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腦脊液檢驗(yàn),1,腦脊液檢驗(yàn),腦脊液(cerebrospinal,CSF)是存在于腦室及蛛網(wǎng)膜下腔中的無色透明液體。 正常成年人CSF總量為120180ml,平均150ml。 CSF的主要功能:保護(hù)腦和脊髓免受外力震蕩損傷;調(diào)節(jié)顱內(nèi)壓力;提供中樞神經(jīng)系統(tǒng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并運(yùn)出其代謝產(chǎn)物;保持中樞神經(jīng)系統(tǒng)pH在7.31-7.34;通過轉(zhuǎn)運(yùn)生物胺類物質(zhì),參與神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)節(jié)。,2,.,標(biāo)本采集,適應(yīng)癥 1 有腦膜刺激癥狀時(shí),如腦膜感染性疾病。 2 疑有顱內(nèi)出血,如蛛網(wǎng)膜下腔出血。 3 中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。 4 不明原因的劇烈頭痛昏迷抽搐或癱瘓。 5 中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病需椎管內(nèi)給藥治療及手術(shù)前麻醉造影等。,3,.,標(biāo)本采集,腰椎穿刺采集,特殊情況下可由小腦延髓池或側(cè)腦室穿刺獲取。 穿刺成功后先作壓力測(cè)定,正常人80-180mmH2O,200mmH2O表示顱壓增高,此時(shí)放出CSF的量應(yīng)控制在2ml以內(nèi)。 測(cè)定壓力后將CSF收集于3支無菌試管中,每管12ml。第1管作細(xì)菌培養(yǎng),第2管作化學(xué)檢查和免疫學(xué)檢查,第3管作理學(xué)及顯微鏡檢查,如疑有惡性腫瘤,取第4管作脫落細(xì)胞學(xué)檢查。,4,.,立即送檢 放置過久,細(xì)胞破壞或細(xì)胞包裹于纖維蛋白凝塊中導(dǎo)致細(xì)胞數(shù)降低及分類不準(zhǔn); 葡萄糖分解,使葡萄糖測(cè)定結(jié)果降低; 細(xì)菌自溶或死亡,影響細(xì)菌檢出率。,5,.,腦脊液常規(guī)檢查,內(nèi)容包括:顏色、性狀、潘氏試驗(yàn)、細(xì)胞計(jì)數(shù)(指白細(xì)胞計(jì)數(shù)) 、細(xì)胞分類(指白細(xì)胞分類)。,6,.,1 顏色,正常情況下,腦脊液呈無色。病理情況下可有不同的顏色改變。 紅色 常見于穿刺損傷或出血性病變。 穿刺損傷引起的出血,第1管為紅色血性,第23管紅色逐漸變淡,紅細(xì)胞計(jì)數(shù)依次減少,離心沉淀后上清液透明。 顱內(nèi)或椎管內(nèi)新鮮出血,3管均呈紅色,紅細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯差別,離心沉淀后上清液呈淡紅色或黃色。 由于紅細(xì)胞在某些腦脊液中5分鐘后即可出現(xiàn)皺縮現(xiàn)象,因此不能根據(jù)紅細(xì)胞是否皺縮鑒別陳舊性或新鮮出血。,7,., 黃色 常見于陳舊性蛛網(wǎng)膜下腔或腦室出血椎管梗阻化膿性腦膜炎結(jié)核性腦膜炎重癥黃疸如核黃疸。,8,., 白色或灰白色 常見于化膿性腦膜炎,多由于白細(xì)胞增加所致。,9,., 褐色或黑色 見于腦膜黑色素瘤。,10,.,2 性狀(透明度),CSF透明度可用“清晰”透明” ”微濁” ”微渾” ”混濁”描述。正常情況下, CSF是“清晰”透明”。 CSF混濁主要由于感染或出血導(dǎo)致CSF中細(xì)胞成分增多所致,混濁程度與細(xì)胞數(shù)量有關(guān),300106/L時(shí),可出現(xiàn)混濁。 蛋白質(zhì)含量增加或含有大量微生物也可產(chǎn)生混濁。 病毒性腦膜炎神經(jīng)梅毒CSF可透明;結(jié)核性腦膜炎CSF常呈毛玻璃樣輕度混濁;化膿性腦膜炎CSF呈明顯混濁。,11,.,3 凝固性,CSF可用“無凝塊” ”有凝塊“”有薄膜“”膠胨狀“描述。 正常情況下CSF標(biāo)本靜置12-24h不形成薄膜凝塊或沉淀物。 在炎癥情況下,CSF中蛋白質(zhì)(包括纖維蛋白原)含量增高,10g/L時(shí)可形成凝塊。 化膿性腦膜炎CSF靜置1-2h,可形成凝塊或沉淀物;結(jié)核性腦膜炎CSF靜置12-24h,標(biāo)本表面有網(wǎng)膜形成,取該網(wǎng)膜作結(jié)核桿菌檢查,陽性率較高;蛛網(wǎng)膜下腔梗阻時(shí),蛋白質(zhì)含量可達(dá)15g/L,呈黃色膠胨狀。,12,.,4 潘氏試驗(yàn)(Pandy test),潘氏試驗(yàn)是蛋白質(zhì)定性試驗(yàn)。 正常CSF蛋白質(zhì)含量不到血漿蛋白的1%,主要為清蛋白。 中樞神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生病變時(shí),蛋白質(zhì)含量可有不同程度的增高。CSF中蛋白質(zhì)含量檢測(cè)有助于對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷。,13,.,潘氏試驗(yàn)(Pandy test),原理 :CSF中蛋白質(zhì)與苯酚結(jié)合成不溶性的蛋白鹽而生成白色沉淀。 操作:取潘氏試劑2ml,置于試管中,用吸管滴入1-2滴CSF,在黑色背景下立即觀察結(jié)果。,14,.,結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn),(1) 不形成沉淀,判定為陰性(-); (2) 輕微的白色云霧狀,判定為弱陽性(); (3)灰白色云霧狀,判定為1+; (4)白色混濁,判定為2+; (5)白色絮狀沉淀,判定為3+; (6)白色塊狀沉淀,判定為4+。,15,.,方法學(xué)評(píng)價(jià),潘氏試驗(yàn)所需CSF標(biāo)本量少,檢測(cè)靈敏度高,結(jié)果易于觀察,沉淀物的多少與標(biāo)本中蛋白質(zhì)含量成正比。 但由于靈敏度高,部分正常CSF可出現(xiàn)弱陽性。,16,.,5 顯微鏡檢查,(1) 細(xì)胞計(jì)數(shù) 日常工作中白細(xì)胞計(jì)數(shù)。在標(biāo)本采集后1h內(nèi)進(jìn)行。 操作:通常采用手工法,改良牛鮑計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。在試管中加入1滴冰醋酸,轉(zhuǎn)動(dòng)試管,使內(nèi)壁沾有冰醋酸后傾去,然后滴加混勻的腦脊液3-4滴,數(shù)分鐘后,混勻充入計(jì)數(shù)池。,17,.,計(jì)數(shù)板:9個(gè)大方格,每個(gè)大方格容積0.1 l,計(jì)數(shù)10個(gè)大方格,結(jié)果106/L。 如標(biāo)本中細(xì)胞數(shù)過多,可用生理鹽水或紅細(xì)胞稀釋液將標(biāo)本稀釋后再計(jì)數(shù)(注意:結(jié)果必須乘以稀釋倍數(shù)),也可以用血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)(尤其是血性標(biāo)本)。,18,.,校正計(jì)數(shù),因穿刺損傷血管或出血性腦血管病的血性CSF,白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果需要校正,剔除因出血帶入CSF的白細(xì)胞。 計(jì)算法 WBC已校正WBC未校正RBCCSF WBC血液/ RBC血液 估算法 以WBC血液/ RBC血液為1/700的關(guān)系,從未校正WBC計(jì)數(shù)結(jié)果中扣除,得已校正WBC。 WBC已校正WBC未校正RBCCSF/700,19,.,參考值,WBC 成人(0-10)106/L 兒童 (0-15)106/L 新生兒(0-30)106/L RBC 無。,20,.,(2 )細(xì)胞分類(白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)),高倍鏡下分單核細(xì)胞(單個(gè)核細(xì)胞,主要包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞)和多核細(xì)胞(主要指中性粒細(xì)胞)。 當(dāng)白細(xì)胞數(shù)100 106/L 時(shí),計(jì)算單核細(xì)胞和多核細(xì)胞的百分比。 當(dāng)白細(xì)胞數(shù)100 106/L 時(shí),報(bào)告單核細(xì)胞和多核細(xì)胞的絕對(duì)值。,21,.,由于高倍鏡下直接分類不能觀察細(xì)胞的細(xì)微結(jié)構(gòu),因此個(gè)別細(xì)胞難以確認(rèn)。 如果有較多量大細(xì)胞既不能歸為單核細(xì)胞,又不能歸為多核細(xì)胞,則進(jìn)行計(jì)數(shù)并在備注中列為 “分類不明大細(xì)胞 106/L ”。 主要目的:引起臨床注意,排除癌細(xì)胞。,22,.,參考值,正常CSF中主要為淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞,二者比例為7:3。可含極少數(shù)中性粒細(xì)胞。 偶爾可見腦膜和蛛網(wǎng)膜細(xì)胞室管膜細(xì)胞脈絡(luò)膜細(xì)胞等。,。,23,.,腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查(脫落細(xì)胞學(xué)檢查),將腦脊液離心(細(xì)胞離心機(jī)制片)瑞氏染色油鏡下分類計(jì)數(shù)。,24,.,細(xì)胞分類,免疫活性細(xì)胞 包括大淋巴細(xì)胞小淋巴細(xì)胞激活淋巴細(xì)胞淋巴樣細(xì)胞漿細(xì)胞。提示免疫反應(yīng)參與了疾病過程。 單核巨噬細(xì)胞 包括單核細(xì)胞激活單核細(xì)胞吞噬細(xì)胞。 多核型白細(xì)胞 包括中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞。 腫瘤細(xì)胞 CSF中發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤有確診價(jià)值。 白血病細(xì)胞及淋巴瘤細(xì)胞,25,.,臨床意義,中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病 分急性炎癥滲出期亞急性增殖期修復(fù)期。滲出期呈粒細(xì)胞反應(yīng);增殖期呈激活淋巴或單核巨噬細(xì)胞反應(yīng);修復(fù)期呈淋巴細(xì)胞反應(yīng)。WBC(10-50)106/L為輕度增高,(50-100)106/L為中度增高,200106/L以上為顯著增高。,26,.,中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病,化膿性腦膜炎 WBC顯著增高,可達(dá)數(shù)千106/L。 結(jié)核性腦膜炎 WBC中度增高,一般500106/L。 病毒性腦炎腦膜炎 WBC輕度增高。 新型隱球菌腦膜炎 WBC中度增高,可查到新型隱球菌。,27,.,蛛網(wǎng)膜下腔出血 出血2-3天后可見吞噬有紅細(xì)胞或含鐵血黃素的吞噬細(xì)胞。 中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤 WBC數(shù)正常或稍高。CSF中找到白血病細(xì)胞對(duì)腦白
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