)克隆動(dòng)物的性狀與供體動(dòng)物完全相同(×)2.補(bǔ)充動(dòng)物細(xì)胞培育的過(guò)程示意圖并填空(1)與植物細(xì)胞培育相比,動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程所用的培育基一般是液體培育基,并加入動(dòng)物血清。(2)動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中兩次用到胰蛋白酶,第一次的作用是將剪碎的組織分散成單個(gè)細(xì)胞;其次次是將貼壁細(xì)胞從瓶壁上分別下來(lái),目的是避開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞的接觸抑制現(xiàn)象。(3)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)加入CO2的主要作用是維持培育液的pH;O2的作用是促進(jìn)細(xì)胞有氧呼吸。3.學(xué)透教材、理清緣由、規(guī)范答題用語(yǔ)專(zhuān)練依據(jù)單克隆抗體制備的過(guò)程示意圖回答下列問(wèn)題(1)制備單克隆抗體時(shí),為什么要選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞?提示:每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體,但不能無(wú)限增殖;骨髓瘤細(xì)胞可大量快速增殖,卻不能產(chǎn)生抗體。若將兩種細(xì)胞融合在一起,則既能產(chǎn)生特異性抗體又能快速增殖。(2)誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的方法有哪些?融合的原理是什么?提示:誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合的方法有聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等;兩種細(xì)胞發(fā)生融合的原理是細(xì)胞膜的流淌性。(3)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)聚乙二醇處理后,培育液中存在哪幾種細(xì)胞?提示:未融合的B淋巴細(xì)胞、未融合的骨髓瘤細(xì)胞、B-B融合細(xì)胞、瘤—瘤融合細(xì)胞、B-瘤融合細(xì)胞。(4)選擇雜交瘤細(xì)胞的兩步篩選的目的各是什么?提示:第一步篩選的目的是獲得雜交瘤細(xì)胞;其次步篩選的目的是獲得能產(chǎn)生所需單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。1.植物組織培育與動(dòng)物細(xì)胞培育的比較比較項(xiàng)目植物組織培育動(dòng)物細(xì)胞培育理論基礎(chǔ)植物細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖培育基類(lèi)型固體或半固體培育基液體培育基成分水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、促生長(zhǎng)因子、動(dòng)物血清等取材植物幼嫩部位或花藥等動(dòng)物胚胎或誕生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織關(guān)鍵環(huán)節(jié)細(xì)胞的脫分化和再分化細(xì)胞增殖和癌變結(jié)果新的組織或植株個(gè)體,可以體現(xiàn)全能性新的細(xì)胞系或細(xì)胞株,不形成個(gè)體,不體現(xiàn)全能性應(yīng)用①植株快速繁殖②脫毒植株的培育③制備人工種子④生產(chǎn)藥物、殺蟲(chóng)劑等⑤轉(zhuǎn)基因植物的培育①蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)②皮膚移植材料的培育③檢測(cè)有毒物質(zhì)④生理、病理、藥理學(xué)探討相同點(diǎn)①兩技術(shù)手段培育過(guò)程中細(xì)胞都進(jìn)行有絲分裂,都是無(wú)性繁殖,都可稱(chēng)克隆,都不涉及減數(shù)分裂②均為無(wú)菌操作,須要相宜的溫度、pH等條件2.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流淌性、細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流淌性、細(xì)胞增殖融合前處理除去細(xì)胞壁使細(xì)胞分散開(kāi)相關(guān)酶纖維素酶和果膠酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶誘導(dǎo)方法物理法:離心、電激、振動(dòng);化學(xué)法:聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)除物理法和化學(xué)法,還可以用滅活的病毒誘導(dǎo)結(jié)果雜種植株雜交細(xì)胞應(yīng)用培育植物新品種主要用于制備單克隆抗體意義突破遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,打破了生殖隔離,擴(kuò)展了雜交的親本組合相同點(diǎn)原生質(zhì)體融合原理相同,原生質(zhì)體融合的方法相像3.單克隆抗體制備過(guò)程中兩次篩選的區(qū)分項(xiàng)目第一次篩選其次次篩選篩選緣由誘導(dǎo)融合后會(huì)得到多種雜交細(xì)胞,另外還有未融合的細(xì)胞由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激,所以經(jīng)選擇性培育獲得的雜交瘤細(xì)胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細(xì)胞篩選方法用特定的選擇培育基篩選:未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞融合后形成的細(xì)胞(“BB”細(xì)胞、“瘤瘤”細(xì)胞)都會(huì)死亡,只有融合的雜交瘤細(xì)胞(“B瘤”細(xì)胞)才能生長(zhǎng)用多孔培育皿培育,在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的狀況下起先克隆化培育和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群篩選目的得到雜交瘤細(xì)胞得到能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞[對(duì)點(diǎn)落實(shí)]1.(2024·浙江11月選考單科卷,節(jié)選)回答與植物克隆和動(dòng)物克隆有關(guān)的問(wèn)題:(1)利用植物愈傷組織獲得再生植株主要有兩條途徑:一是由愈傷組織的細(xì)胞先分化產(chǎn)生芽和根后再形成一個(gè)完整植株的________途徑。二是由愈傷組織的細(xì)胞產(chǎn)生胚狀體后再萌發(fā)形成完整植株的胚胎發(fā)生途徑。另外也可不通過(guò)愈傷組織階段而干脆采納帶腋芽的莖段培育成叢狀苗,再誘導(dǎo)生根獲得再生植株,其緣由是腋芽中存在________。(2)利用植物克隆培育新品種,一方面可利用帶有目的基因的________侵染植株,或?qū)⒛康幕蛲ㄟ^(guò)________的方法導(dǎo)入植物細(xì)胞、組織或器官獲得轉(zhuǎn)基因植株。另一方面利用異源植物的________進(jìn)行融合產(chǎn)生雜種植株,或利用異源植物在試管內(nèi)進(jìn)行________,對(duì)其產(chǎn)生的胚進(jìn)行培育產(chǎn)生雜種植株。(3)下列屬于植物克隆和動(dòng)物克隆共有的培育方法是________。A.懸浮培育、器官培育B.貼壁培育、傳代培育C.器官培育、愈傷組織培育D.原生質(zhì)體培育、傳代培育解析:(1)由愈傷組織的細(xì)胞先分化產(chǎn)生芽和根后再形成一個(gè)完整植株是植物組織培育的器官發(fā)生途徑。不通過(guò)愈傷組織階段而干脆采納帶腋芽的莖段培育成叢狀苗,這說(shuō)明腋芽中含有分生組織,而分生組織中含較高的細(xì)胞分裂素,細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素比值高時(shí)促進(jìn)芽的生長(zhǎng)。(2)利用植物克隆培育新品種時(shí),將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,可以用含有目的基因的農(nóng)桿菌干脆侵染,或者用顯微注射法導(dǎo)入;用異源植物可以利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù);或者受精之后的胚胎進(jìn)行培育,也可以獲得雜種植株。(3)貼壁生長(zhǎng)是動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)的特性;愈傷組織是指植物細(xì)胞在組織培育過(guò)程中形成的一種排列疏松而無(wú)規(guī)則的無(wú)定形態(tài)態(tài)、高度液泡化的薄壁細(xì)胞,動(dòng)物細(xì)胞無(wú)愈傷組織培育;傳代培育應(yīng)用于動(dòng)物細(xì)胞培育過(guò)程中。答案:(1)器官發(fā)生分生組織(2)農(nóng)桿菌顯微注射原生質(zhì)體受精(3)A2.雙特異性單克隆抗體是指可同時(shí)與癌細(xì)胞和藥物結(jié)合的特異性抗體。如圖是科研人員通過(guò)單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿(一種抗癌藥物)的雙特異性單克隆抗體的部分過(guò)程。回答下列問(wèn)題:(1)過(guò)程①的目的是________________________________________,制備雙特異性單克隆抗體的過(guò)程中用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)有______________和______________。(2)過(guò)程②誘導(dǎo)融合常用的化學(xué)方法是______________。經(jīng)過(guò)過(guò)程③④得到的單克隆雜交瘤細(xì)胞應(yīng)具備的特征是________________________________。(3)獲得的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞在體外條件下培育或________________________,均可提取出大量的雙特異性單克隆抗體。(4)與干脆運(yùn)用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,緣由是__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析:(1)過(guò)程①是給小鼠注射癌胚抗原,其目的是使小鼠產(chǎn)生能分泌識(shí)別癌胚抗原抗體的漿細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞),制備雙特異性單克隆抗體的過(guò)程中用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培育。(2)過(guò)程②誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用的化學(xué)試劑是聚乙二醇(PEG),單克隆雜交瘤細(xì)胞應(yīng)具備的特征既能快速大量增殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體的特點(diǎn)。(3)獲得的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞有兩個(gè)培育途徑,一是在體外條件下培育,二是注射到小鼠腹腔內(nèi)培育增殖。(4)與干脆運(yùn)用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,緣由是雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物(長(zhǎng)春堿)定向帶到癌細(xì)胞所在位置,在原位殺死癌細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又削減了用藥劑量,相當(dāng)于“生物導(dǎo)彈”。答案:(1)使小鼠產(chǎn)生能分泌識(shí)別癌胚抗原抗體的漿細(xì)胞(B淋巴細(xì)胞)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培育(2)聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)既能快速大量增殖,又能產(chǎn)生專(zhuān)一的抗體(3)注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖(4)雙特異性單克隆抗體能將抗癌藥物(長(zhǎng)春堿)定向帶到癌細(xì)胞所在位置,在原位殺死癌細(xì)胞,這樣既不損傷正常細(xì)胞,又削減了用藥劑量課堂一刻鐘eq\a\vs4\al(研真題——知命題點(diǎn)·查薄弱點(diǎn)·清迷盲點(diǎn))1.(2024·江蘇高考,多選)右圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是()A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分eq\a\vs4\al(化再誘導(dǎo)融合)B.a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合須要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流淌性都有關(guān)D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的全部基因易錯(cuò)探因——過(guò)程不明錯(cuò)選A的緣由在于對(duì)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程不明確,植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合相比,首先應(yīng)去除細(xì)胞壁。解析:選BC若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,應(yīng)先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁,然后再誘導(dǎo)融合;a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合須要促融處理;細(xì)胞的融合與細(xì)胞膜的流淌性有關(guān);融合后的c細(xì)胞中的基因進(jìn)行選擇性表達(dá),只能表達(dá)a、b兩細(xì)胞的部分基因。2.(2024·江蘇高考)下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述,正確的是()A.PEG是促細(xì)胞融合劑,可干脆誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合B.用原生質(zhì)體制備人工種子,要防止細(xì)胞裂開(kāi)C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理,可干脆獲得單克隆抗體D.核移植克隆的動(dòng)物,其線粒體DNA來(lái)自供卵母體解析:選DPEG是促細(xì)胞融合劑,能誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合,融合前需先用酶解法去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁;制備人工種子應(yīng)當(dāng)用組織培育形成的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,而不是原生質(zhì)體;單克隆抗體是雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的,骨髓瘤細(xì)胞不能分泌抗體;利用核移植技術(shù)克隆動(dòng)物時(shí),是將體細(xì)胞的細(xì)胞核移入去除細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,所以克隆動(dòng)物的線粒體DNA來(lái)自供卵母體。3.(2024·全國(guó)卷Ⅲ)2024年《細(xì)胞》期刊報(bào)道,中國(guó)科學(xué)家領(lǐng)先勝利地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物進(jìn)行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過(guò)程,核移植是指________________________________________________________________________________________________________________________________________________。通過(guò)核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目________(填“減半”“加倍”或“不變”)。2哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度填“大于”或“小于”體細(xì)胞核移植,其緣由是________________________________________________________________________,________________________________________________________________________。命題探源——以“本”為本本小題是對(duì)人教版選修③教材P47原文的干脆考查。選修內(nèi)容較多,但在高考中試題相對(duì)簡(jiǎn)潔,題目大多是對(duì)教材內(nèi)容的轉(zhuǎn)換表達(dá)或淺層次的理解考查。這就要求考生不要急功近利地盲目做題,復(fù)習(xí)重點(diǎn)還要放到對(duì)教材主干學(xué)問(wèn)的理解上。(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過(guò)程中,若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體,通常所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目________(填“相同”或“不同”),性染色體組合________(填“相同”或“不同”)。解析:(1)核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,形成重組細(xì)胞,再將重組細(xì)胞形成的早期胚胎移植到受體子宮內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育,最終分娩得到克隆動(dòng)物。因?yàn)槿旧w在細(xì)胞核中,所以克隆動(dòng)物體細(xì)胞與供應(yīng)細(xì)胞核的個(gè)體的體細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目相同。(2)由于動(dòng)物的胚胎細(xì)胞分化程度低,復(fù)原全能性相對(duì)簡(jiǎn)潔,而動(dòng)物的體細(xì)胞分化程度高,復(fù)原全能性非常困難,因此動(dòng)物體細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植。(3)哺乳動(dòng)物雌雄個(gè)體的體細(xì)胞中,細(xì)胞核內(nèi)常染色體的數(shù)目是相同的,性染色體組合是不同的。若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體,則得到的克隆動(dòng)物的體細(xì)胞中常染色體的數(shù)目相同,性染色體組合不同。答案:(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中不變(2)小于胚胎細(xì)胞分化程度低,復(fù)原全能性相對(duì)簡(jiǎn)潔(3)相同不同4.(2024·海南高考)甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料,利用植物組織培育技術(shù)繁殖該植物?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體,在肯定條件下進(jìn)行組織培育,均能獲得試管苗,eq\a\vs4\al(其原理是______________________________________________________________)eq\a\vs4\al(________________________________________________________________________。)(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培育基中,均加入肯定量的蔗糖,蔗糖水解后可得到______________。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培育獲得幼苗,該細(xì)胞應(yīng)eq\a\vs4\al(具備的條件是)eq\a\vs4\al(________________________________________________________________________,________________________________________________________________________)(填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。易錯(cuò)探因——記憶不準(zhǔn)第(1)(2)小題主要考查對(duì)植物組織培育原理、細(xì)胞具有全能性緣由的精確記憶。在解答此類(lèi)問(wèn)題時(shí),應(yīng)理解相關(guān)概念、原理的內(nèi)涵和外延,抓住關(guān)鍵詞進(jìn)行記憶。(3)圖中A、B、C所示的是不同的培育結(jié)果,該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培育基中兩種激素用量的不同造成的,這兩種激素是________________。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)________形成的。(4)若該種植物是一種雜合體的珍貴花卉,要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉,可用組織培育方法繁殖,在培育時(shí),________(填“能”或“不能”)采納eq\a\vs4\al(經(jīng)減數(shù))分裂得到的花粉粒作為外植體,緣由是______________________________________________,______________________________________________________________________________。破題障礙——不會(huì)遷移本小題考查角度要遷移交匯到減數(shù)分裂過(guò)程中遺傳物質(zhì)的變更特點(diǎn)。本題要明確題干要求——獲得基因型相同的花卉,再?gòu)臏p數(shù)分裂產(chǎn)生配子時(shí)會(huì)因基因重組而產(chǎn)生不同基因型的配子角度分析。解析:(1)植物組織培育的原理是植物細(xì)胞具有全能性。(2)蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖。用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培育獲得幼苗,細(xì)胞必需具有完整細(xì)胞核,才具有發(fā)育為個(gè)體的一整套遺傳信息。(3)影響植物組織培育的兩種主要激素是細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素。愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)脫分化形成的。(4)由于花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同,組織培育得到花卉基因型不同于原植株,導(dǎo)致不能保留親本性狀。答案:(1)綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性,在肯定條件下能發(fā)育成完整的植株(合理即可)(2)葡萄糖、果糖具有完整的細(xì)胞核(3)細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素脫分化(4)不能對(duì)雜合體的植株來(lái)說(shuō),其體細(xì)胞的基因型相同,而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同(用花粉粒進(jìn)行組織培育得到花卉基因型不同于原植株)5.(2024·全國(guó)卷Ⅱ)eq\a\vs4\al(下圖表示通過(guò)核移植等技術(shù)獲得某種)eq\a\vs4\al(克隆哺乳動(dòng)物二倍體的流程)。易錯(cuò)探因——記憶不準(zhǔn)本題難度不大,只需精確識(shí)記細(xì)胞核移植及克隆的相關(guān)學(xué)問(wèn),把握學(xué)問(wèn)間的內(nèi)在聯(lián)系即可對(duì)本題作出正確解答,在復(fù)習(xí)時(shí)可借助流程圖精確記憶相關(guān)學(xué)問(wèn)?;卮鹣铝袉?wèn)題:(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為_(kāi)_______________。過(guò)程①表示去除細(xì)胞核,該過(guò)程一般要在卵母細(xì)胞培育至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行,去核時(shí)常采納__________的方法。②代表的過(guò)程是______________。(2)經(jīng)過(guò)多次傳代后,供體細(xì)胞中____________的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)必需關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)與克隆羊“多莉(利)”培育勝利一樣,其他克隆動(dòng)物的勝利獲得也證明白________________________________________________________________________。解析:(1)哺乳動(dòng)物的正常細(xì)胞核中性染色體的組成為XX(雌性)或XY(雄性)。卵母細(xì)胞在培育至減數(shù)其次次分裂的中期時(shí),常采納顯微操作法去除細(xì)胞核。②過(guò)程是將早期胚胎移植到代孕個(gè)體的子宮中,即代表的是胚胎移植。(2)一般來(lái)說(shuō),動(dòng)物細(xì)胞在傳代培育到10~50代時(shí),部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變更,即遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此,選材時(shí)一般選10代以內(nèi)的細(xì)胞,以保證細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)獲得的克隆動(dòng)物性狀與供體動(dòng)物基本相同,但不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析,性狀不完全相同的緣由是克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來(lái)自去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì),細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響。(4)高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的全能性受到限制,但其細(xì)胞核的全能性在卵母細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中的物質(zhì)的作用下仍能得以表達(dá),故克隆羊“多莉(利)”以及其他克隆動(dòng)物的培育勝利,證明白高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核仍具有全能性。答案:(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響(4)動(dòng)物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性[學(xué)情考情·了然于胸]一、明考情·知實(shí)力——找準(zhǔn)努力方向考查學(xué)問(wèn)1.植物組織培育的基本過(guò)程及影響因素,植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的基本過(guò)程。2.動(dòng)物細(xì)胞培育的基本過(guò)程及培育條件,動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的基本過(guò)程。3.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)及單克隆抗體制備的基本過(guò)程??疾閷?shí)力1.識(shí)記實(shí)力:主要考查對(duì)植物組織培育及植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的基本過(guò)程、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)及單克隆抗體制備技術(shù)的基本過(guò)程等的記憶。2.比較歸納實(shí)力:如比較歸納動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的異同。二、記要點(diǎn)·背術(shù)語(yǔ)——匯總本節(jié)重點(diǎn)1.植物組織培育和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)植物組織培育的基本過(guò)程eq\x(外植體)eq\o(→,\s\up7(脫分化),\s\do5())eq\x(愈傷組織)eq\o(→,\s\up7(再分化),\s\do5())eq\x(根、芽)→eq\x(植物體)(2)植物體細(xì)胞雜交的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞膜的流淌性和植物細(xì)胞的全能性,動(dòng)物細(xì)胞融合的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞膜的流淌性和細(xì)胞增殖。(3)植物體細(xì)胞雜交用到的酶是纖維素酶和果膠酶,動(dòng)物細(xì)胞培育用到的酶是胰蛋白酶或膠原蛋白酶。(4)人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法分為物理法和化學(xué)法,物理法包括離心、振動(dòng)、電激等,化學(xué)法一般是用聚乙二醇作為誘導(dǎo)劑;動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等。2.動(dòng)物細(xì)胞培育和單克隆抗體的制備(1)動(dòng)物細(xì)胞培育時(shí)選用幼齡動(dòng)物組織或胚胎進(jìn)行細(xì)胞培育,因?yàn)橛g動(dòng)物組織或胚胎的細(xì)胞分化程度低,增殖實(shí)力強(qiáng),更易于培育。(2)動(dòng)物細(xì)胞培育需滿意的條件有足夠的養(yǎng)分、相宜的溫度和pH、氣體及無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境。(3)單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可以大量制備的優(yōu)點(diǎn)。(4)在單克隆抗體制備過(guò)程中,有兩次篩選:第一次是篩選出雜交瘤細(xì)胞(用選擇培育基);其次次是進(jìn)一步篩選出能產(chǎn)生人們所須要抗體的雜交瘤細(xì)胞(用抗原—抗體結(jié)合法)。eq\a\vs4\al([課下達(dá)標(biāo)檢測(cè)])一、基礎(chǔ)題點(diǎn)練1.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述,正確的是()A.PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞,經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培育能得到優(yōu)良動(dòng)物個(gè)體B.運(yùn)用冷凍保存的正常細(xì)胞通常在10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型C.在高倍顯微鏡下視察發(fā)生基因突變的細(xì)胞比例可推知某化學(xué)藥品的毒性D.用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后,可用無(wú)菌水稀釋制成細(xì)胞懸浮液解析:選B由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制,動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞不能培育成動(dòng)物;目前運(yùn)用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常在10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型;基因突變是點(diǎn)突變,在光學(xué)顯微鏡下無(wú)法視察到;動(dòng)物細(xì)胞的培育過(guò)程是進(jìn)行細(xì)胞培育時(shí)用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時(shí)間,這樣組織就會(huì)分散成單個(gè)細(xì)胞,再用培育液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液。2.(2024·東營(yíng)質(zhì)檢)探討人員將猴胚胎細(xì)胞(a)中的細(xì)胞核取出,移植入一雌猴的去核卵母細(xì)胞(b)中,得到重組細(xì)胞(c),經(jīng)培育獲得胚胎并移植到另一雌猴(d)體內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育,獲得克隆猴(e)。下列敘述正確的是()A.e的細(xì)胞內(nèi)的全部基因都來(lái)自a,b不供應(yīng)基因B.c經(jīng)一系列增殖和分化形成e的過(guò)程中,細(xì)胞核起限制作用C.d為胚胎發(fā)育供應(yīng)遺傳物質(zhì)和其他相宜條件D.e的形成過(guò)程中沒(méi)經(jīng)過(guò)受精作用,其體細(xì)胞中無(wú)同源染色體解析:選B依據(jù)題意可知:e的細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞核基因來(lái)自a,細(xì)胞質(zhì)基因來(lái)自b;遺傳物質(zhì)主要存在于細(xì)胞核中,重組細(xì)胞c經(jīng)一系列增殖和分化形成e的過(guò)程中,細(xì)胞核起限制作用;d為胚胎發(fā)育供應(yīng)相宜條件,但不供應(yīng)遺傳物質(zhì);e的細(xì)胞核來(lái)源于a猴胚胎細(xì)胞,胚胎細(xì)胞含有同源染色體。3.如圖為煙草植物組織培育過(guò)程的流程圖。下列有關(guān)敘述正確的是()A.對(duì)過(guò)程①獲得的根組織塊應(yīng)做較徹底的滅菌處理B.過(guò)程②應(yīng)依據(jù)要求運(yùn)用相宜的培育基,在避光的環(huán)境中進(jìn)行C.過(guò)程③發(fā)生脫分化,其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)D.用人工種皮包袱X細(xì)胞可獲得煙草人工種子解析:選B對(duì)過(guò)程①獲得的根組織塊應(yīng)進(jìn)行消毒處理,假如采納滅菌技術(shù),會(huì)使根組織塊失去活力,無(wú)法進(jìn)行組織培育;過(guò)程②是脫分化形成愈傷組織的過(guò)程,須要在避光的環(huán)境中進(jìn)行;過(guò)程③發(fā)生再分化,其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá);用人工種皮包袱胚狀體可獲得煙草人工種子。4.如圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是()甲eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(注射),\s\do5()))小鼠B淋巴細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(融合),\s\do5()))乙eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(選擇),\s\do5(培育)))丙eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(篩選),\s\do5()))丁eq\a\vs4\al(\o(→,\s\up7(分泌),\s\do5()))eq\a\vs4\al(抗胃癌單,克隆抗體)A.反復(fù)給小鼠注射甲的目的是讓小鼠體內(nèi)產(chǎn)生更多的抗體B.人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙的常用方法是用滅活的病毒C.丁細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗甲抗原的抗體D.制備的單克隆抗體可以早期診斷人體胃癌的發(fā)生狀況解析:選A甲為抗原,反復(fù)給小鼠注射甲的目的是對(duì)小鼠進(jìn)行免疫,以便產(chǎn)生更多的能分泌相應(yīng)抗體的漿(B淋巴)細(xì)胞;人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的常用方法是用滅活的病毒,還可以用聚乙二醇、電激;丁細(xì)胞為篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗甲抗原的特異性抗體;單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高,可以在早期檢測(cè)出人體胃癌的發(fā)生狀況。5.如圖是“番茄—馬鈴薯”雜種植株的培育過(guò)程,其中①~⑤表示過(guò)程,字母表示細(xì)胞、組織或植株。下列相關(guān)敘述正確的是()A.過(guò)程①表示在低滲溶液中用酶解法處理植物細(xì)胞獲得原生質(zhì)體B.過(guò)程②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,主要依據(jù)細(xì)胞膜具有選擇透過(guò)性的原理C.可以依據(jù)質(zhì)壁分別現(xiàn)象鑒別雜種細(xì)胞的細(xì)胞壁是否再生D.植物有性雜交和體細(xì)胞雜交都能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙解析:選C獲得植物的原生質(zhì)體,操作一般在等滲溶液中進(jìn)行,若在低滲溶液中進(jìn)行,則去掉細(xì)胞壁的原生質(zhì)體會(huì)因吸水而漲破;過(guò)程②誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合,主要依據(jù)細(xì)胞膜具有流淌性的原理;可依據(jù)質(zhì)壁分別現(xiàn)象鑒別雜種細(xì)胞的細(xì)胞壁是否再生;植物有性雜交不能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。6.(2024·濰坊調(diào)研)為探討培育基成分對(duì)馬鈴薯葉肉原生質(zhì)體培育的影響,科學(xué)家配制了如下表所示的2種培育基,開(kāi)展了有關(guān)試驗(yàn),其他培育條件相同且相宜,試驗(yàn)結(jié)果如下圖所示,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()組別培育基培育天數(shù)甲MS培育基(含蔗糖、有機(jī)酸、無(wú)機(jī)鹽、瓊脂)7天乙纖維二糖+MS培育基(同上)7天A.本試驗(yàn)的材料可取自馬鈴薯試管苗的幼嫩葉片B.培育基中還須要添加適當(dāng)比例的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素C.制備原生質(zhì)體前需用濕熱滅菌法對(duì)酶解液進(jìn)行處理D.添加纖維二糖的作用可能是促進(jìn)細(xì)胞壁再生和細(xì)胞持續(xù)分裂生長(zhǎng)解析:選C本試驗(yàn)的材料可取自馬鈴薯試管苗的幼嫩葉片;在植物組織培育過(guò)程須要加入植物激素,生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值低時(shí),有利于芽的分化,反之則利于根的分化;用濕熱滅菌法對(duì)酶解液進(jìn)行處理,會(huì)導(dǎo)致酶丟失活性,使試驗(yàn)失??;據(jù)圖分析可知,假如在培育基中加入纖維二糖后細(xì)胞的出芽率明顯降低,細(xì)胞的分裂率明顯上升,所以添加纖維二糖的作用可能是促進(jìn)細(xì)胞壁再生和細(xì)胞持續(xù)分裂生長(zhǎng)。二、高考題型練7.紫杉醇是一種具有抗癌活性的化合物,為了快速高效地分別、純化紫杉醇,試驗(yàn)小組以紫杉醇為抗原免疫小鼠,取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合,并經(jīng)過(guò)篩選獲得能穩(wěn)定分泌紫杉醇單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,回答下列問(wèn)題:(1)紫杉醇單克隆抗體的獲得所涉及的生物技術(shù)手段有____________________________________,該實(shí)例說(shuō)明單克隆抗體具有________________的優(yōu)點(diǎn)。(2)免疫小鼠和骨髓瘤細(xì)胞融合后產(chǎn)生多種雜交細(xì)胞,為了獲得雜交瘤細(xì)胞應(yīng)用特定的________________進(jìn)行篩選,然后通過(guò)專(zhuān)一抗體檢測(cè)陽(yáng)性和克隆化培育獲得__________________________________的雜交瘤細(xì)胞。(3)若要體內(nèi)培育雜交瘤細(xì)胞,可將雜交瘤細(xì)胞注入小鼠的________,若要在體外培育液中培育雜交瘤細(xì)胞,須要將培育液放置在95%的空氣和5%的CO2培育箱中培育,其中CO2的作用是________________。(4)紫杉醇是紅豆杉產(chǎn)生的一種代謝產(chǎn)物,欲利用植物組織培育獲得大量的紫杉醇,應(yīng)將紅豆杉的外植體培育到________________________________________階段,緣由是________________________________________________________________________。解析:(1)取免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合,采納的是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù),在融合前和篩選雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程中均須要采納動(dòng)物細(xì)胞培育技術(shù)來(lái)培育相應(yīng)的細(xì)胞。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)。(2)制備單克隆抗體的過(guò)程中至少須要兩次對(duì)細(xì)胞進(jìn)行篩選:第一次是在特定的選擇培育基上,將雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái);由于篩選出的雜交瘤細(xì)胞有許多種,因此其次次篩選的目的是通過(guò)專(zhuān)一抗體檢測(cè)陽(yáng)性和克隆化培育,從許多種雜交瘤細(xì)胞中將既能大量增殖、又能產(chǎn)生抗紫杉醇的抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來(lái)。(3)最終篩選出來(lái)的雜交瘤細(xì)胞,可以將其注射到小鼠腹腔內(nèi)進(jìn)行體內(nèi)培育,也可以在體外培育液中進(jìn)行大規(guī)模培育。后者須要將培育液放置在95%的空氣和5%的CO2培育箱中培育,其中CO2的作用是維持培育液的pH。(4)紫杉醇是紅豆杉產(chǎn)生的一種代謝產(chǎn)物。由于愈傷組織的細(xì)胞分裂快、代謝旺盛,所以欲利用植物組織培育獲得大量的紫杉醇,應(yīng)將紅豆杉的外植體培育到愈傷組織階段。答案:(1)動(dòng)物細(xì)胞培育和動(dòng)物細(xì)胞融合特異性強(qiáng)、靈敏度高(2)選擇培育基既能大量增殖,又能產(chǎn)生抗紫杉醇的抗體(3)腹腔維持培育液的pH(4)愈傷組織愈傷組織的細(xì)胞分裂快、代謝旺盛8.下面為菊花植株繁殖的示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:(1)菊花的培育過(guò)程證明白植物細(xì)胞具有________,這個(gè)特性是植物組織培育的理論基礎(chǔ),該過(guò)程須要在________條件下進(jìn)行,并需限制溫度、pH和光照等條件。(2)培育過(guò)程中,為誘導(dǎo)愈傷組織形成根或芽等器官,培育基中要添加植物激素,主要是________________等,主要調(diào)整細(xì)胞的________________。(3)從單個(gè)細(xì)胞到愈傷組織的過(guò)程中,細(xì)胞進(jìn)行了________。(4)假設(shè)A試管內(nèi)是某植物的花粉,則培育出的植株稱(chēng)為單倍體植株,這些植株高度不育,所以必需用______________處理才能獲得志向的可育植株。解析:(1)圖示菊花的繁殖過(guò)程屬于植物組織培育,原理是植物細(xì)胞的全能性;該過(guò)程需在無(wú)菌條件下進(jìn)行,并需限制溫度、pH和光照條件。(2)在植物組織培育過(guò)程中,植物激素中的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。(3)菊花組織培育過(guò)程中,外植體的單個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分化形成愈傷組織。(4)花粉經(jīng)過(guò)組織培育形成的植株為單倍體植株,用秋水仙素處理使染色體加倍才能獲得志向的可育植株。答案:(1)全能性無(wú)菌(2)生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素分裂和分化(3)脫分化(4)秋水仙素9.如圖是科學(xué)家利用小鼠成纖維細(xì)胞獲得單克隆抗體的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)獲得轉(zhuǎn)錄因子基因須要的工具酶是____________,因成纖維細(xì)胞較小,過(guò)程①將目的基因?qū)胄∈蟪衫w維細(xì)胞時(shí)常用的運(yùn)載體是____________。(2)過(guò)程②稱(chēng)為_(kāi)___________,在此過(guò)程中,成纖維細(xì)胞在轉(zhuǎn)錄因子基因的作用下,轉(zhuǎn)化為iPS胚性細(xì)胞,在體外培育條件下,iPS胚性細(xì)胞能不斷進(jìn)行________________。(3)過(guò)程③為動(dòng)物細(xì)胞融合,此過(guò)程常用________、滅活病毒、電激等誘導(dǎo)細(xì)胞融合,融合后的Y細(xì)胞具有____________________________的特性。(4)對(duì)雜種細(xì)胞Y進(jìn)行________________和________________后,才能篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜種細(xì)胞。解析:(1)獲得轉(zhuǎn)錄因子基因須要的工具酶是限制酶,因成纖維細(xì)胞較小,過(guò)程①將目的基因?qū)胄∈蟪衫w維細(xì)胞時(shí)常用的運(yùn)載體是動(dòng)物病毒。(2)過(guò)程②稱(chēng)為動(dòng)物細(xì)胞培育,在體外培育條件下,iPS胚性細(xì)胞能不斷進(jìn)行細(xì)胞分裂。(3)過(guò)程③為動(dòng)物細(xì)胞融合,此過(guò)程常用聚乙二醇(PEG)、滅活病毒、電激等誘導(dǎo)細(xì)胞融合,融合后的Y細(xì)胞具有既能大量增殖,又能產(chǎn)生單一抗體的特性。(4)雜種細(xì)胞經(jīng)過(guò)克隆化培育,并經(jīng)抗原—抗體檢測(cè)后,培育能產(chǎn)生特定抗體的雜種細(xì)胞即可制備單克隆抗體。答案:(1)限制酶動(dòng)物病毒(2)動(dòng)物細(xì)胞培育細(xì)胞增殖(細(xì)胞分裂)(3)聚乙二醇(PEG)既能大量增殖,又能產(chǎn)生單一抗體(4)克隆化培育抗原—抗體檢測(cè)10.(2024·菏澤月考)如圖為番茄—馬鈴薯植株的栽培過(guò)程示意圖,據(jù)圖回答:(1)該栽培過(guò)程屬于植物細(xì)胞工程中的____________技術(shù),這一技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是可以________________________________________________________________________。(2)①②過(guò)程用到的酶是______________。在③過(guò)程中,常用的化學(xué)方法一般是用____________誘導(dǎo)融合,細(xì)胞融合完成的標(biāo)記是______________________。(3)該過(guò)程除了必要的養(yǎng)分和相宜的培育條件,還必需有植物激素以促進(jìn)其完成⑤⑥過(guò)程,其中激素主要是指________________。若要誘導(dǎo)根原基的形成,應(yīng)當(dāng)適當(dāng)增加____________(植物激素)的含量。另外整個(gè)過(guò)程須要在________條件下操作。(4)若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體,馬鈴薯細(xì)胞內(nèi)有n條染色體,則“番茄—馬鈴薯”細(xì)胞在有絲分裂后期含________條染色體。解析:(1)圖示表示植物體細(xì)胞雜交過(guò)程,其優(yōu)點(diǎn)是能夠克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。(2)①②過(guò)程表示利用酶解法去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁,細(xì)胞壁的成分為纖維素和果膠,因此依據(jù)酶的專(zhuān)一性,應(yīng)運(yùn)用纖維素酶和果膠酶。③表示原生質(zhì)體融合,在③過(guò)程中,常用的化學(xué)方法是用PEG(或聚乙二醇)試劑誘導(dǎo)融合。細(xì)胞融合完成的標(biāo)記是雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁。(3)⑤⑥表示植物組織培育的脫分化和再分化過(guò)程,該過(guò)程除了必要的養(yǎng)分和相宜的培育條件,還必需有生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素,若要誘導(dǎo)根原基的形成,應(yīng)當(dāng)適當(dāng)增加生長(zhǎng)素的含量。另外整個(gè)過(guò)程須要在無(wú)菌條件下操作。(4)雜種細(xì)胞的染色體數(shù)為融合前兩種細(xì)胞染色體數(shù)之和,即(m+n),細(xì)胞有絲分裂后期由于著絲點(diǎn)分裂導(dǎo)致姐妹染色單體分開(kāi),使得雜種細(xì)胞中的染色體數(shù)目加倍為2(m+n)。答案:(1)植物體細(xì)胞雜交克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(2)纖維素酶和果膠酶聚乙二醇(或PEG)雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁(3)生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素生長(zhǎng)素?zé)o菌(4)2(m+n)11.下列是利用生物學(xué)技術(shù)制備抗體的兩個(gè)途徑模式簡(jiǎn)圖。據(jù)圖完成有關(guān)問(wèn)題:(1)上述制備抗體1和
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