DB33T 400.1-2003 無公害食品竹蓀 第1部分：菌種.docVIP

DB33400.12003無公害食品 竹蓀第1部分：菌種 1 范圍本部分規(guī)定了竹蓀的母種、原種、栽培種的要求，試驗(yàn)方法、檢驗(yàn)規(guī)則、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸、儲存。本部分適用于長裙竹蓀菌種生產(chǎn)和銷售。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵根據(jù)本部分達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本部分。GB/T 1912000 包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志GB/T 63881986 運(yùn)輸包裝收發(fā)貨標(biāo)志GB/T 127281991 食用菌術(shù)語GB 15569 農(nóng)業(yè)植物調(diào)運(yùn)檢疫規(guī)程N(yùn)Y 5099 無公害食品食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求。3 術(shù)語和定義 GBT 127281991和附錄A（規(guī)范性附錄）確立的術(shù)語和定義適用于本部分。4 要求4.1 制種要求4.1.1 母種（一級種）制作4.1.1.1 種菇要求 1DB33400.12003種菇由取得母種（一級種）生產(chǎn)許可證單位制作，并應(yīng)滿足下述要求：a) 無病蟲害，菌蕾整齊、均勻；b) 以菌蕾作為分離材料，菌蕾白色至粉紅色；c) 菌蕾達(dá)到八、九分成熟。4.1.1.2 培養(yǎng)基采用馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基（PDA）或改良馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基（改良PDA），配方見附錄B（資料性附錄）。4.1.1.3 培養(yǎng)基制作將去皮馬鈴薯切片置容器內(nèi)加水1000mL，煮沸15min，過濾，加入瓊脂，補(bǔ)足水至1000mL，繼續(xù)加熱溶解；待瓊脂溶解后，加入葡萄糖攪拌，用分裝器裝入試管中，裝量為試管長的15，塞上棉塞。置滅菌鍋中，在0.15MPa（1.5kgcm2）壓力下滅菌15min，將試管趁熱排放在斜面板上自然冷卻。4.1.1.4 組織分離與純化在無菌條件下切取菌蕾其內(nèi)部菌柄尖端處直徑2mm3mm的組織塊，接種到斜面培養(yǎng)基上，在2325條件下培養(yǎng)25d35d，見菌絲長滿斜面即進(jìn)行菌絲純化。4.1.1.5 轉(zhuǎn)管擴(kuò)繁經(jīng)出菇鑒定合格的母種，在無菌條件下以1:20進(jìn)行轉(zhuǎn)管，置2325環(huán)境中培養(yǎng)，菌絲滿管后，供擴(kuò)制原種用，對暫不使用的母種貼好標(biāo)簽，置57環(huán)境中保存，一般擴(kuò)繁3次5次。4.1.2 原種、栽培種制作4.1.2.1 培養(yǎng)基采用木屑培養(yǎng)基，配方見附錄B（資料性附錄）。4.1.2.2 裝料2 DB33400.12003將培養(yǎng)料拌勻，原種裝入菌種瓶中，至瓶45處，上緊下松，料面壓平壓實(shí)，用符合NY 5099規(guī)定的生活飲用水洗凈瓶身和瓶口，擦干瓶口后，套好頸圈（套環(huán)）用棉塞封口并包扎牛皮紙，或其他能滿足正常發(fā)菌的材料封口。將培養(yǎng)料拌勻，栽培種裝入菌種袋中，至袋45處，上緊下松，料面壓平壓實(shí)，用清水洗凈袋身和袋口，擦干袋口后，套好頸圈（套環(huán)）用棉塞封口并包扎牛皮紙，或其他能滿足正常發(fā)菌的材料封口。4.1.2.3 滅菌在0.15MPa（1.5kgcm2）壓力下滅菌3h。4.1.2.4 接種培養(yǎng)料冷卻至28以下，在無菌條件下接種，每支母種接6瓶7瓶原種；每瓶原種接45袋50袋栽培種。4.1.2.5 培養(yǎng)培養(yǎng)應(yīng)符合以下要求:a)培養(yǎng)室事先應(yīng)經(jīng)過環(huán)境凈化，應(yīng)清潔、干燥、通風(fēng)、遮光。 b)室內(nèi)溫度保持在2025，空氣相對濕度6570，菌絲長滿袋（瓶），約培養(yǎng)39d42d。4.1.2.6 檢查接種后10d進(jìn)行第一次檢查，以后每隔10d檢查一次，剔除不合格菌種。4.2 容器4.2.1 母種采用18mm180mm或20mm200mm的玻璃試管。4.2.2 原種采用750mL菌種瓶，栽培種采用12cm24cm高壓聚丙烯塑料袋。4.2.3 采用棉塞或其它能滿足正常發(fā)菌要求的材料進(jìn)行容器封口。 3DB33400.120034.3 質(zhì)量要求菌種質(zhì)量應(yīng)符合表1要求。表1 菌種質(zhì)量要求 項(xiàng) 目 母 種原種、栽培種菌絲狀態(tài)菌絲白色呈絨毛狀，菌絲繼發(fā)成線狀，有分枝，最后密集，由無數(shù)纖細(xì)的菌絲膨大交錯聚集紐結(jié)而成菌索。菌絲白色呈絨毛狀，菌絲繼發(fā)成線狀，有分枝，最后密集，由無數(shù)纖細(xì)的菌絲膨大交錯聚集紐結(jié)而成菌索。 害 蟲無無雜 菌無無積 水無無菌絲自溶無無原 基無無菌 皮無無或離瓶（袋）口15處上部有脫 壁無無發(fā)菌程度菌絲占斜面23以上菌絲發(fā)到底高 溫 圈不作要求無吐 黃 水無無5 試驗(yàn)方法 用目測，如目測不能確定的，再進(jìn)行鏡檢。6 檢驗(yàn)規(guī)則6.1 抽樣6.1.1 母種、原種逐支逐瓶檢查。6.1.2 栽培種以同一時間，同一種源，同一制作方法，同一培養(yǎng)條件為一批。 按批量的1隨機(jī)抽樣，但試樣數(shù)最少不應(yīng)少于20瓶。6.2 合格判定同一樣品中，按表1指標(biāo)有一項(xiàng)不合格，判該樣品不合格。根據(jù)栽培種檢驗(yàn)結(jié)果，計(jì)算出樣本中的合格數(shù)和不合格數(shù)。當(dāng)不合格數(shù)5時，判該批為合格；當(dāng)不合格數(shù) 4DB33 400.120035時，判該批不合格。對不合格批可作必要的技術(shù)處理后，按6.1.2重新抽樣檢驗(yàn)。6.3 合格證簽發(fā)和質(zhì)量仲裁6.3.1 菌種生產(chǎn)單位應(yīng)對菌種質(zhì)量進(jìn)行檢驗(yàn)，并簽發(fā)菌種質(zhì)量合格證，禁止不合格菌種出售。6.3.2 需方對質(zhì)量有異議時，雙方協(xié)商解決或由菌種管理部門進(jìn)行仲裁。7 標(biāo)志、標(biāo)簽7.1 出售的各級菌種應(yīng)逐瓶（支、袋）貼上標(biāo)簽，標(biāo)簽應(yīng)標(biāo)明下述內(nèi)容:a) 菌種名稱、級別；b) 生產(chǎn)許可證號；c) 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)號；d) 生產(chǎn)單位名稱、地址及商標(biāo)；e) 接種日期、有效期限。7.2 運(yùn)輸包裝箱外應(yīng)有清晰、牢固的標(biāo)志。應(yīng)標(biāo)明菌種名稱、生產(chǎn)日期、保質(zhì)期、生產(chǎn)企業(yè)名稱?！芭聲瘛?、“怕雨”、“易碎物品”、“向上”標(biāo)志應(yīng)符合GB/T 1912000的規(guī)定。運(yùn)輸包裝收發(fā)貨標(biāo)志應(yīng)符合GB/T 63881986的規(guī)定 。8 包裝、運(yùn)輸、保存8.1 包裝母種用試管盛裝，原種玻璃瓶盛裝，栽培種用塑料袋盛裝，運(yùn)輸箱用瓦楞紙箱包裝。8.2 運(yùn)輸8.2.1 向外調(diào)運(yùn)的菌種，應(yīng)按GB 15569進(jìn)行檢疫，辦理植物檢疫證書。8.2.2 各級菌種不得在28以上環(huán)境中運(yùn)輸。8.2.3 裝車后應(yīng)及時啟運(yùn)，在運(yùn)輸中應(yīng)有防震、防曬、防潮、防污染措施。8.3 保存8.3.1 母種一般在冰箱中保藏，保存溫度15，保存期三個月，超過保存期，則應(yīng)轉(zhuǎn)管復(fù)壯。8.3.2 原種、栽培種應(yīng)在空氣相對濕度5565，溫度518，干燥、通風(fēng)、清潔、避光的室內(nèi)保存，保存時間不應(yīng)超過三個月。 5DB33400.12003附錄A（規(guī)范性附錄）術(shù)語和定義A.1 竹蓀 竹蓀又稱竹參、竹笙、面紗菌、網(wǎng)紗菌、竹菇娘。子實(shí)體單生或群生，由菌蓋、菌裙、菌柄、菌托四部分組成。A.2 母種（一級種）由孢子或子實(shí)體組織、菇基質(zhì)菌絲分率純化后并在專用培養(yǎng)基上繁殖的轉(zhuǎn)管擴(kuò)繁35次以內(nèi)的菌種。A.3 原種（二級種）由母種移植到專用培養(yǎng)基上繁殖的菌種。A.4 栽培種由原種移植到培養(yǎng)基上進(jìn)行擴(kuò)大繁殖的菌種。A.5 雜菌除培養(yǎng)菌以外的其他微生物。A.6 原基尚未分化的子實(shí)體原始階段。A.7 菌絲構(gòu)成真菌菌絲絲狀體的絲狀單元，由孢子或組織萌發(fā)而成。A.8 菌齡一般指菌絲在培養(yǎng)基物中的生長發(fā)育時間。A.9 接種將菌種移植在培養(yǎng)基物中的過程。A.10 培養(yǎng)基培養(yǎng)物生產(chǎn)所需要營養(yǎng)物質(zhì)的液體或固體混合物。 6DB33 400.12003A.11 吐黃水菌種培養(yǎng)期間，菌齡過長或高溫影響，導(dǎo)致生理老化，菌絲解體而產(chǎn)生黃色代謝液。A.12 無菌不含活雜菌的狀態(tài)。A.13 滅菌采用物理或化學(xué)方法殺滅培養(yǎng)基物中一切微生物的方法。A.14 粉孢子一種薄壁的無性孢子。通常由菌絲直接斷裂而成。A.15 菌絲自溶菌齡過長，或高溫影響，導(dǎo)致生理老化，菌絲解體而產(chǎn)生黃色代謝液的現(xiàn)象。A.16 積水培養(yǎng)基含水量過高而導(dǎo)致容器內(nèi)有游離水。A.17 菌皮菌絲在基質(zhì)表面形成的膜狀物。A.18 脫壁因菌齡過長或其他非侵染性因子導(dǎo)致的菌絲體萎縮，色澤變暗，培養(yǎng)基收縮與培養(yǎng)器具之間產(chǎn)生空隙現(xiàn)象。A.19 高溫圈由高溫導(dǎo)致菌絲生長不良形成圈狀發(fā)黃或變暗的菌絲圈。A.20 菌索又稱根狀菌索，某些真菌菌絲集結(jié)而成的繩索狀結(jié)構(gòu)。7DB33 400.12003 附錄B（資料性附錄）培養(yǎng)基配方B.1 母種培養(yǎng)基配方B.1.1 PD