不同透析膜對(duì)血小板活化的影響

1、不同透析膜對(duì)血小板活化的影響來(lái)源：創(chuàng)新醫(yī)學(xué)網(wǎng)作者：王志宏常明劉書馨趙華作者單位：遼寧省大連市中心醫(yī)院腎臟內(nèi)科遼寧大連116011【摘要】目的：探討應(yīng)用不同透析膜材料對(duì)血液透析病人血小板活化的影響。方法: 對(duì) 48 例病情穩(wěn)定的常銅仿膜、血仿膜、聚砜膜透析器進(jìn)行透析，透析前后采血，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)外周血P- 選擇素的表達(dá)水平。膜透析，透析后的血P- 選擇素的表達(dá)水平明顯高于透析前(9.45 ±1.10ng/ml vs3.83 ±0.49ng/ml ， P<0.01) 。擇素的表達(dá)變化：血仿膜和聚砜膜之間無(wú)明顯差異(7.61 ±0.52ng/ml vs 5.8

2、4±0.40ng/ml ，P>0.05) ，均顯著膜之間有顯著差異 (7.61 ±0.52 ng/ml vs 14.90 ±2.39 ng/ml ， P<0.01) 、聚砜膜和銅仿膜之間有顯著差異 (5.8 14.90 ±2.39 ng/ml ， P<0.01) 。結(jié)論 : 血液透析可引起體內(nèi)血小板的活化，血小板的活化程度與透析膜的膜材料小板的活化作用顯著小于銅仿膜，提示血仿膜和聚砜膜的生物相容性優(yōu)于銅仿膜。【關(guān)鍵詞】透析膜血小板活化血 P-選擇素生物相容性血液透析 (hemodialysis,HD) 是終末期腎病 (end stage

3、 renal disease,ESRD)患者的主要腎臟替代治療方法要構(gòu)成部分，透析膜的理化特性決定著透析效果，透析膜的生物相容性直接關(guān)系到維持性血液透析(maintain存質(zhì)量與生存率。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，評(píng)價(jià)透析膜生物相容性的指標(biāo)逐漸完善，其中透析中血- 膜間相互價(jià)透析膜生物相容性的主要指標(biāo)之一1 。本實(shí)驗(yàn)中，我們應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)了血透病人透析前后外周血P- 選討不同血液透析膜材料對(duì)血小板活化的影響，觀察不同透析膜的生物相容性。1 對(duì)象與方法1.1研究對(duì)象 我院血透中心病情穩(wěn)定的長(zhǎng)期維持性血液透析的終末期腎病患者48 例，男性 26例，女性 2年齡 55歲，其中慢性腎炎23 例，糖尿病

4、腎病 15 例，高血壓良性腎小動(dòng)脈硬化6 例，痛風(fēng)腎病 1 例，多囊腎間質(zhì)性腎炎 1 例?；颊呙恐芡肝?3 次，每次 4.5小時(shí)，所有 患者在實(shí)驗(yàn)前兩周未輸血及未服用影響血小板功能全身免疫性疾病、內(nèi)分泌疾病、嚴(yán)重肝病等疾病，未應(yīng)用免疫抑制劑。1.2方法 48 例常規(guī)血透病人均分別采用銅仿膜(CU) 、血仿膜 (HE) 、聚砜膜 (PS) 三種膜材料的透析器透析，機(jī)均為德國(guó)產(chǎn) Fresenius4008B 型機(jī)器，透析膜面積均為15m2，均為碳酸鹽透析，透析液溫度3636.5 ，透140mmol/L，透析液 Ca2+濃度為 1.25 1.5mmol/L ，血流量 180 250ml/min 。為

5、避免人為因素對(duì)血小板活化的影脈端采血 2ml，離心 (600 800r/min,5min) ，取上清液，加多聚甲醛 ( 終濃度為1%)室溫下固定 15min，取上 層緩沖液，調(diào)整血小板濃度為300×109/L, 將 20 l 熒光單抗 ( 法國(guó)國(guó)際免疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)) 加入 100l 用多勻，置室溫暗處 15min，用美國(guó) Coulter 公司生產(chǎn)的 XL 型流式細(xì)胞儀檢測(cè)P-選擇素。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用 SPSS9.0 統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，測(cè)定數(shù)據(jù)用x- ±S表示，多組資料間的比較采間兩兩比較采用 t 檢驗(yàn)。2 結(jié)果2.1 采用三種血透膜血透前、后自我對(duì)照，血透

6、后外周血P- 選擇素的表達(dá)水平較血透前明顯升高(9.45 ± 13.83 ±0.49ng/ml ， P<0.01) 。2.2 三組間血透后外周血P-選擇素的表達(dá)水平變化血仿膜和聚砜膜之間無(wú)明顯差異(7.61 ±0.52 ng/ml vsP>0.05) ，均顯著低于銅仿膜。血仿膜和銅仿膜之間有顯著差異(7.61 ±0.52 ng/ml vs 14.90±2.39 ng/ml ，P有顯著差異 (5.84 ±0.40 ng/ml vs 14.90±2.39 ng/ml ，P<0.01) 。1 / 3透前后及三組間

7、外周血P- 選擇素表達(dá)水平的對(duì)比代表與 CU相比有顯著差異(P<0.01) 。2.3應(yīng)用不同膜材料過(guò)程中血小板計(jì)數(shù)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異。3 討論目前臨床常用的透析膜可分為三類，即未修飾的纖維素膜( 如銅仿膜 ) 。改良或再生纖維素膜( 如血仿膜 ) 。血液透析的中心環(huán)節(jié)，其作為一種異體物質(zhì)，與人體血管內(nèi)皮細(xì)胞不同，與血液接觸后不可避免的會(huì)引起機(jī)體是指人體血液與透析膜接觸時(shí)產(chǎn)生的特殊反應(yīng)，可引起一系列臨床變化，常表現(xiàn)為補(bǔ)體激活，細(xì)胞因子的釋放積，血細(xì)胞的活化以及其他方面的變化，與慢性腎功能衰竭病人的營(yíng)養(yǎng)不良、心血管疾病、微炎癥狀態(tài)、腎性謝、氧化應(yīng)激、免疫功能、貧血、凝血障礙等關(guān)系非常密切，因

8、此透析膜生物相容性一直是研究熱點(diǎn)。國(guó)內(nèi)外性進(jìn)行了大量研究觀察，結(jié)果顯示生物相容性好的透析膜引起的機(jī)體變化輕微，而生物相容性差的透析膜則引起如前所述，評(píng)價(jià)透析膜生物相容性的指標(biāo)逐漸完善，其中血小板活化是評(píng)價(jià)透析膜生物相容性的主要指標(biāo)之蛋白 140KD(granular member protein,GMP-140)，是細(xì)胞黏附分子選擇素家族的重要成員。存在于血小板 -志和黏附受體，其具有多種生物學(xué)功能，參與機(jī)體多種生理病理過(guò)程2,3，是目前所知反映血小板活化和釋放我們采用銅仿膜、血仿膜、聚砜膜三種膜材料的透析器透析，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)透析前后外周血P- 選擇料血透后P-選擇素表達(dá)水平均升高，提示

9、血透后血小板被激活，與席春生5 等研究的血液透析對(duì)血P-選擇素在激活程度上CU較 HE、 PS更明顯，而 HE、 PS間無(wú)差異。本研究的結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了CU的生物相容性較HE、銅仿膜、醋酸膜、血仿膜、合成膜透析后血液 P-選擇素的含量，由高到低依次為銅仿膜>醋酸膜 >血仿膜 >合成異。錢正子等 7 觀察亦發(fā)現(xiàn)，醋酸纖維素膜透析后 P- 選擇素的升高幅度顯著高于聚砜膜。血小板活化與許多疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。血小板被激活而成為活化血小板，和纖維蛋白原聚集成團(tuán)，將塞8 ， 9 ，易 引起動(dòng)靜脈內(nèi)瘺閉塞、透析過(guò)程中在透析器中形成血栓。 Bemdt 和 Dong 等 10 ， 11

10、研究共同證明硬化的發(fā)生上起著重要 的作用，而且很大程度上參與了動(dòng)脈粥樣硬化的全過(guò)程，成為心腦血管學(xué)者關(guān)注的對(duì)象癥反應(yīng)。綜上，長(zhǎng)期應(yīng)用生物相容性好的透析膜會(huì)延緩血液透析相關(guān)急性和慢性并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展，提高尿毒癥病人參考文獻(xiàn)1 KlinkmanH,DavisonAM.Nephrol Dial Transplant.1994,9:1.2 Pendl OG, Robert G, Steinert M, et al.Immature mouse dendritic cells enter inflamed tissuE-and P-selectin but not P-selectin glycopro

11、tein ligand I J.Blood， 2002,99(3):946-956.3 Genbacev OD, Prakobphol A, Foulk RA, et al. Trophoblast L-selectin mediated adhesion at t2 / 3interface J.Science, 2003,299(5605):405-408.4 LebrHA,Olofsson Am, et al.J Lab Invest Med.1994,24:69.5 席春生，鐘建庭，劉麗等 . 血液透析對(duì)血小板黏附分子表達(dá)調(diào)節(jié)的影響J. 中華腎臟病雜志， 2001， 16 GawazM

12、P,MujaisSK,ShikataB,etal.Artif Organs.1999,2(1):29-36.7 錢正子，嚴(yán)海東，鄭曉勇等 . 腎臟病與透析腎移植雜志， 2001， 10(2):114-117.8 Roberts DE,McnicolA,BoseR.Mechanism of collagen activation in human plateletsJ.J BiolCh19430.9 Ando Y.Biochemistry of platelet membrane glycoproteinsJ.Nippon Rinsho,2003,61(4):547-5510 Berndt MC.Induction of Platelet-Endothelial Interactions in PostcapillaryVenules In Hype Critical Role of P-SelectinArteriosclerosis,Thrombosi