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文檔簡介
總結(jié)提升,專題2細胞工程,系統(tǒng)構(gòu)建,規(guī)律整合,內(nèi)容索引,跟蹤訓練,系統(tǒng)構(gòu)建,知識建網(wǎng),脫分化,愈傷組織,雜種細胞,胰蛋白酶處理,原代培養(yǎng),去核卵母細胞,骨髓瘤細胞,雜交瘤細胞,要語必背,1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)、植物體細胞雜交技術(shù)的理論基礎都有細胞的全能性,后者還有細胞膜的流動性;動物細胞核移植技術(shù)的原理是動物細胞核的全能性。2.人工誘導原生質(zhì)體融合的方法有物理法(離心、振動、電激)和化學法(聚乙二醇處理),而動物細胞融合還可以用滅活的病毒誘導。3.植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少,甚至無病毒,因此用分生區(qū)組織進行組織培養(yǎng),再生的植株就不會或極少感染病毒。,4.動物細胞培養(yǎng)一般選用胚胎或幼齡動物的組織,細胞在培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)細胞貼壁(生長)和接觸抑制的現(xiàn)象。培養(yǎng)的條件包括:無菌、無毒的環(huán)境,適宜的營養(yǎng)、溫度和pH及氣體環(huán)境。5.雜交瘤細胞是由經(jīng)免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而成的,具有既能無限增殖又能產(chǎn)生專一抗體的能力。6.制備單克隆抗體過程中第一次篩選是為了獲得雜交瘤細胞,第二次篩選是為了獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。7.單克隆抗體最主要的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高,并可大量制備。主要用途有:作為診斷試劑、用于治療疾病和運載藥物。,規(guī)律整合,1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較,一、植物組織培養(yǎng)和花藥離體培養(yǎng)技術(shù)的比較及植物激素在組織培養(yǎng)中的作用,2.植物激素在組織培養(yǎng)過程中的重要作用生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素,其作用及特點如下表:,例1請回答下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的問題:(1)用于植物組織培養(yǎng)的植物材料稱為_。,外植體,答案,解析植物組織培養(yǎng)的材料叫外植體。,解析,(2)組織培養(yǎng)中的細胞,從分化狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài)的過程稱為_。,脫分化,(或去分化),答案,解析植物組織培養(yǎng)的核心過程是脫分化與再分化,脫分化指由分化狀態(tài)變?yōu)槲捶只癄顟B(tài),再分化指由未分化狀態(tài)變?yōu)榉只癄顟B(tài)。,解析,(3)在再分化階段所用的培養(yǎng)基中,含有植物激素X和植物激素Y。逐漸改變培養(yǎng)基中這兩種植物激素的濃度比,未分化細胞群的變化情況如圖所示。據(jù)圖指出兩種激素的不同濃度比與形成芽、根、愈傷組織的關(guān)系。,當植物激素X與植物激素Y的濃度比等于1時,_。當植物激素X與植物激素Y的濃度比大于1時,_。當植物激素X與植物激素Y的濃度比小于1時,_。,未分化細胞群分化形成芽未分化細胞群分化形成根,未分化細胞群經(jīng)分裂形成,愈傷組織,答案,解析,解析仔細分析所給示意圖,可知植物激素X與植物激素Y濃度比為1時,利于愈傷組織的形成;大于1時利于細胞群分化出芽;小于1時利于細胞群分化出根。,(4)生產(chǎn)上用試管苗保存植物的優(yōu)良性狀,其原因是_。,組織培養(yǎng)形成試管苗,的過程屬于無性繁殖,后代不發(fā)生性狀分離,答案,解析植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖技術(shù),有利于保持親本的優(yōu)良性狀。,解析,二、單克隆抗體制備的關(guān)鍵思路及篩選原因,1.關(guān)鍵思路及操作依據(jù)(1)關(guān)鍵思路克隆單一的B淋巴細胞,形成細胞群。將B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,獲得雜交瘤細胞。(2)用B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合的原因每一個B淋巴細胞只能分泌一種特異性抗體;不同種類的B淋巴細胞分泌的抗體不同。B淋巴細胞在體外培養(yǎng)時不能無限增殖;骨髓瘤細胞能夠無限增殖。,2.單克隆抗體制備過程中的篩選及原因(1)第一次篩選是在B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合之后,因為有三種融合情況(只考慮細胞兩兩融合):B淋巴細胞與B淋巴細胞融合、骨髓瘤細胞與骨髓瘤細胞融合、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,而只有B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合細胞才是需要的雜種細胞。(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng),在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng),然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是由單個雜交瘤細胞克隆來的,所以產(chǎn)生的抗體一定是化學性質(zhì)單一、特異性強的單克隆抗體。,上述B淋巴細胞為經(jīng)過免疫的B淋巴細胞。,特別提醒,例21975年科學家首次利用B淋巴細胞雜交瘤技術(shù)制備出單克隆抗體。請據(jù)圖回答下列問題:(1)病原體注入小鼠體內(nèi)后,要經(jīng)過_細胞處理后,才能被免疫細胞識別。,吞噬,答案,解析滅活的病毒和聚乙二醇均可誘導動物細胞融合;雜交瘤細胞同時具有兩個親代細胞的遺傳特性;可以在體外培養(yǎng)也可以在體內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細胞獲得單克隆抗體。,解析,(2)制備單克隆抗體所用的B淋巴細胞一般從脾中采集,然后以_作誘導劑,使B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合。通過篩選和克隆培養(yǎng),獲得的雜交瘤細胞具有_的特點。,滅活的病毒或聚乙,二醇,既能產(chǎn)生特異性抗體,又能,無限增殖,答案,(3)單克隆抗體的特點是_。根據(jù)圖示寫出應用雜交瘤技術(shù)獲得單克隆抗體的兩種主要方法_。,特異性強,純度高、,并可大量制備(或?qū)R恍詮姟㈧`敏度高),體外培養(yǎng)法和動物體,內(nèi)培養(yǎng)法,答案,跟蹤訓練,1.關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素,下列說法正確的是A.不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同,同一種植物材料培養(yǎng)的難易程度相同B.在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基中必須添加植物激素C.植物激素中生長素和細胞分裂素的作用是相互獨立的D.pH、溫度、光照條件等對植物組織培養(yǎng)特別重要,解析,答案,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,解析不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同,同一種植物材料也會因年齡、保存時間的長短等導致培養(yǎng)的難易程度不同;在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基中常常要添加植物激素,但不是都必須添加植物激素,如菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易,不必添加植物激素;各種植物激素的作用是相互聯(lián)系的,而不是相互獨立的。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,2.為了培育菊花新品種,科學家利用二倍體野生夏菊和六倍體栽培秋菊進行雜交,培育過程如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是,解析,答案,A.d植株含有夏菊和秋菊的遺傳物質(zhì)B.與過程有關(guān)的細胞器只有高爾基體比較活躍C.過程常選擇酶解法去壁,一般在低滲溶液中進行D.野生夏菊和栽培秋菊自然雜交后是四倍體,屬于同一物種,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,解析d植株含有野生夏菊和栽培秋菊的遺傳物質(zhì),A正確;過程是雜種細胞形成細胞壁,有關(guān)的細胞器有高爾基體、線粒體等,B錯誤;過程為去除細胞壁的過程,植物體細胞雜交的實質(zhì)是植物原生質(zhì)體的融合,所以在融合前需要使用酶解法(纖維素酶和果膠酶)去除植物細胞的細胞壁,獲得植物的原生質(zhì)體,此操作一般在等滲溶液中進行,如在低滲溶液中進行,則去掉細胞壁的原生質(zhì)體會因吸水而漲破,C錯誤;野生夏菊和栽培秋菊自然條件下不能雜交,存在生殖隔離,屬于不同物種,D錯誤。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,3.下列生物技術(shù)不屬于細胞工程領域的是A.植物組織培養(yǎng)技術(shù)B.轉(zhuǎn)基因技術(shù)C.克隆技術(shù)D.植物體細胞雜交技術(shù),答案,解析細胞工程是在細胞水平或細胞器水平上進行的操作。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的操作對象為基因,即DNA分子水平上的操作技術(shù),屬于基因工程。,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,4.用甘薯的莖尖分生組織離體培養(yǎng),可快速繁殖脫毒的種苗。下列說法不正確的是A.該過程依據(jù)的主要原理是植物細胞的全能性B.形成脫毒的種苗只經(jīng)過細胞分裂,沒有細胞分化的發(fā)生C.顯微鏡下觀察處于細胞周期中的細胞,在多數(shù)細胞中看不到染色體D.甘薯的莖尖細胞中含有甘薯的全套遺傳物質(zhì),解析,答案,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,解析植物組織培養(yǎng)的原理是植物細胞的全能性,A正確;該過程中細胞都通過有絲分裂方式增殖,由莖尖分生組織到脫毒苗經(jīng)過植物組織培養(yǎng),要發(fā)生細胞分化過程,B錯誤;細胞周期包括分裂間期和分裂期,其中分裂間期所占的時間長,因此顯微鏡下觀察細胞周期中的細胞,絕大多數(shù)細胞處于分裂間期,看不到染色體,C正確;甘薯的莖尖細胞是由受精卵有絲分裂形成的,含有甘薯的全套遺傳物質(zhì),D正確。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,A.甲過程需要對實驗小鼠進行消毒B.乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶處理C.丙過程得到的細胞大多具有異倍體核型D.丁過程得到的細胞具有異質(zhì)性,5.實驗小鼠皮膚細胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,解析動物細胞培養(yǎng)需要無菌無毒的環(huán)境,甲過程是指從實驗小鼠身上取下皮膚組織,該過程需要對小鼠進行消毒處理,A項正確;乙過程表示將得到的皮膚組織分散成單個細胞制備成細胞懸液,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處理,B項正確;丙過程表示原代培養(yǎng),此時的細胞仍能保持正常的二倍體核型,C項錯誤;丁過程表示傳代培養(yǎng),少部分細胞會克服細胞壽命的自然極限,獲得不死性,這些細胞已經(jīng)發(fā)生突變,正在朝著等同于癌細胞的方向發(fā)展,D項正確。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,6.美國得克薩斯州科學家培育出世界上第一只克隆貓,這只小貓毛色花白,看上去完全不像生養(yǎng)它的花斑貓媽媽,也不完全像為它提供細胞核的基因貓媽媽。對該克隆貓毛色的解釋合理的選項是基因重組所造成的結(jié)果提供卵細胞的雌貓細胞質(zhì)基因表達的結(jié)果表現(xiàn)型是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果生養(yǎng)它的花斑貓媽媽的基因表達的結(jié)果A.B.C.D.,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,解析細胞核移植沒有發(fā)生基因重組,因而不是基因重組所造成的結(jié)果,錯誤;由于動物細胞的細胞質(zhì)中的線粒體內(nèi)含有少量的遺傳物質(zhì)DNA,所以提供卵細胞的雌貓細胞質(zhì)基因能表達出性狀,正確;基因的表達受環(huán)境因素的影響,所以表現(xiàn)型是基因型與環(huán)境共同作用的結(jié)果,正確;生養(yǎng)它的花斑貓媽媽與小貓之間只有營養(yǎng)物質(zhì)的交換,沒有基因的交流,錯誤。因此對該克隆貓毛色的解釋合理的是,選B。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,7.獲得大量單克隆抗體必須用單個的B淋巴細胞進行無性繁殖,形成細胞群。其原因是A.在體外培養(yǎng)條件下B淋巴細胞可以無限增殖B.每一個B淋巴細胞都參與特異性免疫反應C.單個的B淋巴細胞產(chǎn)生抗體的能力強D.在動物體內(nèi)B淋巴細胞可產(chǎn)生多達百萬種以上的抗體,而每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,解析在動物發(fā)生免疫反應的過程中,體內(nèi)的B淋巴細胞可以產(chǎn)生多達百萬種以上的特異性抗體,但是每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。因此,要想獲得大量的單一抗體,必須用單個的B淋巴細胞進行無性繁殖,也就是通過克隆形成細胞群,這樣的細胞群就有可能產(chǎn)生出化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體單克隆抗體。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,8.核苷酸合成有兩個途徑,物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑(如下圖)。正常細胞內(nèi)含有補救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶,制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?,F(xiàn)用加入H、A、T三種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”來篩選特定的雜交瘤細胞。關(guān)于篩選原理的敘述,正確的是,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,A.免疫的B淋巴細胞及其互相融合細胞因全合成途徑被A阻斷而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖B.骨髓瘤細胞及其互相融合細胞因無法進行上述兩個途徑而在HAT培養(yǎng)基上不能增殖C.雜交瘤細胞因為可以進行上述兩個途徑所以能在HAT培養(yǎng)基上大量增殖D.HAT培養(yǎng)基上篩選出的所有雜交瘤細胞既能大量增殖又能產(chǎn)生高純度的目標抗體,答案,解析,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,解析免疫的B淋巴細胞及其互相融合細胞均屬于成熟細胞,不能增殖,A錯誤;骨髓瘤細胞及其互相融合細胞缺乏轉(zhuǎn)化酶,又因HAT培養(yǎng)基中的物質(zhì)A阻斷了全合成途徑,所以在HAT培養(yǎng)基上不能增殖,B正確;雜交瘤細胞因為可以進行補救合成途徑,故能夠在HAT培養(yǎng)基上大量增殖,C錯誤;HAT培養(yǎng)基上篩選出的雜交瘤細胞能大量增殖,也能產(chǎn)生抗體,但不一定產(chǎn)生特異性抗體,D錯誤。,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,9.(2014廣東,29節(jié)選)鐵皮石斛是我國名貴中藥,生物堿是其有效成分之一。應用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖(簡稱PLBs,類似愈傷組織)生產(chǎn)生物堿的實驗流程如下:,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,在固體培養(yǎng)基上,PLBs的重量、生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示,請回答下列問題:,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,(1)選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是_,誘導外植體形成PLBs的過程稱_。,營養(yǎng)芽細胞分裂能力強,幾乎不含,病毒,脫分化,解析選用新生營養(yǎng)芽為外植體是因為其分裂能力旺盛且?guī)缀醪粩y帶病毒。誘導外植體形成類似愈傷組織的PLBs的過程稱為脫分化。,解析,答案,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,(2)與黑暗條件下相比,PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在_,_,_。,的時間早增重持續(xù)的時間長,開始增重,PLBs增重的量更多,解析分析曲線圖可知,在光照條件下PLBs開始增重的時間早,增重持續(xù)的時間長,增重的量更多。,解析,答案,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,10.美國科學家已經(jīng)在實驗室中成功培育出膀胱,并順利移植到7名患者體內(nèi)。這種技術(shù)為那些急需器官移植的患者帶來福音?;卮鹣铝袉栴}:(1)科學家從患者的膀胱上取下一小塊活細胞樣本,將其中的肌肉細胞和膀胱上皮細胞分別置于不同的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。在培養(yǎng)之前,需用_處理以分散細胞,細胞在培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)過程屬于_代培養(yǎng)。與植物組織培養(yǎng)相比,動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基的主要不同點是含有_。,胰蛋白酶,(或膠原蛋白酶),原,動物血清、血漿,解析動物細胞培養(yǎng)之前要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,動物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基,含有的營養(yǎng)成分的主要不同點是前者
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