柑桔黃龍病監(jiān)測方法

1、柑桔黃龍病監(jiān)測方法柑桔黃龍病監(jiān)測方法（試行）為規(guī)范柑桔黃龍病疫情監(jiān)測工作，及時掌握疫情發(fā)生、發(fā)展動態(tài)，特制定本辦法。本辦法規(guī)定了柑桔黃龍病菌監(jiān)測區(qū)域、監(jiān)測布點、監(jiān)測時期、監(jiān)測方法等要求。本辦法適用于我省各地柑桔黃龍病的監(jiān)測。1監(jiān)測準(zhǔn)備收集當(dāng)?shù)馗探?、金柑屬和枳屬植物等蕓香科植物的種植情況，柑桔黃龍病菌發(fā)生歷史和現(xiàn)狀等有關(guān)資料；制定簡便易行的柑桔黃龍病菌監(jiān)測計劃。2監(jiān)測區(qū)域2.1 未發(fā)生區(qū)重點監(jiān)測疫情發(fā)生高風(fēng)險區(qū)域，如：從疫情發(fā)生區(qū)調(diào)入柑桔屬、金柑屬和枳屬等蕓香科植物的種苗及產(chǎn)品的地區(qū)，境外柑桔屬、金柑屬和枳屬植物引種種植區(qū)，柑桔屬、金柑屬和枳屬等蕓香科植物種苗繁育基地等高風(fēng)險區(qū)域。主要監(jiān)測是否傳

2、入柑桔黃龍病菌。2.2 發(fā)生區(qū)重點監(jiān)測發(fā)生疫情的有代表性地塊和發(fā)生邊緣區(qū)。主要監(jiān)測多年種植柑桔屬、金柑屬和枳屬植物等植物，并有柑桔黃龍病發(fā)生歷史的地塊。監(jiān)測柑桔黃龍病的發(fā)生動態(tài)和擴散趨勢。3監(jiān)測作物重點監(jiān)測柑桔屬、金柑屬、枳屬等蕓香科植物。4監(jiān)測工具剪刀、取樣袋、手套、鞋套、小鏡子、熒光記錄筆、標(biāo)簽紙、記錄表、消毒液等。5監(jiān)測時期在柑桔屬、金柑屬和枳屬類等苗或成年樹春、夏、秋梢轉(zhuǎn)綠后各調(diào)查1次，調(diào)查時間一般為5月上旬至11月中下旬，各地可根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂蚝透探蹖佟⒔鸶虒俸丸讓僮魑锏纳诖_定具體的調(diào)杳時間。6監(jiān)測方法6.1未發(fā)生區(qū)6.1.1訪問調(diào)查向柑桔屬、金柑屬和枳屬類的種苗育苗場和采穗圃、經(jīng)

3、銷商、農(nóng)技人員等相關(guān)人員詢問有關(guān)柑桔黃龍病情況，初步了解疫情可能發(fā)生地點、時間、危害情況。對詢問過程發(fā)現(xiàn)的柑桔黃龍病可疑性地區(qū),進行深入重點調(diào)查，訪問結(jié)果填寫柑桔黃龍病田間調(diào)查記錄表（附表Do6.1.2踏查在柑桔屬、金柑屬和枳屬果樹苗期和田間生長期進行踏查2-3次,代表面積占種植面積的50%以上。6.1.3定點調(diào)查在訪問調(diào)查和踏查基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)可疑疫情進行定點調(diào)查。采用5點取樣法，每點隨機調(diào)查10株，統(tǒng)計發(fā)病株率。6.2發(fā)生區(qū)6.2.1 發(fā)生區(qū)范圍監(jiān)測采取訪問調(diào)查和踏查方法（具體方法見6.1.1和6.1.2）,發(fā)現(xiàn)可疑疫情進行定點調(diào)查，結(jié)果記入附表1。6.2.2 發(fā)生區(qū)發(fā)生動態(tài)監(jiān)測采取定點調(diào)查法

4、（具體方法6.1.3）。每縣選5個調(diào)查點，每30天調(diào)查1次，整個生育期調(diào)查3次，每點10畝，10畝內(nèi)采取五點取樣，每樣點隨機調(diào)查10株，統(tǒng)計病株率，填寫柑桔黃龍病田間調(diào)查監(jiān)測記錄表（附表2）7疫情診斷7.1現(xiàn)場診斷主要檢查新梢葉片，花期和果實。新梢葉片不能轉(zhuǎn)綠，葉片均勻黃化，或新梢葉片轉(zhuǎn)綠后，從主、側(cè)脈附近和葉片基部及邊緣褪綠形成黃綠相間的斑駁狀黃化，病株開花早而多，落的多，果實小畸形，堅硬，著色不均勻，近果蒂部分橙紅色，其余部分青綠色，果汁少，渣多，味酸，成熟期后仍不著色的青果”，或著色不均勻的斑駁果7.2室內(nèi)鑒定經(jīng)現(xiàn)場檢驗檢測，不能確定為柑桔黃龍病的，取樣帶回實驗室進行檢測鑒定。8監(jiān)測記錄

5、詳細(xì)記錄、匯總監(jiān)測區(qū)內(nèi)各調(diào)查點結(jié)果。監(jiān)測結(jié)果記入附表2。并將原始記錄表連同照片、影像等其它資料妥善保存于縣級植物檢疫機構(gòu)。9監(jiān)測報告縣級植物檢疫機構(gòu)對監(jiān)測結(jié)果進行整理匯總形成監(jiān)測報告，并按要求逐級報送上級植物檢疫機構(gòu)。附錄：柑桔黃龍病病原、癥狀及防治措施等1病原特征病原為Liberobacterasiaticum,屬原核生物(prokaryote),目前還未能人工培養(yǎng)。菌體多數(shù)呈圓形、橢圓形或線形，少數(shù)呈不規(guī)則形，大小50600X1701600nm,菌體的外部界限是膜質(zhì)結(jié)構(gòu)，厚約1733nm,平均25nm,由三層膜組成，壁膜結(jié)構(gòu)與革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁膜構(gòu)造相似。柑桔黃龍病病原分為3個種，即亞

6、洲種(Liberobacterasiaticum)、非洲種(Liberobacterafricanum)和美洲種(Liberobacteramenicum)。亞洲種引起柑桔黃龍病，非洲種引起柑桔青果病。黃龍病主要發(fā)生在亞洲和非洲的40多個國家，是柑桔上毀滅性病害。廣東省汕頭地區(qū)最早發(fā)生。在我國，本病主要在南部和西南部各省柑桔產(chǎn)區(qū)蔓延為害，摧毀了大量的柑桔園，二十世紀(jì)30年代以后逐漸嚴(yán)重，在廣東、廣西、福建、海南、臺灣的柑桔產(chǎn)區(qū)廣泛蔓延，80年代以后，隨著柑桔生產(chǎn)的大發(fā)展，黃龍病在老病區(qū)病情加重，新病區(qū)不斷擴大，至今在江西、浙江、四川、云南、貴州和湖南等省的部分產(chǎn)區(qū)均證實有黃龍病發(fā)生。2為害癥狀

7、柑桔樹各生長期均感病，46年生開始結(jié)果的樹發(fā)病較多，苗期或十幾年以上的成年樹發(fā)病較少。該病全年均可發(fā)生，以夏梢、秋梢發(fā)病最多，其次是春梢。春梢發(fā)病時，當(dāng)年新抽春梢能正常轉(zhuǎn)綠，5月份以后部分葉片主脈、側(cè)脈附近黃化，葉肉逐漸褪綠變黃，形成黃綠相間的駁斑，葉質(zhì)硬化。夏梢或秋梢多在8月至10月間發(fā)病。新抽夏梢或秋梢中有一、二個梢的葉片尚未完全轉(zhuǎn)綠時，則停止轉(zhuǎn)綠。葉片在老熟過程中葉脈變黃，葉肉由淡黃色均勻黃化，葉質(zhì)變硬。而有的葉片轉(zhuǎn)綠后變黃，出現(xiàn)黃綠相間的斑駁當(dāng)年發(fā)病的黃梢，秋末葉片陸繼脫落。第二年抽出的春梢，葉片明顯變長、變小，變硬。葉肉變黃，葉片表現(xiàn)為缺鋅、缺鈕的癥狀，因此，黃龍病后期葉片癥狀與缺素

8、癥不容易區(qū)別。病樹開花早而多，但花細(xì)小，畸形，所結(jié)果實小，畸形，著色不均勻，近果蒂部分橙紅色，其余部分春綠色，稱為“紅鼻果”，果汁少，渣多，很酸。3寄主范圍主要危害蕓香科的柑桔屬、金柑屬和枳屬三個屬的植物。其中蕉柑、甜橙、年桔較感病，酸桔、檸檬較耐病，柚子也有黃龍病。用菟絲子能將此病菌傳到長春花和夾竹桃植株上，引起典型的黃龍病癥狀，表明這兩種植物也是黃龍原寄主。4傳播途徑遠(yuǎn)距離傳播主要通過帶病的接穗和苗木，而果園近距離傳病則是帶菌的柑桔木虱(Diaphorinacitri)。木虱的成蟲和高齡若蟲(45齡)都會傳病，病原體在木虱成蟲體內(nèi)的循回期長短不一，短的為3天或少于3天,長的為2627天。高

9、齡若蟲或成蟲一旦獲得病原體后，能終生傳病。此病除由木虱傳播外，也可通過嫁接傳病，在實驗室內(nèi)，可通過菟絲子傳到草本寄主長春花上，但是不能由汁液摩擦和土壤傳病。5生物學(xué)特性柑桔黃龍病亞洲種，屬于耐熱型，最適宜溫度2832C,癥狀表現(xiàn)明顯，病害在高溫地區(qū)流行，傳播蟲媒為柑桔木虱，主要分布于亞洲高溫干燥地區(qū)。我國的柑桔黃龍病屬于亞洲種。非洲種引起柑桔青果病，屬于熱敏感型，最適宜溫度2024C,癥狀表現(xiàn)明顯，病害在冷涼地區(qū)流行，傳病蟲媒為非洲木虱，主要分布于非洲適溫高濕地區(qū)；毛里球斯島上，既有亞洲種，也有非洲種存在。6防控措施(1)嚴(yán)格實行檢疫保護無病區(qū)和新區(qū)，嚴(yán)格執(zhí)行植物檢疫制度，禁止病區(qū)的接穗和苗木

10、進入新區(qū)和無病區(qū)。疫區(qū)采取封鎖措施，盡快予以撲滅。(2)建立無病苗圃，培育無病苗木無病苗圃應(yīng)選擇在無柑桔木虱發(fā)生的無病區(qū)，并盡可能遠(yuǎn)離病柑桔園,至少相距5公里以上，具有良好的隔離條件，最好有高山大海等自然屏障。砧木種子用5052C熱水預(yù)浸5分鐘，再用5556C溫湯處理50分鐘，然后播種育苗。無病接穗的采集及處理從優(yōu)良品種的健康老樹上采種，經(jīng)5556C熱水處理后隔離種植，培育無病的實生樹采穗。在非病區(qū)或病區(qū)中隔離的無病老果園中，嚴(yán)格選擇無病樹作母樹采穗，接穗用1000單位鹽酸土霉素或四環(huán)素浸泡2小時；接穗也可用濕熱空氣4749C處理50分鐘。莖尖嫁接脫除病原是獲得無病接穗和培育無病苗木的好方法，

11、比前述方法更為優(yōu)越。因為前者只能脫除黃龍病病原體，而莖尖嫁接既能脫除黃龍病病原體，又能脫除衰退病病毒和裂皮病類病毒。(3)挖除病株及防治媒介昆蟲在病區(qū)及時控除病樹，集中燒毀，以消除傳染源，并適時噴藥防治傳病的柑桔木虱。鏟除果園附近木虱的寄主和越冬場所，主要是果園附近的蕓香科植物，消滅傳染中心和蟲媒是防治黃龍病發(fā)生流行的關(guān)鍵措施之一，因此，疫區(qū)要抓好兩個時期：一是每年春芽萌動前，可結(jié)合冬季清園，加噴殺蟲劑防除；二是每次新梢抽發(fā)期，視蟲口密度情況，連噴12次殺蟲劑防治。10%叱蟲咻可濕性粉劑、20%撲虱靈可濕性粉劑、40%氧化樂果等對柑桔木虱的成蟲、若蟲都有很好的防治效果。對于初發(fā)病和發(fā)病較輕的柑桔園內(nèi)病株，一經(jīng)發(fā)現(xiàn)應(yīng)立即整株挖除；發(fā)病較重的柑桔園，重病樹應(yīng)全面鏟除，同時要噴灑殺蟲劑，防治傳病蟲煤。(4)加強栽培管理通過柑桔園內(nèi)管理，如水肥管理，合理施N、P、K,增強樹勢，以提高抗病力，并創(chuàng)造園中小氣候，不利于柑桔木虱的發(fā)生、繁殖和傳播，而有利于柑桔樹的健壯生長，可以減輕黃龍病的發(fā)生和危害。有條件的果園，四周可以栽植防護林，以減少日照和保持果園有較高的濕度，這對媒介昆蟲的遷飛有阻礙作用。柑桔黃龍病癥狀附表1:柑桔黃龍病田間調(diào)