藥物分析第七版期末考試重點(diǎn)

1、藥物分析 第一章 概況 藥典基本結(jié)構(gòu) 凡例 正文 附錄 索引(中英文) 凡例 解釋和正確使用 CHP 進(jìn)行質(zhì)量檢定的基本原則，并對有關(guān)共性問題進(jìn)行規(guī)定 1) 名稱及編排 2) 項(xiàng)目與要求 3) 檢驗(yàn)方法和限度 4 ) 標(biāo)準(zhǔn)品、對照品 用于鑒別、檢查和含量測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。不包括色譜用的內(nèi)標(biāo) 標(biāo)準(zhǔn)品 ：是指用于生物檢定、 抗生素或生化藥品中含量或效價(jià)測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)， 按效價(jià)單位 或 ug 計(jì)。 對照品 ：除另有規(guī)定外，均按干燥品或無水物計(jì)算后使用。 5) 計(jì)量 法定計(jì)量單位 6) 精確度 取樣量的準(zhǔn)確度和實(shí)驗(yàn)精密度 精密稱定 ：準(zhǔn)確至所取重量的千分之一 稱定：準(zhǔn)確至所取重量的百分之一 取用量約若干

2、 ：指該量不得超過規(guī)定量的正負(fù) 10%。 精密量取 ：量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合該體積移液管的精密度要求 稱取：根據(jù)數(shù)據(jù)的有效數(shù)位確定 分別稱?。?2g 2.0g 2.00g 則可稱 ：1.5-2.0g 1.95-2.05g 1.995g-2.005g 量?。河脙赏盎虬凑樟咳◇w積的有效數(shù)位選用量具 恒重：供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在 0.3mg 以下的重量。 按干燥品計(jì)算：除另有規(guī)定外，應(yīng)取未經(jīng)干燥的供試品進(jìn)行試驗(yàn)，測得干燥失 重后，再在計(jì)算式從取用量中扣除 空白試驗(yàn) ：不加供試品或以等量溶劑替代供試液，同法操作所得結(jié)果。 第二章 藥物的鑒別試驗(yàn) 目的： 項(xiàng)目 ： 1.性狀 外觀 溶解度

3、 物理常數(shù)(熔點(diǎn) m.p， 比旋度 ：在一定波長與溫度下， 偏振光透過長 1dm 且每 1ml 中含有旋光性物質(zhì) 1g 的溶液時(shí) 測得的旋光度 吸收系數(shù) ：在給定的波長，溶劑溫度等條件下， 吸光物質(zhì)在單位濃度，單位液層厚度時(shí)的吸 收度) 2. 一般鑒別試驗(yàn) ( general identification test GIT ) 根據(jù)某一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或物化性質(zhì)， 通過化學(xué)反應(yīng)鑒別藥物的真?zhèn)巍?只能證實(shí)藥物的類別，不能證實(shí)是哪一種藥物，區(qū)別不同 類別的藥物。僅適用于確認(rèn)單一的化學(xué)藥物。 3. 專屬鑒別試驗(yàn) (SPECIFIC IDENTIFICATION TEST,SIT) 在 git 的基礎(chǔ)

4、上進(jìn)行， 根絕每一種藥物在化學(xué)結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)上的特殊性差異， 采用更靈敏、 選擇性更強(qiáng)的反應(yīng)，進(jìn)一步鑒別藥物的真?zhèn)?。區(qū)別同類藥物。 方法驗(yàn)證 ：化學(xué)法，光譜法，色譜法，生物學(xué)法 最低檢出量：應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定反應(yīng)條件下，能觀測除反應(yīng)結(jié)果所需的供試品的最小量。 空白試驗(yàn)：消除試劑和器皿可能帶來的影響 對靈敏度很高的鑒別試驗(yàn)，很重要 提高反應(yīng)靈敏度的方法： 消除干擾 改進(jìn)觀測方法 加入少量與水互不相容的有機(jī)溶劑，顏色加深，易觀察 第三章藥物的雜質(zhì)檢查 第一節(jié)、雜質(zhì)來源：生產(chǎn)過程中引入（合成藥，藥物制劑的生產(chǎn)過程中，引入溶劑、酸堿 性試劑、催化劑，從金屬工具中引入金屬雜質(zhì)，引入低效無效的藥物異構(gòu)體

5、或晶型） 貯藏過程中引入，（保存不善或貯藏時(shí)間過長，微生物作用，外界條件影響導(dǎo)致水解、氧 化、霉變、異構(gòu)化、晶型改變） 雜質(zhì)限量：含義，在不影響藥物的療效和不產(chǎn)生毒性的情況下，藥物中可允許的咋質(zhì)量。即 藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量。 雜質(zhì)限量檢查：不要求測定雜質(zhì)的含量，只需檢查雜質(zhì)是否超過限量。 方法：對照法：去一定量被檢雜質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液與一定量供試品在相同條件下處理后，比 較反應(yīng)結(jié)果。特點(diǎn)：注意平行操作，不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量 雜質(zhì)限量=（雜質(zhì)最大允許量/供試品量）*100% =【（標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度*標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積）/供試品量】*100% 靈敏度控制法，在供試品溶液中鍵入試劑，一定條件下反應(yīng) 后，

6、觀察有無正反應(yīng)出現(xiàn)。以不出現(xiàn)正反應(yīng)為合格。特點(diǎn)：不需對照品。 比較法：取供試品一定量依法檢查，測定特定待檢雜質(zhì)的參數(shù)（如吸光度）與 規(guī)定的限量進(jìn)行比較，不得更大 一般雜質(zhì)的檢查方法， 化物檢查法 原理 方法1、反應(yīng)試劑：AGNO3試液，2、標(biāo)準(zhǔn)溶液：標(biāo)準(zhǔn) NACL溶液，每1ml相當(dāng)于10ug 的cl-適宜比濁濃度：50-80ugcl-/ml 原理 氯化物 AGNO3 硫酸鹽 Bacl2 鐵鹽 SCN- 重金屬 硫代硫酸鈉 砷鹽 古蔡式法zn+hcl產(chǎn)生H2,+AsSO33生成ASH3 熾濁殘?jiān)?硫酸灰分 殘留溶劑 加入過硫酸鈉的作用，將fe2+氧化成fe3+,防止光纖將硫氰酸鐵離子還原或分解

7、第四章藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證 藥物定量分析方法： 一、容量分析法 二、光譜分析法三、色譜分析法 一、容量分析法1關(guān)鍵：準(zhǔn)確地確定等當(dāng)點(diǎn)（滴定液與被測藥物完全作用，反應(yīng)達(dá)到化 學(xué)計(jì)量點(diǎn)即等當(dāng)點(diǎn)）2滴定誤差：滴定終點(diǎn)與等當(dāng)點(diǎn)之間的誤差3特點(diǎn) 簡便，快速，精 密、準(zhǔn)確專屬性、靈敏度差 常用于化學(xué)原料藥的含測 滴定度T： 每ml規(guī)定濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y藥物的質(zhì)量（mg） aA + bB ? cC T = m x (a/b) x M (mg/ml ) 百分含量計(jì)算 直接滴定： 含量% = V T F W 100% 生成物滴定法： ?剩余滴定（做空白實(shí)驗(yàn)） 再用另一滴定液B 先加入定量過量的滴定液

8、A,當(dāng)與被測藥物反應(yīng)完全后 回滴剩余的滴定液 A 含量% = 0s (VbVb) Ta Fb W 100% Vb0 :空白試驗(yàn)消耗滴定液B的體積 V :樣品測定消耗滴定液B的體積 二、光譜分析法（一）UV-Vis分光光度法 1. Lambert-Beer 定律 A = CL :百分吸收系數(shù) 2特點(diǎn)：較靈敏、較準(zhǔn)確；專屬性差 3. 儀器校正和檢定 波長校正：儀器使用前校正 雜散光的檢查 吸收度準(zhǔn)確度的檢定： 用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定 對溶劑的要求：截止波長，純度 溶劑在所選波長附近的吸收度應(yīng)不超過一定值?？諝鉃榭瞻?4. 測定 核對檢測波長： 供試品的實(shí)際吸收峰波長是否與藥典給出的波長一致（土

9、2nm） 如果不一致，可能與試樣的真?zhèn)?、純度及儀器波長的準(zhǔn)確度有關(guān) 以配制供試品溶液的同批溶劑為空白 供試品溶液：吸收度0.3-0.7;溶質(zhì)沒有離解、聚合等 選擇合適的定量方法測定 對照品比較法 比色法 吸收系數(shù)法計(jì)算分光光度法 （二）熒光分析法 1特點(diǎn)：靈敏度高于UV;熒光淬滅；干擾多 應(yīng)在低濃度溶液中進(jìn)行 ? 高濃度：產(chǎn)生內(nèi)濾光效應(yīng)和自吸收現(xiàn)象線性偏離 內(nèi)濾光效應(yīng)：溶液中存在能吸收激發(fā)光和熒光的物質(zhì)，使熒光強(qiáng)度減少。 空白試驗(yàn)排除干擾 溶劑純度，溶液中的微粒、溶氧、pH、溫度、光照等 校正儀器靈敏度：供試品對激發(fā)光穩(wěn)定：用待測物的對照品溶液校正 供試品對激發(fā)光不穩(wěn)定：采用激發(fā)、發(fā)射光譜與供

10、試品近似且穩(wěn)定的物質(zhì)校正 藍(lán)色熒光-硫酸奎寧的稀硫酸溶液 黃綠色熒光-熒光素鈉水溶液 紅色熒光-羅丹明B水溶液 2. 含量測定 ? 對照法：熒光強(qiáng)度與藥物濃度線性關(guān)系良好時(shí)用 且x FrFrb Fx ? 標(biāo)準(zhǔn)曲線法：熒光強(qiáng)度與濃度明顯偏離線性時(shí)用 三、色譜分析法 特點(diǎn)：高效，快速，高靈敏度，高專屬性 1. HPLC法 最常用固定相： octadecylsila ne-b on ded silica gel 十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS或C18） 流動相及其pH : RP-HPLCt選甲醇-水，乙腈-水 pH 2-8 （以硅膠為基質(zhì)的鍵合固定相） 柱溫、檢測器：室溫、紫外檢測器 固定相種類、流動

11、相組分和檢測器類型不得任意改變外 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 色譜柱的理論塔板數(shù)色譜峰的分離度 色譜系統(tǒng)的重復(fù)性色譜峰的拖尾因子 藥物分析中常用的HPLC定量方法： - 內(nèi)標(biāo)法： 內(nèi)標(biāo)校正曲線法 內(nèi)標(biāo)一點(diǎn)法：對照法 內(nèi)標(biāo)校正因子法 - 外標(biāo)法： 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 外標(biāo)一點(diǎn)法：對照法 氣相色譜法 藥品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的色譜條件除固定液品種、檢測器類型及特殊指定的色譜柱材料不得 任意改變外 藥物分析方法的驗(yàn)證：根據(jù)分析項(xiàng)目的要求，預(yù)先設(shè)置一定的驗(yàn)證內(nèi)容，并通過設(shè)計(jì)合 理的試驗(yàn)來驗(yàn)證所建立的分析方法是否科學(xué)、合理。 保證分析結(jié)果的準(zhǔn)確、可靠。 壁 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中需驗(yàn)證的分析項(xiàng)目： 壁鑒別試驗(yàn) 雜質(zhì)限度或定量檢查 原料藥或制

12、劑中有效成分的含量測定 制劑中其它成分的含量測定 含量均勻度、溶出度、釋放度測定方法 驗(yàn)證內(nèi)容：準(zhǔn)確度精密度 專屬性檢測限 定量限線性 范圍耐用性 一. 準(zhǔn)確度 accuracy 含義：測定結(jié)果與真實(shí)值的接近程度 表示：回收率 試驗(yàn)樣品： 原料的含測：藥物的對照品 制劑的含測：處方量的空白輔料+藥物的對照品 已經(jīng)測得含量的制劑+藥物的對照品 雜質(zhì)定量：已經(jīng)測得雜質(zhì)含量的原料藥或制劑+雜質(zhì)對照品 溶出度測定：空白溶出介質(zhì)+藥物的對照品 二. 精密度 precisi on 含義：指在規(guī)定的測試條件下，對同一個(gè)均勻供試品，經(jīng)多次 取樣測定，所得結(jié)果之間的接近程度。 表示：標(biāo)準(zhǔn)偏差SD 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

13、relative sta ndard deviationRSD 試驗(yàn)樣品：供試品 試驗(yàn)內(nèi)容：重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性 三. 專屬性 specificity （選擇性 selectivity ） 含義：有其他成分（如雜質(zhì)、輔料等）存在時(shí)，分析方法能準(zhǔn)確測定 出被測物的特性，即分析方法排除各種干擾的能力。 表示： 對鑒別試驗(yàn)：不含被測物的供試品，應(yīng)呈負(fù)反應(yīng) 對雜質(zhì)檢查和含量測定：被測物應(yīng)能與其它成分分離 給出代表性圖譜，說明專屬性 四. 檢測限 limit of detectio n, LOD 含義：指供試品中被測物能被測定出的最低濃度或量。 反映分析方是否具有靈敏的檢測能力，沒有定量意義。 試

14、驗(yàn)樣品：處方量的空白輔料+藥物的對照品（對藥物制劑） 藥物的對照品（對原料藥） 測定方法: (1) 目視法，標(biāo)準(zhǔn)偏差法 (2) 信噪比法：適用于能顯示信號和基線噪音強(qiáng)度的儀器分析方法 LOD為S/N=3時(shí)的對應(yīng)濃度或注入儀器的量 檢測限驗(yàn)證：濃度等于檢測限的實(shí)際樣品，進(jìn)行分析，測試圖譜 五. 定量限 limit of qua ntitatio n, LOQ 含義：指供試品中被測物能被定量測定的最低濃度或量測定結(jié)果應(yīng)有一定準(zhǔn)確度和精密度 反映了分析方法定量測定的靈敏度 試驗(yàn)樣品：處方量的空白輔料+藥物的對照品(對藥物制劑) 藥物的對照品(對原料藥) 信噪比法測定：S/N = 10時(shí)，被測物濃度或

15、注入儀器的量 定量限驗(yàn)證：測試圖譜，測試結(jié)果的準(zhǔn)確度、精密度 六. 線性 lin earity 含義： 在設(shè)計(jì)的“范圍”內(nèi)，測試結(jié)果與樣品中待測物濃度或量直接呈正比關(guān)系的程度。 試驗(yàn)樣品：被測物的對照品 數(shù)據(jù)要求：回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖，至少5個(gè)點(diǎn)，相關(guān)系數(shù)大于 0.999 七. 范圍 range 含義： 達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，分析方法適用的高、低限濃度或量的區(qū)間。 常見規(guī)定范圍： 原料和制劑的含測：測試濃度的80%120% 制劑含量均勻度測定：測試濃度的70%130% 溶出度或釋放度測定：限度值的土20% 雜質(zhì)的含測：規(guī)定限度的土 20% 試驗(yàn)樣品：供試品 八. 耐用性 robu

16、st ness 含義：當(dāng)測定條件有小的變動時(shí)，測定結(jié)果不受影響的承受程度。 試驗(yàn)樣品：供試品 常見變動條件： 供試品溶液的穩(wěn)定性 樣品制備方法 I HPLC中流動相組成的比例，pH，流速 色譜柱的廠牌、批號，柱溫等 GC:色譜柱的廠牌、批號，固定液和載體的類型，柱溫等。 第五章體內(nèi)藥物分析概述 體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn) 體內(nèi)樣品的特點(diǎn) 待測物濃度低、游離/結(jié)合物；干擾物多；樣品數(shù)多、量小。 體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn) 體內(nèi)樣品需要分離、濃集；分析方法需專屬、靈敏；分析工作量大、復(fù)雜 1血樣 常用穩(wěn)定劑： 酶抑制劑（NaF、三氯醋酸）抗氧劑 Cp Issnia :血港加抗癡劑離心 種類Y血清 :血液不加抗33

17、劑.自然觸置，離心 J全血（whole blood） : itl液加抗3S劑.但干離也 2. 尿樣 測定尿藥濃度的目的： 藥物劑量回收，藥物清除率，藥物代謝和生物利用度 尿樣特點(diǎn)：藥物濃度較大但易變，體積大 采樣：常用時(shí)間尿 保存：立即測定；4 C保存； 放置較長時(shí)間需冷凍；加入防腐劑：甲苯，氯 仿，醋酸等 （二） 常用預(yù)處理方法 1、體內(nèi)樣品中蛋白質(zhì)的去除 （1）目 的： 去除蛋白質(zhì)，釋放結(jié)合型藥物或代謝物，便于測定總濃度； 預(yù)防提取過程中蛋白質(zhì)發(fā)泡，減少乳化的形成； 保護(hù)儀器性能。 （2）方法： 蛋白質(zhì)沉淀法 ?與水相混溶的有機(jī)溶劑：乙腈，甲醇，丙酮，THF ?中性鹽：飽和硫酸銨，硫酸鈉，

18、磷酸鈉，NaCI,枸櫞酸鹽 ?強(qiáng)酸：10%三氯醋酸，6%高氯酸 ?熱凝固法：可將熱變性蛋白質(zhì)除去 酶解法 ?適用于與蛋白質(zhì)結(jié)合牢固及遇酸或遇熱不穩(wěn)定的藥物 ?常用蛋白水解酶中的枯草菌溶素（細(xì)菌性堿性蛋白分解酶） 2、體內(nèi)樣品中綴合物的水解綴合物（conjugate）:藥物或代謝物與內(nèi)源性物質(zhì)（葡萄 糖 醛酸，硫酸等）結(jié)合生成的產(chǎn)物；極性大（ 1）目的：使綴合物中的藥物或代謝物游離，便 于用有機(jī)溶劑提取測定尿液中藥物的總量 3、體內(nèi)樣品中藥物或代謝物的分離 定量分析方法的建立與驗(yàn)證 分析方法的選擇：首選色譜法 量方法的選擇：首選內(nèi)標(biāo)法 建立體內(nèi)藥物分析方法的基本步驟 方法特異性 3 模擬體內(nèi)樣品

19、試驗(yàn) 方法特異性 體內(nèi)定量分析方法的驗(yàn)證：專屬性準(zhǔn)確度 范圍提取回收率樣品穩(wěn)定性 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)： 色譜條件選擇及優(yōu)化 1色譜條件的初步選擇 2.空白生物基質(zhì)試驗(yàn) 方法效能指標(biāo) 4 實(shí)際體內(nèi)樣品測試 一一 精密度定量限(定量下限)標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性 生產(chǎn)成熟產(chǎn)品 是用以檢測藥品質(zhì)量是否達(dá)到用藥要求所作的技術(shù)規(guī)定。 1中華人民共和國藥典(療效確切 4臨床試驗(yàn)用藥品標(biāo)準(zhǔn) 藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的分類：國家藥品標(biāo)準(zhǔn) 穩(wěn)定_) 2局(部)頒標(biāo)準(zhǔn)3進(jìn)口藥品注冊標(biāo)準(zhǔn) 業(yè)藥品標(biāo)準(zhǔn) 5監(jiān)測期藥品標(biāo)準(zhǔn)企 3. 鑒別 藥典常用的鑒別方法： ? (1)化學(xué)法優(yōu)點(diǎn)：操作簡便、快速、成本低，應(yīng)用廣，缺點(diǎn)：專屬性差 (2)儀器分 析法 UV

20、、IR、TLC HPLG GC PC ? (3 )理化常數(shù)測定法 ?4、檢查常用測定方法及其特點(diǎn)： (1)重量分析法原料 準(zhǔn)確度高、精密度好 靈敏度和專屬性差 ，操作復(fù)雜 ?分析法 原料準(zhǔn)確度高、精密度好 靈敏度和專屬性差 ?(3)分光光度法：原料、單方制劑的含測；含量均勻度、溶出度 ?UV法熒光法：靈敏度、專屬性優(yōu)于UV ?(4)色譜法 ?原料、制劑 ?HPLC :準(zhǔn)確度、精密度、靈敏度均較好，專屬性強(qiáng) ?常選色譜柱：ODS,硅膠，氨基鍵合硅膠柱 ?首選檢測器：Vis-UV ?GC: ?常選固定液：SE-30 OV-17、OV-1O1、SE-54 PEG-20M ?首選檢測器：FID ?6

21、貯藏 藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)的分類及目的： (1)影響因素試驗(yàn) (2)除去包裝，高溫、高濕度、強(qiáng)光照射、其他破壞等試驗(yàn) 主要目的： 研究藥物的固有穩(wěn)定性及其影響因素，為貯藏條件提供依據(jù)。 加速試驗(yàn)：40 C, 75%相對濕度 ?上市藥品包裝 目的：未進(jìn)行室溫或一般條件下長期穩(wěn)定性試驗(yàn)前，預(yù)測藥物的穩(wěn)定性，保證臨床研究或試 生產(chǎn)期間的藥品質(zhì)量；為制劑設(shè)計(jì)、包裝、貯藏等提供必要資料。 (3) 長期試驗(yàn)：25 C, 60%相對濕度 上市藥品包裝，目的：考察藥品的有效期 (4) 配伍穩(wěn)定性試驗(yàn)：制劑的穩(wěn)定性試驗(yàn)有時(shí)考察 第七章藥物制劑分析 1藥物制劑分析的特點(diǎn)1）鑒別特點(diǎn)可采用原料的鑒別方法。 當(dāng)輔料干擾主藥

22、的鑒別時(shí)，不能直接采用。先去除輔料或改用具有分離能力的方法。 2）檢查特點(diǎn)雜質(zhì)檢查 項(xiàng)目可能不同。不需重復(fù)原 料藥的項(xiàng)目，而檢查在制劑制備和貯藏過程中可能引入的雜 質(zhì)。限量要求不同。 劑型常規(guī)檢查 保證均一性、安全性、有效性 3）含量測定特點(diǎn)測定方法可能不同 化學(xué)原料注重精密度；制劑注重選擇性和靈敏度。結(jié)果表示不同原料多用百 分含量，制劑多用標(biāo)示量。含量合格要求不同 溶出度dissolution rate:系指藥物從片劑、膠囊劑等制劑在規(guī)定條件下溶出的速率和程度 溶出度試驗(yàn) dissolution test:測定藥物制劑溶出度的過程，是一種模擬口服固體制劑在胃腸 道中崩解和溶出的體外試驗(yàn)方法。

23、 Noyes-Whit ney方程 h dWdt = KfSCt 影響藥物溶出的主要因素1藥物粒子大小藥物的理化性質(zhì) 溶解度、水合狀態(tài)、晶型等 制劑處方和工藝 3藥物制劑的含量均勻度檢查 含量均勻度：系指小劑量或單劑量的固體制劑、半固體制劑和非均相液體制劑的每片（個(gè)） 含量符合標(biāo)示量的程度。 檢查目的：控制小劑量或單劑量制劑中藥物含量的均勻程度，保證給藥劑量的準(zhǔn)確性。 片劑分析 常規(guī)檢查：重量差異崩解時(shí)限 糖類的干擾及其排除（排除：過濾、改用弱氧化劑硫酸亞鐵片劑：鈰量法；原料：高錳 酸鉀法） 硬脂酸鎂的干擾及其排除（掩蔽法：酒石酸、草酸等掩蔽。提取分離法：有機(jī)溶劑提 取藥物UV法：硬脂酸鎂無U

24、V吸收） 注射劑分析 常規(guī)檢查：裝量 滲透摩爾濃度 裝量差異 可見異物不溶性微粒 無菌熱原 或細(xì)菌內(nèi)毒素 抗氧劑的干擾及其排除避開Vit C的最大吸收波長，可排除其對藥物UV測定法的 干擾。加掩蔽劑丙酮或甲醛加酸使抗氧劑分解加弱氧化劑氧化溶 劑油的干擾及其排除 有機(jī)溶劑稀釋法有機(jī)溶劑提取法柱色譜法 第八章羧酸及其酯類藥物的分析 結(jié)構(gòu)與性質(zhì) 羧基-酸性-OH、-OCOCH:鄰位致活基團(tuán) 酸性增強(qiáng) 鄰位-0H:分子內(nèi)氫鍵酸性增強(qiáng) 酸性大小水楊酸阿司匹林苯甲酸 HAc H2CO3 苯酚 酯基-水解性酸性介質(zhì)：不可能全部水解 過量堿（氫氧化鈉和碳酸鈉）存在，可水解完全 3）官能團(tuán)反應(yīng)特性含酚羥基、潛在

25、酚羥基的水楊酸類與三氯化鐵試液反應(yīng)，顯色 含芳伯氨基、潛在芳伯氨基重氮化反應(yīng)、重氮化-偶合反應(yīng) 含硫的丙磺舒 阿司匹林鑒定 分解生成硫化物 水解反應(yīng) COOH OCOCH 3+ Na2CO COOH OH CH 3C00Na + CO 2 COONa OH + H2SO4 OH + Na?S04 與三氯化鐵反應(yīng) 加弐氫化鈉黑鴻水解 紫 西己 含酚羥基或潛在酚羥基的藥物，在中性或弱酸性條件下，可與FeC3試液反應(yīng)，生成類似紫色 （紫色，紫堇色，紫紅色）的配位化合物 丙磺舒鈉鹽在pH5.06.0水溶液中與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成米黃色沉淀 重氮化-偶合反應(yīng)分解反應(yīng)丙磺舒 HOOC O Na2SO3

26、Na2SO4 + Na 2SO3 + HN（CH 2兇2兇3）2 特殊雜質(zhì)：乙酸苯酯 水楊酸苯酯 乙酰水楊酸苯酯，一定量阿司匹林在碳酸鈉試液中溶解應(yīng) 澄清。 游離水楊酸 水楊酸可直接與高鐵鹽反應(yīng)呈色HPLC法 阿司匹林含量測定酸堿滴定法 UV法 HPLC法 氯貝丁酯的鑒別異羥肟酸鐵反應(yīng) KOH Fe3+紫色 卡托普利的鑒別?；磻?yīng)HNO2紅色 酮洛芬的鑒別縮合反應(yīng)酮洛芬+二硝基苯肼偶氮化合物（橙色） 第九章 巴比妥類藥物的分析 環(huán)狀丙二酰脲母核：共性部分一與其它類藥物區(qū)別 取代基：特性部分 區(qū)別各巴比妥類藥物 o H O 巴C2 基本結(jié)構(gòu)（六元） 苯巴比妥 H 理化性質(zhì) 1弱酸性2與重金屬離子

27、的反應(yīng) 3紫外吸收光譜特征 4官能團(tuán)反應(yīng)特性 1弱酸性 酰亞胺基上的氫受鄰位羰基的影響，可以發(fā)生1,3-質(zhì)子遷移，由酮式變?yōu)橄〈际健?巴比妥類薊物A/Cu代Co代膚色物憂沉淀 （分弔中的籬亞胺基）適當(dāng)?shù)膒H I：弱碗性 pH10的堿性溶液： 5，5-二取代和1，5，5-三取代藥物均發(fā)生一級電離 pH13 的強(qiáng)堿性溶液 （0.1mol/L NaOH）: 5，5-二取代藥物發(fā)生二級電離，共軛結(jié)構(gòu)延長，最大吸收峰在255nm; 鑒別試驗(yàn) 一）丙二酰脲類鑒別反應(yīng)一般鑒別反應(yīng)，銀鹽反應(yīng)的方法，銅鹽反應(yīng)的方法 利用不飽和取代基的鑒別試驗(yàn)-司可巴比妥鈉 ? 與碘或溴試液的加成反應(yīng)：碘試液或溴試液褪色，與KM

28、nO4的氧化還原反應(yīng)： 堿性溶液中，巴比妥類藥物將紫色的KMnO4,還原成棕色的Mn O2 利用芳環(huán)取代基的鑒別試驗(yàn)-苯巴比妥 ? 硝化反應(yīng) 含芳香取代基的巴比妥類+ KNOJ + H2SC4黃色硝基化合物 ? 與硫酸-亞硝酸鈉的反應(yīng) 苯巴比妥+硫酸-亞硝酸鈉，橙黃色產(chǎn)物，隨即變?yōu)槌燃t色。 ? 與甲醛-硫酸的反應(yīng) 苯巴比妥+甲醛-硫酸 玫瑰紅色產(chǎn)物 含量測定 銀量法 原理 ? 巴比妥類藥物與硝酸銀定量反應(yīng)生成溶于水的一銀鹽。反應(yīng)比為1:1 ? 稍過量的銀離子與藥物形成難溶性的二銀鹽沉淀，溶液變混濁，指示滴定終點(diǎn)。 ? 以銀-玻璃電極電位法指示終點(diǎn)，準(zhǔn)確。 溴量法 定量反應(yīng)+Br2剩余滴定+KI

29、置換滴定+硫代硫酸鈉+淀粉 第十章芳胺類藥物的分析 對氨基苯甲酸酯類藥物 基本結(jié)構(gòu)： 芳酰胺類藥物 基本結(jié)構(gòu) 理化性質(zhì)：芳伯氨基特性、水解后顯芳伯氨基特 ,重氮化-偶合反應(yīng)，與芳醛縮合形成 Schiff 堿的反應(yīng) Schiff堿：伯胺和醛、酮反應(yīng)生成的化合物 ArCHO + H2N-R 宀 ArCH=NR + H0 *氧化變色 三鑒別試驗(yàn) （一）重氮化-偶合反應(yīng) 探鹽酸丁卡因 酸性溶液中，與亞硝酸鈉反應(yīng) N-亞硝基化合物的乳白色沉淀 鹽酸普魯卡因 H2N COONa H2N COOH H2N 重金屬離子-游離 1. 與銅和鈷離子的反應(yīng) ，Na2CO3試液中：（ChP） 中化合色COOH 鹽酸利

30、多卡因 + CUSQ-壬ci藍(lán)紫紫色配位 過量 t轉(zhuǎn)入氯仿 ? 鹽酸酸性溶液中：（USP），鹽酸利多卡因 + CoC2 t亮綠色鈷鹽 三氯化鐵反應(yīng) NHCOCH + FeCl5 OH Pe + 3HU 亞硝酸鈉滴定法1.原理Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCI宀 Ar-N2+C+ NaCI + 2H2O 定量） 2. 測定條件 1 ）加入適量KBr,加快反應(yīng)速度 2 ）酸的種類和用量 HCL 3）反應(yīng)溫度室溫 4）滴定速度 滴定終點(diǎn)：常用指示劑：KI-淀粉糊劑或指示液 缺點(diǎn)： ? 易混淆終點(diǎn)：未達(dá)終點(diǎn)時(shí)，KI在滴定液的強(qiáng)酸性條件下被空氣中的氧氧化析出碘, 與淀粉顯藍(lán)色，多次外試損失樣品

31、第十一章苯乙胺類藥物的分析 （一）基本結(jié)構(gòu) 酚羥基特性： 與F$+等重金屬離子配合呈色，易氧化呈色 芳環(huán)側(cè)連的氨基醇結(jié)構(gòu)：雙縮脲反應(yīng)在強(qiáng)堿性溶液中，雙縮脲與CuSQ形成紫 色絡(luò)合物的反應(yīng) 脂肪伯氨基：與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng) ? 含酚羥基的本類藥物，易被氧化劑氧化 ? 氧化劑： 碘過氧化氫鐵氰化鉀 三.特殊雜質(zhì)檢查 酮體在310nm波長處有最大吸收 第十二章甾體激素類藥物的分析 基本結(jié)構(gòu) 均含環(huán)戊烷并多氫菲母核 甾體化合物取代基構(gòu)型的確定 ? 甾體分子的4個(gè)環(huán)處于同一均等平面 ? 若將18-, 19-位的角甲基置于 平面之上，則： ? 伸在平面之上的氫原子或取代基為 B構(gòu)型（實(shí)線表示） ? 處于平

32、面之下的氫原子或取代基為 a構(gòu)型（虛線表示） ? 第二節(jié)鑒別試驗(yàn) ?（一）官能團(tuán)反應(yīng) a -醇酮基：強(qiáng)還原性，能與氧化劑反應(yīng) 深藍(lán)色的溶液（Cu2+） - CU2O J （紅色） Ag J 1 . Ci7- a -醇酮基的呈色反應(yīng) 鑒別腎上腺皮質(zhì)激素 ? 堿性酒石酸酮試液 ： ? 氨制硝酸銀試液：產(chǎn)生 四氮唑試液：產(chǎn)生有色的甲替 2. 酚羥基的呈色反應(yīng) 鑒別雌激素類：與重氮苯磺酸反應(yīng)生成紅色染料 3. 炔基的沉淀反應(yīng) ? 鑒別含乙炔基的甾體激素 ? 和硝酸銀試液反應(yīng)，生成白色炔銀沉淀。 4. 甲基酮的呈色反應(yīng) ? 鑒別孕激素類 ? 含CfC0的甾體激素類可與亞硝基鐵氰化鈉、間二硝基酚和芳香醛反

33、應(yīng)呈色。 ? 黃體酮+ Na2Fe （CN）s（NO）-藍(lán)紫色產(chǎn)物（靈敏、專屬） 5. 酮基的呈色反應(yīng) 與羰基試劑反應(yīng)，形成黃色的腙 2, 4-二硝基苯肼 硫酸苯肼 異煙肼 J有機(jī)鹵素拓氧瓶燃燒 含氟甾體藥物無機(jī)氟化物 茜素氟藍(lán)藍(lán)紫色水溶性配合物 硝酸亞鈰Ce3+ pH 4.3 三比色法含量測定方法 窺四氮唑比色法 腎上腺皮質(zhì)激素類的含測 2 反應(yīng)原理 在強(qiáng)堿性溶液中，含 C17- a -醇酮基的腎上腺皮質(zhì)激素將四氮唑鹽定量還原為有色甲替 Kober反應(yīng)比色法 雌激素的含測 雌激素與硫酸-乙醇反應(yīng)呈色，在 520 nm附近有最大吸收 窺異煙肼比色法 原理 酸性條件下，酮基與異煙肼縮合，形成黃色

34、的異煙腙，一定波長處具有最大吸收。 反應(yīng)的專屬性 對含?4-3-酮基的甾體激素類有一定專屬性 第13章 維生素類藥物的分析 CH3 CH3 vitamin A （醇或酯） 100% 鑒別試驗(yàn) 三氯化銻反應(yīng)（Carr-Price反應(yīng)） 1、原理 維生素A在飽和無水SbC3的無醇三氯甲烷溶液中，顯藍(lán)色 維生素A和SbC3中存在的親電試劑氯化高銻（5價(jià)）作用，形成不穩(wěn)定的藍(lán)色碳正離子 維生素A的無水乙醇-鹽酸溶液： 326nm處有單一吸收峰 含量測定 （一） UV法（三點(diǎn)校正法） 維生素A: 在325-328nm范圍內(nèi)具有最大吸收 維生素A原料中混有的雜質(zhì)： 在310-340nm內(nèi)，有吸收 2. 三

35、點(diǎn)校正法 在3個(gè)波長處測定吸收度后，在規(guī)定條件下以校正公式校正吸收度，再進(jìn)行含量計(jì) 算。 消除雜質(zhì)等無關(guān)吸收的影響，求得維生素A的真實(shí)含量。 求維生素A醋酸酯占標(biāo)示量的百分含量 A D 1900 W W 100 L 標(biāo)示量 示量 % = A： A328 或 A328（校正） W:供試品取用量 標(biāo)示量：每粒膠丸含 維生素A醇 D:供試品稀釋倍數(shù) :膠丸的平均內(nèi)容物重 Vit A醋酸酯的國際單位數(shù) 標(biāo)示量% A D 1830 W 100% W 100 L標(biāo)示量 維生素B （一）硫色素反應(yīng)-維生素Bi的專屬反應(yīng) 堿性溶液中，噻唑環(huán) 開環(huán)，再與嘧啶環(huán)上的-NH2環(huán)合，經(jīng)鐵氰化鉀 等氧化劑 氧 化，生成

36、硫色素。 硫色素溶于正丁醇（或異丁醇），顯藍(lán)色熒光。加 酸使成酸性，熒光消失，再加堿使成堿性， 熒光又重現(xiàn)。 維生素C一.結(jié)構(gòu)與性質(zhì) （一）結(jié)構(gòu) 二烯醇 內(nèi)酯環(huán) 2個(gè)手性碳原子 鑒別試驗(yàn) 與硝酸銀 6ch2oh CDH chph HCOH l/V o I 2 AO3 h6 I 2HNO3 + （二）與2，6-二氯靛酚反應(yīng) 由玫瑰紅色生成紅色，含量測定1。碘量法 2，6-二氯靛酚法，滴定終點(diǎn)顯紅色 維生素E 硝酸酸性條件下，水解成生育酚，生育酚被硝酸氧化成生育紅（橙紅色） 三氯化鐵堿性條件下，水解成生育酚，生育酚與FeC3發(fā)生氧化還原反應(yīng), 生育酚對-生育醌 Fe3+Fe2+ Fe2+與聯(lián)吡啶，

37、生成紅色的配位離子 第十四章雜環(huán)類藥物的分析 第一節(jié)萇菪烷類藥物 O 主要理化性質(zhì) 水解性具有酯結(jié)構(gòu)，易水解 堿性，脂環(huán)上的叔胺氮原子：堿性較強(qiáng)，易與酸成鹽 旋光性氫溴酸東莨菪堿：含手性碳原子，左旋體 硫酸阿托品：含手性碳原子，但容易外消旋化消旋體，無旋光性 鑒別試驗(yàn)：托烷生物堿的一般鑒別試驗(yàn) Vitaili反應(yīng)：水解產(chǎn)物莨菪酸的反應(yīng) 氧化還原反應(yīng) 托烷生物堿萇菪酸 硫酸 重鉻酸鉀 4苯甲醛 第二節(jié)吩噻嗪類藥物 R 鑒別試驗(yàn)：氧化劑氧化顯色反應(yīng) 與鈀離子配合顯色反應(yīng)：不受氧化產(chǎn)物的干擾 第三節(jié)苯并二氮雜卓類藥物 主要理化性質(zhì) 弱堿性： 苯并二氮雜卓上的 N: 弱堿性，在非水溶液中可用酸液滴定 水解性，二苯甲酮衍生物 水解后顯芳伯胺反應(yīng) NaN02 橙紅色 堿性&萘酚試液橙紅 適于Ni位上未取代的該類藥物 氯氮卓和奧沙西泮酸水解”含芳伯胺基的二甲酮衍生物 第四節(jié)喹啉類藥物 2 （游離） ,H2SO4,2H2O （一）綠奎寧反應(yīng) 6位含氧的喹啉衍生物：顯此反應(yīng) 硫酸奎寧、硫酸奎尼丁生成綠色產(chǎn)物 堿性條件下，呈綠色 中性條件下，呈藍(lán)色 酸性條件下，呈紫紅色 第六節(jié)、二氫吡啶類 nh2 化學(xué)鑒別法（二氫吡啶類藥物） 利用硝基的氧化性鑒別 Fe（0H）3 （紅棕色） 與亞鐵鹽反應(yīng)：Fe（OH）? 重氮化-偶合反應(yīng) R-NO2 R-NH2 重氮化偶合反應(yīng) 利