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課時跟蹤檢測(三十九) 微生物的培養(yǎng)和利用一、題點練1下列有關(guān)微生物培養(yǎng)與應(yīng)用的說法,正確的是()A天然培養(yǎng)基是指直接取自自然界不需加工的培養(yǎng)基B接種前需對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手等進行嚴格的滅菌處理C大腸桿菌的純化培養(yǎng)過程包括培養(yǎng)基的配制和純化大腸桿菌兩個階段D分離分解尿素的細菌時,尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源和碳源解析:選C天然培養(yǎng)基是指用天然物質(zhì)制成的培養(yǎng)基,但也需要加工;實驗操作者的雙手應(yīng)消毒,不能滅菌;分離分解尿素的細菌時,尿素是培養(yǎng)基中唯一的氮源,不是碳源,需加入不含氮元素的有機物(如葡萄糖)作為碳源。2平板劃線法和稀釋涂布平板法是接種微生物的兩種常用方法,下列描述正確的是()A都要將菌液進行一系列的梯度稀釋B平板劃線法是將不同稀釋度的菌液通過接種環(huán)連續(xù)劃在固體培養(yǎng)基表面C稀釋涂布平板法是將不同稀釋度的菌液倒入液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)D都會在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落解析:選D平板劃線法不需要進行梯度稀釋,稀釋涂布平板法需要將不同稀釋度的菌液涂布到固體培養(yǎng)基的表面。平板劃線法和稀釋涂布平板法都能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。3下列關(guān)于“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)”實驗的敘述,錯誤的是()A土壤取樣時應(yīng)選取距地表約38 cm的土壤層B測定細菌的數(shù)量,一般選用104、105和106倍的稀釋液C土壤中能合成脲酶的細菌能分解尿素D向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入剛果紅溶液可以鑒定出分解尿素的細菌解析:選D測定細菌數(shù)量,一般選用104、105和106倍稀釋液進行平板培養(yǎng);測定真菌的數(shù)量,一般選用102、103和104倍稀釋液;測定放線菌的數(shù)量,一般選用103、104和105倍稀釋液。鑒定分解尿素的細菌時需向以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑。4做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時,下列敘述正確的是()A高壓滅菌加熱結(jié)束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B倒平板時,應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D用記號筆標記培養(yǎng)皿中菌落時,應(yīng)標記在皿底上解析:選D在高壓滅菌的操作過程中,加熱結(jié)束后應(yīng)讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,待壓力表的指針指到零時,打開放氣閥,旋松螺栓,打開蓋子。倒平板時,用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不是完全取下放到一邊。接種環(huán)經(jīng)火焰灼燒滅菌后應(yīng)在火焰旁冷卻后,再用其挑取菌落。在微生物的培養(yǎng)中,一般將培養(yǎng)皿倒置,在皿底上用記號筆做標記。5.在涂布有大腸桿菌的培養(yǎng)基上進行抑菌實驗,在a、b、c處分別貼浸有不同抗生素(濃度相同)的無菌濾紙片,d處濾紙片浸有無菌水。培養(yǎng)后的結(jié)果如圖所示。以下判斷錯誤的是()Aa處抑菌效果小于b處Bb處的濾紙片沒有瀝干Cc處抗生素無效Dd為對照解析:選A培養(yǎng)皿中不同濾紙片四周透明圈的大小不同,透明圈越大,說明浸有的抗生素抑菌效果越好。a處的透明圈并不小于b處;b處不是圓形的透明圈,可能是濾紙片沒有瀝干,抗生素流出濾紙片;c處無透明圈,說明c處抗生素對大腸桿菌無效;d為空白對照。二、題型練6農(nóng)業(yè)和林業(yè)生產(chǎn)上每年都有大量的富含纖維素的下腳料,如農(nóng)作物秸稈和木屑等。這些下腳料中的纖維素經(jīng)過微生物的轉(zhuǎn)化可以形成葡萄糖,而葡萄糖既是生物體內(nèi)重要的能源物質(zhì),也是食品和制藥工業(yè)的重要原料。請分析回答下列問題:(1)許多微生物都能產(chǎn)生分解利用纖維素的纖維素酶,這種酶是一種復(fù)合酶,一般認為它至少包括三種組分:_、_和_。在纖維素酶的作用下,農(nóng)業(yè)和林業(yè)下腳料中的纖維素最終將被分解為_。(2)分解纖維素的微生物可以從土壤中分離獲得,分離的基本過程如下:土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落。其中選擇培養(yǎng)的目的是_,選擇培養(yǎng)所用的培養(yǎng)基中唯一的碳源是_。鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基中需要加入的特殊物質(zhì)是_,該物質(zhì)能夠與纖維素反應(yīng)生成_;如果某個菌落的周圍出現(xiàn)了透明圈,說明該種微生物能夠_。(3)從土壤中分離纖維素分解菌需要采用_技術(shù),例如對培養(yǎng)基應(yīng)該進行_處理,接種工具應(yīng)該進行_處理。答案:(1)C1酶CX酶葡萄糖苷酶葡萄糖(2)增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從樣品中分離到所需的微生物纖維素剛果紅紅色復(fù)合物產(chǎn)生纖維素酶,分解纖維素(3)無菌高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌7尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥,不能直接被農(nóng)作物吸收,只有當土壤中的微生物將尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,對土壤中分解尿素的微生物進行分離和鑒定具有重要意義。回答下列問題:(1)對土壤中分解尿素的微生物的分離過程如下:第一步:土壤取樣。取土樣用的工具和盛土樣的信封等在使用前都需要_(填“消毒”或“滅菌”)。第二步:樣品稀釋。通常分離不同種類的微生物要采用不同的稀釋度,原因是_。第三步:微生物的培養(yǎng)與觀察。將一定稀釋度的樣品接種在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上,并在適宜的條件下培養(yǎng)。分解尿素的微生物能在該培養(yǎng)基上生長繁殖,而_則不能生長繁殖。(2)若對土壤懸液進行梯度稀釋時,未經(jīng)振蕩而直接取上層懸液進行梯度稀釋,用稀釋倍數(shù)為104的樣液涂布到平板上進行培養(yǎng)和計數(shù),統(tǒng)計出的菌落數(shù)往往比正確操作統(tǒng)計出的菌落數(shù)_。(3)若要對上述初步篩選出的分解尿素的微生物作進一步的鑒定,需在如表所示培養(yǎng)基配方中添加的物質(zhì)是_、_。若分離得到的是尿素分解菌,則培養(yǎng)基中pH升高使酚紅指示劑變?yōu)榧t色,pH升高的原因是_。成分KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O酚紅指示劑尿素蒸餾水培養(yǎng)基(含量)1.4 g2.1 g0.2 g0.01 g1.0 g1 000 mL答案:(1)滅菌土壤中各類微生物的數(shù)量不同不能利用尿素的微生物(2)偏高(3)葡萄糖瓊脂尿素分解菌合成的脲酶將尿素分解成氨8高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉嗜熱菌樣品中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,其篩選過程如下圖所示:(1)進行過程的目的是_,過程所使用的接種方法是_法。(2)從用途上來說,號培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基,配制時僅以_作為唯一碳源;從物理狀態(tài)上來說,號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時應(yīng)加入_作為凝固劑。(3)、號培養(yǎng)基配制和滅菌時,滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是_。一般對配制的培養(yǎng)基采用_法滅菌。(4)培養(yǎng)一段時間后,應(yīng)從號培養(yǎng)基上挑出_的菌落,接種到號培養(yǎng)基上。解析:(1)分析題圖可知,過程是梯度稀釋,目的是對樣品進行稀釋;過程是用稀釋涂布平板法進行接種。(2)本題實驗的目的是篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌,從用途上來說,號培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基,本培養(yǎng)基以淀粉為唯一碳源;從物理狀態(tài)上來說,號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基,配制時應(yīng)加入瓊脂作為凝固劑。(3)培養(yǎng)基配制和滅菌時應(yīng)先調(diào)節(jié)pH,然后再進行滅菌,如果先滅菌再調(diào)節(jié)pH,在調(diào)節(jié)pH時會污染培養(yǎng)基;一般對配制的培養(yǎng)基采用高壓蒸汽滅菌法滅菌。(4)能分解淀粉的嗜熱菌在號培養(yǎng)基上生長時可釋放淀粉酶,分解培養(yǎng)基中的淀粉,在菌落周圍形成透明圈,透明圈越大淀粉酶的活性越強,所以要從號培養(yǎng)基上挑出透明圈大的菌落,接種到號培養(yǎng)基上。答案:(1)稀釋稀釋涂布平板(2)選擇淀粉瓊脂(3)先調(diào)節(jié)pH,后滅菌高壓蒸汽滅菌(4)透明圈大92016年7月鄭州市衛(wèi)生計生委發(fā)布的第3期衛(wèi)生監(jiān)測信息顯示有15家美容美發(fā)場所的毛巾、理發(fā)(美容)用具大腸桿菌嚴重超標。如圖甲為大腸桿菌含量檢測操作簡圖,圖乙為伊紅美藍培養(yǎng)基配方?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:(1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)_(填“大于”或“小于”)大腸桿菌。受此啟發(fā),對某些不耐高溫的試劑可以怎樣除菌?_。(2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時,除了水分、無機鹽以外,還應(yīng)加入_(一種營養(yǎng)成分),以及_。待各成分都溶化后和分裝前,要進行的是_和滅菌,對培養(yǎng)基進行滅菌的常用器具是_。倒平板時要待平板冷凝后,將平板倒置,其主要目的是_。伊紅美藍培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)深紫色,從功能上劃分,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(3)用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌,操作時,接種環(huán)通過灼燒滅菌,在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線的目的是_。要檢測樣液中的大腸桿菌含量,取25 cm2毛巾樣本,加5 mL蒸餾水,浸潤半小時,然后在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL樣液;在37 的培養(yǎng)箱中放置48小時,3個平板上的黑色菌落數(shù)分別為49、48和47。據(jù)此可得出25 cm2毛巾樣液中的活菌數(shù)為_。解析:(1)圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌,濾膜過濾才能獲得大腸桿菌,對不耐高溫的試劑除菌時無法用高壓蒸汽滅菌法,可以用濾膜過濾達到除菌目的。(2)配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時,除了水分、無機鹽以外,還應(yīng)加入氮源以及瓊脂。配制的培養(yǎng)基在溶化后和分裝前需要先進行調(diào)pH和滅菌。高壓蒸汽滅菌法常用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基等進行滅菌。倒平板后將平板倒置的主要原因是防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染。從功能上劃分,伊紅美藍培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。(3)接種環(huán)灼燒滅菌后,在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線的目的是將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落。在伊紅美藍培養(yǎng)基上,大腸桿菌的菌落呈深紫色,據(jù)題意可知,25 cm2毛巾樣本中的活菌數(shù)為(494847)30.152.4103。答案:(1)小于用濾膜過濾除茵(2)氮源瓊脂調(diào)整pH高壓蒸汽滅菌鍋防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染鑒別(3)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落2.410310纖維素酶在生物燃料制作、布料處理中起重要作用。目前,利用微生物提高纖維素酶產(chǎn)量是主要發(fā)展方向。如圖甲,用紫外線照射含有纖維素分解菌的土樣,分離、培養(yǎng),再檢測各菌株的纖維素酶的產(chǎn)生量。請回答下列相關(guān)問題:(1)紫外線照射的目的是_,A0組未經(jīng)紫外線處理,其作用是作為_。(2)經(jīng)高壓滅菌鍋滅菌的培養(yǎng)基,需要冷卻后才能用來倒平板。常用于估計培養(yǎng)基已冷卻到50 左右的簡便方法為_。(3)上述培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基除含有水和無機鹽、酵母膏、水解酪素、瓊脂等外,還應(yīng)有_,目的是選擇纖維素分解菌。(4)上述檢測結(jié)果如圖乙所示。由圖可知,_組酶含量與A0組相同,最可能的原因是_。解析:(1)紫外線屬于誘發(fā)基因突變的物理因素,通過紫外線照射后細菌突變頻率大大提高,從而可能篩選出人類需要的高產(chǎn)菌株;A0組未經(jīng)紫外線處理,為對照組。(2)用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶剛剛不燙手時的溫度是50 左右。(3)以纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基上,只有產(chǎn)纖維素酶的細菌才能存活。(4)據(jù)圖乙可知A5組纖維素酶的含量與對照組相同,由于基因突變具有低頻性的特點,該組可能沒有發(fā)生基因突變。答案:(1)誘發(fā)基因突變,提高突變頻率,獲得高產(chǎn)的纖維素分解菌對照(2)用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶剛剛不燙手(3)纖維素(4)A5沒有發(fā)生基因突變11(2017貴陽一檢)某研究小組的同學用所學的微生物的實驗室培養(yǎng)的方法進行“變質(zhì)牛奶中金黃色葡萄球菌的分離和計數(shù)實驗”,部分實驗處理和結(jié)果如圖所示。(注:培養(yǎng)皿旁的數(shù)字代表菌落數(shù)目;實驗條件適宜;實驗操作規(guī)范等)請回答相關(guān)問題:(1)在實驗室培養(yǎng)微生物,一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供合適的_和_條件;另一方面需要確保無處不在的其他微生物無法混入。(2)據(jù)圖,研究小組采用的是_法分離和計數(shù)金黃色葡萄球菌。由樣品到4號試管的操作中,第一步,將分別盛有9 mL生理鹽水的4支試管_,并編號14號;第二步,用移液管從樣品中吸取1 mL牛奶,注入1號試管中,充分搖勻;第三步,重復(fù)第二步驟操作,以此類推。4號試管的稀釋倍數(shù)是_。(3)資料顯示,金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10%15%NaCl肉湯中生長。本實驗可配制含10%氯化鈉的培養(yǎng)基,使之成為_培養(yǎng)基,以利于金黃色葡萄球菌生長,抑制或阻止其他微生物的生長。(4)在統(tǒng)計菌落數(shù)目時,需按照菌落計數(shù)的要求計數(shù),以保證計數(shù)結(jié)果準確。據(jù)圖可得出1 mL牛奶樣品
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