瘧原蟲鏡檢技術(shù)120228

1、泗陽縣人民醫(yī)院檢驗科泗陽縣人民醫(yī)院檢驗科 王恒松王恒松瘧原蟲鏡檢技術(shù)瘧原蟲鏡檢技術(shù)l瘧原蟲的基本形態(tài)特征瘧原蟲的基本形態(tài)特征l血片制作與染色血片制作與染色l瘧原蟲計數(shù)瘧原蟲計數(shù)l顯微鏡的維護與保養(yǎng)顯微鏡的維護與保養(yǎng) 瘧疾是由蚊子傳播的寄生蟲病，它的病瘧疾是由蚊子傳播的寄生蟲病，它的病原體是瘧原蟲。原體是瘧原蟲。 寄生于人體的瘧原蟲有寄生于人體的瘧原蟲有4 4 種種瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)n瘧原蟲基本構(gòu)造為瘧原蟲基本構(gòu)造為核、細胞質(zhì)（胞漿）和瘧核、細胞質(zhì)（胞漿）和瘧色素。色素。n原蟲經(jīng)原蟲經(jīng)姬氏姬氏GiemsaGiemsa或瑞氏或瑞氏WrightWright染色：染色： 核核呈呈紅色紅色,

2、,胞質(zhì)胞質(zhì)呈呈蘭色蘭色，瘧色素瘧色素為本色為本色胞漿胞漿瘧色素瘧色素核核瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)2.2.細胞漿細胞漿 藍色或深藍色，隨著蟲體發(fā)育長大，藍色或深藍色，隨著蟲體發(fā)育長大，細胞漿逐漸增多。細胞漿逐漸增多。瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)胞漿胞漿瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)n不著色，顏色和顆粒的形狀，因瘧原蟲種類而不著色，顏色和顆粒的形狀，因瘧原蟲種類而異，瘧色素在蟲體內(nèi)散在分布或聚集成團塊。異，瘧色素在蟲體內(nèi)散在分布或聚集成團塊。n間日瘧原蟲呈短棒狀，黃褐色；間日瘧原蟲呈短棒狀，黃褐色；n惡性瘧原蟲呈細砂狀，黑褐色；惡性瘧原蟲呈細砂狀，黑褐色；n三日瘧原蟲呈砂粒狀，深褐色；三日瘧原蟲

3、呈砂粒狀，深褐色；n卵形瘧原蟲與間日瘧原蟲相似。卵形瘧原蟲與間日瘧原蟲相似。3.3.瘧色素瘧色素瘧色素瘧色素滋養(yǎng)體期：滋養(yǎng)體期：早期、晚期滋養(yǎng)體早期、晚期滋養(yǎng)體裂殖體期：裂殖體期：未成熟、成熟裂殖體未成熟、成熟裂殖體配子體期：配子體期：雌、雄配子體雌、雄配子體瘧原蟲在瘧原蟲在RBCRBC內(nèi)內(nèi)各期形態(tài)各期形態(tài)各不相同各不相同瘧原蟲在紅細胞內(nèi)按照生長發(fā)育繁殖的階段不同瘧原蟲在紅細胞內(nèi)按照生長發(fā)育繁殖的階段不同瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)1.1. 紅細胞通常漲大紅細胞通常漲大 2.2. 薛氏點明顯薛氏點明顯 3.3. 環(huán)狀體較粗大環(huán)狀體較粗大4.4. 滋養(yǎng)體胞漿有阿米巴樣滋養(yǎng)體胞漿有阿米巴樣偽足偽足

4、5.5. 血片中可見各期的原蟲血片中可見各期的原蟲形態(tài)形態(tài)6.6. 成熟裂殖體約含成熟裂殖體約含12-2412-24個裂殖子，排列不規(guī)則個裂殖子，排列不規(guī)則 間日瘧（間日瘧（P. P. vivaxvivax ） 鑒定要點鑒定要點n蟲體蟲體約占約占RBCRBC直徑的直徑的1/31/3，一個一個RBCRBC含有一個原蟲，含有一個原蟲，偶爾偶爾2 2個個n核核紅色，紅色，1 1個，位于蟲體個，位于蟲體一側(cè)，頗似戒指的紅寶一側(cè)，頗似戒指的紅寶石。石。n胞質(zhì)胞質(zhì)較少，淡藍色，呈較少，淡藍色，呈環(huán)狀，中間為大空泡。環(huán)狀，中間為大空泡。1.1.早期滋養(yǎng)體早期滋養(yǎng)體-環(huán)狀體環(huán)狀體間日瘧原蟲間日瘧原蟲薄血膜2

5、2 間日瘧原蟲間日瘧原蟲-晚期滋養(yǎng)體晚期滋養(yǎng)體n蟲體蟲體由小漸大，活動顯著，由小漸大，活動顯著，充滿充滿RBCRBCn胞質(zhì)胞質(zhì)變形，有偽足伸出，形變形，有偽足伸出，形態(tài)不規(guī)則。有數(shù)個空泡態(tài)不規(guī)則。有數(shù)個空泡 。n核核紅色，增大紅色，增大n瘧色素瘧色素增多，呈黃褐色增多，呈黃褐色n紅細胞紅細胞脹大，顏色變淡，出脹大，顏色變淡，出現(xiàn)淡紅色的現(xiàn)淡紅色的薛氏小點。薛氏小點。 薄血膜3 3 間日瘧原蟲間日瘧原蟲-未成熟裂殖體未成熟裂殖體 n蟲體蟲體變圓，空泡消失變圓，空泡消失n核核開始開始分裂分裂n胞漿胞漿未分裂未分裂n瘧色素瘧色素黃棕色，開始集黃棕色，開始集中中薄血膜4.4.間日瘧原蟲間日瘧原蟲- -

6、成熟裂殖體成熟裂殖體大小：大?。后w積大，不規(guī)則的體積大，不規(guī)則的圓形圓形裂殖子：裂殖子：數(shù)目為數(shù)目為12-2412-24不不等等, ,平均平均 1616個左右，排列個左右，排列不規(guī)則不規(guī)則核核 分裂分裂胞漿：胞漿：分裂分裂瘧色素：瘧色素：位于中央或一邊位于中央或一邊薄血膜5.1 5.1 間日瘧原蟲間日瘧原蟲-雌配子體雌配子體n蟲體蟲體較大，占滿脹大的紅細胞較大，占滿脹大的紅細胞n胞質(zhì)胞質(zhì)致密，色深藍致密，色深藍n核核小致密，深紅色，多位于蟲小致密，深紅色，多位于蟲體一側(cè)體一側(cè)n瘧色素瘧色素分散分散 5.2 5.2 間日瘧原蟲間日瘧原蟲-雄配子體雄配子體n蟲體蟲體較小，胞質(zhì)藍色而略較小，胞質(zhì)藍色

7、而略帶紅帶紅n核核大疏松，淡紅色，多位大疏松，淡紅色，多位于蟲體的中央。于蟲體的中央。n瘧色素瘧色素均勻散在均勻散在薄血膜1.1. 紅細胞不漲大紅細胞不漲大2.2. 1 1個個RBCRBC內(nèi)內(nèi)2 2個以上原蟲個以上原蟲常見，環(huán)狀體內(nèi)可有常見，環(huán)狀體內(nèi)可有2 2個核個核 3.3. 環(huán)狀體可貼在紅細胞環(huán)狀體可貼在紅細胞邊緣邊緣 4.4. 血片中除血片中除R R、G G外沒有外沒有其他發(fā)育期其他發(fā)育期5.5. 配子體呈新月形或臘配子體呈新月形或臘腸形腸形6.6. 成熟裂殖體約含成熟裂殖體約含16-3216-32個裂殖子，排列不規(guī)個裂殖子，排列不規(guī)則則7.7. 可出現(xiàn)茂氏點可出現(xiàn)茂氏點惡性瘧（惡性瘧（

8、P.falciparumP.falciparum） 鑒定要點鑒定要點惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲-環(huán)狀體環(huán)狀體nRBCRBC不脹大不脹大n可見數(shù)粒，大小不一，紅色粗大的茂氏點可見數(shù)粒，大小不一，紅色粗大的茂氏點n核核1 1個，但個，但2 2個常見個常見n紅細胞常含紅細胞常含2 2個以上原蟲個以上原蟲n蟲體常位于紅細胞的邊緣蟲體常位于紅細胞的邊緣 ，呈，呈“鳥飛狀鳥飛狀”薄血膜惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體 n一般不出現(xiàn)在外周血中一般不出現(xiàn)在外周血中n體小結(jié)實，圓形，不活體小結(jié)實，圓形，不活動動n瘧色素集中一團，黑褐瘧色素集中一團，黑褐色色n原蟲此時開始集中在內(nèi)原蟲此時開始集中在內(nèi)臟毛細血管臟毛細

9、血管薄血膜惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲成熟裂殖體成熟裂殖體 n裂殖子裂殖子8 83636個，通常個，通常18182424個，排列不規(guī)則個，排列不規(guī)則n瘧色素瘧色素集中成一團集中成一團n蟲體蟲體占紅細胞體積的占紅細胞體積的2/32/3至至3/4 3/4 薄血膜 惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲n新月形新月形，兩端較尖，兩端較尖n核核致密，深紅色，常位于致密，深紅色，常位于中央中央n瘧色素瘧色素黑褐色，分布于核黑褐色，分布于核周圍周圍n胞漿胞漿呈藍色呈藍色雌配子體雌配子體雄配子體雄配子體n臘腸形臘腸形，兩端鈍圓，兩端鈍圓n胞質(zhì)胞質(zhì)色藍而略帶紅色藍而略帶紅n核核疏松，淡紅色，位于中央疏松，淡紅色，位于中央n瘧色素瘧色素

10、黃棕色，小桿狀，在核周圍較多黃棕色，小桿狀，在核周圍較多 薄血膜1.1. 紅細胞不漲大或略紅細胞不漲大或略小小2.2. 環(huán)狀體環(huán)狀體中等大小，中等大小，核較大，胞漿粗厚核較大，胞漿粗厚3.3. 胞漿不活躍呈帶狀胞漿不活躍呈帶狀形形 4.4. 成熟裂殖體呈菊花成熟裂殖體呈菊花狀狀, ,內(nèi)含內(nèi)含6-126-12個裂殖個裂殖子子 5. 雌雄配子體小于雌雄配子體小于 正正 常常 紅細胞，瘧色紅細胞，瘧色 素呈深褐色素呈深褐色 6. ?？刹橐姼麟A段常可查見各階段 的瘧原蟲的瘧原蟲三日瘧（三日瘧（P.malariaeP.malariae） 診斷要點診斷要點與間日瘧原蟲的與間日瘧原蟲的環(huán)狀體頗相似環(huán)狀體頗相

11、似三日瘧原蟲三日瘧原蟲-環(huán)狀體環(huán)狀體三日瘧原蟲三日瘧原蟲大滋養(yǎng)體大滋養(yǎng)體蟲體蟲體常呈帶狀常呈帶狀胞漿胞漿藍色，藍色，三日瘧原蟲三日瘧原蟲裂殖體裂殖體蟲體蟲體小于正常紅細小于正常紅細胞胞裂殖子裂殖子612個，個，排列呈菊花狀排列呈菊花狀瘧色素瘧色素呈深褐色，呈深褐色，常聚集在中央常聚集在中央蟲體蟲體小于正常紅小于正常紅細胞細胞,呈圓形呈圓形核核紅，偏于一側(cè)紅，偏于一側(cè)胞漿胞漿呈藍色呈藍色瘧色素瘧色素深褐色深褐色三日瘧原蟲三日瘧原蟲-大配子體大配子體蟲體蟲體小于正常小于正常紅細胞紅細胞三日瘧原蟲三日瘧原蟲-小配子體小配子體卵形瘧（卵形瘧（P. P. ovaleovale） 診斷要點診斷要點1.1.

12、 紅細胞略漲大或正紅細胞略漲大或正常，卵圓形或邊緣常，卵圓形或邊緣呈鋸齒狀呈鋸齒狀2.2. 環(huán)狀體中等大小，環(huán)狀體中等大小，核較大，胞漿粗厚核較大，胞漿粗厚3.3. 薛氏點出現(xiàn)較早粗薛氏點出現(xiàn)較早粗大，量多大，量多4.4. 成熟裂殖體約含成熟裂殖體約含6-6-1212個裂殖子個裂殖子 5. 5. 常可查見各階段的?？刹橐姼麟A段的 瘧原蟲瘧原蟲 環(huán)狀體環(huán)狀體滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體裂殖體裂殖體 配子體配子體卵形瘧 被寄生的紅細胞被寄生的紅細胞 間日瘧原蟲間日瘧原蟲 大小大小 斑點斑點脹大脹大 滋養(yǎng)體期開始滋養(yǎng)體期開始出現(xiàn)薛氏點出現(xiàn)薛氏點( (Schuffners dots )，出現(xiàn)，出現(xiàn)稍晚，鮮紅色，稍晚，

13、鮮紅色，細小數(shù)多細小數(shù)多 惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲正常或略縮小正?；蚵钥s小 常見有茂氏點常見有茂氏點(Maurers dots) ，紫褐，紫褐色，粗大數(shù)少色，粗大數(shù)少 三日瘧原蟲三日瘧原蟲正?；蚩s小正常或縮小 常見有齊氏點常見有齊氏點(Ziemanns dots )，淡紅，淡紅色，微細色，微細卵形瘧原蟲卵形瘧原蟲略大或正常略大或正常感染紅細胞感染紅細胞邊緣呈距齒邊緣呈距齒狀狀常見有薛氏常見有薛氏點點,出現(xiàn)較早，出現(xiàn)較早，環(huán)狀體階段環(huán)狀體階段可見，可見，紅色，微粗紅色，微粗瘧原蟲基本結(jié)構(gòu)瘧原蟲基本結(jié)構(gòu) 寄生的紅細胞寄生的紅細胞: : 經(jīng)染色后，因細胞內(nèi)血紅蛋經(jīng)染色后，因細胞內(nèi)血紅蛋白溶解，輪廓消失，

14、但有時尚留下殘骸的白溶解，輪廓消失，但有時尚留下殘骸的“影影子子”或點彩?；螯c彩。 厚血膜由于用血量多，血膜小，細胞重迭，厚血膜由于用血量多，血膜小，細胞重迭，干燥緩慢，各期瘧原蟲的體積都略為縮小，其干燥緩慢，各期瘧原蟲的體積都略為縮小，其中大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變，裂殖體和中大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變，裂殖體和配子體的形態(tài)則變化不大。配子體的形態(tài)則變化不大。厚血膜中瘧原蟲的形態(tài)厚血膜中瘧原蟲的形態(tài)：厚血膜間日瘧原蟲間日瘧原蟲 厚血膜厚血膜環(huán)狀體環(huán)狀體配子體配子體滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體裂殖體裂殖體惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲厚血膜RingsGametocytesPM 三日瘧原蟲三日瘧原蟲厚血膜配子體配子體

15、滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體裂殖體裂殖體惡惡性性瘧瘧環(huán)環(huán)狀狀體體滋滋養(yǎng)養(yǎng)體體裂裂殖殖體體配配子子體體間間日瘧日瘧三三日日瘧瘧卵卵形形瘧瘧 由于在血膜制備過程中由于在血膜制備過程中紅細胞溶解，紅細胞溶解，因而其因而其原形態(tài)消失原形態(tài)消失，且染液和玻片上可能存在，且染液和玻片上可能存在雜質(zhì)雜質(zhì)等，等，要根據(jù)瘧原蟲的三個基本要素仔細要根據(jù)瘧原蟲的三個基本要素仔細加以鑒別。加以鑒別。n（1)1)疑似瘧色素疑似瘧色素 厚血膜在制作和染色過程厚血膜在制作和染色過程中，血膜上的染料殘渣及空氣中或耳垂上的中，血膜上的染料殘渣及空氣中或耳垂上的塵埃，有時可誤認為瘧色素。塵埃，有時可誤認為瘧色素。瘧原蟲與其他異物的鑒別瘧原蟲與其

16、他異物的鑒別n（2 2）疑似瘧原蟲核）疑似瘧原蟲核n細菌尤其是球菌或白細細菌尤其是球菌或白細胞碎裂后散出的顆粒，胞碎裂后散出的顆粒，常染成紅色小點，常與常染成紅色小點，常與瘧原蟲的核相似。瘧原蟲的核相似。n（3 3）疑似瘧原蟲胞漿）疑似瘧原蟲胞漿 n網(wǎng)織紅細胞的殘骸和白細胞的殘骸，常被染網(wǎng)織紅細胞的殘骸和白細胞的殘骸，常被染成藍色，頗似瘧原蟲的胞漿，有時因與上述紅成藍色，頗似瘧原蟲的胞漿，有時因與上述紅點巧合一起，而容易誤認為瘧原蟲的大滋體，點巧合一起，而容易誤認為瘧原蟲的大滋體，可依據(jù)瘧色素的特點加以區(qū)別可依據(jù)瘧色素的特點加以區(qū)別瘧原蟲與其他異物的鑒別瘧原蟲與其他異物的鑒別薄血膜中常見的血液

17、成分薄血膜中常見的血液成分血小板中性粒細胞中性粒細胞單核細胞單核細胞淋巴細胞淋巴細胞嗜酸性粒細胞嗜酸性粒細胞（4）血液成份與分析）血液成份與分析（5 5）雜質(zhì)）雜質(zhì)-類似瘧原蟲的物質(zhì)類似瘧原蟲的物質(zhì)瘧原蟲與其他異物的鑒別瘧原蟲與其他異物的鑒別（6 6） 形態(tài)失常形態(tài)失常l瘧原蟲成份丟失。瘧原蟲成份丟失。l成份增加。成份增加。如在多蟲感染、多核以及如在多蟲感染、多核以及多蟲重疊時瘧原蟲形態(tài)構(gòu)造會有異于多蟲重疊時瘧原蟲形態(tài)構(gòu)造會有異于正常。正常。l形態(tài)改變。形態(tài)改變。惡性瘧粗大的環(huán)狀體。惡性瘧粗大的環(huán)狀體。l 藥物影響。藥物影響。 服服氯喹氯喹后后, ,大滋養(yǎng)體胞漿停滯發(fā)育，失去阿大滋養(yǎng)體胞漿停滯

18、發(fā)育，失去阿米巴樣形態(tài)，并發(fā)生碎解和色澤加深米巴樣形態(tài)，并發(fā)生碎解和色澤加深. . 服服伯喹伯喹后后, ,配子體的核和胞漿破碎，瘧色素配子體的核和胞漿破碎，瘧色素粗大并相對集中等。粗大并相對集中等。 血片的制作與染色血片的制作與染色 n血液涂片鏡檢瘧原蟲目前仍是確血液涂片鏡檢瘧原蟲目前仍是確診瘧疾和鑒別蟲種的主要方法，診瘧疾和鑒別蟲種的主要方法，玻片清潔與否玻片清潔與否，血片制作的質(zhì)量血片制作的質(zhì)量和染色的好壞，和染色的好壞，直接影響鏡檢的直接影響鏡檢的速度和準(zhǔn)確性。速度和準(zhǔn)確性。血片制作血片制作所需材料所需材料: 載玻片載玻片 采血針采血針 75酒精棉球酒精棉球 玻片盒玻片盒n載玻片的清洗：

19、載玻片的清洗：n新玻片的清洗方法新玻片的清洗方法 用加有洗潔精或洗用加有洗潔精或洗衣粉的熱水洗滌，浸于衣粉的熱水洗滌，浸于95% 95% 的乙醇中的乙醇中1 1小時以上小時以上n已用過的玻片：已用過的玻片：用加有洗衣粉的熱水洗用加有洗衣粉的熱水洗滌，浸于滌，浸于95% 95% 的乙醇中的乙醇中1 1小時以上小時以上 載玻片載玻片取血部位取血部位: 指尖指尖 耳垂耳垂血片制作血片制作標(biāo)準(zhǔn)的推片姿勢標(biāo)準(zhǔn)的推片姿勢薄血膜的涂制：薄血膜的涂制：取血液取血液1-1.5l1-1.5l血滴置于載玻片的血滴置于載玻片的中央中央，將推片的一端置于血滴之前，當(dāng)血液在載玻將推片的一端置于血滴之前，當(dāng)血液在載玻片與推

20、片之間向兩側(cè)擴展至片與推片之間向兩側(cè)擴展至約約2cm2cm寬寬時，兩時，兩玻片保持玻片保持20-3020-30角，角，推成舌狀薄血膜，推成舌狀薄血膜，長約長約2-2.5CM2-2.5CM。血片制作血片制作 血片制作血片制作 厚血膜的涂制：厚血膜的涂制： 取血液取血液4-5l4-5l 血滴置于載片的中央偏血滴置于載片的中央偏右右1/31/3， 由里向外劃圈涂成直徑為由里向外劃圈涂成直徑為0.8-10.8-1厘米厘米 厚薄均勻、圓形厚血膜厚薄均勻、圓形厚血膜. .血片制作血片制作 每張載玻片上分別做每張載玻片上分別做1 1個薄血膜，個薄血膜，1 1個厚血個厚血膜。標(biāo)準(zhǔn)血膜的位置如下圖所示。膜。標(biāo)準(zhǔn)

21、血膜的位置如下圖所示。血片制作血片制作厚、薄血膜優(yōu)缺點厚、薄血膜優(yōu)缺點 厚血膜厚血膜 薄血膜薄血膜 優(yōu)點優(yōu)點血量多，面積小，血量多，面積小，原蟲檢原蟲檢出率高出率高紅細胞完整，原蟲形紅細胞完整，原蟲形態(tài)改變不大，態(tài)改變不大，原蟲易原蟲易于辨認于辨認 缺點缺點原蟲在干燥過程中皺縮，原蟲在干燥過程中皺縮，紅細胞消失，原蟲變形較紅細胞消失，原蟲變形較大，大，原蟲鑒定困難原蟲鑒定困難血量比厚血膜少許多，血量比厚血膜少許多，面積比厚血膜的大。面積比厚血膜的大。檢查費時，檢查費時，原蟲檢出原蟲檢出率較低率較低 用途用途用于瘧疾病人檢查用于瘧疾病人檢查原蟲蟲種、蟲期鑒定原蟲蟲種、蟲期鑒定及初學(xué)者教學(xué)標(biāo)本及初

22、學(xué)者教學(xué)標(biāo)本血片染色血片染色兩種染色方法兩種染色方法: :n吉氏染色法吉氏染色法n瑞氏染色法瑞氏染色法n常用吉氏染色法常用吉氏染色法血片的染色血片的染色n待血片待血片完全干燥完全干燥后才可染色后才可染色n1 1血膜的固定血膜的固定-甲醇甲醇 吉氏染液：染色方法吉氏染液：染色方法薄血膜經(jīng)甲醇固定干燥后，薄血膜經(jīng)甲醇固定干燥后，將血片平放，將血片平放，用用PH7.0-7.2PH7.0-7.2的磷酸緩沖液的磷酸緩沖液或蒸餾水將吉氏原液稀釋，或蒸餾水將吉氏原液稀釋，原液與緩沖液為原液與緩沖液為1:201:20。混混勻勻染色染色20-3020-30分鐘分鐘，晾干鏡檢。晾干鏡檢。厚血膜溶血染色厚血膜溶血染

23、色 放置多時未染色的血片（放置多時未染色的血片（2 2天以上，薄天以上，薄片已用甲醇固定），在染色之前，須在片已用甲醇固定），在染色之前，須在厚血膜上用清水進行溶血，待血膜全部厚血膜上用清水進行溶血，待血膜全部溶解后倒掉，用吉氏染液染色溶解后倒掉，用吉氏染液染色, ,清水漂清水漂洗干凈洗干凈, ,晾干。晾干。n 染色用水和沖洗用水染色用水和沖洗用水npH7.0pH7.0pH7.2pH7.2緩沖蒸餾水效果最佳緩沖蒸餾水效果最佳。n先制備好兩種貯備液先制備好兩種貯備液n貯備液貯備液I 1/15MI 1/15M磷酸氫二鈉（磷酸氫二鈉（NaNa2 2HPOHPO4 4）溶液溶液 n NaNa2 2HP

24、OHPO4 4 9.5 g9.5 gn 蒸餾水蒸餾水 1000 ml1000 mln貯備液貯備液 1/15M 1/15M磷酸二氫鉀磷酸二氫鉀 （KHKH2 2POPO4 4 ）溶液溶液 n KHKH2 2POPO4 4 9.07 g 9.07 gn 蒸餾水蒸餾水 1000 ml1000 mln緩沖蒸餾水配制緩沖蒸餾水配制nPH M/15 NaPH M/15 Na2 2HPOHPO4 4 M/15 KH M/15 KH2 2POPO4 4 DW DW n (ml) ( ml) (ml)n7.0 63 37 900n7.1 68 32 900n7.2 73 27 900n緩沖蒸餾水宜用時緩沖蒸餾水

25、宜用時新鮮配制新鮮配制為好。為好。n著色較好的血片，著色較好的血片，肉眼看上去肉眼看上去呈淡紫呈淡紫紅色紅色，不應(yīng)該出現(xiàn)藍不應(yīng)該出現(xiàn)藍綠色或紅色；綠色或紅色；鏡檢紅細胞呈鏡檢紅細胞呈淡紅色淡紅色，嗜酸性細胞的，嗜酸性細胞的顆粒呈顆粒呈鮮紅色鮮紅色，淋巴細胞及瘧原蟲的，淋巴細胞及瘧原蟲的胞漿呈胞漿呈藍色或淡藍色藍色或淡藍色，白細胞的核呈，白細胞的核呈紫藍色紫藍色，瘧原蟲的核呈，瘧原蟲的核呈紅色紅色，瘧色素，瘧色素清晰可見，在顯微鏡下僅有小量染液清晰可見，在顯微鏡下僅有小量染液沉淀。沉淀。 血片制作注意事項血片制作注意事項（1 1）在制作血片前，首先要核對患者的）在制作血片前，首先要核對患者的 姓

26、名、年齡和住址姓名、年齡和住址（2 2）載玻片必須清潔無油污，理想的?。┹d玻片必須清潔無油污，理想的薄 血膜是一層血細胞均勻分布不重血膜是一層血細胞均勻分布不重 疊、無裂縫、無皺折和空泡，血膜疊、無裂縫、無皺折和空泡，血膜 末端呈舌狀。末端呈舌狀。（3 3）厚血膜厚度以一個油鏡視野內(nèi)可見厚血膜厚度以一個油鏡視野內(nèi)可見5-5-1010個白細胞為宜。個白細胞為宜。（4 4）制成的血片在未干前不能傾斜放置，制成的血片在未干前不能傾斜放置，待其自然干燥，不要加熱，加熱會使原蟲待其自然干燥，不要加熱，加熱會使原蟲變形，影響鏡檢結(jié)果變形，影響鏡檢結(jié)果血片制作注意事項血片制作注意事項（1 1）染料溶劑的質(zhì)量）染料溶劑的質(zhì)量 （2）染液的新舊）染液的新舊（3）染液稀釋后使用時間）染液稀釋后使用時間原液必須臨用時稀釋，隨配隨用。原液必須臨用時稀釋，隨配隨用。（4）染液的稀釋濃度）染液的稀釋濃度（5）染色時間）染色時間 (6) 染色稀釋用水染色稀釋用水:Ph7.0-7.2 染色質(zhì)量影響因素染色質(zhì)量影響因素n（7 7）血膜在制備后應(yīng)盡量能在當(dāng)天染色，）血膜在制備后應(yīng)盡量能在當(dāng)天染色