DB36-T1742-2023-大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程-江西省

ICS65.020.20DB36CCSB30江西省地方標(biāo)準(zhǔn)DB36/T1742—2023大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程Technicalregulationsofspawnproductionforstrophararugosoannulata江西省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB36/T1742—2023目次前言................................................................................II范圍..............................................................................12規(guī)范性引用文件....................................................................1134術(shù)語和定義........................................................................1菌種生產(chǎn)場地要求..................................................................15菌種生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備要求..............................................................16母種制作..........................................................................27原種制作..........................................................................28栽培種制作........................................................................39標(biāo)簽、標(biāo)志、貯存和留樣............................................................4IDB36/T1742—2023前言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由江西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)應(yīng)用微生物研究所、江西農(nóng)業(yè)大學(xué)、江西省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心、江西生物科技職業(yè)學(xué)院、江西省中小企業(yè)發(fā)展促進中心。本文件起草人：陳緒濤、魏云輝、龔正、馮艷、魏楨、胡文君、熊澤亞、孫鵬、戴建成、彭新紅、胡佳、戴丹、王振、李菁。IIDB36/T1742—2023大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程1范圍本文件規(guī)定了大球蓋菇菌種生產(chǎn)的范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、菌種生產(chǎn)場地要求、菌種生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備要求、母種制作、原種制作、栽培種制作及標(biāo)簽、標(biāo)志、貯存和留樣等技術(shù)要求。本文件適用于各級大球蓋菇菌種生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB191包裝儲運圖示標(biāo)志GB4806.7食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品接觸用塑料材料及制品GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程NY/T1935食用菌栽培基質(zhì)質(zhì)量安全要求3術(shù)語和定義大球蓋菇Strophariarugosoannulata隸屬于傘菌綱Agaricomycetes、傘菌目Agaricales、球蓋菇科Strophariaceae，是一種可食用的大4菌種生產(chǎn)場地要求選擇地勢高燥，通風(fēng)良好，排水暢通，交通便利的場地。要求300m內(nèi)無畜牧舍、垃圾場、食用菌5菌種生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備要求各級菌種生產(chǎn)有各自隔離的原材料庫、配料分裝室、滅菌室、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室、儲存室、菌種檢驗室等設(shè)施。有磅秤、天平、高壓滅菌鍋、凈化工作臺或接種箱、調(diào)溫設(shè)備、除濕設(shè)備、培養(yǎng)架、恒溫箱或培養(yǎng)室、冰箱或冷庫等常規(guī)設(shè)備。菌種生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備應(yīng)符合NY/T528的規(guī)定。1DB36/T1742—20236母種制作6.1容器規(guī)格使用玻璃試管或培養(yǎng)皿。試管的規(guī)格宜為18mm×180mm或20mm×200mm，培養(yǎng)皿的規(guī)格宜為直徑70mm～90mm，錐形瓶規(guī)格宜為250mL～500mL。試管塞宜用硅膠塞。6.2培養(yǎng)基配方馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH自然。6.3培養(yǎng)基分裝和滅菌培養(yǎng)基配制后應(yīng)在4h內(nèi)進鍋滅菌。6.3.1斜面分裝和滅菌分裝培養(yǎng)基至試管長度的1/4~2/5處，用硅膠塞封口，每10只試管為1把，牛皮紙包裹硅膠塞，扎緊，試管口朝上放置，在121℃～123℃(0.10MPa～0.12MPa)滅菌30min。滅菌結(jié)束后溫度降至65℃±5℃時，在潔凈的環(huán)境中擺斜面，要求斜面長度不超過試管長度的2/3。6.3.2培養(yǎng)皿分裝和滅菌培養(yǎng)基裝入錐形瓶最大刻度的2/3處，用封口膜或硅膠塞封口，在121℃～123℃(0.10MPa～0.12MPa)滅菌30min。滅菌結(jié)束后溫度降至65℃±5℃時，在超凈工作臺內(nèi)將錐形瓶中的培養(yǎng)基分裝至無菌培養(yǎng)皿高度的1/3～1/2處。試管斜面或平板冷卻凝固后，按照無菌操作在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，將菌種接種在試管或培養(yǎng)皿培養(yǎng)基的中部，封口做好標(biāo)記。接種好的試管或培養(yǎng)皿放置24℃～26℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，定期檢查，及時挑出有雜菌污染的大球蓋菇菌種。菌絲長滿2/3時放入4℃冰箱備用。7選擇容積750mL（口徑4.5cm×高度18cm×底徑8.5cm）的帶蓋聚丙烯塑料瓶，瓶蓋帶有透氣棉，2DB36/T1742—20237.2.2原材料要求干燥、新鮮、無霉變，其中木屑不能為松樹、杉樹和樟樹等芳香氣味的樹種。原材料應(yīng)符合NY/T1935的要求。生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749的要求。7.3裝瓶滅菌培養(yǎng)料按配方配制后，裝入菌種瓶的2/3處，壓實，旋緊瓶蓋，立即進鍋滅菌，121℃～123℃（0.10MPa～0.12MPa）滅菌2h，自然降溫。7.4接種料溫冷卻至28℃以下，按照無菌操作在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，每瓶接入2cm～3cm大小母種1～2塊，做好標(biāo)記。7.5培養(yǎng)將接好母種的菌種瓶放置24℃～26℃恒溫避光的培養(yǎng)室中培養(yǎng)，菌絲快要長滿菌種瓶時，將培養(yǎng)溫度降低至22℃左右。培養(yǎng)過程中定期檢查，及時挑出污染的大球蓋菇菌種。8栽培種制作8.1菌袋規(guī)格選擇12cm×24cm的聚丙烯塑料袋，聚丙烯材質(zhì)的子母套環(huán)（直徑4.5cm）進行封口，菌袋材質(zhì)應(yīng)符合GB4806.7的規(guī)定。配方一：闊葉樹木屑65%，牛糞15%，谷殼15%，豆粕3%，石灰1%，石膏1%，含水量65%±2%。配方二：玉米芯50%，闊葉樹木屑48%，石灰1%，石膏1%，含水量65%±2%；配方三：闊葉樹木屑78%，谷殼10%，豆粕10%，石灰1%，石膏1%，含水量65%±2%；8.2.2原材料要求干燥、新鮮、無霉變，其中木屑不能為松樹、杉樹和樟樹等芳香氣味的樹種。原材料應(yīng)符合NY/T1935的要求。生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749的要求。配制好的培養(yǎng)料按以下步驟進行發(fā)酵。a)將培養(yǎng)料混合均勻，堆成寬2.0m～2.5m、高1.2m～1.5m、長度不限的料堆，料堆堆好后，從料堆頂部至底部自上而下用木棍打2排孔徑10cm左右的通氣孔；b)當(dāng)料堆溫度達到60°C保持2d～3d后翻堆，翻堆時將外層低溫料層翻到內(nèi)層，把內(nèi)層高溫料層翻到外層，重新建堆和打通氣孔；c)當(dāng)料溫再次達到60°C后保持2d~3d，在發(fā)酵過程中翻堆2～3次；d)發(fā)酵好的培養(yǎng)料含水量適中、質(zhì)地松軟且無酸臭氨氣味，培養(yǎng)料發(fā)酵好后及時散堆降溫，備用。發(fā)酵好的培養(yǎng)料裝入菌袋的2/3處，壓實，套上子母套環(huán)，立即進鍋滅菌，121℃～123℃(0.10MPa～0.12MPa)滅菌2h，自然降溫。3DB36/T1742—2023料溫冷卻至28℃以下，按照無菌操作在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，每個栽培種菌包接入原種量≥15g，做好標(biāo)記。8.6培養(yǎng)將栽培種菌包放置20℃～22℃恒溫培養(yǎng)室培養(yǎng)，菌絲快要長滿菌袋時，將培養(yǎng)溫度降低至18℃。培養(yǎng)過程中定期檢查，及時挑出污染的大球蓋菇菌種。9標(biāo)簽、標(biāo)志、貯存和留樣9.1標(biāo)簽、標(biāo)志大球蓋菇菌種應(yīng)貼標(biāo)簽。注明菌種種類、品種、級別、接種日期、生產(chǎn)單位、地址電話等。外包裝上應(yīng)有防曬、防潮、防倒立、防高溫、防雨、防重壓等標(biāo)志，標(biāo)志應(yīng)符合GB191的規(guī)定。