刺五加對他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護作用

1、刺五加對他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護作用         【摘要】  探討刺五加對他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護作用. 方法 灌胃給予35mg/kg他克林制作小鼠急性肝組織損傷模型，每日分別灌胃給予小鼠不同劑量的刺五加總皂苷及粗多糖，連續(xù)4d，觀察小鼠血清中天冬氨酸氨基轉移酶（AST）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）及腫瘤壞死因子（TNF-）活性的變化. 結果 不同劑量的刺五加總皂苷及粗多糖均可降低急性肝組織損傷小鼠血清AST，ALT，ALP，TNF-活性，與水飛薊素比較無顯著

2、性差別. 結論 刺五加對他克林所致小鼠急性肝組織損傷有一定的保護作用. 【關鍵詞】  刺五加屬;他克林;水飛薊素;肝疾病;小鼠刺五加作為藥物已廣泛應用于臨床，具有固本強壯之功效.近年來，國內(nèi)外學者在刺五加的化學成分、藥理作用及臨床應用等方面進行了較為深入的研究，但關于刺五加對肝組織損傷保護作用的報道較少見.本文觀察了刺五加對他克林所致小鼠急性肝組織損傷的保護作用，旨在為刺五加的應用提供更多的依據(jù).   1 材料   1.1 實驗動物  取昆明種小鼠，由延邊大學醫(yī)學部實驗動物科提供，體重為2022g，均為雄性.25恒溫環(huán)境飼養(yǎng)，飼以標準

3、飼料.   1.2 藥品與試劑  水飛薊素購自中國藥品生物制品檢定所，批號為050603;刺五加購自吉林省延吉市新藥大藥房，由延邊大學藥學院生藥學教研部劉永鎮(zhèn)教授鑒定為正品;他克林（tacrine）為美國Sigma公司產(chǎn)品;天冬氨酸氨基轉移酶（AST）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、血清堿性磷酸酶（ALP）及腫瘤壞死因子（TNF-）試劑盒均購自南京建成生物工程研究所.   1.3 儀器  SP-4430型全自動生物化學分析儀為日本Arkray公司產(chǎn)品;BS224型電子天平為北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司產(chǎn)品;95308型全自動離心機為美國

4、Sigma公司產(chǎn)品.   2 方法   1 刺五加粗多糖及總皂苷的制備  取刺五加生藥材適量，加入蒸餾水，于80條件下提取，高濃度乙醇沉淀，沉淀物洗凈得刺五加粗多糖;取刺五加生藥材適量，經(jīng)950mL/L乙醇提取，蒸干，加水溶解，飽和正丁醇萃取，揮干乙醇得刺五加總皂苷 1 .   2 分組及肝組織損傷模型制作  將小鼠按體重分為9個組，即空白對照組、模型對照組、水飛薊素對照組、刺五加總皂苷大、中、小劑量組及刺五加粗多糖大、中、小劑量組，每組各為10只.刺五加總皂苷及粗多糖大、中、小劑量組給藥劑量分別為25，15，5m

5、g/L.每日分別灌胃給予各給藥組小鼠20mL/kg相應藥物，連續(xù)4d;而空白對照組及模型對照組小鼠則每日灌胃給予等體積生理鹽水.末次給藥前禁食16h，末次給藥1h后除空白對照組小鼠外均灌胃給予35mg/L他克林溶液20mL/kg，24h后脫頸椎處死 2 .   3 小鼠血清的制備  取小鼠頸動脈血，靜置15min，以2000r/min離心15min，取血清，置于-20條件下冷凍保存，備用.   4 生物化學指標的檢測  應用全自動生物化學分析儀測定各組小鼠血清中AST，ALT，ALP，TNF-的活性 3 . 2.5 統(tǒng)計學處理

6、0; 所有實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準偏差（x±SD）表示，用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行方差分析，組間差異比較采用t檢驗.            3 結果   1 刺五加總皂苷對急性肝組織損傷小鼠血清ALT，AST，ALP，TNF-活性的影響  由Table1可見，灌胃給予他克林后，模型對照組小鼠AST，ALT，ALP，TNF-活性均明顯升高，與空白對照組比較有顯著性差異（P0.05，P0.01），提示模型制作成功.刺五加總皂苷大、中、小劑量組小鼠血

7、清AST活性均較模型對照組顯著下降，相比較均有顯著性差異（P0.05，P0.01）.   2 刺五加粗多糖對急性肝組織損傷小鼠血清ALT，AST，ALP，TNF-的影響  由Table1可見，刺五加粗多糖大、中、小劑量組小鼠血清AST活性較模型對照組均下降，且刺五加粗多糖大、中劑量組小鼠ALT，ALP活性較模型組明顯下降，相比較均有顯著性差異（P0.05，P0.01）.   Table1 Effects of total saponin（T-sap）and acanthopanax santicosus polysaccharide（略）

8、60;  4 討論   他克林可加速細胞能量的消耗，引發(fā)線粒體功能障礙，從而抑制肝細胞線粒體DNA合成，引發(fā)肝細胞核糖體及內(nèi)質網(wǎng)功能障礙，降低肝細胞蛋白質水平，誘發(fā)肝細胞壞死 4 .本實驗結果表明，刺五加總皂苷及粗多糖大、中、小劑量組小鼠血清AST，ALT，ALP，TNF-活性均低于模型對照組，且大劑量組降低效果最為明顯，提示刺五加總皂苷及粗多糖均具有較好的保護肝組織作用，并呈現(xiàn)明顯的劑量依賴性. 【參考文獻】  1 曲中原，金哲雄，高文昊，等.刺五加總皂苷提取工藝的研究J. 哈爾濱商業(yè)大學學報 ，2005，21（1）:14.2 馮有輝，何康，鄒麗宜，等.人參須對四氯化碳致小鼠肝纖維化的保護作用J. 中國臨床藥理學與治療學 ，2004，9（9）:101