TCACM1326.33-2019假鷹爪種子超低溫保存技術(shù)規(guī)程VIP

ICSC T/CACM1326.33—TechnicalcodeofpracticeforcryopreservationofDesmoschinensis 中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)T/CACMT/CACM1326.33—目前 活 附錄A（規(guī)范性附錄）試劑的配制和保存方 前——T/CACM1326.1——T/CACM1326.2——T/CACM1326.3——T/CACM1326.4——T/CACM1326.5——T/CACM1326.6——T/CACM1326.7——T/CACM1326.8——T/CACM1326.9——T/CACM1326.10GB/T1.1－2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》給出的規(guī)則起草。T/CACMT/CACM1326.33—本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了假鷹爪（Desmoschinensis）種子超低溫保存過程中的術(shù)語(yǔ)和定義、種子的選擇、GB/T3543.6假鷹爪Desmos為番荔枝科（Annonaceae）假鷹爪屬（DesmosLour.）灌木，在我國(guó)南部山丘上常見，花美麗，假鷹爪果實(shí)Desmoschinensis內(nèi)有種子1～7顆。假鷹爪種子Desmoschinensisseedof℃月4（2）法測(cè)定假鷹爪種子生活力。待測(cè)種子在30℃～35℃溫水中浸種2h，隨后取吸脹種子20粒，整齊地埋于備好的1.5％BTB瓊脂凝膠中，注意要將胚埋入凝膠中。將培養(yǎng)皿置于35℃溫箱中26hBTBAA.1≥50??

×100%?????????????????（1）用尼龍網(wǎng)袋包裹假鷹爪種子，置于盛有變色硅膠的干燥器內(nèi)，硅膠與種子的體積比為60：1，室溫條件下干燥處理0h～22h，在干燥過程可定期測(cè)定種子含水量，將種子含水量由15％～20％降至14％～15％。

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×100%……….900假鷹爪種子超低溫保存的冷凍方式為玻璃化冷凍法，即將裝有種子的5mL（每管45種子）置于裝載液（LS）中并于25℃處理種子20min，再用玻璃化保護(hù)溶液（PVS2）冰浴處理種子30min，換上預(yù)冷新鮮的PVS2后迅速投入液氮中進(jìn)行超低溫保存。LSPVS2AA.2A.324h2402min洗滌液（DS）15min3DSAA.4取出1管解凍后的種子，按照5.1活力檢測(cè)方法，進(jìn)行超低溫保存后的初始生活力檢測(cè)。當(dāng)種子生活力≥20％時(shí)視為保存成功。將剩下1管解凍后的假鷹爪種子，播種到帶有無菌濾紙的帶蓋發(fā)芽盒中，溫度25℃～30℃，濕度70％～85％條件下培養(yǎng)。附錄BTB精密稱取BTB0.1g，溶解于煮沸過的100mL純水中，然后用濾紙去殘?jiān)?。濾液若呈黃色，可1.5BTB0.1BTB40mL0.5g加入杯中，加熱并不斷攪拌使之完全溶解。待溶液稍稍冷卻即可趁熱倒入9cm培養(yǎng)皿中，使之成一13.7g11.9mLMSpH5.8100mL，高溫高壓滅菌，4℃冷藏。23.8mL13.6mL13.6mL13.7gMS中，調(diào)pH至5.8后，定容至100mL，高溫高壓滅菌，4℃冷藏。精密稱取蔗糖41.1gMS溶液中，調(diào)pH至5.8后，定容至100mL，高溫高壓滅菌，4℃LiPing-tao,MichaelG.Gilbert.Annonaceae[M]//FloraOfChinaBeijing:SciencePress/St.Louis:MissouriBotanicalGardenPress.2011.19:681-682.中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植