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文檔簡介

,微生物學(xué)實驗,實驗八 微生物檢測,學(xué)習(xí)平板菌落計數(shù)法。,實驗?zāi)康?實驗原理,1編號 取無菌平皿9個，分別用記號筆標(biāo)明10-4、10-5、10-6（稀釋度）各三套。另取6支試管，加入9ml無菌水，依次標(biāo)明10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。 2稀釋 水樣：用1ml無菌試管吸取1ml樣品精確加入加有9ml無菌水的10-1的試管中，此即為10倍稀釋。將10-1試管振蕩，使其充分混勻。用另一吸管吸取10-1菌液1ml，精確加入0.5ml至10-2試管中，此即為100倍稀釋。其余10-3、10-4、10-5、10-6依次類推。 固體樣品：準(zhǔn)確稱取10g上午膜樣，加入90ml無菌水中，充分混勻后即為10倍稀釋。將10-1試管振蕩，使其充分混勻。用另一吸管吸取10-1稀釋液1ml，精確加入0.5ml至10-2試管中，此即為100倍稀釋。其余10-3、10-4、10-5、10-6依次類推。,三.實驗步驟,3加樣倒平板： 用不同的滅菌吸管分別吸取10-4、10-5、10-6稀釋液1ml，分別注入3個滅菌培養(yǎng)皿中。分別立即傾注約15ml已熔化并冷卻到45左右的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，并立即在桌面上作平面旋搖，使水樣與培養(yǎng)基充分混勻（每稀釋度做3個）。另取一空的滅菌培養(yǎng)皿，傾注牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基15ml，做空白對照。培養(yǎng)基凝固后，倒置于37溫箱中培養(yǎng)。,三.實驗步驟,4計數(shù) 培養(yǎng)24-48h后，取出培養(yǎng)平板，并按下列公式進行計算： 每毫升中菌落形成單位（cfu）=同一稀釋度的平均菌落數(shù)x稀釋倍數(shù) 注： 一般選擇每個平板上長有30-300個菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較適宜。,三.實驗步驟,三作業(yè)： 計算菌體含量

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